第九至十一章食品中副溶血性弧菌的檢驗(yàn)

1、第九至十一章食品中副溶血性弧菌的檢驗(yàn)第1頁，共13頁，2022年，5月20日，15點(diǎn)20分，星期日一、概況 副溶血性弧菌（V。parahemolyticus）于1950年從日本一次暴發(fā)性食物中毒中分離發(fā)現(xiàn)。該菌存在于近海的海水、海底沉積物和魚類、貝殼等海產(chǎn)品中。根據(jù)菌體O抗原不同，現(xiàn)已有13個血清群。主要引起食物中毒，尤以日本、東南亞、美國及我國臺北地區(qū)多見，也是我國大陸沿海地區(qū)食物中毒中最常見的一種病原菌。 本菌廣泛存在于海水中，偶亦見淡水。在海水中能存活47日以上，淡水中生存12日。在37、pH7.7、含氯化鈉34%的環(huán)境中生長最好。 本菌嗜鹽畏酸，在無鹽培養(yǎng)基上，不能生長，3%6%食鹽水

2、繁殖迅速，每89分鐘為1周期，低于0.5%或高于8%鹽水中停止生長。對酸敏感，在2%醋酸中或50%的食醋中1分鐘即可死亡。不耐熱，56、5分鐘即可殺死，90、1分鐘滅活。對低溫及高濃度氯代鈉抵抗力甚強(qiáng)。 第2頁，共13頁，2022年，5月20日，15點(diǎn)20分，星期日目前已發(fā)現(xiàn)本菌有12種菌分為、型。從患者糞便分離出菌株屬于、型，自致病食物分離的菌株90%以上屬于、型。致病性菌株能溶解人及家兔紅細(xì)胞，稱為“神奈川”試驗(yàn)（kanagawa test）陽性。其致病力與其溶血能力平行，這是由一種不耐熱的溶血素（分子量42000）所致。本菌能否產(chǎn)生腸毒素尚待證明。 媒介食品 副溶廣泛存在于海岸和海水中，

3、海生動植物常會受到污染而帶菌。海魚、蝦、蟹、蛤等海產(chǎn)品帶菌率極高；被海水污染的食物、某些地區(qū)的淡水產(chǎn)品如鯽魚、鯉魚等及被污染其他含鹽量較高的食物如咸菜、咸肉、咸蛋亦可帶菌，也可因受到污染而引起中毒。帶用少量該菌的食物，在適宜的溫度下，經(jīng)34小時細(xì)菌可急劇增加至中毒數(shù)量。進(jìn)食肉類或蔬菜而致病者，多因食物容器或砧板污染所引起。 臨床表現(xiàn) 潛伏期多為10小時左右，一般840小時，主要癥狀有惡心、嘔吐、上腹部陣發(fā)性劇烈腹痛、頻繁腹瀉、洗肉水樣或帶粘液便，無里急后重，每日56次，體溫39。重癥病人可有脫水、血壓下降、意識不清等。病程24天，一般預(yù)后良好，無后遺癥，少數(shù)病人因休克、昏迷而死亡.第3頁，共1

4、3頁，2022年，5月20日，15點(diǎn)20分，星期日二、生物學(xué)特性（一）形態(tài)與染色 1、革蘭氏陰性無芽胞多形態(tài)桿菌，單端鞭毛、兩端濃染。桿狀、棒狀、甚至球狀、絲狀等 第4頁，共13頁，2022年，5月20日，15點(diǎn)20分，星期日（二）培養(yǎng)特性：1、需氧或兼性厭氧：生長最好2、在2%NaCL培養(yǎng)基中生長最好，無鹽或食鹽10%不能生長。 3、最適溫度36，PH7.57.8（7.7）4、在專用選擇性平板上，菌落呈圓形凸起，混濁不透明，表面光滑，較濕潤，邊緣不整齊。5、血平板：可見溶血環(huán)。 第5頁，共13頁，2022年，5月20日，15點(diǎn)20分，星期日（三）生化特性 1、分解GLU產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不分解乳糖

5、，蔗糖。 2、H2S（）、V-P（）、靛基質(zhì)（）、精氨酸（） 3、甲基紅（）、賴氨酸（）、溶血/-第6頁，共13頁，2022年，5月20日，15點(diǎn)20分，星期日（四）抗原結(jié)構(gòu)：O抗原 O1O13 13個群。H抗原：K抗原：K1K70 65個型 缺：K2 K14 K17 K35 K62第7頁，共13頁，2022年，5月20日，15點(diǎn)20分，星期日三、檢驗(yàn)操作要點(diǎn) 采樣樣品處理增菌培養(yǎng)分離培養(yǎng)3.5%氯化鈉三糖鐵培養(yǎng)基嗜鹽性試驗(yàn)生化鑒定動物試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告第8頁，共13頁，2022年，5月20日，15點(diǎn)20分，星期日1、采樣： 患者糞便、嘔吐物、可凝食品。 從海產(chǎn)品的體表面，腸內(nèi)容物，鰓等取樣 包裝物

6、，炊具用具。 快，不宜低溫保存。2、增菌培養(yǎng)：Nacl結(jié)晶紫增菌液，37 816小時。第9頁，共13頁，2022年，5月20日，15點(diǎn)20分，星期日3、分離培養(yǎng)：Nacl蔗糖平板：圓形，半透明或不透明，無粘性，(綠)蘭色，直徑24mm 嗜鹽選擇性平板：直徑2.5mm，圓整或不齊，隆起混濁，無粘性，無色，濕潤。4、3.5%Nacl-TSI 培養(yǎng)37 24小時5、鏡檢：應(yīng)為革蘭氏陰性，無芽胞多形態(tài)，兩端濃染。第10頁，共13頁，2022年，5月20日，15點(diǎn)20分，星期日第11頁，共13頁，2022年，5月20日，15點(diǎn)20分，星期日 6、嗜鹽性試驗(yàn)： 將可疑培養(yǎng)物接種于不同鹽濃度的鹽胨水中，37 24小時，觀查生長情況。鹽含量0、3、7、9、11% ， 在37 %生長良好。11第12頁，共13頁，2022年，5月20日，15點(diǎn)20分，星期日思考題： 1、副溶血性弧菌的形態(tài)與染色有何特點(diǎn)。 2、副溶血性弧菌的生化特性中最有特點(diǎn)