食品中過氧化氫殘留量的測定-標(biāo)準(zhǔn)文本（食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)）

1、PAGE 5食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中過氧化氫殘留量的測定范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中過氧化氫殘留量的測定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于利樂包裝的牛奶、飲料、豆制品（豆腐干）、保健品（鈣片）、水發(fā)產(chǎn)品（魚翅、海蜇）、鳳爪等食品中過氧化氫殘留量的測定。第一法 碘量法原理食品中的強(qiáng)氧化物在稀硫酸中使碘化鉀氧化，產(chǎn)生定量的碘，生成的碘以淀粉作指示劑，用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定得到強(qiáng)氧化物總量。加入過氧化氫酶分解去除試樣中的過氧化氫，用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定去除過氧化氫后的其他氧化物含量。2 次滴XX果之差可計(jì)算得到樣品中過氧化氫的含量。試劑和材料注：除非另有說明，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T 6682規(guī)定的三級水

2、。試劑硫代硫酸鈉：分析純?？扇苄缘矸郏悍治黾?。碘化鉀：分析純。硫酸：分析純。鉬酸銨：分析純。過氧化氫酶（單位活力大于200，000 U/mL）：置于-20保存。亞鐵氰化鉀：分析純。乙酸鋅：分析純。冰乙酸：分析純。活性炭。試劑配制淀粉指示劑（10 g/L）：稱取可溶性淀粉0.50 g，加少許水，調(diào)成糊狀，倒入50 mL沸水中調(diào)勻，煮沸。臨用時(shí)現(xiàn)配。碘化鉀溶液（100 g/L）：稱取10.00 g碘化鉀，加水溶解，定容至100 mL，貯于棕色瓶中。臨用時(shí)現(xiàn)配。10%稀硫酸（質(zhì)量濃度）：量取60 mL硫酸，緩緩注入約700 mL水中，冷卻，稀釋至1000 mL。3%鉬酸銨溶液：稱取3.00 g鉬酸銨

3、，加100 mL水溶解。0.1%過氧化氫酶溶液：稱0.10 g過氧化氫酶，用100 mL蒸餾水分多次將其溶解，冷藏可保存兩個月。亞鐵氰化鉀溶液：稱取106.0 g亞鐵氰化鉀，用水溶解，并稀釋至1000 mL。乙酸鋅溶液：稱取220.0 g乙酸鋅，加30mL冰乙酸，用水溶解，稀釋至1000 mL。 活性炭：將100 g活性炭加至750 mL 1 mol/L鹽酸中，回流1 h-2 h，過濾，用水洗數(shù)次，至濾液中無鐵離子（Fe3+）為止，然后置于110 烘箱中烘干。檢驗(yàn)鐵離子方法：利用普魯士藍(lán)反應(yīng)。將20 g/L亞鐵氰化鉀與1%鹽酸等量混合，將上述洗出濾液滴入，如有鐵離子則產(chǎn)生藍(lán)色沉淀。標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

4、0.1 mol/L硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)儲備液：按GB/T 601規(guī)定的方法配制和標(biāo)定。0.0020 mol/L硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液：臨用時(shí)用標(biāo)準(zhǔn)儲備液稀釋。儀器和設(shè)備電子天平：感量為0.01 g。高速搗碎機(jī)。分析步驟試樣制備固體樣品稱取粉碎均勻的試樣10 g（精確到0.01 g），加適量水溶解，轉(zhuǎn)移入100 mL容量瓶中，對蛋白質(zhì)、脂肪含量較高的樣品可加入乙酸鋅溶液5 mL，亞鐵氰化鉀溶液5 mL，加水定容至刻度，搖勻。浸泡30 min，用濾紙過濾，濾液作為試樣液備用。液體樣品稱取25 g（精確到0.01g）試樣于100 mL容量瓶中，對蛋白質(zhì)、脂肪含量較高的樣品可加入乙酸鋅溶液5 mL，亞鐵氰化鉀

5、溶液5 mL，加水定容至刻度，搖勻，用濾紙過濾，濾液作為試樣液備用。如樣品濾液有顏色，加入1 g活性炭，振搖1 min，用干燥濾紙過濾，棄去初濾液，濾液待用。測定分別吸取濾液25.0 mL，置于A、B兩個250 mL碘量瓶中，A瓶中加入0.1%過氧化氫酶溶液0.5 mL，混勻，放置10 min（放置過程中搖動數(shù)次）。在A、B兩瓶中各加入10%硫酸5.0 mL、碘化鉀溶液5.0 mL、3%鉬酸銨3滴，混勻，置暗處放置10 min，各加水50 mL，分別用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，待滴至微黃色時(shí)，加淀粉指示劑0.5 mL，繼續(xù)滴至藍(lán)色消失，分別記錄A、B兩瓶消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的毫升數(shù)。分析結(jié)果的

6、表述試樣中過氧化氫的含量按式（1）進(jìn)行計(jì)算：.（1） 式中：X樣品中過氧化氫的含量，單位為毫克每千克（mg/kg）；VAA瓶中消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積，單位為毫升（mL）； VB B瓶中消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積，單位為毫升（mL）；c硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度，單位為摩爾每升（mol/L）；m試樣質(zhì)量，單位為克（g）；B樣品稀釋倍數(shù)；17.01與1.00 mL硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液c（Na2S2O3）=1.000 mol/L相當(dāng)?shù)倪^氧化氫的質(zhì)量，單位為毫克（mg）。計(jì)算結(jié)果以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測XX果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留三位有效數(shù)字。精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)

7、立測XX果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。其他本方法定量限為3 mg/kg。第二法 鈦鹽比色法原理過氧化氫在酸性溶液中，與鈦離子生成穩(wěn)定的橙色絡(luò)合物。在430 nm下，吸光度與樣品中過氧化氫含量成正比，用比色法測定樣品中過氧化氫的含量。試劑和材料注：除非另有說明，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T 6682規(guī)定的三級水。試劑高錳酸鉀：分析純。30% H2O2溶液：分析純。硫酸：分析純。二氧化鈦：分析純。硫酸銨：分析純。鹽酸：分析純。試劑配制鈦溶液：稱取1.00 g二氧化鈦（TiO2）、4.00 g硫酸銨于250 mL錐形瓶，加入100 mL濃硫酸，上面放置一小漏斗，置于可控溫電熱套中

8、150 保溫15 h16 h，冷卻后以400 mL水稀釋，最后用濾紙過濾，清液備用。1 mol/L鹽酸：量取90 mL鹽酸，加入1000 mL水中。硫酸（1+4）：量取10 mL硫酸，加入40 mL水中。標(biāo)準(zhǔn)溶液配制高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液c（KMnO4）=0.100 mol/L：按GB/T 601規(guī)定的方法配制和標(biāo)定。過氧化氫標(biāo)準(zhǔn)儲備液：吸取30% H2O2溶液1 mL 于100 mL容量瓶中，加水至刻度，混勻。吸取20.00 mL上述溶液于250 mL 錐形瓶中，加入10%稀硫酸（3.2.3）25 mL，用高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液c（KMnO4）=0.100 mol/L滴定至微紅色。過氧化氫標(biāo)準(zhǔn)儲備液的濃

9、度按式（2）進(jìn)行計(jì)算：. （2）式中：X：過氧化氫標(biāo)準(zhǔn)儲備液濃度，單位為毫克每毫升（mg/mL）；V：滴定所用高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液c（KMnO4）=0.100 mol/L的體積，單位為毫升（mL）；c：高錳酸鉀 c（KMnO4）=0.100 mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，單位為摩爾每升（mol/L）；17.01：每毫升高錳酸鉀c（KMnO4）=0.100 mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)于過氧化氫的質(zhì)量，單位為毫克（mg）。過氧化氫標(biāo)準(zhǔn)使用液：根據(jù)10.3.2的標(biāo)XX果將過氧化氫標(biāo)準(zhǔn)儲備液稀釋成20 g/mL。儀器和設(shè)備電子天平：感量為0.01 g。高速搗碎機(jī)。分光光度計(jì) ：配5 cm比色皿。分析步驟試樣制備同

10、5.1。標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作吸取0.00 mL、0.25 mL、0.50 mL、1.00 mL、2.50 mL、5.00 mL、7.50 mL、10.0 mL過氧化氫標(biāo)準(zhǔn)使用液（相當(dāng)于0 g、5 g、10 g、20 g、50 g、100 g、150 g、200 g過氧化氫），分別置于25 mL帶塞比色管中。各加入鈦溶液5.0 mL，用水定容至25 mL，搖勻，放置10 min。用5 cm比色皿，以空白管調(diào)節(jié)零點(diǎn)，于波長430 nm處測吸光度。以標(biāo)準(zhǔn)系列的過氧化氫濃度（g/mL）對吸光度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。測定吸取10.00 mL試樣液于25 mL帶塞比色管中，以下按標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制步驟操作（從“各加入鈦溶液5.0 mL于波長430 nm處測吸光度”），同時(shí)做試劑空白。如果經(jīng)過活性炭吸附后試樣液仍有顏色干擾，應(yīng)扣除試樣液的本底色，即用5.0 mL稀硫酸（1+4）代替鈦溶液，其他按上述方法操作。分析結(jié)果的表述試樣中過氧化氫的含量按式（3）進(jìn)行計(jì)算： .（3）式中：X樣品中過氧化氫含量，單位為毫克每千克（mg/kg）；c試樣測定液中過氧化氫的質(zhì)量，單位為微克（g）；V1試樣處理液總體積，