鄰菲羅啉分光光度法測(cè)定水中微量鐵

1、鄰菲羅啉分光光度法測(cè)定水中微量鐵第1頁(yè)，共12頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)21分，星期三一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1了解分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)和正確的使用方法；2學(xué)習(xí)吸收曲線的制作方法，理解最大吸收波長(zhǎng)的意義；3掌握朗伯比爾定律的應(yīng)用。第2頁(yè)，共12頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)21分，星期三二、實(shí)驗(yàn)原理 在pH約為5的HAc-NaAc緩沖溶液中，F(xiàn)e2+與鄰二氮菲(phen)生成穩(wěn)定的橙紅色絡(luò)合物，max510nm, 1.1104L/(molcm)。在510nm處吸光度與其濃度成正比，符合朗伯-比爾定律，用標(biāo)準(zhǔn)曲線法可求得試樣中微量Fe2+的測(cè)定。 如果鐵以Fe3+的形式存在，應(yīng)預(yù)先加入鹽酸羥胺將F

2、e3+還原成Fe2+。第3頁(yè)，共12頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)21分，星期三三、主要儀器與試劑1儀器 722型分光光度計(jì)、 10mL吸量管，50mL容量瓶。2試劑 (1) 鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液（含鐵 100g/mL）； (2) 0.1%鄰菲羅啉溶液 ； (3) 5%鹽酸羥胺溶液 ； (4) HAc-NaAc緩沖液（pH=4.6）。第4頁(yè)，共12頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)21分，星期三四、實(shí)驗(yàn)步驟1鄰菲羅啉-亞鐵吸收曲線的繪制 準(zhǔn)確吸取鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液（含鐵 10g/mL，用含鐵 100g/mL 配制）4mL于50mL容量瓶中，依次加入5mL HAc-NaAc緩沖液、2mL鹽酸羥胺溶液、5mL鄰

3、菲羅啉溶液，用水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘。以水作參比溶液，用1cm比色皿和722型分光光度計(jì)在=440-600nm分別測(cè)定吸光度A。 以所得吸光度A為縱坐標(biāo)，相應(yīng)波長(zhǎng)為橫坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪制A與的吸收曲線。從吸收曲線上選擇測(cè)定鐵的適宜波長(zhǎng)，一般選用最大吸收波長(zhǎng)max為測(cè)定波長(zhǎng)。第5頁(yè)，共12頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)21分，星期三2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 準(zhǔn)確吸取鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液（含鐵10g/mL）0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL于六個(gè)50mL容量瓶中，依次加入5mL HAc-NaAc緩沖液、2mL鹽酸羥胺溶液、5mL鄰菲羅啉溶液，用去離子水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘

4、。以不加鐵的試劑溶液作參比，用1cm比色皿，在max處分別測(cè)定吸光度A。 以顯色后的50mL溶液中的含鐵量(g)為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)，繪制測(cè)定鐵的標(biāo)準(zhǔn)曲線。第6頁(yè)，共12頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)21分，星期三3試樣中微量鐵的測(cè)定 準(zhǔn)確吸取試樣10mL于50mL容量瓶中，按照繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的實(shí)驗(yàn)步驟，配制溶液并測(cè)定吸光度Ax，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出對(duì)應(yīng)的鐵的質(zhì)量，并求原試樣中鐵含量的濃度（g/mL）。 第7頁(yè)，共12頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)21分，星期三五、數(shù)據(jù)記錄及結(jié)果處理 1吸收曲線繪制和測(cè)量波長(zhǎng)選擇 由吸收曲線可得，max= nm。2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制和鐵含量的測(cè)定第8頁(yè)，共

5、12頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)21分，星期三若由標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出對(duì)應(yīng)的鐵含量為cx ，則原試樣中鐵含量的濃度cFe計(jì)算： 第9頁(yè)，共12頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)21分，星期三六、思考題 1參比溶液的作用是什么？ 2溶液酸度對(duì)測(cè)定有何影響？ 3制作標(biāo)準(zhǔn)曲線和進(jìn)行其他條件實(shí)驗(yàn)時(shí)，加入試劑的 順序能否任意改變？為什么？第10頁(yè)，共12頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)21分，星期三七、注意事項(xiàng)1為了防止光電管疲勞。不測(cè)定時(shí)必須將比色皿暗箱蓋打開(kāi)，使光路切斷，以延長(zhǎng)光電管使用壽命。 2比色皿使用注意事項(xiàng)：1）每臺(tái)儀器與比色皿配套，不能與其它儀器上的比色皿調(diào)換；2）拿取比色皿時(shí)，手指不能

6、接觸其透光面； 3）裝溶液時(shí)，先用該溶液潤(rùn)洗比色皿內(nèi)壁23次，被測(cè)溶液以裝 至比色皿的3/4高度為宜，并用濾紙輕輕吸去比色皿外部的液 體，再用擦鏡紙小心擦拭透光面，直到潔凈透明；4）測(cè)定系列溶液時(shí)，通常按由稀到濃的順序測(cè)定；5）實(shí)驗(yàn)完畢，及時(shí)把比色皿洗凈、晾干，放回比色皿盒中。第11頁(yè)，共12頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)21分，星期三附722型分光光度計(jì)簡(jiǎn)要操作方法： 預(yù)熱儀器。為使測(cè)定穩(wěn)定，將電源開(kāi)關(guān)打開(kāi)，使儀器預(yù)熱 20min。預(yù)熱儀器和在不測(cè)定時(shí)應(yīng)將比色皿暗箱蓋打開(kāi)，使光 路切斷，防止光電管疲勞 ；選定波長(zhǎng)。轉(zhuǎn)動(dòng)波長(zhǎng)調(diào)節(jié)器，使指針指示所需要的單色光波長(zhǎng)。調(diào)節(jié)“T 0”點(diǎn)。打開(kāi)吸收池暗室蓋（光門(mén)自動(dòng)關(guān)閉），使讀數(shù) 模式調(diào)至T上，在調(diào)節(jié)0% T旋鈕，使數(shù)字顯示為“00.0”；調(diào)節(jié)T=100。輕輕蓋上吸收池蓋（將參比溶液置于光路）， 調(diào)節(jié)透光率100% T旋鈕，使數(shù)學(xué)顯示為“100.0” ；測(cè)定。使讀數(shù)模式調(diào)至A，輕輕拉動(dòng)比色皿座架拉桿，使被 測(cè)溶液進(jìn)入