壯爾顆粒對小鼠免疫功能的影響

1、壯爾顆粒對小鼠免疫功能的影響【關(guān)鍵詞】壯爾顆粒；,免疫；,吞噬功能；,溶血素；,T淋巴細(xì)胞摘要：目的觀察壯爾顆粒對小鼠免疫功能的影響。方法采用氫化可的松造模法制作免疫抑制小鼠模型，進(jìn)而觀察壯爾顆粒對其腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能、溶血素形成、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的影響。結(jié)果壯爾顆粒能明顯進(jìn)步正常小鼠和免疫抑制小鼠巨噬細(xì)胞吞噬百分率、吞噬指數(shù)、血清溶血素含量和淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率。結(jié)論壯爾顆粒對機(jī)體免疫功能有顯著增強(qiáng)作用。關(guān)鍵詞：壯爾顆粒；免疫；吞噬功能；溶血素；T淋巴細(xì)胞IunpharalgialStudiesfZhuangerGranulesinieAbstratbjetiveTinvestigatetheiun

2、lgialeffetsfZhuangerGranulesinie.ethdsTheiundepressiniedelsereinduedbyinjetinfhydrrtisne.TheinfluenesfZhuangerGranulesnphagytifuntinfarphage,fratinfseruhelysin,andryphytetransfratinbthinnralanddelieerebserved.ResultsZhuangerGranulesuldbvislyineasetheratefsall,sallindex,ntentfhelysinandtransitinratef

3、lyphyte.nlusinZhuangerGranulesanarkedlyiprvetheiunity.KeyrdsZhuangerGranules;Iunity;Phagytsis;Seruhelysin;T-lyphyte壯兒顆粒由黃芪、生地、太子參等制成的中藥制劑，具有益氣養(yǎng)陰、扶正補(bǔ)虛之成效，臨床應(yīng)用對小兒氣陰兩虛型反復(fù)呼吸道感染RRT有很好的療效。本實驗旨在從免疫學(xué)角度對壯爾顆粒治療RRT的機(jī)制進(jìn)展討論。1器材壯爾顆粒由黃芪、生地、太子參等中藥組成，3.665g生藥/g顆粒，遼寧中醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院制劑中心消費，批號：040402；益氣養(yǎng)血口服液，吉林修正藥業(yè)集團(tuán)通化市制藥消費，國藥

4、準(zhǔn)字Z22023392，消費批號：20221025；氫化可的松：黑衛(wèi)藥準(zhǔn)字1982第100267號，0.1g/20l，齊齊哈爾第二制藥廠消費，消費批號03040801。植物血凝素PHA：上海伊華醫(yī)學(xué)科技，批號：20220216。LYPUS顯效微鏡：日本產(chǎn)。恒溫枯燥箱：DH64型，上海醫(yī)療器械產(chǎn)消費。分光光度計：UV-765日本島津。游標(biāo)卡尺：北京儀器廠消費。昆明種小鼠，雌雄各半，體重2026g，普通級，由遼寧中醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供。2方法與結(jié)果2.1分組按性別、體重隨機(jī)分成6組：正常生理鹽水對照組，正常2.0g/kg壯爾顆粒組，免疫抑制生理鹽水對照組，免疫抑制壯爾顆粒2.0g/kg低劑量組，

5、免疫抑制壯爾顆粒4.0g/kg中劑量組，免疫抑制壯爾顆粒8.0g/kg高劑量組，免疫抑制益氣養(yǎng)血口服液2.0l/kg陽性對照組，每組10只。2.2造模及給藥藥物分別配成10%，20%，40%濃度，益氣養(yǎng)血口服液使用原濃工，灌胃給藥2.0l/kg。正常生理鹽水對照組，正常給藥組連續(xù)灌胃給予生理鹽水或藥物7d，2次/d，然后各鼠均皮下注射氫化可的松2.0l/kg，1次/d，連續(xù)5d，注射氫化可的松的同時，各給藥組均繼續(xù)灌胃給予生理鹽水或藥物。2.3對小鼠腹腔巨噬功能的影響1，2正常生理鹽水對照組，正常給藥組給藥后的第5天，每鼠腹腔注射5%滅菌淀粉溶液1.0l，末次給藥后1h，每鼠腹腔注射生理鹽水1

6、.0l，1in后剪開腹壁，抽取腹腔洗液涂片；各免疫抑制組于給藥后的第6天注射滅菌淀粉溶液和RB懸液，方法和劑量均同前，2h后處死，涂片。經(jīng)孵育、染色、晾干后在油鏡下每片計數(shù)100個巨噬細(xì)胞，計數(shù)已吞噬RB的總數(shù)。按以下公式計算每鼠巨噬細(xì)胞的吞噬百分充和吞噬指數(shù)并進(jìn)展組間t檢驗。結(jié)果見表1。結(jié)果顯示，壯樂顆粒對正常小鼠具有顯著增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬功能的作用，與正常生理鹽水對照組相比，使吞噬百分率和吞噬指數(shù)均有顯著進(jìn)步，而且比擬有顯著性差異P0.05。氫化可的松可顯著抑制巨噬細(xì)胞的吞噬功能。各免疫抑制組經(jīng)壯爾顆粒防治后，被抑制的免疫功能得到顯著恢復(fù)，其吞噬百分率、吞噬指數(shù)與免疫抑制對照組相比均顯著進(jìn)步

7、，而且比擬有顯著性差異P0.05或P0.01，作用呈量效關(guān)系。吞噬百分率=吞噬雞紅細(xì)胞的巨噬細(xì)胞數(shù)200個巨噬細(xì)胞吞噬百分率=吞噬雞紅細(xì)胞的巨噬細(xì)胞數(shù)200個巨噬細(xì)胞表1壯爾顆粒增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬功能作用略與正常對照組比擬，P0.05，P0.01，*與免疫抑制對照組比擬，*P0.05，*P0.01，n=102.4對小鼠血清溶血素生成的影響3正常對照組，正常給藥組連續(xù)灌胃給予生理鹽水或藥物3d后，每只小鼠腹腔內(nèi)注射0.2l綿羊紅細(xì)胞SRB，注射SRB后，再繼續(xù)給藥4d，于末次給藥后1h，眼眶采血，進(jìn)展溶血素的測定；各免疫抑制組在注射氫化可的松后的第2天，注射SRB，再繼續(xù)給藥4d，末次給藥后1h，

8、眼眶采血測定血清溶血素。對給藥組動物的H50值與對照組H50組進(jìn)展組間t檢驗。結(jié)果見表2。結(jié)果顯示，壯爾顆粒對正常小鼠具有顯著進(jìn)步血清溶血素含量的作用，H50與正常生理鹽水對照組相比顯著進(jìn)步P0.05。氫化可的松顯著抑制小鼠血清血素的生成，H50顯著降低。各免疫抑制組經(jīng)壯爾顆粒防治后H50進(jìn)步，并且與免疫抑制對照組比擬有顯著性差異P0.05或P0.01，作用呈量效關(guān)系。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.表2壯爾顆粒進(jìn)步血清溶血素的含量略與正常對照組比：P0.05，P0.01，*與免疫抑制對照組比：*P0.05，*P0.01，n=102.5對小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的影響4正常生理鹽水對照組，正常給藥組第3天末次

9、給藥后1h，肌肉注射PHA6g/kg，1次/d，連續(xù)3d，注射PHA的同時繼續(xù)胃給藥，停用PHA后再灌胃給藥1d，眼眶采血推片，姬母薩瑞特氏染色。各免疫抑制組于注射氫化可的松的第2天末次給藥后，開場注射PHA，劑量和方法同前。染色后每片油鏡下計數(shù)100個淋巴細(xì)胞，計算淋巴細(xì)胞及過渡型淋巴細(xì)胞所占的百分率并進(jìn)展組間t檢驗。結(jié)果見表3。結(jié)果顯示，壯爾顆粒對PHA誘導(dǎo)的正常小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化具有協(xié)同促進(jìn)作用，可顯著進(jìn)步淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的百分率，與正常對照組比擬有顯著性差異P0.05。氫化可的松可顯著抑制PHA所誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化，使免疫抑制對照組的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的抑制作用，對PHA所誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化具

10、有顯著的協(xié)同進(jìn)步作用，而且與免疫抑制作用，對PHA所誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化具有顯著的協(xié)同進(jìn)步作用，而且與免疫抑制對照組比擬有顯著性差異P0.05或P0.01，作用呈量效關(guān)系。表3壯爾顆粒促進(jìn)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化作用略與正常對照組比擬，P0.05，P0.01，*與免疫抑制對照組比擬，*P0.05，*P0.01，n=103討論現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為免疫功能低下是RRT的主要原因。目前，有眾多臨床研究顯示：體液免疫和細(xì)胞免疫功能低下，患兒血清免疫球蛋白IgA，Ig，IgE及補(bǔ)體3程度低于正常；紅細(xì)胞免疫功能低下可引起RRTI5。因此，治療和預(yù)防RRT就應(yīng)該進(jìn)步患兒機(jī)體的免疫功能。巨噬細(xì)胞屬機(jī)體的非特異性免疫細(xì)胞，在有異物

11、侵入的時候，從血液中釋放出巨噬細(xì)胞吞噬異物，紅細(xì)胞相對小鼠是異體抗原性物質(zhì)，當(dāng)被注入小鼠腹腔后，可引起腹腔巨噬細(xì)胞聚集并吞噬，這是一項衡量機(jī)體非特異性免疫功能的主要指標(biāo)，因此可用其檢測藥物對機(jī)體防御才能的影響6。實驗中壯爾顆粒進(jìn)步小鼠巨噬指數(shù)，說明壯爾顆粒具有增強(qiáng)機(jī)體非特異性免疫功能的作用，這種增強(qiáng)免疫的作用可增強(qiáng)機(jī)體抵抗病原微生物的功能。血清溶血素的含量是反映機(jī)體的體液免疫程度的一個可靠指標(biāo)7，壯爾顆粒各組均可以顯著增高小鼠的H50含量P0.01，且呈劑量相關(guān)性，隨劑的增加H50的含量亦相應(yīng)增加，說明壯爾顆粒劑可以進(jìn)步抗原誘導(dǎo)循環(huán)抗體程度，從而實現(xiàn)進(jìn)步機(jī)體的體液免疫力的作用。通過淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實驗測定外周血中T細(xì)胞轉(zhuǎn)化率，可判斷機(jī)體的細(xì)胞免疫力功能程度，壯爾顆粒對PHA誘導(dǎo)的正常小鼠和免疫抑制小鼠的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化，均具有顯著差異性P0.05，作用呈量效關(guān)系，說明壯爾顆粒具有進(jìn)步機(jī)本細(xì)胞免疫的功能。綜上所述，可以推斷壯爾顆粒對氣陰兩虛型RRT小兒的治療作用，可能是通過進(jìn)步機(jī)體的非特異性和特異性免疫功能實現(xiàn)的。參考文獻(xiàn)：1陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)北京：人民衛(wèi)生出版社，1993：315，982，750，275，78，780，305.2呂昌龍，謝光臨.烏賊墨對小鼠免疫功能的影響J.中國海洋藥物雜志，1994，452：23