感冒止咳膠囊的質量標準研究

1、感冒止咳膠囊的質量標準研究【摘要】目的建立感冒止咳膠囊的質量標準。方法采用HPL法對感冒止咳膠囊中的黃芩苷進展含量測定，流動相為甲醇-0.4%磷酸55：45，檢測波長277n。采用薄層色譜法對制劑中主要藥味黃芩、金銀花、葛根、青蒿、柴胡等進展定性鑒別。結果黃芩苷的線性范圍為0.0492.040gr=0.99995，n=5，平均回收率為98.10%，相對標準偏向為1.83%。薄層圖譜斑點明晰，可鑒別出黃芩、金銀花、葛根、青蒿對應的斑點，陰性對照無干擾。結論可用于感冒止咳膠囊的質量控制?！娟P鍵詞】感冒止咳膠囊；黃芩苷；高效液相色譜；薄層色譜法；質量標準Abstrat：bjetiveTestabli

2、shthequalityntrlstandardfGanaZhikeapsules.ethdsThententfbaialinintheapsulesasdeterinedbyHPLiththebilephasensistingfethanl0.4%phsphriaid(55:45)andUVdetetinavelengthat277n.Thin-layerhratgraphy(TL)aseplyedthekthesubsistentRadixSutellarlae,FlsLnieraeJapniae,RadixPuerariaeLbatae,HerbaArteisiaeAnnuae,Radi

3、xBupleuri.ResultsBaialinshedagdlinearityintherange0.0492.040gr=0.99995，n=5，theaveragereveryas98.10%andRSDas1.83%.TheTLulddetettherrespndinghratgraphisptsfRadixSutellarlae,FlsLnieraeJapniae,RadixPuerariaeLbatae,HerbaArteisiaeAnnuaeithuttheinterferenefnegativentrlgrup.nlusinTheethdanbeusedfrthequality

4、ntrlfGanaZhikeapsules.Keyrds：GanaZhikeapsules;Baialin;HPL;TL;Qualitystandard感冒止咳膠囊是由感冒止咳沖劑改劑型而得，原方收載于?衛(wèi)生部藥品標準中藥成方制劑?第2冊，由黃芩、柴胡、金銀花等中藥組成，具有清熱解表、止咳化痰的成效。用于感冒發(fā)熱，頭痛鼻塞，傷風咳嗽，咽喉腫痛，四肢怠倦，流行性感冒。黃芩為方中主藥，其所含黃芩苷為主要有效成分之一，也是其指標性成分，本文為建立感冒止咳膠囊的質量標準，采用HPL法測定方中黃芩的黃芩苷含量，同時對主要藥味黃芩、金銀花、葛根、青蒿進展薄層鑒別。1儀器與試藥DINEXP680高效液相色譜

5、儀；島津L-10AT高效液相色譜儀；梅特勒-托利多電子天平AE100精細為0.0001g；梅特勒-托利多電子天平3精度為0.001g，PERKINELERLabda12型紫外掃描儀，數顯恒溫水浴鍋國華電器；甲醇、磷酸為色譜純，水為二次蒸餾水，其余試劑均為分析純。黃芩苷對照品批號110715-200212、綠原酸對照品批號110753-200212、葛根素對照品批號110752-200209、青蒿對照藥材批號121016-202203均購于中國藥品生物制品檢定所。感冒止咳膠囊市場購得，批號20220601，20220602，20220603，陰性樣品實驗室自制。2方法與結果2.1薄層定性鑒別2.

6、1.1黃芩、金銀花的薄層定性鑒別1取樣品2粒，加50%甲醇10l，超聲處理20in，濾過，濾液作為供試品溶液。另取綠原酸、黃芩苷對照品，分別加50%甲醇制成每毫升各含0.2g的溶液，作為對照品溶液。按樣品制備方法制得缺黃芩、金銀花陰性對照溶液。照薄層色譜法2實驗，汲取上述3種溶液各10l，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以醋酸丁酯-甲酸-水7:4:3的上層溶液為展開劑，預飽和30in后，展開，取出，晾干，置紫外光燈365n下檢視。供試品色譜中，在與黃芩苷、綠原酸對照品色譜相應的位置上，顯一樣顏色的熒光斑點。2.1.2葛根的薄層定性鑒別1樣品6粒，加醋酸乙酯25l超聲30i

7、n，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇0.5l使溶解，作為供試品溶液。另取葛根素對照品，加甲醇制成每毫升含0.4g的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法2實驗，汲取上述兩種溶液各5l，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水7:2.5:0.25為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365n下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯一樣顏色的熒光斑點。2.1.3青蒿的薄層定性鑒別取樣品2粒，加水20l超聲使溶解，濾過，濾液置分液漏斗中，用醋酸乙酯提取2次，20l/次，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘渣加乙醇2l使溶解，作為供試品溶液。另取青蒿對照藥材1g，加水15l，加熱回

8、流1h，濾過，濾液用醋酸乙酯10l提取，分取醋酸乙酯液，蒸干，殘渣加乙醇2l使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法2實驗，汲取上述2種溶液各10l，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-醋酸乙酯17:3為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365n下檢視。供試品色譜中，在與青蒿對照藥材色譜相應的位置上，顯一樣顏色的熒光斑點。2.2含量測定2.2.1色譜條件色譜柱為AgilentKrasil18，流動相：甲醇-0.4%磷酸5545，檢測波長：277n，流速：1.000l/in，柱溫25，進樣量10l，理論板數按黃芩苷計應不低于2500。2.2.2樣品溶液的制備取樣品適量，

9、研細，取粉末約0.5g，精細稱定，置100l錐形瓶中，精細參加70%乙醇50l，稱定重量，超聲處理30in，放冷，稱定重量，用70%乙醇補足減失的重量，搖勻，過濾，精細量取續(xù)濾液1l置10l量瓶中，加70%乙醇至刻度，搖勻，即得。2.2.3檢測波長的選定精細稱取黃芩苷對照品，加甲醇溶解制成每毫升含黃芩苷對照品25g的溶液，于200400n范圍內進展紫外掃描，可以看到黃芩苷在277n處有最大吸收峰，應選擇277n為檢測波長。轉貼于論文聯(lián)盟.ll.2.2.4耐用性實驗考察2.2.4.1液相色譜法流動相組成比例：根據2022年版?中國藥典?中黃芩項下黃芩苷的含量測定條件以及預實驗的結果，分別進展了甲

10、醇-0.4%磷酸5545、甲醇-0.4%磷酸5050、甲醇-0.4%磷酸6040組成比例的研究，對同一批批號：20220603樣品進展了含量測定研究，結果說明當組成為甲醇-0.4%磷酸5545時，保存時間適當，峰形以及峰別離度較好。流動相的pH值：取同一批樣品溶液批號：20220603，分別采用了0.1%磷酸、0.4%磷酸、0.5%磷酸作為流動相，進展了含量測定，結果說明流動相的pH值對峰形和峰別離度的影響很大，但是甲醇-0.4%磷酸5545系統(tǒng)與甲醇-0.5%磷酸5545系統(tǒng)根本上沒有差異。考慮到色譜柱的對酸、堿的耐受性以及使用壽命，選擇酸的濃度為0.4%磷酸，即流動相為甲醇-0.4%磷酸5

11、545。檢測波長：取同一批樣品溶液批號：20220603，經選用272，277，282n作為檢測波長，對樣品溶液進樣測定分析，黃芩苷的平均含量為11.66g/粒，RSD為0.92%。柱溫：取同一批樣品溶液批號：20220603，經選用20，25，30作為柱溫，對樣品溶液進樣測定分析，黃芩苷的平均含量為11.62g/粒，RSD為0.62%。變動色譜柱：取同一批樣品溶液批號20220603，經選用漢邦Krasil18、漢邦Lihrspher18、AgilentKrasil18不同色譜柱，進展含量測定，黃芩苷的平均含量為11.56g/粒，RSD為0.65%。穩(wěn)定性實驗：取同一批樣品溶液批號20220

12、601，分別于0，2，4，8，12，24h進樣10l測定，黃芩苷的平均峰面積為657425，RSD為1.42%。結果說明樣品溶液在24h內穩(wěn)定。2.2.4.2樣品溶液制備方法的考察取同一批樣品批號20220603，分別采用回流提取3h與超聲提取30in，測定黃芩苷的含量分別為，11.60g/粒。2.2.5線性關系考察精細稱取黃芩苷對照品，分別制成0.0049，0.02450，0.0510，0.1020，0.2040g/l的溶液，各精細汲取10l注入高效液相色譜儀，測定峰面積，以對照品進樣量g，X為橫坐標、峰面積Y為縱坐標，繪制標準曲線，結果說明黃芩苷進樣量在0.0492.040g的范圍內，峰面

13、積與進樣量呈良好的線性關系，回歸方程為：y=51.188x0.5467，r=0.99995n=5。2.2.6準確度實驗采用加樣回收法，取含量的同批批號20220602樣品約0.5g，研細，精細稱定6份，每份各精細參加黃芩苷對照品約10g，按樣品溶液的制備方法進展操作，測定。黃芩苷的平均回收率為98.10%，相對標準偏向為1.83%。結果見表1。表1黃芩苷含量測定準確度測定結果略2.2.7精細度實驗重復性：取同一批樣品批號20220603約0.5g，研細，精細稱定6份，按樣品溶液的制備方法進展操作，測定。結果說明黃芩苷的平均含量為11.65g/粒，RSD為1.03%。中間精細度：取同一批樣品溶液

14、批號20220603，分別采用DINEXP680高效液相色譜儀和島津L-10AT高效液相色譜儀測定，黃芩苷含量為11.62g/粒和11.57g/粒。重現(xiàn)性：取3批樣品溶液批號20220601，20220602，20220603，分別在兩個不同單位用HPL法測定，3批樣品黃芩苷含量平均值+偏向為10.620.11，11.240.12，11.540.21g/粒，結果說明，重現(xiàn)性良好。2.2.8專屬性實驗按處方比例制備不含黃芩藥材的感冒止咳膠囊樣品，按樣品溶液的制備方法制備陰性對照溶液。分別精細汲取黃芩苷對照品溶液、樣品溶液、陰性對照溶液各10l，注入高效液相色譜儀，結果說明，陰性對照無干擾。見圖1。2.2.9范圍考察考察本品含量測定方法的范圍的低限為限度的-50%供試品溶液的制備的取樣量為0.25g，高限為限度的+50%供試品溶液的制備的取樣量為0.75g。在范圍的高、低限，對同一批號的樣品批號：20220603分別考察了精細度和準確度，結果說明：低限為-50%，高限為+50%時，本品含量測定方法精細度和準確度較好，精細度RSD值從低限到高限分別為0.81%，1.03%，0.93%，準確度RSD值從低限到高限分別為2.84%，2.94%。2.2.10樣品的含量測定按照上述方法測定3批樣品中黃芩苷的含量。結果見表2。表2含量測定結果