野生松乳菇菌絲在不同培養(yǎng)基上的分離試驗(yàn)

1、野生松乳菇菌絲在不同培養(yǎng)基上的別離試驗(yàn)摘要以野生松乳菇的子實(shí)體作為別離材料,取子實(shí)體的柄基進(jìn)展組織別離,分別接入不同配方的培養(yǎng)基上進(jìn)展培養(yǎng)試驗(yàn),結(jié)果說(shuō)明,葡萄糖20g、酵母1g、gs47h20.5g、瓊脂20g、松根液100l(100g松根+500l水煮沸過(guò)濾)、腐殖土水100l(100g腐殖土+500l水煮沸過(guò)濾),加水至1000l的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)最好。關(guān)鍵詞松乳菇;培養(yǎng)基;菌絲生長(zhǎng)松乳菇(latariusdeliisus),別名松菇,其質(zhì)脆味美,營(yíng)養(yǎng)豐富,深受人們喜歡,每年56月和1011月有松乳菇上市,商品價(jià)值較高。近年來(lái),野生松乳菇產(chǎn)量逐年下降,人工開(kāi)發(fā)已成開(kāi)展趨勢(shì)1-6。通過(guò)對(duì)野生

2、松乳菇子實(shí)體進(jìn)展別離,挑選出合適菌絲生長(zhǎng)的培養(yǎng)基,以期為開(kāi)發(fā)利用松乳菇奠定基矗1材料與方法1.1試驗(yàn)材料野生菌株采自江西省吉安縣鳳凰鎮(zhèn)松樹林中,采摘朵形正常、生長(zhǎng)強(qiáng)健、內(nèi)菌幕剛破、無(wú)蟲害、成熟的新穎子實(shí)體。1.2試驗(yàn)方法1.2.1母種培養(yǎng)基的配制。配方:葡萄糖20g,酵母1g,gs47h20.5g,瓊脂20g,松根液100l(100g松根+500l水煮沸過(guò)濾),腐殖土水100l(100g腐殖土+500l水煮沸過(guò)濾),水加至1000l。腐殖土液200l(200g腐殖土+1000l水煮沸過(guò)濾);青松針液200l(300g青松針+1000l水煮沸過(guò)濾),松根液200l(300g松根+1000l水者沸

3、過(guò)濾);啤酒糟200l(200g干啤酒糟+1000l水煮沸過(guò)濾);葉酸0.01g;瓊脂20g;水加至1000l。除未參加葉酸0.01g,其他配方同。去皮馬鈴薯200g(切薄片加水1000l煮沸過(guò)濾),葡萄糖20g,瓊脂20g,水加至1000l。將以上4種配方分別裝入15試管,每支10l,每組100支,于121下滅菌30in,冷卻做成斜面培養(yǎng)基。1.2.2組織別離。將子實(shí)體反復(fù)沖洗干凈,取柄基用酒精處理外表,在無(wú)菌條件下取中間局部切成小薄片,用接種針接入不同的培養(yǎng)基斜面上,每個(gè)處理接種30支試管。將接好種的試管置入人工氣候箱內(nèi),在恒溫25下進(jìn)展培養(yǎng),3d后觀察菌絲萌發(fā)生長(zhǎng)情況,每天檢查1次,將污

4、染的試管揀出。1.2.3孢子別離。將一菌蓋厚實(shí)、菌柄粗壯、外觀光潔、無(wú)病蟲危害的野生松乳菇切除柄基,反復(fù)沖洗,用干紗布吸去外表水分后,噴灑75%酒精進(jìn)展消毒,再用自來(lái)水反復(fù)沖洗,用紗布擦干,放在消好毒的玻璃鐘罩內(nèi)進(jìn)展孢子搜集。獲得孢子后,用蒸餾水稀釋,用滴管接入不同的培養(yǎng)基斜面上,每個(gè)處理接種30支試管。將接好種的試管置入人工氣候箱內(nèi),在恒溫25下進(jìn)展培養(yǎng),3d后觀察菌絲萌發(fā)生長(zhǎng)情況,每天檢查1次。1.2.4原母種擴(kuò)大再生母種。將別離獲得的純菌絲體分別接入上述培養(yǎng)基斜面上,每種培養(yǎng)基各接10支試管,置于25下培養(yǎng),3d后每天觀察1次。2結(jié)果與分析2.1不同培養(yǎng)基的別離效果組織別離除培養(yǎng)基、外,

5、培養(yǎng)基、均獲得了菌絲純培養(yǎng)物,但在不同的培養(yǎng)基上組織別離的成功率不一致。菌絲長(zhǎng)勢(shì)因培養(yǎng)基不同而異,培養(yǎng)基菌絲淺灰色,濃密,絨毛狀生長(zhǎng);培養(yǎng)基菌絲淺灰色,較疏,匍匐生長(zhǎng)。孢子別離因污染未獲成功。培養(yǎng)比擬合適用于松乳菇組織別離,別離的菌絲較粗而濃密,成功率為40%;培養(yǎng)基上菌絲別離成功率高達(dá)60%,但菌絲體纖細(xì)而稀疏(見(jiàn)表1)。2.2母種轉(zhuǎn)接培養(yǎng)觀察接入培養(yǎng)基、上的菌絲體均能生長(zhǎng)。以培養(yǎng)基、上的菌絲生長(zhǎng)較好,菌絲體呈淺灰白色,較粗而濃密,放射型絨毛生長(zhǎng);培養(yǎng)基上的菌絲體長(zhǎng)到第4天全部停頓生長(zhǎng),未長(zhǎng)滿斜面;培養(yǎng)基上的菌絲體生長(zhǎng)速度快,比、培養(yǎng)基提早1.5d長(zhǎng)滿斜面,但菌絲體稀而細(xì)。3結(jié)論試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明

6、,葡萄糖20g、酵母1g、gs47h20.5g、瓊脂20g、松根液100l(100g松根+500l水煮沸過(guò)濾)、腐殖土水100l(100g腐殖土+500l水煮沸過(guò)濾),水加至1000l的培養(yǎng)基上松乳菇菌絲生長(zhǎng)最好。4參考文獻(xiàn)1施秀娟,孫東明,邱韓英,等.姬菇品種及其培養(yǎng)基挑選試驗(yàn)j.上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2022(3):137-139.2徐瑞雅,齊志廣,賈耐兵,等.食用菌最正確母種培養(yǎng)基的挑選j.河北農(nóng)業(yè)科學(xué),2022(1):23-24,45.3梁磊.食用菌液體菌種培養(yǎng)基與栽培料配方挑選研究j.寧夏農(nóng)林科技,2022(6):38.4趙俊霞,王立安.四種食用菌母種培養(yǎng)基的挑選j.食用菌,2022(2):18,20.5陳文強(qiáng),