培養(yǎng)基適用性檢查

1、1010倍遞稀釋微生物計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查記錄.培養(yǎng)基名稱：批號(hào)：.對(duì)照培養(yǎng)基批號(hào)：對(duì)照培養(yǎng)基生產(chǎn)廠家：.配制日期：年月日實(shí)驗(yàn)日期：年月日一、方法依據(jù)：中國(guó)藥典2010年版。二、菌液制備：（1）大腸埃希菌新鮮肉湯培養(yǎng)物1ml9ml0.9%無(wú)菌NaCl溶液10倍遞稀釋（2）金黃色葡萄球菌新鮮肉湯培養(yǎng)物1ml9ml0.9%無(wú)菌NaCl溶液10倍遞稀釋（3）枯草芽孢桿菌新鮮肉湯培養(yǎng)物1ml9ml0.9%無(wú)菌NaCl溶液10倍遞稀釋（4）白色念珠菌新鮮改良馬丁培養(yǎng)物1ml9ml0.9%無(wú)菌NaCl溶液10倍遞稀釋（5）黑曲霉新鮮改良馬丁培養(yǎng)物1ml9ml0.9%無(wú)菌NaCl溶液需要的菌種在內(nèi)劃三、每m

2、l菌液含菌量的計(jì)數(shù)測(cè)定。測(cè)定方法：取稀釋后的菌液1ml,置直徑90mm的無(wú)菌平皿中，注入15-20ml，溫度不超過(guò)45的溶化的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（細(xì)菌類別計(jì)數(shù)選用該培養(yǎng)基）或玟瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基（霉菌、酵母菌類別計(jì)數(shù)選用該培養(yǎng)基），混勻，凝固，倒置培養(yǎng)。每稀釋級(jí)每種培養(yǎng)基至少制備2個(gè)平板。細(xì)菌類別培養(yǎng)溫度3035；霉菌、酵母菌類別培養(yǎng)溫度為2328。細(xì)菌類別培養(yǎng)3天，霉菌類別培養(yǎng)5天。四、結(jié)果判斷：若被檢培養(yǎng)基上的菌落平均不小于對(duì)照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的70%，且菌落形態(tài)大小應(yīng)與對(duì)照培養(yǎng)基上的菌落一致，則判斷該培養(yǎng)基的適用性檢查符合規(guī)定。菌種類被檢型培養(yǎng)基菌種類被檢型培養(yǎng)基養(yǎng)基B被檢與對(duì)照培養(yǎng)基菌落

3、形態(tài)（%大菌腸埃皿1大菌腸埃皿1皿2平均皿1皿2平均B金黃色葡萄球枯草芽孢桿菌白色念珠菌黑曲霉結(jié)果判斷檢驗(yàn)人：復(fù)核人：微生物計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查記錄驗(yàn)證目的：細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基的適應(yīng)性檢查，本次驗(yàn)證的目的是為了確證營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和玟瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基適合細(xì)菌、霉菌及酵母菌測(cè)定。參照標(biāo)準(zhǔn)：2010年版中國(guó)藥典驗(yàn)證項(xiàng)目：營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和玟瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基驗(yàn)證所用培養(yǎng)基：名稱批號(hào)生產(chǎn)廠家名稱批號(hào)生產(chǎn)廠家77、結(jié)果記錄：營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基121220北京三藥科技開(kāi)發(fā)公司玟瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基玟瑰紅鈉瓊脂對(duì)照培基130107135003-201103135005-2011

4、03北京三藥科技開(kāi)發(fā)公司營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基121220北京三藥科技開(kāi)發(fā)公司玟瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基玟瑰紅鈉瓊脂對(duì)照培基130107135003-201103135005-201103北京三藥科技開(kāi)發(fā)公司中國(guó)藥品生物制品鑒定所中國(guó)藥品生物制品鑒定所配制日期：2013年3實(shí)驗(yàn)日期2013年3月月1日20日5、菌液制備：接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養(yǎng)物至營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基斜面上。培養(yǎng)24小時(shí)；接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁瓊脂斜面，培養(yǎng)24小時(shí)，上述培養(yǎng)物用0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液10倍稀釋制成每1ml含菌數(shù)為50-100cfu的菌懸液。6、適用性檢查：取大腸埃希菌、

5、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌各50-100cfu，分別注入無(wú)菌平皿中，立即傾注營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，混勻，凝固，每株實(shí)驗(yàn)平行制備2個(gè)平皿，另1平皿不接種菌作為空白對(duì)照，置30-35培養(yǎng)48小時(shí)，計(jì)數(shù)；取白色念珠菌50-100cfu，立即傾注玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基，混勻，凝固，每株實(shí)驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿，另1平皿不接種菌作為空白對(duì)照，置23-28培養(yǎng)72小時(shí)，計(jì)數(shù)。同時(shí)，用相應(yīng)對(duì)照培養(yǎng)基替代被檢培養(yǎng)基同步進(jìn)行上述試驗(yàn)。驗(yàn)證菌株皿號(hào)供試培養(yǎng)基對(duì)照培養(yǎng)基回收率%應(yīng)菌落形態(tài)組Cfu/ml組Cfu/ml加與大小大腸埃希菌1（培養(yǎng)2天計(jì)數(shù)）788280合格2688476平均738378金黃色葡萄1球菌（培養(yǎng)2天計(jì)數(shù)）807678合格2746871平均787476枯草芽孢桿1菌（培養(yǎng)2天計(jì)數(shù)）677370合格2756972平均717171白色念珠菌1（培養(yǎng)3天837981合格計(jì)數(shù)）2776973平均807477備注：空白皿均