淮山生物多糖分離提取工藝技術(shù)課件

1、淮山生物多糖分離提取工藝技術(shù)目錄淮山生物多糖分離提取的研究意義淮山生物多糖提取工藝流程淮山生物多糖的結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)淮山生物多糖的分離參考文獻淮山生物多糖含量的測定淮山生物多糖分離提取的研究意義淮山又名淮山藥 ，本草綱目中記載，山藥有益腎氣、健脾胃等功效【3】。山藥具有多種生物活性，主要活性成分是山藥多糖，有果糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖等【9】。山藥多糖有很多作用：苗明三研究了山藥多糖對小鼠免疫功能的影響，結(jié)果表明淮山藥多糖可明顯提高小鼠淋巴細胞的轉(zhuǎn)化率，提高小鼠的免疫功能【4】 。詹彤研究了小鼠代謝性衰老模型的各項指標，發(fā)現(xiàn)山藥多糖具有良好的抗衰老作用【4】 。此外山藥多糖還具有抗腫

2、瘤、抗氧化、降低糖尿病小鼠的血糖水平,并且具有抑制-淀粉酶活性的作用【17】 。因此，開展提取山藥多糖的實驗研究，開發(fā)以山藥多糖為主的多功能生物制品，對提高人民的健康水平有十分重要的意義。淮山生物多糖的結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì) 多糖是由糖苷鍵結(jié)合的糖鏈,由二十多個到上萬個單糖組成的大分子，多糖除以游離狀態(tài)存在外，也以結(jié)合的方式存在。結(jié)合型多糖有與蛋白質(zhì)結(jié)合在一起的蛋白多糖和與脂質(zhì)結(jié)合在一起的脂多糖等?；瓷剿幹杏卸嗵?52.4%)和蛋白質(zhì)(47.6% )的復(fù)合體粘液質(zhì)【5】 。粘液質(zhì)在山藥中的含量約為0.06%一1.09% 【5】 ，所含山藥多糖主要由葡萄糖、甘露糖、半乳糖、阿拉伯糖等組成，含量約2.15

3、%一2.96%，是山藥的主要活性成分，山藥多糖無甜味，多糖不溶于高濃度的乙醇、苯、甲苯、氯仿、甲醇、丙酮等有機溶劑，多糖分子量越大，在水中溶解度越小?！?】山藥中含有大量淀粉，占干物質(zhì)質(zhì)量的59.12%78.85% ，且與多糖性質(zhì)相似。在提取過程中如果溫度過高，則會有大量淀粉糊化溶解，醇沉后混入粗多糖中，并造成粗多糖量值的虛高。另一方面，由于山藥淀粉顆粒的存在，提取溫度低于淀粉糊化溫度時，淀粉顆粒的包裹阻礙了山藥多糖的釋放，造成山藥多糖提取的不完全【6】 。因此在提取多糖時，應(yīng)除淀粉。溶劑提取法酸提法堿提法超濾法超聲提取法微波提取法酶提法淮山生物多糖提取工藝流程冷凍干燥粗多糖山藥去皮搗碎乙醇沉

4、淀離心殘渣上清液提取多糖除淀粉加淀粉酶水解溶劑提取法：在所有溶劑中,水對植物組織的穿透力強,提取效率高，安全易得。最佳提取條件：料液比1:8 浸提溫度45 ,浸提時間2h【2】，離心，除去雜質(zhì)后將上清液蒸發(fā)濃縮。酸提法：為防止降解，用1%的醋酸，在5以下提取。堿提法：適宜提取條件為料液比為1:8,NaOH濃度0.3mo1/L，浸提時間為1h，乙醇濃度為80%【8】，為防止多糖降解,常通以氮氣或加入硼氫化鈉或硼氫化鉀【11】。 酶提法： 在多糖的提取過程中,使用酶可降低提取條件,在比較溫和的條件中分解植物組織,加速多糖的釋放或提取。此外,使用酶還可分解提取液中果膠、蛋白質(zhì)等非目的產(chǎn)物,常用的酶有

5、蛋白酶,果膠酶等【12】。除淀粉：向山藥中加水150mL，加入-淀粉酶0.16%，攪拌混勻后，置于70 水浴60min，再加入糖化酶0.12%，水浴60min，完成后取出煮沸。待其冷卻后，以4000 r/min 離心5min，收集上清液抽濾并收集濾液。取該濾液3.0mL判斷淀粉是否全部溶解【6】 。 淀粉檢驗方法：在PH=4,45以下，向山藥溶液中加碘液（0.1I2與1 KI的混合液）,溶液變藍，則代表淀粉未溶解完；反之，淀粉溶解完全。若溶液顯藍色，則重復(fù)上述除淀粉操作；反之，進行之后步驟。溶液的顏色（碘與淀粉的包合物）可在加熱后去除【7】 。淮山生物多糖的分離活性炭脫色法雙氧水脫色法鹽析法等

6、電點法加熱法溶劑沉淀法透析法粗多糖脫蛋白去小分子物質(zhì)脫色淮山多糖脫脂石油醚回流將粗多糖置于索氏提取器中，加入石油醚在9 0 下回流提取1h 【2】 。鹽析法：向提取液中加入大量的硫酸銨溶液，濃的鹽溶液會中和電荷、破壞水化膜，從而降低蛋白質(zhì)的溶解度，使蛋白質(zhì)沉淀。等電點法：蛋白質(zhì)在PH約為等電點的條件下，溶解度最小。 加熱法：加熱后，蛋白質(zhì)變性凝固。蛋白質(zhì)凝固多為絮狀，先離心，再過濾。此法在本實驗不適用，加熱后呈粘稠狀，不易分離。溶劑沉淀法：有機溶劑可以使蛋白質(zhì)表面電荷基團或親水基團的水化程度降低，破壞蛋白質(zhì)膠體的水膜，降低溶液的介電常數(shù)，使蛋白質(zhì)之間的靜電引力增大，產(chǎn)生沉淀。透析法是利用小分子

7、物質(zhì)在溶液中可通過半透膜，而大分子物質(zhì)不能通過半透膜的性質(zhì)，達到分離的方法。用截留量為8000的透析袋流水透析48h 。雙氧水脫色方法是直接氧化提取液中的色素，氧化后的色素將作為雜質(zhì)留在提取液內(nèi)，達不到分離的目的。對于植物來源的多糖，可能含有酚型化合物而顏色較深，這類色素大多呈負性離子，不能用活性炭吸附劑脫色，并且活性炭會吸附多糖【2】 。弱堿性樹脂DEAE纖維素柱層析陰離子交換柱山藥去皮搗碎乙醇沉淀離心殘渣上清液提取多糖除淀粉冷凍干燥粗多糖脫蛋白脫脂去小分子物質(zhì)脫色淮山多糖淮山生物多糖提取分離工藝流程參考文獻1.徐琴.江蘇產(chǎn)淮山藥多糖成分的研究D.南京工業(yè)大學(xué)，20062.聶凌鴻.淮山活性多

8、糖的分離純化、結(jié)構(gòu)與生物活性的研究D.華南理工大學(xué)，20043.王震宙.山藥多糖的提取、分離、功能性及及其功能食品工藝研究D.南昌大學(xué)，20054.姜軍.山藥多糖的分離純化及其化學(xué)結(jié)構(gòu)的初步研究D.揚州大學(xué)，20075.吳丹.山藥多糖提取工藝優(yōu)化及結(jié)構(gòu)分析D.浙江大學(xué)，20076.董義.酶解輔助提取山藥多糖的研究J.河南工業(yè)大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版）,2015,36(3) 7.張秀清.淀粉與碘反應(yīng)的顯色原理和條件J.實驗教學(xué)與儀器, 2006,12 8.聶凌鴻,寧正祥.廣東淮山多糖提取工藝研究J.食品工業(yè)科技,2003,129.王欣雨,楊林青.山藥多糖的提取工藝及其生物活性研究現(xiàn)狀J.焦作大學(xué)學(xué)報,2010,310.王欣雨，楊林青. 山藥多糖的提取工藝及其生物活性研究現(xiàn)狀J.焦作大學(xué)學(xué)報, 2010, 311.許燕燕.植物多糖的提取方法和工藝J.福建水產(chǎn), 200612.張衛(wèi)明.酶解法測定山藥多糖含量的研究J.食品科學(xué), 2009,2013.張青,張?zhí)烀?苯酚-硫酸比色法測定多糖含量J.山東食品科技, 200414.孫仕玲.山藥多糖含量的測定方法研究J.農(nóng)業(yè)與技術(shù), 2010,315.張青,張?zhí)烀?苯酚-硫酸比色法測定多糖含量J.山東食品科技, 200416.蘇玉順,李艷君,紫外- 可見分光光度法在