醫(yī)學(xué)免疫學(xué)課件：自身免疫病治療新策略 凋亡-抗原誘導(dǎo)治療

1、自身免疫病治療新策略：凋亡-抗原誘導(dǎo)治療（apoptosis-antigentherapy）1.自身免疫病三類免疫反應(yīng)和自身免疫病第三類免疫反應(yīng)和自身免疫病最近幾年，越來越多的證據(jù)表明，第三類免疫反應(yīng)在一些自身免疫病的發(fā)展和持續(xù)中起了很大的作用，比如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)，多發(fā)性硬化(MS)，1型糖尿病(T1D)，葡萄膜炎，銀屑病。而且表明，這些之前認(rèn)為是Th1細(xì)胞主要作祟的病，可能第1類免疫反而是起的保護(hù)機(jī)制。之后又發(fā)現(xiàn)，Th1/17細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)，既有重疊的部分，也有功能不同的部分。在一/三類免疫之間，既有拮抗，又有重疊，如果缺乏第一類免疫反應(yīng)的細(xì)胞因子，那么就會促進(jìn)第三類免疫反應(yīng)，讓

2、后者占據(jù)主導(dǎo)位置，反之亦然，所以他們之間也存在一種平衡。在小鼠模型中，第三類天然免疫細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子已經(jīng)足以激活銀屑病這樣的自身免疫病了，而T細(xì)胞激活會使得病情緩慢不愈。AID vs AD自身炎癥性疾病(autoinflammatorydisease，AID)由于基因突變使編碼蛋白發(fā)生改變，導(dǎo)致固有免疫失調(diào)而引起全身性炎性反應(yīng)。AID主要包括一組單基因遺傳病，如家族性地中海熱。AID還包括一些多基因疾病，如克羅恩病和痛風(fēng)。更多新的AID正在被逐漸認(rèn)識和命名。AID vs AD自身免疫病(autoimmunedisease)包括了一組可累及各個組織和器官的疾病，通常主要指彌漫性結(jié)締組織病。AD

3、亦分為單基因病和多基因病，后者包括類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、多發(fā)性硬化（multiple sclerosis，MS） 、系統(tǒng)性血管炎、1型糖尿病等。AD常分為兩類疾病，即多器官(系統(tǒng))疾病和單一器官(組織)受累疾病。AD病因不明，遺傳和環(huán)境因素都可能參與其中，但適應(yīng)性免疫系統(tǒng)針對自身抗原的超強(qiáng)反應(yīng)發(fā)揮了主要作用。自身免疫病的治療治療任何自身免疫性疾病的終極目標(biāo)是：預(yù)防自身抗原反應(yīng)性T細(xì)胞或B細(xì)胞的激活及其引起的組織損害和炎癥反應(yīng)。（一）抗炎藥物（二）免疫抑制劑（三）免疫調(diào)節(jié)（四）血漿置換（五）對癥治療2.Th17細(xì)胞2.1簡介Th17細(xì)胞 (Thelpercell17,T

4、h17)，Th17細(xì)胞是一類產(chǎn)生IL-17的Th細(xì)胞亞群，與許多炎癥反應(yīng)和自身免疫性疾病的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)。Th17的發(fā)現(xiàn)源于實驗性自身免疫性腦炎（EAE）和膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎（CIA）這兩個典型動物實驗?zāi)Ｐ?，發(fā)現(xiàn)發(fā)揮促炎效應(yīng)的是由分泌IL-17的一種新亞群，而非Th1細(xì)胞介導(dǎo)。這種新發(fā)現(xiàn)的亞群以分泌IL-17為主，因此被命名為Th17或產(chǎn)IL-17T細(xì)胞。Th17細(xì)胞的特征是在其胞內(nèi)表達(dá)RORt（維甲酸相關(guān)孤核受體t，它是Th17細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子）。Th17細(xì)胞表達(dá)多種細(xì)胞因子，包括IL-17A、IL-17F、IL-21和IL-22。目前研究中普遍采用的是2009年提出方法，把分泌IL-1

5、7A作為人類Th17細(xì)胞的表型特征。2.2細(xì)胞因子IL-17從1993年首次發(fā)現(xiàn)IL-17A以來，人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了六個IL-17家族細(xì)胞因子，分別為IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E和IL-17F。IL-17A和IL-17F是Th17的效應(yīng)因子，二者在染色體的上位置十分接近。TCR信號通路NFAT結(jié)合位點Interleukin-17AandInterleukin-17F:ATaleofTwoCytokines2.2 細(xì)胞因子IL-17效應(yīng)因子IL-17作為致炎細(xì)胞因子，可以促進(jìn)T細(xì)胞的激活，刺激上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞產(chǎn)生：IL-6、IL-8、粒細(xì)胞-巨噬

6、細(xì)胞刺激因子(GM-CSF)及細(xì)胞黏附分子(CAM-1)，從而導(dǎo)致炎癥的產(chǎn)生。啟動因子IL-17是T細(xì)胞誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)的早期啟動因子，可以通過促進(jìn)釋放促炎細(xì)胞因子來放大炎癥反應(yīng)。IL-17與受體結(jié)合后，可通過MAP激酶途徑和核轉(zhuǎn)錄因子kB(NF-kB)途徑發(fā)揮其生物學(xué)作用。在動物實驗中，給予IL-17A靶向自身疫苗可預(yù)防自身免疫性腦脊髓炎 (EAE)。用IL-17RA拮抗治療或用IL17抑制抗體治療，都可以減弱類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎Th17細(xì)胞能夠分泌產(chǎn)生IL-17A、IL-17F、IL-6以及腫瘤壞死因子(TNF-)等，這些細(xì)胞因子可以集體動員、募集及活化中性粒細(xì)胞。Th17細(xì)胞產(chǎn)生的IL-17能有

7、效地介導(dǎo)中性粒細(xì)胞動員的興奮過程，從而有效地介導(dǎo)了組織的炎癥反應(yīng)。2.3 Th17細(xì)胞的功能2.3分化2.3分化2.3分化抑制Th1和Th2細(xì)胞分別產(chǎn)生的型干擾素(IFN-)和IL-4可共同下調(diào)Th17細(xì)胞反應(yīng)。2.4 Th17細(xì)胞與自身免疫?。捍傺滓蜃覫L-17具有促炎癥作用，誘導(dǎo)促炎細(xì)胞因子(如IL-6、TNF)、趨化因子和基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)，引起組織細(xì)胞浸潤和組織破壞。IL-17也參與中性粒細(xì)胞的增殖、成熟和趨化，對T細(xì)胞的活化起協(xié)同刺激作用，并能促進(jìn)樹突狀細(xì)胞的成熟。IL-22參與Th17細(xì)胞的效應(yīng)功能。IL-17與IL-22協(xié)同作用，可以增強(qiáng)炎癥反應(yīng)并造成組織損傷。IL-17與IL

8、-22共同表達(dá)被認(rèn)為是自身攻擊性(auto-aggressive)T細(xì)胞和促炎癥T細(xì)胞的標(biāo)志。2.4 Th17細(xì)胞與自身免疫病多發(fā)性硬化（multiple sclerosis，MS）是以中樞神經(jīng)系統(tǒng)白質(zhì)炎性脫髓鞘病變?yōu)橹饕攸c的自身免疫病。主要臨床特點為中樞神經(jīng)系統(tǒng)白質(zhì)散在分布的多病灶與病程中呈現(xiàn)的緩解復(fù)發(fā)，癥狀和體征的空間多發(fā)性和病程的時間多發(fā)性。在MS的病程中，由Th17細(xì)胞分泌 IL-17、IL-6、IL-21、IL-22、IL-23和腫瘤壞死因子 TNF-發(fā)揮著關(guān)鍵作用，自體活化的Th17細(xì)胞通過分泌IL-17和IL-22，來破壞原先緊密鏈接的由中樞神經(jīng)內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成的膠質(zhì)蛋白網(wǎng)，穿透血

9、腦屏障，進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)實質(zhì)內(nèi)，這一過程也被證明是MS發(fā)病的起始和關(guān)鍵過程。同時在MS病人外周血檢測中，發(fā)現(xiàn)DC細(xì)胞分泌IL-23水平增高，這也與前文DC細(xì)胞通過IL-23調(diào)節(jié)Th17和IL-17水平的結(jié)論相吻合。EAE模型CCL20Th17CCL20Th17細(xì)胞增多為什么？口腔腸道3.Treg細(xì)胞分類：按來源不同胸腺-自然發(fā)生調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(naturallyoccurringTreg,nTreg)抗原特異性：胸腺中的自身抗原 E.g.CD4+CD25+Treg細(xì)胞外周-誘導(dǎo)性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(inducedregulatoryTcells,iTreg)抗原特異性：組織特異性抗原和外來抗原 E.g

10、.Tr1,Th3通過分泌抑制性細(xì)胞因子發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，如IL-10，TGF-通過細(xì)胞間直接接觸發(fā)揮作用Treg細(xì)胞作用方式 Treg細(xì)胞的可塑性Treg細(xì)胞的可塑性CD4+T細(xì)胞有明顯的可塑性，特別是Treg和Th17細(xì)胞。在兩類細(xì)胞間，還有一些額外的亞類，包括IL-17+IFN-+細(xì)胞、IL-17+IL-10+細(xì)胞、IL-17+FoxP3+細(xì)胞。人類外周血和淋巴組織中也存在在CD4+FoxP3+Treg細(xì)胞，可以表達(dá)CCR6，并有能力產(chǎn)生IL-17。這類產(chǎn)生IL-17的Treg細(xì)胞共表達(dá)FoxP3和RORt，并且強(qiáng)烈抑制反應(yīng)性CD4+T細(xì)胞增殖的能力。這些細(xì)胞可能是人類CD4+T細(xì)胞的一個

11、亞類，表現(xiàn)出都是具有Treg和Th17細(xì)胞的功能特征：IL-17的產(chǎn)生、CCR6的表達(dá)和免疫抑制作用。CD4+FoxP3+RORt+細(xì)胞可能是轉(zhuǎn)化的一個類型，可以產(chǎn)生Th17和Treg細(xì)胞，主要根據(jù)感受局部的環(huán)境決定，如果感受到前炎癥的環(huán)境，Treg細(xì)胞可以釋放IL-17。Th17-likeTregcell4.凋亡-抗原誘導(dǎo)治療產(chǎn)生自身抗原特異性的Treg細(xì)胞導(dǎo)入體內(nèi)，實驗對于EAE有明顯的治療效果，目前的研究僅限于體外誘導(dǎo)后注入未免疫的小鼠，起到預(yù)防作用，或者在疾病發(fā)生前的免疫幼稚型老鼠。但是，未免疫的老鼠和疾病狀態(tài)下的人、發(fā)炎的組織有很大的區(qū)別，發(fā)炎組織里，自身免疫的細(xì)胞無法控制地被激活，

12、分泌促炎癥因子在免疫幼稚型的老鼠中，激活的Treg可以充分發(fā)揮作用，但是在炎癥這種非正常狀況下，Treg的功能可能會被抑制，甚至可能轉(zhuǎn)化為效應(yīng)T細(xì)胞所以最大的問題是在炎癥狀態(tài)下產(chǎn)生Treg細(xì)胞，并且發(fā)揮作用所以，這種新的思路建立在重編程的思想上在自身免疫的環(huán)境中，修復(fù)，并且重新引導(dǎo)回免疫耐受的狀態(tài)這種方法可以建立一種機(jī)制，在體內(nèi)誘導(dǎo)出抗原特異性的Treg細(xì)胞EAE模型自身抗原是髓鞘脂蛋白pPLP: proteolipidproteinpeptidePLP139151pMOG: myelinoligodendrocyteglycoproteinpeptide35553組對照是：自身免疫小鼠+PB

13、SIRR，PLP，IRR，MAC，OVA，對照組都發(fā)展成了復(fù)發(fā)型EAE*IRR+MAC+PLP與3個對照組相比，出現(xiàn)了顯著的抑制所有接受射線的小鼠Treg細(xì)胞有所增加，但是只有免疫耐受的小鼠分泌IL-17的TH17細(xì)胞有所下降在脾臟內(nèi)，Treg細(xì)胞出現(xiàn)的頻率和總數(shù)也有所增加*在成功誘導(dǎo)免疫耐受小鼠里，由pPLP引起的T細(xì)胞擴(kuò)增和炎癥因子都大幅減少了*用抗體除去90%的CD8+T細(xì)胞和B細(xì)胞，不影響CD4+T細(xì)胞，也達(dá)到了效果脊髓中的浸潤性炎癥T細(xì)胞數(shù)量減少，Th17減少，Treg變多，整體CD4+T細(xì)胞不變MT-response不受影響TGF-發(fā)揮關(guān)鍵作用吞噬細(xì)胞產(chǎn)生的TGF-是一過性的如果在之前的治療方案中，加入TGF-的抗體，TGF-的中和會完全轉(zhuǎn)換了耐受的方向并且讓小鼠回復(fù)到之前的病理水平免疫耐受的小鼠中，TGF-可能是由吞噬細(xì)胞和Treg細(xì)胞共同產(chǎn)生的，吞噬細(xì)胞來源的是因為放射之后吞噬凋亡細(xì)胞，Treg細(xì)胞產(chǎn)生的TGF-是由于后續(xù)發(fā)展的抗原刺激的特異性Treg細(xì)胞產(chǎn)生 Treg細(xì)胞的關(guān)鍵作用*去除后的小鼠表現(xiàn)出炎癥細(xì)胞的升高，病情更加嚴(yán)重 Treg細(xì)胞的關(guān)鍵作用一，凋亡是開啟長期免疫耐受的關(guān)鍵因素二，這種新的治療方法不會分