基因工程菌的發(fā)酵PPT教學(xué)課件

1、基因工程菌的發(fā)酵PPT教學(xué)課件基因工程菌的發(fā)酵PPT教學(xué)課件基因工程菌的穩(wěn)定性基因工程菌的遺傳不穩(wěn)定性的表現(xiàn) 基因工程菌的遺傳不穩(wěn)定性主要表現(xiàn)在重組質(zhì)粒的不穩(wěn)定性， 這種 不穩(wěn)定性具有下列兩種表現(xiàn)形式： 結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定性 重組 DNA 分子上某一區(qū)域發(fā)生缺失、重排、修飾，導(dǎo)致其表 觀生物學(xué)功能的喪失 分配不穩(wěn)定性 整個(gè)重組 DNA 分子從受體細(xì)胞中逃逸（curing）基因工程菌的穩(wěn)定性基因工程菌的遺傳不穩(wěn)定性的表現(xiàn)基因工程菌的穩(wěn)定性基因工程菌的遺傳不穩(wěn)定性的的產(chǎn)生機(jī)制 受體細(xì)胞中的限制修飾系統(tǒng)對(duì)外源重組 DNA 分子的降解 外源基因的高效表達(dá)嚴(yán)重干擾受體細(xì)胞正常的生長(zhǎng)代謝 能量、物質(zhì)的匱乏和外源基

2、因表達(dá)產(chǎn)物的毒性誘導(dǎo)受體細(xì)胞產(chǎn)生 應(yīng)激反應(yīng)：關(guān)閉合成途徑，啟動(dòng)降解程序 重組質(zhì)粒在受體細(xì)胞分裂時(shí)的不均勻分配 這是重組質(zhì)粒逃逸的基本原因 受體細(xì)胞中內(nèi)源性的轉(zhuǎn)座元件促進(jìn)重組分子的缺失重排基因工程菌的穩(wěn)定性基因工程菌的遺傳不穩(wěn)定性的的產(chǎn)生機(jī)制基因工程菌的穩(wěn)定性基因工程菌的遺傳不穩(wěn)定性的的產(chǎn)生機(jī)制 受體細(xì)胞中的限制修飾系統(tǒng)對(duì)外源重組 DNA 分子的降解 外源基因的高效表達(dá)嚴(yán)重干擾受體細(xì)胞正常的生長(zhǎng)代謝 能量、物質(zhì)的匱乏和外源基因表達(dá)產(chǎn)物的毒性誘導(dǎo)受體細(xì)胞產(chǎn)生 應(yīng)激反應(yīng)：關(guān)閉合成途徑，啟動(dòng)降解程序 重組質(zhì)粒在受體細(xì)胞分裂時(shí)的不均勻分配 這是重組質(zhì)粒逃逸的基本原因 受體細(xì)胞中內(nèi)源性的轉(zhuǎn)座元件促進(jìn)重組分

3、子的缺失重排基因工程菌的穩(wěn)定性基因工程菌的遺傳不穩(wěn)定性的的產(chǎn)生機(jī)制基因工程菌的穩(wěn)定性重組質(zhì)粒的逃逸率 當(dāng)含有重組質(zhì)粒的工程菌在非選擇性條件下生長(zhǎng)時(shí)，培養(yǎng)系統(tǒng)中一部分細(xì)胞不再攜帶重組質(zhì)粒，這些空載細(xì)胞數(shù)與總細(xì)胞數(shù)之比稱為重組質(zhì)粒的宏觀逃逸率。 重組質(zhì)粒逃逸的原因有： 高溫培養(yǎng)、表面活性劑（SDS）、藥物（利福平）、染料促使重 組質(zhì)粒滲漏 受體細(xì)胞中的核酸酶降解重組質(zhì)粒 重組質(zhì)粒在受體細(xì)胞分裂時(shí)不均勻分配，細(xì)胞所含重組質(zhì)粒拷貝 數(shù)的差異隨著細(xì)胞分裂次數(shù)的增多而加劇基因工程菌的穩(wěn)定性重組質(zhì)粒的逃逸率 影響基因工程菌穩(wěn)定性的因素 載體的選擇 遺傳特性 宿主的選擇 外源基因整合到宿主染色體上 培養(yǎng)基 生

4、長(zhǎng)速率 發(fā)酵工藝 限制性基質(zhì) 溫度 pH 和溶氧 外源基因表達(dá)基因工程菌的穩(wěn)定性 影響基因工程菌穩(wěn)定性的因素基因工程菌的穩(wěn)定性 提高基因工程菌穩(wěn)定性的策略 改進(jìn)載體受體系統(tǒng) 以增加質(zhì)粒穩(wěn)定性為目的的構(gòu)建方法包括： 將 R1 質(zhì)粒上的 parB 基因引入表達(dá)型載體中 其表達(dá)產(chǎn)物可以選擇性地殺死由于分配不均勻所產(chǎn)生的無質(zhì)粒細(xì)胞 正確設(shè)置載體上的多克隆位點(diǎn) 禁止 DNA 片段插在穩(wěn)定區(qū)內(nèi) 將受體細(xì)胞的致死性基因安裝在載體上 同時(shí)構(gòu)建條件致死性的相應(yīng)受體系統(tǒng)，如大腸桿菌的 ssb 基因 （DNA 單鏈結(jié)合蛋白編碼基因）基因工程菌的穩(wěn)定性 提高基因工程菌穩(wěn)定性的策略基因工程菌的穩(wěn)定性培養(yǎng)基 一些基因重組

5、菌在復(fù)合培養(yǎng)基中顯示較高的質(zhì)粒穩(wěn)定性 微生物在含有有機(jī)氮源如酵母抽提物、蛋白胨等營(yíng)養(yǎng)豐富的復(fù)合培 養(yǎng)基中培養(yǎng)時(shí)，由于培養(yǎng)基提供了生長(zhǎng)必須的氨基酸和其他物質(zhì)， 微生物的生長(zhǎng)較在基本培養(yǎng)基中快。 培養(yǎng)條件對(duì)基因工程菌穩(wěn)定性的影響培養(yǎng)基培養(yǎng)條件對(duì)基因工程菌穩(wěn)定性的影響比生長(zhǎng)速率 基因重組菌的比生長(zhǎng)速率對(duì)質(zhì)粒穩(wěn)定性有很大影響。提高比生長(zhǎng)速率有助于提高質(zhì)粒穩(wěn)定性。 基因重組菌的比生長(zhǎng)速率與培養(yǎng)環(huán)境有關(guān)，如溫度，pH，溶氧，限制性營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度，有害代謝產(chǎn)物濃度等。在一定的溫度和 pH 下，限制性基質(zhì)濃度往往是決定比生長(zhǎng)速率的主要因素。培養(yǎng)條件對(duì)基因工程菌穩(wěn)定性的影響比生長(zhǎng)速率培養(yǎng)條件對(duì)基因工程菌穩(wěn)定性的影

6、響限制性基質(zhì) 一般培養(yǎng)基中各成分并不是完全平衡的，經(jīng)過一段時(shí)間的培養(yǎng)，微生物的生長(zhǎng)通常會(huì)受到一種或幾種物質(zhì)的限制。限制性基質(zhì)的種類對(duì)重組菌有不同的影響培養(yǎng)條件對(duì)基因工程菌穩(wěn)定性的影響限制性基質(zhì)培養(yǎng)條件對(duì)基因工程菌穩(wěn)定性的影響pH 和溶解氧 pH 和溶氧影響重組酵母菌的穩(wěn)定性。 pH 和溶氧是影響微生物生長(zhǎng)的重要參數(shù)，在發(fā)酵罐培養(yǎng)基因重組菌時(shí)，通常都需要維持一定的 pH 和溶氧水平。在基因重組菌的高密度培養(yǎng)時(shí)，為了維持所需的溶氧水平，除了提高攪拌轉(zhuǎn)速和通氣量，往往還要在通入的空氣中補(bǔ)充氧氣，以提高發(fā)酵罐的供氧能力。培養(yǎng)條件對(duì)基因工程菌穩(wěn)定性的影響pH 和溶解氧培養(yǎng)條件對(duì)基因工程菌穩(wěn)定性的影響外源

7、基因的表達(dá) 外源基因的表達(dá)會(huì)引起重組質(zhì)粒的不穩(wěn)定 外源基因高效表達(dá)時(shí)，有可能因競(jìng)爭(zhēng)利用物質(zhì)、能量、核糖體等干擾宿主細(xì)胞的正常代謝活動(dòng)，并造成質(zhì)粒不穩(wěn)定。 例如，吲哚丙烯酸（IAA ）是 trp 操縱子阻遏物的部分去阻遏劑，在培養(yǎng)大腸桿菌 MV12（pVH5）時(shí)，在培養(yǎng)基中加入不同量的 IAA，發(fā)現(xiàn)隨 IAA 量的增加，pVH5 帶有的分支酸合成酶和色氨酸合成酶基因的表達(dá)水平有很大提高，同時(shí)比生長(zhǎng)速率下降，培養(yǎng)液中 Trp 的比例上升。電泳分析表明 60%70% 色氨酸合成能力喪失是由于質(zhì)粒結(jié)構(gòu)的變化，其余是由于質(zhì)粒丟失造成。培養(yǎng)條件對(duì)基因工程菌穩(wěn)定性的影響外源基因的表達(dá)培養(yǎng)條件對(duì)基因工程菌穩(wěn)定

8、性的影響提高基因工程菌穩(wěn)定性的策略 施加選擇壓力 根據(jù)載體上的抗藥性標(biāo)記，向培養(yǎng)系統(tǒng)中添加相應(yīng)的抗生素 藥物和食品生產(chǎn)時(shí)禁止使用抗生素 加入大量的抗生素會(huì)使生產(chǎn)成本增加 添加一些容易被水解失活的抗生素，只能維持一定時(shí)間 添加抗生素選擇壓力對(duì)質(zhì)粒結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定無能為力 載體上的營(yíng)養(yǎng)缺陷型標(biāo)記，向培養(yǎng)系統(tǒng)中添加相應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)組份 培養(yǎng)基復(fù)雜，成本較高 提高質(zhì)粒穩(wěn)定性的方法提高基因工程菌穩(wěn)定性的策略 提高質(zhì)粒穩(wěn)定性的方法提高基因工程菌穩(wěn)定性的策略 分階段控制培養(yǎng) 因外源基因表達(dá)造成質(zhì)粒不穩(wěn)定時(shí)，可以考慮將發(fā)酵過程分階段控制 在生長(zhǎng)階段使外源基因處于阻遏狀態(tài)，避免因表達(dá)造成不穩(wěn)定性問 題的發(fā)生；在獲得需要的菌

9、體密度后，再去阻遏或誘導(dǎo)外源基因表 達(dá)。 連續(xù)培養(yǎng)時(shí)可以考慮采用多級(jí)培養(yǎng)，如在第一級(jí)進(jìn)行生長(zhǎng)，維持菌 體的穩(wěn)定性，在第二級(jí)進(jìn)行表達(dá)。 提高質(zhì)粒穩(wěn)定性的方法提高基因工程菌穩(wěn)定性的策略 提高質(zhì)粒穩(wěn)定性的方法提高基因工程菌穩(wěn)定性的策略 控制目的基因的過量表達(dá) 使用可控型啟動(dòng)子控制目的基因的定時(shí)表達(dá)及表達(dá)程度 使用可控型復(fù)制子控制質(zhì)粒的定時(shí)增殖或降低質(zhì)粒的拷貝數(shù) 優(yōu)化基因工程菌的培養(yǎng)工藝 培養(yǎng)基組成：限制培養(yǎng)基比豐富培養(yǎng)基更有利于穩(wěn)定 培養(yǎng)溫度： 較低的培養(yǎng)溫度有利于重組質(zhì)粒的穩(wěn)定 提高質(zhì)粒穩(wěn)定性的方法提高基因工程菌穩(wěn)定性的策略 提高質(zhì)粒穩(wěn)定性的方法提高基因工程菌穩(wěn)定性的策略 優(yōu)化基因工程菌的培養(yǎng)工藝

10、 工程菌的培養(yǎng)條件對(duì)其質(zhì)粒的穩(wěn)定性和表達(dá)效率影響很大 可調(diào)控的環(huán)境參數(shù)為：培養(yǎng)基組分、培養(yǎng)溫度、pH 和溶解氧濃度。 有些含質(zhì)粒的菌對(duì)發(fā)酵環(huán)境的改變比不含質(zhì)粒的菌反應(yīng)慢，因而采用 間隙改變培養(yǎng)條件的方法以改變這兩種菌的比生長(zhǎng)速率，從而改善質(zhì) 粒的穩(wěn)定性。通過間隙供氧的方法和通過改變稀釋速率的方法都可提 高質(zhì)粒的穩(wěn)定性。 培養(yǎng)基組成：限制培養(yǎng)基比豐富培養(yǎng)基更有利于穩(wěn)定 培養(yǎng)溫度： 較低的培養(yǎng)溫度有利于重組質(zhì)粒的穩(wěn)定 提高質(zhì)粒穩(wěn)定性的方法提高基因工程菌穩(wěn)定性的策略 提高質(zhì)粒穩(wěn)定性的方法提高基因工程菌穩(wěn)定性的策略 控制培養(yǎng)條件 有些含質(zhì)粒的菌對(duì)發(fā)酵環(huán)境的改變比不含質(zhì)粒的菌反應(yīng)慢，因而采用間隙改變培養(yǎng)

11、條件的方法以改變這兩種菌的比生長(zhǎng)速率，從而改善質(zhì)粒的穩(wěn)定性。通過間隙供氧的方法和通過改變稀釋速率的方法都可提高質(zhì)粒的穩(wěn)定性。 例如研究表達(dá)干擾素 a 的大腸桿菌 W3110(pEC901) 在不同比生長(zhǎng)速率下的質(zhì)粒穩(wěn)定性，隨著稀釋率的增加，質(zhì)粒穩(wěn)定性明顯增加，干擾素的比效價(jià)也明顯增大. 提高質(zhì)粒穩(wěn)定性的方法提高基因工程菌穩(wěn)定性的策略 提高質(zhì)粒穩(wěn)定性的方法 提高質(zhì)粒穩(wěn)定性的方法提高基因工程菌穩(wěn)定性的策略 固定化 固定化可以提高基因重組大腸桿菌的穩(wěn)定性 基因重組大腸桿菌進(jìn)行固定化后，質(zhì)粒的穩(wěn)定性及目的產(chǎn)物的 表達(dá)率都有了很大提高。 在游離重組菌系統(tǒng)中常用抗生素，氨基酸等選擇性壓力穩(wěn)定質(zhì) 粒的手段，

12、往往在大規(guī)模生產(chǎn)中難以應(yīng)用。而采用固定化方法 后，這種選擇壓力則可被省去。 不同的宿主菌及質(zhì)粒在固定化系統(tǒng)中均表現(xiàn)出良好的穩(wěn)定性。 提高質(zhì)粒穩(wěn)定性的方法提高基因工程菌穩(wěn)定性的策略一、基因工程菌的培養(yǎng)方式二、基因工程菌的發(fā)酵工藝第七節(jié) 基因工程菌的培養(yǎng)一、基因工程菌的培養(yǎng)方式第七節(jié) 基因工程菌的培養(yǎng)基因工程菌發(fā)酵的基本操作方式有： 分批培養(yǎng) 分批培養(yǎng)操作簡(jiǎn)單，但因不能控制生長(zhǎng)，獲得的菌體密度也有限 半連續(xù)培養(yǎng)（補(bǔ)料分批） 在一次投料發(fā)酵的基礎(chǔ)上，流加一定量的營(yíng)養(yǎng)，使細(xì)胞進(jìn)一步的 生長(zhǎng)，或得到更多的代謝產(chǎn)物 連續(xù)培養(yǎng) 不斷地流加營(yíng)養(yǎng)，并不斷地取出發(fā)酵液。 連續(xù)培養(yǎng)則多用于動(dòng)力學(xué)特性和穩(wěn)定性等研究。

13、 透析培養(yǎng) 固定化培養(yǎng)基因工程菌培養(yǎng)方式基因工程菌發(fā)酵的基本操作方式有：基因工程菌培養(yǎng)方式補(bǔ)料分批培養(yǎng) 補(bǔ)料分批培養(yǎng)是將種子接入發(fā)酵反應(yīng)器中進(jìn)行培養(yǎng)，經(jīng)過一段時(shí)間，間歇或連續(xù)地補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基，使菌體進(jìn)一步生長(zhǎng)的培養(yǎng)方法。 在分批培養(yǎng)中，為保持基因工程菌生長(zhǎng)所需的良好微環(huán)境，延長(zhǎng)其生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期，獲得高密度菌體，通常把溶氧控制和流加補(bǔ)料措施結(jié)合起來，根據(jù)基因工程菌的生長(zhǎng)規(guī)律來調(diào)節(jié)補(bǔ)料的流加速率。基因工程菌培養(yǎng)方式補(bǔ)料分批培養(yǎng)基因工程菌培養(yǎng)方式連續(xù)培養(yǎng) 連續(xù)培養(yǎng)是將種子接入發(fā)酵反應(yīng)器中，攪拌培養(yǎng)至菌體濃度達(dá)到一定程度后，開動(dòng)進(jìn)料和出料蠕動(dòng)泵，以一定稀釋率進(jìn)行不間斷培養(yǎng)。 連續(xù)培養(yǎng)可以為微生物提供恒定的

14、生活環(huán)境，控制其比生長(zhǎng)速率，為研究基因工程菌的發(fā)酵動(dòng)力學(xué)、生理生化特性、環(huán)境因素對(duì)基因表達(dá)的影響等創(chuàng)造了良好的條件。 但是由于基因工程菌的不穩(wěn)定性，連續(xù)培養(yǎng)比較困難。為了解決這一問題，人們將工程菌的生長(zhǎng)階段和基因表達(dá)階段分開，進(jìn)行兩階段連續(xù)培養(yǎng)。在這樣的系統(tǒng)中關(guān)鍵的控制參數(shù)是誘導(dǎo)水平、稀釋率和細(xì)胞比生長(zhǎng)速率。優(yōu)化這三個(gè)參數(shù)以保證在第一階段培養(yǎng)時(shí)質(zhì)粒穩(wěn)定，菌體進(jìn)入第二階段后可獲得最高表達(dá)水平或最大產(chǎn)率?；蚬こ叹囵B(yǎng)方式連續(xù)培養(yǎng)基因工程菌培養(yǎng)方式透析培養(yǎng) 透析培養(yǎng)技術(shù)是利用膜的半透性原理使培養(yǎng)物和培養(yǎng)基分離，其主要目的是通過去除培養(yǎng)液中的代謝產(chǎn)物來解除其對(duì)生產(chǎn)菌的不利影響。 采用膜透析裝置是在發(fā)

15、酵過程中用蠕動(dòng)泵將發(fā)酵液抽出打入罐外的膜透析器的一側(cè)循環(huán)，其另一側(cè)通入透析液循環(huán)，在補(bǔ)料分批培養(yǎng)中，大量乙酸在透析器中透過半透膜，降低培養(yǎng)基中的乙酸濃度，并可通過在透析液中補(bǔ)充養(yǎng)分而維持較合適的基質(zhì)濃度，從而獲得高密度菌體。 膜的種類、孔徑、面積，發(fā)酵液和透析液的比例，透析液的組成，循環(huán)流速，開始透析的時(shí)間和透析培養(yǎng)的持續(xù)時(shí)間段都對(duì)產(chǎn)物的產(chǎn)率有影響?；蚬こ叹囵B(yǎng)方式透析培養(yǎng)基因工程菌培養(yǎng)方式固定化培養(yǎng) 基因工程菌培養(yǎng)的一大難題是如何維持質(zhì)粒的穩(wěn)定性。有人將固定化技術(shù)應(yīng)用到這一領(lǐng)域，發(fā)現(xiàn)基因工程菌經(jīng)固定化后，質(zhì)粒的穩(wěn)定性大大提高，便于進(jìn)行連續(xù)培養(yǎng)，特別是對(duì)分泌型菌更為有利。由于這一優(yōu)點(diǎn)，基因工

16、程菌固定化培養(yǎng)研究已得到迅速開展?；蚬こ叹呐囵B(yǎng)方式固定化培養(yǎng)基因工程菌的培養(yǎng)方式基因工程菌的培養(yǎng)設(shè)備 應(yīng)用發(fā)酵罐來大規(guī)模培養(yǎng)基因工程菌。為了防止工程菌丟失攜帶的質(zhì)粒，保持基因工程菌的遺傳特性，因而對(duì)發(fā)酵罐的要求十分嚴(yán)格。由于生化工程學(xué)和計(jì)算機(jī)的發(fā)展，新型自動(dòng)化發(fā)酵罐完全能滿足這些要求。 常規(guī)的微生物發(fā)酵設(shè)備可直接用于基因工程菌的培養(yǎng)。不同點(diǎn)在于，微生物發(fā)酵主要收獲的是它們的初級(jí)或次級(jí)代謝產(chǎn)物，細(xì)胞生長(zhǎng)并非主要目標(biāo)。 基因工程菌培養(yǎng)是為了獲得最大量的基因表達(dá)產(chǎn)物。由于這類物質(zhì)是相對(duì)獨(dú)立于細(xì)胞染色體之外的重組質(zhì)粒上的外源基因所合成的、細(xì)胞并不需要的蛋白質(zhì)，因此，培養(yǎng)設(shè)備以及設(shè)備控制應(yīng)滿足獲得高

17、濃度的受體細(xì)胞和高表達(dá)的基因表達(dá)產(chǎn)物。 基因工程菌的培養(yǎng)設(shè)備 應(yīng)用發(fā)酵罐來大規(guī)模培養(yǎng)基因工程菌發(fā)酵罐的組成部分有： 發(fā)酵罐體 保證高傳質(zhì)作用的攪拌器、 精細(xì)的溫度控制和滅菌系統(tǒng)、 空氣無菌過濾裝置 殘留氣體處理裝置 參數(shù)測(cè)量與控制系統(tǒng)（如 pH、O2、CO2 等） 培養(yǎng)液配制及連續(xù)操作裝置等。 基因工程菌的培養(yǎng)設(shè)備發(fā)酵罐的組成部分有：基因工程菌的培養(yǎng)設(shè)備基因工程菌的發(fā)酵PPT教學(xué)課件基因工程菌的發(fā)酵PPT教學(xué)課件基因工程菌在發(fā)酵培養(yǎng)過程中要求 環(huán)境條件恒定，不影響其遺傳特性，更不能引起所帶質(zhì)粒丟失。對(duì)發(fā)酵罐有特殊要求 如要提供菌體生長(zhǎng)的最適條件 培養(yǎng)過程不得污染 保證純菌培養(yǎng) 培養(yǎng)及消毒過程中

18、不得游離出異物，干擾細(xì)菌代謝活動(dòng)基因工程菌的培養(yǎng)設(shè)備基因工程菌在發(fā)酵培養(yǎng)過程中要求基因工程菌的培養(yǎng)設(shè)備發(fā)酵罐的結(jié)構(gòu)材料的穩(wěn)定性要好，一般要應(yīng)用不銹鋼制成罐體表面光滑易清洗，滅菌時(shí)沒有死角與發(fā)酵罐連接的閥門要用膜式閥，不用球形閥所有的連接接口均要用密封圈封閉，不留“死腔”，不得有泄漏攪拌器轉(zhuǎn)速和通氣應(yīng)適當(dāng)空氣過濾系統(tǒng)要采用活性碳和玻璃纖維棉材料培養(yǎng)液要經(jīng)化學(xué)處理或熱處理后才可排放發(fā)酵罐的排氣口須有蒸汽滅菌或微孔濾器除菌后才將廢氣放出。軸封可采用磁力攪拌或雙端面密封基因工程菌的培養(yǎng)設(shè)備發(fā)酵罐的結(jié)構(gòu)材料的穩(wěn)定性要好，一般要應(yīng)用不銹鋼制成基因工程菌中國(guó)陶瓷史專題講座 紫砂陶中國(guó)陶瓷史專題講座 宜興紫砂

19、陶生產(chǎn)始于北宋，盛于明清，是我國(guó)獨(dú)特的陶瓷工藝品。素以制作技藝精湛，造型豐富多彩，色澤古雅淳樸而著稱于世。早在1926年就獲得美國(guó)費(fèi)城國(guó)際博覽會(huì)金質(zhì)獎(jiǎng)，984年紫砂精品榮獲萊比錫國(guó)際博覽會(huì)金質(zhì)獎(jiǎng)。在國(guó)內(nèi)，也曾數(shù)次獲得國(guó)家和部、省優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品稱號(hào)。紫砂陶的設(shè)計(jì)、制作依靠天然原料的特性，采用泥片鑲接手工成型手法，造型渾厚，飽滿又樸質(zhì)，加上本身所具有的裝飾性，及形體的變化和仿自然物體形象所采用堆、雕、捏、塑和鑲嵌金銀絲等裝飾，達(dá)到美的意境，產(chǎn)生強(qiáng)烈的藝術(shù)感染力.紫砂陶器主要有壺、瓶、盆、鼎、餐具、文具、雕塑和其他陳設(shè)工藝品，品種2千余個(gè)。其間而以紫砂壺最具特色。紫砂壺造型美觀大方，色澤淳樸，古色古香，不

20、僅有卓越的工藝水平，而且有獨(dú)特的實(shí)用功。宜興紫砂陶生產(chǎn)始于北宋，盛于明清，是我國(guó)獨(dú)特的陶瓷 用紫砂壺泡茶不走味，盛暑越宿不易餿，使用時(shí)間越，器身色澤越發(fā)光潤(rùn)，泡出的茶也更為醇郁芳香，“首世間茶具此為”這是人們對(duì)它的高度評(píng)價(jià)。 紫砂花盆清麗雅致，栽花置景具有樸質(zhì)渾厚的韻味，紫砂盆有瓷器彩繪般的華麗雕刻裝飾，又有似瓦盆那樣的吸水透氣性能，因而用紫砂盆養(yǎng)花植木有助于根須生長(zhǎng)，有“不爛根、易生發(fā)、花時(shí)長(zhǎng)、落葉遲”之優(yōu)點(diǎn)，以其布置廳堂、居令人心怡神寧。 紫砂雕塑，陳設(shè)品具有一定的藝術(shù)價(jià)值和收藏價(jià)值。紫砂陶刻裝飾集文學(xué)、書畫、詩(shī)歌、金石、篆刻于一體，以刀代筆，有傳統(tǒng)的鐫刻模印浮雕、印花等手法，畫面構(gòu)思新穎

21、，題材廣泛，清雅瀟灑，別具一格。 紫砂原料，是顆粒較粗的陶土，它和景德鎮(zhèn)、龍泉窯的瓷土同屬于高嶺-石英-云母類型。但含鐵、硅量較高。從顏色上分主要有三種：一種呈紫紅色和淺紫色，稱作“紫砂泥”，肉眼可見含有云母微粒，燒成后呈紫黑色或紫棕色；一種呈灰白色或灰綠色，稱作“綠泥”，燒成后呈淺灰色或灰黃色，；還有一種呈紅色，稱作“紅泥”，燒成后為灰黑色。利用這些陶土燒制出的器皿就是紫砂器。 用紫砂壺泡茶不走味，盛暑越宿不易餿，使用時(shí)間越，器身色提梁壺 （明代） 壺系宜興窯產(chǎn)品。砂質(zhì)，肝紅色，質(zhì)地較粗，壺面有缸壇飛釉。球腹，腹下部稍斂，平底，彎流，流與腹銜接處貼塑四瓣柿蒂形紋飾。圓角四棱的提梁近似橋形，轉(zhuǎn)

22、折處為倭角，后部有一栓繩系蓋的小系。平蓋，組件葫蘆狀，無子母口，蓋內(nèi)有“十”字形筋。整個(gè)壺造型嚴(yán)謹(jǐn)，做工規(guī)整。此壺從南京市中華門外馬家山明代司禮太監(jiān)吳經(jīng)墓中出土，同出的磚刻墓志表明墓葬年份為明嘉靖十二年(1533年)。這是我國(guó)目前唯一有絕對(duì)紀(jì)年可考的嘉靖早年紫砂器。 提梁壺 （明代） 壺系宜興窯產(chǎn)品。砂質(zhì)，肝紅色， 鼎足蓋圓壺 （明代） 壺通體呈栗色，略帶黃，布滿梨皮狀小白斑點(diǎn)，器蓋尤為明顯。豐肩，直頸，下腹?jié)u收，平底，假圈足。曲流裝于器腹正中，圓孔。柄體圓，內(nèi)壁線條足卵形。蓋口嚴(yán)密。蓋的弧面上倒立三只扁鼎足，足外側(cè)呈外撇的弧線，內(nèi)側(cè)為兩個(gè)連弧。器底有單行豎排“時(shí)大彬制”陰刻楷書款識(shí)，刀法嫻熟

23、有力，字體方正，起筆處多圓折。此壺1987年7月11日出于于福建省漳浦縣盤陀鄉(xiāng)廟埔村明萬歷年間戶、工二部侍郎盧維禎(15431610年)墓中，同時(shí)出土有墓志銘等紀(jì)年物。壺在出土?xí)r蓋圈已有輕度磨損，當(dāng)為墓主生前使用過的。 鼎足蓋圓壺 （明代） 壺通體呈栗色，略帶黃，布滿梨三足圓壺（明代） 壺身似球形，腹鼓似鬲，三足矮小如乳頭。壺蓋貼塑四瓣對(duì)稱的柿蒂紋。壺身無紋飾，表面滿布微凸小顆粒，似“石榴皮”的質(zhì)感，色淺絳無光。壺的嘴柄相對(duì)，柄下方腹壁上有陰刻楷“大彬”兩字，字體工整有力。整體造型古樸雅致。此壺從無錫系甘露鄉(xiāng)蕭塘墳明崇禎二年華涵莪墓中出土。 三足圓壺（明代） 壺身似球形，腹鼓似鬲，三足矮小如紫

24、砂胎紅雕漆執(zhí)壺 （明代）壺身方形，略呈上闊下斂狀，圓口，環(huán)柄，曲流，四角有過底矮足。平底外滿髹黑漆，中心漆層下隱約現(xiàn)出“時(shí)大彬制”起先楷書款，似為陰刻。壺外涂紅漆，厚約3mm，上雕多種紋飾；腹部四面開光，兩面山水人物，兩面雜實(shí)紋，柄、流上流云飛鶴，肩、蓋上亦為雜實(shí)紋。此壺造型端莊樸雅，雕飾華美，是紫砂工藝與雕漆工藝結(jié)合的成功作品。此種復(fù)合工藝始于明代，制品多壺類。有時(shí)大彬款的雕漆紫砂壺，此為僅見。 紫砂胎紅雕漆執(zhí)壺 （明代）壺身方形，略呈上闊下斂狀，圓口，環(huán)蓋罐 （明代） 罐平口直頸，長(zhǎng)圓腹，底微向里凹。肩部有六瓣柿蒂紋。蓋面中心有“周氏俊造”陽(yáng)文篆字款。 蓋罐 （明代） 罐平口直頸，長(zhǎng)圓腹，

25、底微向里凹。肩部印花小碟（明代） 小碟同時(shí)出土兩件，形制大小及紋飾完全一致，唯顏色各異，一件朱泥制成，呈赭色，一件紫泥制成，呈深褐色。胎極薄，厚度為0.1cm。底內(nèi)凸。制造工藝簡(jiǎn)練，先用手工捏塑成形，底部指紋清晰可見，然后模印花卉。出土于揚(yáng)州城北公社卜西大隊(duì)馬莊小隊(duì)。 印花小碟（明代） 小碟同時(shí)出土兩件，形制大小及紋飾完陳鳴遠(yuǎn)制印花小碟 （明代）此壺是宜興制陶名手陳鳴遠(yuǎn)所制。他的制品新穎靈巧，銘刻書法古雅，有晉唐風(fēng)格。茶具、瓜果小品等均極精妙，名馳中外，影響甚廣。南瓜形壺，壺嘴堆雕瓜葉，把手飾莖紋，蓋狀瓜蒂。砂質(zhì)溫潤(rùn)，色近橘紅。葉脈筋絡(luò)自然逼真，巧奪天工，妙趣盎然。壺身一側(cè)刻楷書“仿得東陵式盛

26、來雪乳香”十字，刻款“鳴遠(yuǎn)”并鈐陽(yáng)文篆書“陳鳴遠(yuǎn)”方印。 陳鳴遠(yuǎn)制印花小碟 （明代）此壺是宜興制陶名手陳鳴遠(yuǎn)所制。他的 陳鳴遠(yuǎn)制蓮形銀配壺 （明代） 壺身呈蓮蓬形，鼓腹下部漸收斂。壺身四周飾八片寬體蓮瓣。壺嘴短，飾荷葉紋。壺蓋面上以六顆蓮子裝飾在圓形鈕四周，鈕和蓮子均能活動(dòng)。壺蓋和壺口結(jié)合緊密。壺肩部裝有一藕節(jié)形的銀配。在壺身一蓮瓣上刻有“資雨清德煩暑咸滌君子友之以永朝夕”銘文，并刻有陳鳴遠(yuǎn)名款及二篆書印“陳”、“鳴遠(yuǎn)”。 陳鳴遠(yuǎn)制蓮形銀配壺 （明代） 壺身呈蓮蓬形， 石榴形小杯 （清代） 泥質(zhì)紫褐色中閃點(diǎn)點(diǎn)金星，俗稱“桂花砂”。器形為半爿石榴，樹枝形杯把，底部雕塑枝葉，杯把旁塑一蓓蕾。整個(gè)造

27、型穩(wěn)重協(xié)調(diào)。在蓓蕾與樹枝中間藏有陽(yáng)文篆書“陳鳴遠(yuǎn)”三字印。 石榴形小杯 （清代） 泥質(zhì)紫褐色中閃點(diǎn)點(diǎn)金星，俗稱“印花烹茶圖壺 （清代） 壺呈六方形，直口，短頸，折肩，折底，短流，如意式曲柄，蓋與壺口嚴(yán)密吻合。整體瘦長(zhǎng)挺拔。用紫紅色砂泥制作。壺身三面印制烹茶圖，圖中二人在茶樓的幾案旁坐飲，一書僮在廊中煮水，另一書僮端兩茶杯作送茶狀。四周有松、竹、梅及洞石作陪襯。壺身另三面鐫刻乾隆御制詩(shī)：“雨中烹茶泛臥淳書室有作 溪煙山雨相空，生衣獨(dú)坐楊柳風(fēng)。竹爐茗碗泛清瀨，米家書畫將無同。松風(fēng)瀉處生魚眼，中泠三峽何須辨。清香仙露沁詩(shī)脾，座間不覺芳堤轉(zhuǎn)?！痹?shī)后篆刻陽(yáng)文“乾隆”二字章式款。這首詩(shī)是清高宗弘歷于乾隆七

28、年夏至那天，在地壇神畢返回圓明園途中所作。烹茶圖取材于乾隆御制詩(shī)，詩(shī)書結(jié)合，形式和內(nèi)容有機(jī)地融為一體。 印花烹茶圖壺 （清代） 壺呈六方形，直口，短頸，折肩，金銀彩繪山水茶壺 （清代） 通體呈方形，直口，口以下漸廣，方圈足。曲形柄，流、柄均凸起四棱，與壺體相呼應(yīng)?？谏细缴w與壺體相吻合。用紫色砂泥制作，形體古樸大方。腹部一面用金銀彩繪山水、樓閣和松柏。另一面為金彩篆書御制詩(shī)：“御制 花港觀魚，錦梭不籍。天孫擲練，影中堆萬。族云設(shè)興，水仙作春。服天邊風(fēng)，月傲清華。”共三十四字。蓋面用金彩彩描繪卷枝紋作邊飾，壺口邊、足邊刻絡(luò)繹纖細(xì)的回紋。底陽(yáng)印“乾隆年制”四字篆款。彩繪技法嫻熟，書意清逸典雅，篆書用

29、筆流暢，是紫砂器中的珍品。 金銀彩繪山水茶壺 （清代） 通體呈方形，直口，口以下漸注壺 （清代） 壺為梅花形，并有梅花形蓋，蓋上塑二桃形鈕。壺流朝天，為半圓形。梅花形矮圈足。底心有一圓形戳記，字模糊不清。整體造型俊秀，小巧玲瓏。 注壺 （清代） 壺為梅花形，并有梅花形蓋，蓋上塑彩繪山水注壺 （清代） 壺身似杯，有短平流，無把。蓋身、圈足均作四瓣瓜棱形。蓋頂堆塑雙桃，瓜棱腹兩側(cè)用胭脂紅、藍(lán)、青、黃、黑等多種色料繪山水畫。器形規(guī)整，制作講究。蓋內(nèi)及壺底均刻草書“王倫”二字，底又印有橢圓形款記，惜字跡模糊，難以辨認(rèn)。1959年浙江杭州半山清乾隆年間墓葬出土。 彩繪山水注壺 （清代） 壺身似杯，有短平

30、流，無把。蓋身加彩壺（清代） 壺蓋呈扁圓形，壺身呈扁圓柱形，口及底漸收，有圈足，短流，把手上圓下方。周身以深淺藍(lán)琺瑯彩滿繪花紋帶。蓋上繪花卉、如意紋，壺口下部一周是回紋，回紋外一周是如意紋，腹中部一周繪花卉卷草紋，近底部繪變形蓮瓣紋?；y的顏色和紫砂胎本色既對(duì)比又和諧，在加彩裝飾的紫砂器中堪稱佳作。 加彩壺（清代） 壺蓋呈扁圓形，壺身呈扁圓柱形，口及底漸圣思制桃形杯（清代） 杯以桃實(shí)半部為形，折枝作把，并以枝、葉、花為飾。杯下三足，亦由枝、葉及桃實(shí)構(gòu)成。枝干中心觸空，留下斑斑疤痕，形象逼真。泥質(zhì)細(xì)凈，色呈暗紅。是宜興紫砂器中極少見的珍品。有杯托，為近代名藝人裴石民所配。杯表鐫有“閬苑花前是醉鄉(xiāng)

31、，拈翻王母九霞觴”詩(shī)句，款署“圣思”，鈐“圣思氏”篆書陽(yáng)文方印。 圣思制桃形杯（清代） 杯以桃實(shí)半部為形，折枝作把陳綬馥制螭龍?jiān)评准y壺 （清代） 平蓋，短頸，鼓腹，圓底，乳式鼎足。流若龍首，把飾 蟠螭，鈕似伏獅。壺體絳紅色，腹部飾黑泥印云雷紋裝飾帶。底鈐鳳舞紋樣方印，蓋內(nèi)鈐有陽(yáng)文直書正楷“綬馥”橢圓小章。綬馥，姓陳，乾、嘉年間人。披云樓舊藏有陳綬馥制于乾隆三十八年的紫砂大壺。其名不及楊彭年之輩炫顯，作品傳世甚少。 陳綬馥制螭龍?jiān)评准y壺 （清代） 平蓋，短頸，鼓腹，圓底紫砂胎刻書畫錫壺 （清代） 壺為紫砂胎外包錫皮。壺身呈斛形，四角形短直流上細(xì)下粗，鑲螭虎狀青玉環(huán)形把，正方形蓋上嵌矩形白玉鈕。器

32、身一側(cè)刻牡丹紋，另一側(cè)刻隸書：“微潤(rùn)欲沾，雨前吐尖。己丑小春月，石梅”己丑年為清道光九年(1829年)。深赭色紫砂胎底內(nèi)鈐“楊彭年制”陽(yáng)文篆書印款。此壺將紫砂與錫、玉工藝相結(jié)合，堪稱珠聯(lián)璧合，相得益彰，為難得的工藝珍品。此壺出土于清咸豐元年墓。 紫砂胎刻書畫錫壺 （清代） 壺為紫砂胎外包錫皮。壺身呈楊鳳年制梅段壺 （清代） 壺形似梅椿一段，斂口，直腹，假圈足。壺身貼塑梅枝三叢，繁花盛開，再飾以斷枝癭節(jié)。鈕、把、嘴皆作梅枝形。色呈暗紅，泥質(zhì)細(xì)密。壺底鈐陽(yáng)文篆書“楊氏”小圓印。作者楊鳳年為清代宜興制壺名手楊彭年之妹。 楊鳳年制梅段壺 （清代） 壺形似梅椿一段，斂口，藍(lán)釉博古方壺（清代） 造型作方鐘

33、形，斂口，鼓腹，底微凹。方形流，流下部緊貼腹壁。扁環(huán)形把。四注式蓋，弧形鈕。紫砂胎，器表施藍(lán)釉，腹壁兩側(cè)以白、紅、綠彩繪博古圖。底正中鈐一陽(yáng)文方印，字跡不清。 藍(lán)釉博古方壺（清代） 造型作方鐘形，斂口，鼓腹，八卦紋束竹段壺 （清代）壺身外壁似一捆整齊的竹段，中腰以一竹束之。竹段頂端(即壺面邊沿)逐個(gè)雕刻小圓圈，以示竹心中空，形象逼真。壺蓋以的為中心雕入卦紋，把、流堆雕龍頭。壺底三足，亦雕刻矮竹段編連狀，底面雕星象紋。壺色澤蟹青，造型典雅，裝飾協(xié)調(diào)，堪稱上品。蓋內(nèi)鈐瓜子形陽(yáng)文楷書小印“大亨”。 八卦紋束竹段壺 （清代）壺身外壁似一捆整齊的竹段，中腰以一竹魚化龍壺（清代） 此壺選泥精細(xì)，泥色極為純

34、正。通身作海水波浪紋，線條流利，簡(jiǎn)潔明快。魚龍吐珠，神韻生動(dòng)。壺蓋安裝的龍首伸縮自如，優(yōu)美靈活。配以龍尾執(zhí)柄，渾成一體，格律謹(jǐn)嚴(yán)?？记宕腥~陽(yáng)次制壺名手一時(shí)涌現(xiàn)，特以二泉楊彭年為制曼生壺飲譽(yù)獨(dú)高，然細(xì)審傳世真品，大亨所制巧思出群，格調(diào)高雅，誠(chéng)有過之。借其頗自珍重，距今雖百年余年，而作品傳世絕少。魚化龍式為其代表作，此壺已為國(guó)內(nèi)孤品。壺蓋內(nèi)鈐陽(yáng)文楷書“大亨”瓜子形印。 魚化龍壺（清代） 此壺選泥精細(xì)，泥色極為純正。通四方菱花壺 （清代） 鈕、蓋、口、身、圈足統(tǒng)一協(xié)調(diào)成四方菱花形整體，制作精細(xì)規(guī)整。紫砂色調(diào)呈赤褐，夾有細(xì)小的黃砂及黑點(diǎn)。底有楷書刻款“友泉”兩字。 四方菱花壺 （清代） 鈕、蓋、口、

35、身、圈足統(tǒng)一協(xié)五足洗 （清代） 此小船塢為白泥所制，扁圓腹，底有五柱形足。腹上凸雕對(duì)稱的四個(gè)莖干形節(jié)，還凹挖兩個(gè)樹葉形和一個(gè)拱形裝飾，內(nèi)各貼一片紫泥，紫泥上點(diǎn)戳蜂窩狀小圓點(diǎn)。另有一處凹挖為雞心形，內(nèi)無紫泥。腹內(nèi)施白釉，開小碎片。腹內(nèi)底心上有藍(lán)色隸書“胡興隆”三字，行書“秀記”二字。 五足洗 （清代） 此小船塢為白泥所制，扁圓腹，底人物騎象擺件 （清代） 胎泥呈土黃色，砂質(zhì)細(xì)膩。塑造一羅漢坐于象背，大象緩緩前行，回首張望。造型象征期望天下太平，子孫安樂。象腹底部印有篆書款“彭年”二字。 人物騎象擺件 （清代） 胎泥呈土黃色，砂質(zhì)細(xì)膩。塑造一加彩方形水仙盤 （清代） 盤呈淺長(zhǎng)方體。在紫砂器的赭紅色底上以藍(lán)白兩色釉繪面蝶花圖案，壁項(xiàng)飾湖藍(lán)地深藍(lán)色回紋邊。 加彩方形水仙盤 （清代） 盤呈淺長(zhǎng)方體。在紫砂器的赭紅木紋