毛茛總苷對(duì)血管緊張素Ⅱ致心肌肥大的影響

1、毛茛總苷對(duì)血管緊張素致心肌肥年夜的影響【摘要】目的研討毛茛總苷對(duì)血管緊張素Ang引誘的心肌肥年夜的影響。要發(fā)采與正交真驗(yàn)方案法沒有俗觀察Ang濃度、心肌細(xì)胞稀度戰(zhàn)Ang干預(yù)工夫?qū)π募》誓暌鼓Ｐ蜆?gòu)建的影響，肯定心肌肥年夜模型的構(gòu)建前提，沒有俗觀察毛茛總苷對(duì)Ang引誘的心肌肥年夜的影響。結(jié)果心肌肥年夜模型的前提為：Ang濃度為1lL-1,心肌細(xì)胞稀度為2105個(gè)L-1，Ang干預(yù)工夫?yàn)?8h。50、100、200gL-1毛茛總苷有抑制Ang引誘的心肌肥年夜的做用。結(jié)論毛茛總苷有抗心肌肥年夜的做用。【關(guān)鍵詞】毛茛總苷；心肌肥薄；血管緊張素；正交真驗(yàn)Keyrds:ranunulin;yardialhy

2、pertrphy;angitensin;rthgnalexperient1材料與要發(fā)1.2真動(dòng)做物SD乳鼠誕死13d,由廣東省醫(yī)教真動(dòng)做物中心供應(yīng)，答應(yīng)證號(hào)：SXK粵2022-002，粵監(jiān)證字2022A010。1.3藥物制備毛茛齊草晾干切碎，85乙醇回流提與3次，過80目篩,開并提與液，減壓稀釋采與溶劑，等體積的醋酸乙酯萃與幾次至醋酸乙酯層為淺綠色?；鶎踊饘诱舾扇軇?，得膏狀物經(jīng)D-101年夜孔樹脂吸附，火洗,棄去,再用雜乙醇洗脫,搜集此部位,蒸干乙醇得膏狀物即毛茛總苷。毛茛總苷本液配制：與毛茛總苷膏狀物用DE培養(yǎng)液消融，配制成5,10，20gL-1的本液，無菌過濾，備用。1.5心肌肥年夜模型的

3、構(gòu)建用正交真止方案法5沒有俗觀察細(xì)胞稀度，Ang濃度戰(zhàn)Ang干預(yù)工夫3個(gè)果素對(duì)肥年夜心肌細(xì)胞的影響，肯定心肌細(xì)胞肥年夜模型構(gòu)建的最好前提。真止反復(fù)2次。詳細(xì)要發(fā)以下：將細(xì)胞接種至96孔中，分黑9個(gè)組，按照上述正交真止方案法肯定的方案對(duì)細(xì)胞減藥處理。細(xì)胞培養(yǎng)幾工夫后，與出96孔板，吸走培養(yǎng)基，采與SRB染色法6并用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度A值。1.6形狀教斷定將細(xì)胞按照上述真止獲得的稀度培養(yǎng)正在底部置有22載玻片的曲徑為3.5的培養(yǎng)皿中，分黑3個(gè)組：1一般組：沒有減任何藥物處理；2模型組：減Ang孵育；3藥物組：同時(shí)減Ang戰(zhàn)洛沙坦處理，洛沙坦的終濃度均為1LL-1，干預(yù)48h。蘇木素伊黑染色，拍照，從

4、形狀教角度沒有俗觀察細(xì)胞的肥年夜火平。1.7抗心肌細(xì)胞肥年夜藥物挑選心肌細(xì)胞接種培養(yǎng)至96孔板中，72h后，培養(yǎng)液換成5%()FBS培養(yǎng)24h，對(duì)細(xì)胞分組每組設(shè)8個(gè)復(fù)孔減藥干預(yù)：1一般組減等體積的DE；2肥年夜模型組：Ang終濃度為1lL-1,3洛沙坦組：同時(shí)減Ang戰(zhàn)洛沙坦，終濃度均為1lL-1；4毛茛總苷組：Ang終濃度均為1lL-1,毛茛總苷濃度均為50、100、200gL-1，減藥干預(yù)48h后，采與SRB染色法沒有俗觀察各組細(xì)胞吸光度值。真止反復(fù)3次。1.8統(tǒng)計(jì)教處理部分?jǐn)?shù)據(jù)均以s表示，統(tǒng)計(jì)教處理采與t檢驗(yàn),以P0.05為沒有同有較著性。2結(jié)果2.1構(gòu)建心肌肥年夜模型的最好前提表19次

5、真驗(yàn)的汲與值略Tab.1Absrbanesfninetests表1結(jié)果說明：以R值大小去斷定主次果素，細(xì)胞稀度是主要果素，順次是減藥培養(yǎng)工夫戰(zhàn)Ang濃度。最好前提為A3B22，即Ang濃度為10-6lL-1，細(xì)胞稀度為2105L-1，減藥干預(yù)培養(yǎng)工夫?yàn)?8h。那個(gè)組開正在正交表中已呈現(xiàn)，為了證明其牢靠性，按A3B22前提舉止真驗(yàn)，真驗(yàn)結(jié)果獲得的吸光度值為：0.5433，比表1中任何一組真驗(yàn)獲得的吸光度值皆年夜，證明所獲得的最好前提是牢靠的。2.2HE染色結(jié)果2010從HE染色結(jié)果可以看出,由血管緊張素引誘的肥年夜心肌細(xì)胞圖1B的外表積比一般組較著刪年夜，肥年夜心肌細(xì)胞經(jīng)洛沙坦干預(yù)48h，心肌細(xì)胞外表積底子光復(fù)至一般火平圖1。2.3毛茛總苷抗心肌肥年夜做用研討各組細(xì)胞經(jīng)1lL-1的Ang孵育48h后，經(jīng)SRB染色的A值隱著比一般組年夜，說明經(jīng)Ang引誘后的細(xì)胞總卵黑露量刪下，即心肌細(xì)胞經(jīng)過1lL-1的Ang孵育48h后，細(xì)胞發(fā)死了肥年夜。毛茛總苷50、100、200gL-1均具有較著抑制心肌肥年夜的做用，與模型組比擬，沒有同有較著性P0.01。睹表2。A一般細(xì)胞組;BAng引誘的肥年夜細(xì)胞組;洛沙坦醫(yī)治組圖1乳鼠心肌細(xì)胞的蘇木素-伊黑染色圖2010略Fig.1Heatxylin-esinstainingfardiytesfrnenatalSDrats表2毛