靈雷菌質(zhì)抗炎鎮(zhèn)痛作用的研究

1、靈雷菌質(zhì)抗炎鎮(zhèn)痛作用的研究 周雪娥劉敏亮謝小梅【摘要】目的考察靈雷菌質(zhì)的抗炎鎮(zhèn)痛作用。方法通過二甲苯致耳腫脹及醋酸引起毛細(xì)血管擴(kuò)張法觀察靈雷菌質(zhì)的抗炎作用；采用熱板法觀察靈雷菌質(zhì)的鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果靈雷菌質(zhì)對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹和醋酸引起的毛細(xì)血管擴(kuò)張有良好的抑制作用；并能進(jìn)步熱致痛小鼠的痛閾。結(jié)論雙向固體發(fā)酵后的靈雷菌質(zhì)仍保存一定的抗炎與鎮(zhèn)痛作用?！娟P(guān)鍵詞】雙向性固體發(fā)酵；靈雷菌質(zhì)；耳腫脹；痛閾Abstrat：bjetiveTresearhtheanti-inflaatryandanalgesieffetsffungalferentativeprdutsinTripterygiuilfrdiiH

2、k(linglEifungalsubstane).ethdsThedelsfearsellinginduedbydiethylbenzeneandapillarypereabilityinduedbyaetiaidereusedtbservetheanti-inflaatryeffet.Ht-plateethdasusedtbservetheanalgesieffet.ResultsTheFungalFerentativePrdutsinlingleifungalsubstaneuldsignifiantlyreduetheapillarypereabilityfie，inhibitearse

3、llinginduedbydiethylbenzeneinie，andelevatepainthreshldnlusinThefungalferentatinsubstanesnlingleifungalsubstanehasanti-inflaatryandanalgesieffets.Keyrds：Bi-diretinalslid-statefungalferentatin；Lingleifungalsubstane；Earselling；Painthreshld雷公藤TriterygiuilfrdiiHk，為衛(wèi)矛科雷公藤屬植物。藥理學(xué)研究說明其有免疫抑制、抗腫瘤、抗生育、抗炎等作用。臨床

4、已被廣泛用于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎、兒童原發(fā)性和繼發(fā)性腎病綜合征、成人各種腎炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、血管炎和銀屑病等各種皮膚病13，但雷公藤對(duì)人體有嚴(yán)重的不良反響4。近年來，對(duì)雷公藤減毒持效的研究已經(jīng)成為熱點(diǎn)，但一直未有滿意結(jié)果5，6。本實(shí)驗(yàn)室研究說明，應(yīng)用雙向性固體發(fā)酵技術(shù)能顯著降低雷公藤急性毒性并保持免疫抑制作用另文發(fā)表。為討論在降低雷公藤毒性的同時(shí)是否仍能保持其抗炎鎮(zhèn)痛的作用，我們進(jìn)展了以下研究?，F(xiàn)報(bào)道如下。1材料與儀器1.1藥物靈雷菌質(zhì)(本實(shí)驗(yàn)室提供)，G30代表發(fā)酵30d的靈雷菌質(zhì)；地塞米松(浙江仙琚制藥股份，批號(hào)060432)；阿司匹林南京白敬宇制藥，批號(hào)071118。1.2動(dòng)物

5、昆明種小鼠,體重1822g，由江西醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。1.3儀器UV-2102型紫外分光光度儀(尤尼柯上海儀器設(shè)備)；BS系列電子天平(塞多利斯)；TGL-16G型臺(tái)式離心機(jī)上海安亭科學(xué)儀器廠；型電熱恒溫水槽上海一恒科技。2方法與結(jié)果2.1統(tǒng)計(jì)學(xué)處理通過SPSS11.5軟件進(jìn)展獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。數(shù)據(jù)以s表示。2.2對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響7取昆明種雄性小鼠60只1822g，隨機(jī)分為6組，每組10只，分別為雷公藤生藥組，G30高、中、低劑量組，地塞米松陽性組，生理鹽水NS組即空白組。根據(jù)小鼠體重按每10g灌胃0.2l計(jì)算給藥量，G30高、中、低的濃度分別為其LD50的1/8，1/12，1/

6、16，地塞米松的濃度為0.00375g/kg，空白組按體重灌服等量生理鹽水。連續(xù)灌胃給藥4d。末次給藥后1h，用移液槍在小鼠左耳涂抹二甲苯正反兩面各10l。30in后，將小鼠頸椎脫臼致死，沿耳廓基線剪下兩耳。用6直徑打孔器分別在同一部位打下圓耳片，電子天平稱重。計(jì)算腫脹抑制率。結(jié)果見表1。腫脹抑制率%=ABA100%式中，A代表空白組腫脹度，B代表受試藥物組或陽性對(duì)照藥物組腫脹度。腫脹度(g)=左耳重量-右耳重量從表1可見G30明顯減輕小鼠耳腫脹程度P0.01)，以G30中劑量組為佳。表1藥物對(duì)小鼠耳腫脹度的影響略23對(duì)毛細(xì)血管通透性的影響7所選動(dòng)物、分組和給藥方法同“2.2項(xiàng)。末次給藥后1h

7、各鼠尾靜脈注射1%伊文思藍(lán)0.1l/10g，隨即腹腔注射0.6%醋酸0.1l/10g。20in后將小鼠頸椎脫臼致死，腹腔注射NS6l。輕揉小鼠腹部后，沿腹中線剪1小口，傾出腹腔溶液約56l，1000r/in離心5in。在紫外分光光度計(jì)590n處測(cè)定吸收度(D值)。結(jié)果見表2。表2藥物對(duì)小鼠腹腔染料滲出的影響略從表2可見生藥和G30高劑量組可減少小鼠腹腔伊文思藍(lán)滲出量P0.05，P0.01)，但地塞米松組無明顯變化，可能與用藥量和時(shí)間有關(guān)。2.4熱板法鎮(zhèn)痛試驗(yàn)7將雌性小鼠置于(55.40.5)恒溫?zé)岚迳?，以舔后足為指?biāo)，挑選痛閾值大于5s小于30s的合格小鼠60只。將挑選的合格小鼠隨機(jī)分為6組，

8、分別為空白組、G303個(gè)劑量組(即G30高，G30中，G30低)、阿司匹林組0.2g/kg、雷公藤生藥組。各組按0.2l/10g體重ig給藥，空白組給予同等劑量的生理鹽水，連續(xù)4d。第4天給藥后15，60，90，120，180in依次測(cè)量各小鼠痛閾值，并計(jì)算痛閾進(jìn)步百分率。結(jié)果見表34。表3藥物對(duì)小鼠痛閾值的影響略表4給藥后不同時(shí)間點(diǎn)小鼠的痛閾進(jìn)步百分率略痛閾進(jìn)步百分率%=用藥后平均痛閾-用藥前平均痛閾/用藥前平均痛閾值100%從表3中可見，與空白對(duì)照比較，阿司匹林給藥組、G30組均能升高熱致痛小鼠痛閾，且G30組中劑量組的鎮(zhèn)痛維持時(shí)間、痛閾進(jìn)步百分率較陽性對(duì)照組高。3討論雙向性固體發(fā)酵是根據(jù)

9、中藥被某些真菌污染霉變發(fā)酵后引起中藥藥性藥效變化的原理，用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)在人工嚴(yán)密控制條件下接種有益的藥用真菌對(duì)中藥進(jìn)展發(fā)酵，產(chǎn)生的菌絲體發(fā)酵物質(zhì)簡(jiǎn)稱菌質(zhì)將賦有新的成分與藥效，該藥性菌質(zhì)是人工制造的新藥材8。中國早在1500年前就有“制曲工藝消費(fèi)多種曲、酒等供藥用，其消費(fèi)工藝可以認(rèn)為是雙向性固體發(fā)酵的雛形。莊毅教授帶著的科研組在20世紀(jì)90年代運(yùn)用藥用真菌固體發(fā)酵技術(shù)研制了中藥一類新藥“槐耳菌質(zhì)“槐耳顆粒，并在此根底上進(jìn)展了“槐芪菌質(zhì)的研究，十余年的研究說明藥性菌質(zhì)較藥用菌質(zhì)可能有更好更廣的藥效，主要表如今增效、擴(kuò)用、解毒等方面9。本實(shí)驗(yàn)室采用雙向性固體發(fā)酵技術(shù)已經(jīng)獲得了毒性降低仍然保持免疫抑制

10、作用的G30靈雷菌質(zhì)。在此根底上我們用常規(guī)方法考察了G30的鎮(zhèn)痛、抗炎作用，結(jié)果說明靈雷菌質(zhì)G30具有較好的抗炎鎮(zhèn)痛作用，進(jìn)一步說明了雙向性固體發(fā)酵后靈雷菌質(zhì)減毒持效作用，為研制減毒持效的靈雷菌質(zhì)新藥材奠定了基矗目前，本實(shí)驗(yàn)室正在對(duì)靈雷菌質(zhì)治療腎炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎模型等方面開展實(shí)驗(yàn)研究?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1黃懷鵬,牛聯(lián)改,陳志強(qiáng)，等，雷公藤對(duì)系膜增生性腎炎大鼠IA-1及其RNA影響的研究J.中華實(shí)用中西醫(yī)雜志，2002，2(15)：9.2劉春芳，林娜，賈紅偉，等.雷公藤甲素對(duì)型膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎小鼠免疫功能的影響J.中國中醫(yī)藥信息雜志,2022，711：7.3張壤之，孫先進(jìn)，王宗澤.雷公藤多甙片配合中藥治療尋常型銀屑病67例J.皮膚病與性病，2022，291：22.4李龍雷公藤及昆明山海棠引起的腎損害J.中國臨床醫(yī)生，2022，3412：713.5梁文波中藥復(fù)方對(duì)抗雷公藤多甙毒性的研究J.中草藥，1999，3012：916.6羅雪芹，劉家玉，陳東輝，等對(duì)雷