實驗技術(shù)明膠酶譜法_第1頁
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文檔簡介

1、MMP-2MMP-9MMP-9復(fù)性原理:在電泳過程中,SDSMMPs(當(dāng)然是可逆性結(jié)合),破壞其氫鍵、疏水鍵而使 MMPs 不能發(fā)揮其分解明膠的作用,而只有當(dāng)將膠置MMP-2MMP-9MMP-9復(fù)性原理:在電泳過程中,SDSMMPs(當(dāng)然是可逆性結(jié)合),破壞其氫鍵、疏水鍵而使 MMPs 不能發(fā)揮其分解明膠的作用,而只有當(dāng)將膠置10% SDS 聚丙烯酰胺凝膠 10ml(包括)1.5mol/l Tris(PH膠膠1mol/lTris-HCL(PH 銨0.125mol/lTris-(4)40.32%Tris-1mol/lTris-HCL(PH 銨0.125mol/lTris-(4)40.32%Tri

2、s-3.2 ml X-100,50mmol/LTris-HCl(5) 洗脫液CaCl2,pH7.漂洗液: 50mmol/LTris-HCl,5mmol/LCaCl2,pH7.6(202染色液:0.05%CoomassicR-250,30%甲醇,10%乙酸(31.取對數(shù)期的癌細(xì)胞在總量一致)。與 5上樣緩沖液混合,13ul 樣本+4ul 上樣緩沖液。(不要用槍用力吹打,防SDSv1.5(電泳時在周圍敷上冰,有利于使條帶跑直)電泳結(jié)束后,將凝膠置于洗脫液(2.5% Triton X-100,50mmol/L Tris -HCl ,5mmol/L 5mmol/ CaCl2 , 0. 02% Brij-35 ,pH7.6)3742

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