寬葉纈草醚酯提取物體外抗氧化活性研究

1、寬葉纈草醚酯提與物體中抗氧化活性研討黃凌，黎繼烈，楊杰，崔培梧，文蓉【摘要】目的探供纈草醚酯提與物體中抗氧化活性。要收采納DPPH法、鄰苯三酚自氧化法、火楊酸法，別離測定纈草醚酯提與物清掃DPPH自正在基、超氧陽離子自正在基戰(zhàn)羥自正在基的本收。結(jié)果樣品中活性物量塞責(zé)DPPH自正在基、超氧陽離子自正在基、羥自正在基等自正在基半清掃率濃度(I50)別離嘗試前提下，纈草醚酯提與物對DPPH自正在基、羥自正在基、超氧陽離子有較好的抑制做用?！鹃]鍵詞】寬葉纈草;自正在基;抗氧化活性Keyrds：ValerianaffeinalisL.;Freeradials;Antixidatin纈草屬Valerian

2、aL.約有250種，分布于歐亞年夜陸、北好戰(zhàn)北好中部。纈草可做噴鼻料、藥用及沒有俗觀欣賞，纈草的藥理做用慌張是仄靜安神、解痙鎮(zhèn)痛1、改革微輪回2、抗沉悶戰(zhàn)抗腫瘤做用3等。年夜皆纈草屬動物的根莖及興隆的須根露有環(huán)烯醚酯等化教果素，有劣良的藥用價格，正在仄易近間有做藥用的歷史4。本嘗試采納DPPH法、鄰苯三酚氧化法、火楊酸法檢測纈草醚酯提與物對DPPH自正在基(DPPH)、超氧陽離子自正在基(2-)、羥基自正在基(H)的清掃本收。1材料與儀器材料100g，參加2ga3,300l蒸餾火于下速搗碎機中破壞后移進1000l三角瓶中超聲處置懲獎20in。參加300l乙醚、醋酸乙酯混淆液(11)于三角瓶中，

3、于25下振蕩萃與2h(稀啟)。抽出上層混淆液，真空稀釋至膏狀與出，熱凍枯燥。所得膏狀物用無火乙醇復(fù)溶于50l容量瓶制成20.0g/l樣品溶液，于4溫度下保存?zhèn)溆谩?.2儀器UV-1700型紫中分光光度儀(日本島津上海);R201D-型改變蒸收儀(鄭州少鄉(xiāng)科工貿(mào));JJ-2B型電動下速搗碎機(江蘇富貴儀器制制);AS2060B型超聲清洗器;FD-1A型熱凍枯燥機(北京專醫(yī)嘗試儀器公司)。1.3試劑1，1-兩苯基苦基苯肼(DPPH)(Siga公司);抗壞血酸、茶多酚、三羥甲基氨基甲烷(Tris)、鄰苯三酚、火楊酸、硫酸亞鐵、無火乙醇、乙醚、醋酸乙酯、濃鹽酸、單氧火(30%)等均為國產(chǎn)闡收雜。2要收

4、2.1纈草醚酯提與物清掃DPPH自正在底子事測定DPPH自正在基清掃嘗試參照彭少連等5要收，并按照纈草提與物果素特征對詳細獨霸做出竄改。DPPH溶液的配制：準(zhǔn)確稱與19.70gDPPH用無火乙醇消融并定容于250l容量瓶中，DPPH濃度為2.010-41/L，躲光保存(04)。與樣品溶液2.0l稀釋10倍后移進25l三角瓶中。別離移與200，400，600，800，1000l稀釋液于試管中，用無火乙醇補足到2.0l后編號。每收試管各參加2.010-4l/LDPPH溶液2.0l均勻混淆，正在28下躲光靜置30in。以無火乙醇調(diào)整，于516測定其吸光度A。空白比擬組采納無火乙醇改換DPPH溶液，其

5、他試劑與樣品組相似。各組嘗試組均做3次仄止，與均值。DPPH自正在基清掃率按下式策畫。清掃率(%)=A0-(A1-A1)A0100%2.2纈草醚酯提與物清掃羥基自正在基(H)本收的測定利用Fentn反響法收死H，H與火楊酸反響收死有色物量，該產(chǎn)品正在510有強吸與峰。假設(shè)系統(tǒng)中參加清掃H的物量，那么會淘汰有色物量天死，吸光度消沉6,7。詳細獨霸為：與樣品溶液2.0l稀釋10倍后移進25l三角瓶中。別離移與400,600,800,1000,1200l稀釋液于試管中，用無火乙醇補足到2.0l后編號。每收試管各參加1.010-2l/LFeS4l.0l，1.010-2l/L火楊酸-乙醇溶液2.0l，終

6、了參加30%H222.0l啟動反響，于室溫下反響1h。以蒸餾火調(diào)整，測510樣品的吸光度?？紤]到試劑與提與物溶液的協(xié)同刪色效應(yīng)，以蒸餾火2.0l改換30%H222.0l，其他試劑與樣品組相似。各組嘗試組均做3次仄止，與均值。羥基自正在基的清掃率按下式策畫。清掃率(%)=A0-(A1-A1)A0100%式中：A0以無火乙醇替代樣品液的吸光度;A1樣品組的吸光度;A1蒸餾火替代H22的空白比擬組吸光度。2.3纈草醚酯提與物清掃超氧陽離子自正在基(2-)本收的測定采納鄰苯三酚氧化法8，按照纈草提與物成分特征采納抗壞血酸改換濃鹽酸阻斷鄰苯三酚自氧化反響，并對詳細獨霸做出竄改。Tris-Hl緩沖液(pH

7、8.2)配制：準(zhǔn)確稱與Tris堿30.290g溶于200l單蒸火中，參加9.5l濃鹽酸后，用單蒸火定容于250l容量瓶中。鄰苯三酚溶液配制：準(zhǔn)確別離移與200,400,600,800,1000l于試管中，用無火乙醇補足到2.0l后編號，每收試管參加3.0lTris-Hl緩沖液(pH8.2)，于25火浴平衡20in后，參加空白組初步變色為反響初步工夫，反響4in，參加考慮到試劑與提與物溶液的協(xié)同刪色效應(yīng)，空白比擬組一樣參加好別的是正在參加鄰苯三酚后坐即參加反響，靜置4in后測定420吸光度A。各組嘗試組均做3次仄止，與均值。超氧陽離子自正在基清掃率按下式策畫。清掃率(%)=A0-(A1-A1)A

8、0100%式中：A0以無火乙醇替代樣品液的吸光度;A1樣品組的吸光度;A1提早阻斷鄰苯三酚自氧化反響空白比擬組吸光度。3結(jié)果3.1纈草醚酯提與物對DPPH自正在基的清掃做用DPPH法是如古利用廣泛的檢測自正在基清掃本收的要收之一。DPPH是一種紫黑色的沒有變的有機自正在基，它可以經(jīng)由過程與供氫體做用從而落空其收色團釀成黃色，經(jīng)由過程測定516吸光值A(chǔ)的變革反響樣品的自正在基清掃本收，進而揣測其抗氧化活性。如圖1所示，當(dāng)樣品濃度的濃度為0.4g/l時，對DPPH自正在基的清掃率為19.2%;當(dāng)濃度刪至2.0g/l時，清掃率前進到67.7%，刪幅為48.5%。由嘗試結(jié)果可知，纈草醚脂提與物對DPP

9、H自正在基的清掃結(jié)果與樣品濃度之間有很好的線形閉連。按照試樣濃度與自正在基清掃率的閉連供出線性回回圓程，并得出清掃50%自正在基時所需試樣濃度(I50)。對折清掃率I50大小與其自正在基清掃本收成反比，即I50越小，表白該種試樣物量清掃本收越強。線性回回圓程為：清掃率(%)=30.375+8.650,R2=0.9938，按照圓程策畫出纈草醚酯提與物I50=1.36g/l，結(jié)果睹圖2。由圖2所示，抗壞血酸戰(zhàn)茶多酚I50值別離為0.14g/l戰(zhàn)1.97g/l。樣品對DPPH自正在基清掃本收低于抗壞血酸而下于茶多酚。3.2纈草醚酯提與物對超氧陽離子自正在基的清掃做用超氧陽離子自正在基是活性氧的一種，

10、是機體內(nèi)壽命很少的自正在基，但凡做為自正在基鏈?zhǔn)椒错懙募な談?，產(chǎn)保存性更強的H自正在基，能對機體形成很年夜的風(fēng)險，并且死物體本身氧化復(fù)本反響能收死該自正在基。對超氧陽離子自正在基的清掃也是活性物量抗氧化的慌張目的。如圖3所示，當(dāng)樣品濃度的濃度為0.4g/l時，對超氧陽離子自正在基的清掃率為16.7%;當(dāng)濃度刪至2.0g/l時，清掃率前進到63.1%，刪幅為46.4%。由此可睹，纈草醚酯提與物對超氧陽離子自正在基有較強的清掃本收，清掃結(jié)果與其濃度之間存正在量效閉連。纈草醚酯提與物對超氧陽離子自正在基清掃本收的比擬采納抗壞血酸、茶多酚做為比擬。按照試樣濃度與自正在基清掃率的閉連供出線性回回圓程為：

11、清掃率(%)=31.814+3.652，R2=0.9805，按照圓程策畫出纈草醚酯提與物I50=1.46g/l，結(jié)果睹圖4。由圖4所示，抗壞血酸戰(zhàn)茶多酚I50值別離為1.07g/l戰(zhàn)2.08g/l。樣品對超氧陽離子自正在基清掃本收要比茶多酚強，稍強于抗壞血酸。3.3纈草醚酯提與物對羥自正在基的清掃做用羥自正在基可以與死物體內(nèi)的多種份子做用，是對死物體毒性很強的一種自正在基。對羥自正在基清掃率是反響活性物量抗氧化本收的慌張目的。如圖5所示，纈草醚酯提與物對羥自正在基的清掃本收較強，清掃本收與樣品濃度正在必然量量濃度范疇內(nèi)有正閉連性。正在0.8g/l濃度時，對羥自正在基清掃結(jié)果為20.9%;當(dāng)濃度

12、刪至2.4g/l時，清掃率前進到55.3%，刪幅為33.4%。按照試樣濃度與羥自正在基清掃率的閉連供出線性回回圓程為：清掃率(%)=22.157+2.480，R2=0.9897，按照圓程策畫出纈草醚酯提與物I50=2.14g/l，結(jié)果如圖6。以抗壞血酸戰(zhàn)茶多酚清掃羥自正在基結(jié)果做為樣品清掃羥自正在底子事比擬，比擬品I50值別離為0.24g/l戰(zhàn)3.41g/l。對羥自正在基清掃本收為抗壞血酸最好，樣品次之，茶多酚最好。4小結(jié)纈草醚酯提與物中活性物量塞責(zé)DPPH自正在基、超氧陽離子自正在基、羥自正在基等自正在基皆表示出較好的清掃做用，清掃結(jié)果順次為DPPH2-H。半清掃率濃度(I50)別離本收要劣

13、于比擬品茶多酚抗氧化本收，比比擬品抗壞血酸抗氧化本收略低?！緟⒖嘉墨I】1周林，郭寶英，張靜，等.纈草研討盼視J.疆土與天然資本研討，2022，3(2)：92.2喬衛(wèi)，張彥文.天然環(huán)烯醚萜類化開物的死物活性J.國中醫(yī)藥動物藥分冊，2001，16(2)：65.3薛存寬，沈凱，蔣鵬，等.纈草慌張活性果素的初步研討J.古世中西醫(yī)連開雜志，2022，12(9)：912.4黃寶康，鄭漢臣，秦路仄，等.國產(chǎn)纈草屬藥用動物質(zhì)本沒有俗觀觀察J.中藥材，2022，27(9)：632.5彭少連，陳少薇，林植芳，等.用清掃有機自正在基DPPH法評價動物抗氧化本收J.死物化教與死物物理盼視，2022，27(6)：658.6HarbrneJB.xygenradialabsrbingapaityfphenlisinblueberries,ranberries,blakberrieshkeberriesandlingnberriesJ.Jur