雄黃的研究進(jìn)展

1、雄黃的研究進(jìn)展【摘要】綜述了雄黃的化學(xué)成分、炮制工藝、藥代動(dòng)力學(xué)、藥理作用、臨床應(yīng)用及毒副反響，并對(duì)雄黃的制劑工藝進(jìn)展了展望。【關(guān)鍵詞】雄黃;化學(xué)成分；炮制工藝；藥理作用；臨床應(yīng)用雄黃是中醫(yī)內(nèi)治外用常用藥之一，最早收載于?神農(nóng)本草經(jīng)?，距今已有幾千年歷史。雄黃又名石黃,其性辛溫、味苦,有毒。2022年版?中國(guó)藥典?收載含雄黃的中成藥共26種，約占藥典成方總數(shù)的4.6%1。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為雄黃具有解毒、殺蟲(chóng)、燥濕、祛痰、截瘧等功能。自20世紀(jì)50年代以來(lái)，國(guó)內(nèi)醫(yī)者將含雄黃的復(fù)方制劑或單方用于治療血液系統(tǒng)疾并惡性淋巴系統(tǒng)疾病甚至實(shí)體瘤，獲得了明顯的治療效果，引起人們廣泛的關(guān)注。本文就雄黃的化學(xué)成分、炮

2、制工藝、藥理作用機(jī)制、臨床應(yīng)用及毒副作用進(jìn)展綜述。1化學(xué)成分雄黃的主要化學(xué)成分是As4S4或As2S2，另外還含有少量三氧化二砷(As23)及五氧化二砷(As25)。長(zhǎng)期以來(lái)，關(guān)于雄黃的主要成分的討論一直沒(méi)有中斷，2000版?中國(guó)藥典?規(guī)定雄黃的主要成分為As2S2，其含量不得少于90%。梁國(guó)剛等2認(rèn)為雄黃的主要成分是As4S4，只有在550800時(shí)才分解成As2S2。陳憲平等3利用電鏡-能譜儀對(duì)雄黃進(jìn)展分析，掃描電子顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)，雄黃為柱狀晶體或不規(guī)那么晶體；能譜儀測(cè)定發(fā)現(xiàn)，雄黃中的主要元素為砷和硫，其中砷與硫的重量百分比為1.27:1。2炮制工藝由于雄黃在臨床上的特殊成效及其毒性反響，自

3、古就很重視它的炮制處理，僅古籍記載就有十余種4。其中，使用歷史較久的是漢代的干研法和宋代的水飛法5。1990年及1995年版藥典的炮制方法為將雄黃粗品研成細(xì)粉或水飛,可以保存某些可溶性成分。而2000年版藥典規(guī)定應(yīng)將可溶性成分全部除去,只剩下不溶于水的As2S2，并且規(guī)定了雄黃不得顯示游離砷反響。但大量的研究說(shuō)明，As23在治療白血病等血液系統(tǒng)疾病時(shí)可有效抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，提示雄黃的毒性成分可能是它的有效成分之一；另外，陸道培等6也研究發(fā)現(xiàn)As4S4同樣對(duì)腫瘤細(xì)胞有抑制作用，但難溶性As4S4藥理活性的發(fā)揮需要一個(gè)更長(zhǎng)的過(guò)程，在解決難溶性雄黃的生物利用度問(wèn)題上，王曉波等7采用球磨法制備納米級(jí)

4、雄黃粉體，發(fā)現(xiàn)納米雄黃與傳統(tǒng)雄黃比擬，生物利用度等方面具有明顯優(yōu)勢(shì)。寧凝等8采用溶劑接力法制備雄黃納米混懸液有誘導(dǎo)HL-60和K562細(xì)胞凋亡和壞死的雙重作用。詹秀琴等9應(yīng)用微射流法制備超細(xì)微雄黃顆粒與水飛法、氣流粉碎制備的雄黃顆粒從粉體表征、藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)、體內(nèi)外抑瘤作用等方面進(jìn)展了比擬，得出微射流法制備的超細(xì)微雄黃顆粒優(yōu)于其它兩種方法。3藥化動(dòng)力學(xué)雄黃為砷類礦物中藥，砷作為微量元素存在于正常人體內(nèi)。砷在生物體內(nèi)的存在形式主要包括四類：無(wú)機(jī)砷、有機(jī)砷小分子、砷的有機(jī)化合物、含砷的生物大分子1012。程增江等13對(duì)istar大鼠持續(xù)5周灌胃不同劑量的雄黃，結(jié)果顯示，大鼠灌服雄黃后攝入的砷幾乎在

5、所有組織器官中都有分布。其中，砷在血液中的蓄積量最高。汪金華等14研究正常大鼠和腦缺血大鼠在灌胃服用安宮牛黃丸的實(shí)驗(yàn)結(jié)果中顯示，砷在正常和腦缺血大鼠的體內(nèi)分布未見(jiàn)明顯差異，從而推斷As2S2在體內(nèi)未被吸收，實(shí)驗(yàn)中檢出的砷可能來(lái)自雄黃中少量的可溶性砷。汪寶琪等15測(cè)定了六神丸和牛黃清心丸中砷在家兔體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)參數(shù),發(fā)現(xiàn)復(fù)方中的砷在體內(nèi)吸收速度快，消除速度極慢，同時(shí)還發(fā)現(xiàn)砷的分布在心、肺中的含量高于肝、腎含量。湯毅珊等16將安宮牛黃丸及復(fù)方中的單味藥與雄黃混合用人工胃液處理，測(cè)得的可溶性砷含量均比單味雄黃在人工胃液中的溶出量低。鐵步榮等17對(duì)安康志愿者服用牛黃解毒片后尿砷濃度檢測(cè)說(shuō)明雄黃經(jīng)腎臟由尿

6、液排出體外的量很少可能大局部由糞便排出。房圣民等18報(bào)道家兔經(jīng)陰道連續(xù)7d給藥僅在肝和脾臟中檢測(cè)到少量的砷。uiX等19研究發(fā)現(xiàn)砷在膽汁和尿中的排泄形式受給藥途徑、劑量和化學(xué)形態(tài)的影響，其中GSH起重要作用。由于藥物進(jìn)入機(jī)體后，其變化是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，難溶性雄黃在含有大量酶的體液環(huán)境中可以溶解，在酶催化下進(jìn)展氧化復(fù)原、生物甲基化等生物合成，產(chǎn)生亞砷酸、砷酸、甲基胂酸、二甲基胂酸等物質(zhì)。由此可見(jiàn)，體外可溶的As23和難溶的As4S4進(jìn)入體內(nèi)后，都可以進(jìn)展生物轉(zhuǎn)化，發(fā)揮其藥理作用。4藥理作用4.1抗腫瘤作用4.1.1雄黃誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡鐘璐等20，21，郝紅纓等22應(yīng)用雄黃作用于NB4細(xì)胞，使PL

7、交融蛋白降解,快速調(diào)變PL-RAR交融蛋白的亞細(xì)胞定位。劉延方等23將As2S2處理NB4細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)aspase-3酶活性增加,突變型p53蛋白表達(dá)下降。aspase的活化級(jí)聯(lián)形式是砷劑誘導(dǎo)凋亡的重要通路。陳思宇等24研究雄黃作用于K562細(xì)胞后，Bax蛋白表達(dá)量增加,其凋亡機(jī)制可能與Bax上調(diào)有關(guān)。經(jīng)雄黃作用后的耐藥K562AD細(xì)胞,細(xì)胞攝取DNR的量增加,從而增加了DNR的細(xì)胞毒性作用,并且使Bl-2和P-gP顯著下調(diào)25。另外，As2S2能增加K562及K562AD細(xì)胞膜HSP70蛋白表達(dá),且與時(shí)間及濃度成正相關(guān),從而影響細(xì)胞凋亡26。高曉東等27用雄黃作用HL-60/ADR細(xì)胞，

8、發(fā)現(xiàn)雄黃可抑制HL-60/ADR細(xì)胞生長(zhǎng),逆轉(zhuǎn)其耐藥性,促進(jìn)細(xì)胞凋亡,且與劑量呈依賴性,其機(jī)理可能與P-gP表達(dá)下降有關(guān)。顧春紅等28應(yīng)用基因表達(dá)譜芯片研究，推測(cè)細(xì)胞骨架和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的改變可能參與As2S2促進(jìn)U937細(xì)胞凋亡的過(guò)程。張晨等29將雄黃處理Raji細(xì)胞后，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞形態(tài)發(fā)生染色質(zhì)凝集、核固縮和核碎裂,F檢測(cè)此細(xì)胞處于G2/期阻滯。李靜等30用不同濃度雄黃作用于K562細(xì)胞發(fā)現(xiàn)雄黃可顯著抑制細(xì)胞端粒酶活性和細(xì)胞增殖,并呈劑量相關(guān)，端粒酶活性下降是雄黃誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡的機(jī)制之一。4.1.2促進(jìn)腫瘤細(xì)胞成熟、分化陳思宇等31研究發(fā)現(xiàn)，雄黃對(duì)NB4細(xì)胞有不完全的分化誘導(dǎo)作用。表現(xiàn)為局部細(xì)

9、胞出現(xiàn)核凹陷、核漿比例減少,酷似中、晚幼粒細(xì)胞,但細(xì)胞不向末端分化。4.1.4增加細(xì)胞膜HSP70及T蛋白表達(dá)湯毅珊等35將雄黃和安宮牛黃散分別灌胃于SD大鼠試驗(yàn)中,發(fā)現(xiàn)用藥后8h大鼠腦組織內(nèi)的HSP70RNA表達(dá)顯著高于正常對(duì)照組,并能抑制外傷性腦水腫模型大鼠血清中炎性細(xì)胞因子TNF-的釋放。張晨等26采用流式細(xì)胞儀測(cè)定經(jīng)硫化砷處理的K562細(xì)胞和耐藥細(xì)胞K562AD細(xì)胞膜HSP70蛋白表達(dá)及細(xì)胞凋亡,發(fā)現(xiàn)硫化砷能增加細(xì)胞膜HSP70蛋白表達(dá)，而其細(xì)胞凋亡率與膜HSP70的表達(dá)成一定的相關(guān)性,這種改變可能對(duì)細(xì)胞凋亡率產(chǎn)生一定影響。RahEH.等36研究說(shuō)明,砷使鼠肝內(nèi)膜細(xì)胞內(nèi)的T基因表達(dá)增高

10、,使細(xì)胞對(duì)砷的耐受性比對(duì)照組細(xì)胞增加2.5倍。Shiizu.等37證實(shí)T的表達(dá)在拮抗砷毒性及激活原癌基因中起重要作用。SusantI等38研究說(shuō)明砷誘導(dǎo)細(xì)胞T量的增加不受細(xì)胞內(nèi)程度的影響且T的抗砷毒性比GSH更重要。4.2抗菌、抗病毒作用雄黃具有廣泛的抗菌譜，如對(duì)金黃色葡萄球菌、鏈球菌、白色鏈珠菌、痢疾桿菌、結(jié)核桿菌等有較強(qiáng)的抗菌作用?？涤赖?9對(duì)雄黃體外抑菌效果進(jìn)展了研究，發(fā)現(xiàn)雄黃對(duì)金黃色葡萄球菌有非常明顯的抑制作用。同時(shí)進(jìn)展了雄黃對(duì)白細(xì)胞及網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能影響的研究，說(shuō)明雄黃能增強(qiáng)內(nèi)皮系統(tǒng)RES的吞噬才能，且不影響白細(xì)胞總數(shù)及分類，進(jìn)步機(jī)體非特異性免疫功能。另外，雄黃及含雄黃復(fù)方治療

11、帶狀皰疹等病毒性皮膚感染與其具有解疫毒，燥濕祛風(fēng)等作用有關(guān)。一過(guò)性細(xì)胞凋亡可能是控制細(xì)胞中病毒復(fù)制的普遍機(jī)制40。5毒副反響雄黃是一種含砷的化合物，在以往的研究中，關(guān)于砷及其化合物的作用和危害已有了一定的認(rèn)識(shí)。國(guó)內(nèi)早已出現(xiàn)了有關(guān)其毒性的文獻(xiàn)報(bào)道4143。砷是一種細(xì)胞原漿毒，進(jìn)入機(jī)體后作用于酶系統(tǒng),可抑制含巰基酶的活性,阻止細(xì)胞的氧化和呼吸,嚴(yán)重干擾細(xì)胞代謝、染色體構(gòu)造、核分裂等。受影響的重要酶系統(tǒng)有丙酮酸氧化酶、丙酮酸脫氫酶、磷酸酯酶、細(xì)胞色素氧化酶、脫氧核糖核酸聚合酶、白介素1轉(zhuǎn)化酶IE等。砷可致中樞神經(jīng)系統(tǒng)缺氧和功能紊亂,引起惡心、嘔吐、腹脹、腹瀉；砷對(duì)腎臟也有損害作用，李國(guó)明等44用雄黃

12、給小鼠灌胃5周，發(fā)現(xiàn)低劑量組對(duì)腎臟損害不明顯，而高劑量組對(duì)腎臟損害較為嚴(yán)重，腎小球充血較明顯，細(xì)胞數(shù)增多，腎小囊腔明顯狹窄，囊壁增厚，并有少量新月體形成。另外，砷可引發(fā)貧血及砷角化病等45，長(zhǎng)期大量使用雄黃可致突變，致癌，致畸46。6臨床應(yīng)用臨床理論說(shuō)明，含雄黃復(fù)方常外用治療病毒性皮膚感染、銀屑并小兒腮腺炎、乳癰、鋒利濕疣，療效顯著。含雄黃的復(fù)方制劑或單方用于治療血液系統(tǒng)疾并惡性淋巴系統(tǒng)疾病也獲得了一定療效。另外，近期的一項(xiàng)研究說(shuō)明，雄黃有望用于治療膠質(zhì)瘤47。7展望通過(guò)上述綜述，使我們理解到雄黃不僅可以通過(guò)各種不同途徑抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，同時(shí)還可以增強(qiáng)機(jī)體的非特異性免疫功能，進(jìn)步機(jī)體抗菌和抗病毒才能。另外，雄黃對(duì)機(jī)體的毒性作用除與使用劑量有關(guān)外，還與給藥途徑、用藥時(shí)間、存在狀態(tài)及與其他物質(zhì)的拮抗或協(xié)同作用等有關(guān)。盡管人們對(duì)于雄黃的藥用機(jī)理認(rèn)識(shí)仍不非常清楚,但近年來(lái)雄黃及其復(fù)方