基因工程和基因重組

1、第十四章基因重組與基因如工有幫程助，歡迎下載支持！內(nèi)容提要：細菌的基因轉(zhuǎn)移包括接合作用、轉(zhuǎn)化作用、轉(zhuǎn)導作用等。當細胞與細胞或細菌通過菌毛相互接觸時，質(zhì)粒DNA從一個細胞轉(zhuǎn)移至另一個細胞，這種類型的DNA轉(zhuǎn)移稱為接合作用。通過自動獲取或人為的供給外源DNA，使細胞或培養(yǎng)的受體細胞獲得新的遺傳表型，這就是轉(zhuǎn)化作用。由病毒攜帶將宿主DNA片段從一個細胞轉(zhuǎn)移至另一細胞的現(xiàn)象或機制，稱為轉(zhuǎn)導作用。在接合、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導或轉(zhuǎn)座過程中，不同DNA分子間發(fā)生的共價連接即為重組。重組DNA技術是在人們對自然界基因轉(zhuǎn)移和重組的認識基礎上創(chuàng)立的新技術。為研究基因的結構與功能，從構建的基因組DNA文庫或cDNA文庫分離、

2、擴增某一感興趣的基因就是基因克隆或分子克隆，又稱重組DNA技術。一個完整的基因克隆過程應包括：1.分，即目的基因的獲取及基因載體的選擇。目的基因指科學家感興趣的外源基因，其來源有幾種途徑：化學合成、PCR技術、基因組文庫或cDNA文庫中獲得。載體是目的基因的攜帶者，常用的載體有質(zhì)粒、噬菌體等。2.切，即限制性核酸內(nèi)切酶的應用。限制性內(nèi)切酶是識別DNA的特異序列，并在識別位點或其周圍切割雙鏈DNA的一類內(nèi)切酶，是實現(xiàn)重組DNA技術的重要的工具酶。3.接，即將目的基因與載體連接形成重組體（或重組DNA）。4.轉(zhuǎn)，即將重組體導入宿主菌（或細胞），根據(jù)采用的載體性質(zhì)不同，將重組體導入宿主菌的方法有轉(zhuǎn)化

3、、轉(zhuǎn)染及感染。5.篩，即重組體的篩選與鑒定，將重組體導入宿主菌后，通過適當形式的培養(yǎng)板生長即可獲得一定的抗藥菌落。利用原位雜交，和Southern印跡或免疫學方法對抗藥菌落進行篩選，獲得含目的基因的轉(zhuǎn)化子菌落，再經(jīng)擴增、分離重組DNA獲得基因克隆。重組DNA技術在疾病基因的發(fā)現(xiàn)，表達有藥用價值的蛋白質(zhì)，DNA診斷及疾病的預防等方面具有廣泛應用價值，并促進了當代分子醫(yī)學的誕生和發(fā)展。一、選擇題【A型題】1.下列DNA序列屬于回文結構的是（）A.ATGCCGTACGGCB.GAATTCCTTAAGC.GGCCGGCCGGCCD.TCTGACAGACTGE.CTAGGGGATCCCDNA經(jīng)限制性內(nèi)切

4、核酸酶切割后，斷端易于首尾相接，自行成環(huán)。這是因為存在著（）A.鈍性末端B.平端C.粘性末端D.5端E.3端限制性內(nèi)切核酸酶的通常識別序列是（）A.粘性末端B.聚腺苷酸C.回文對稱序列D.RNA聚合酶附著點E.甲基化“帽”結構pBR322是（）如有幫助，歡迎下載支持！如有幫助，歡迎下載支持！A.經(jīng)人工改造的大腸桿菌質(zhì)粒B.天然的大腸桿菌質(zhì)粒C.天然的酵母質(zhì)粒D.經(jīng)人工改造的大腸桿菌噬菌體E.經(jīng)人工改造的酵母質(zhì)粒5免疫球蛋白的生成是通過以下哪個過程（）A.轉(zhuǎn)化B.轉(zhuǎn)導C.轉(zhuǎn)染D.轉(zhuǎn)位E.溶原6常用載體-質(zhì)粒的特點（）A.是線形雙鏈DNAB.插入片斷的容納量比入噬菌體DNA大C.含有抗藥性基因D.

5、含有同一限制性內(nèi)切核酸酶的多個切口E.不隨細菌繁殖而進行自我復制7基因工程的操作程序可概括為（）A.切、轉(zhuǎn)、接、篩、分B.轉(zhuǎn)、接、篩、分、切C.接、篩、分、切、轉(zhuǎn)D.篩、分、切、轉(zhuǎn)、接E.分、切、接、轉(zhuǎn)、篩.cDNA文庫指（）A.一個生物組織和細胞的全部基因信息B.一個生物組織和細胞的全部mRNA信息C.一個生物組織和細胞所表達的mRNA信息D.一個物種的全部mRNA信息E.一個物種的全部基因信息.限制性內(nèi)切核酸酶（）A.可將單鏈DNA任意切斷B.由噬菌體提取而得C.可將雙鏈DNA序列特異地切開D.可將兩個DNA分子連接起來E.不受DNA甲基化影響.在重組DNA技術中，不常用的酶是（）A.限制

6、性內(nèi)切核酸酶B.DNA聚合酶C.DNA連接酶D.反轉(zhuǎn)錄酶E.DNA解鏈酶.可作為重組DNA的目的基因的是（）A.mRNAB.tRNAC.rRNAD.基因組DNAE.mRNA和基因組DNA.以質(zhì)粒為載體，將外源基因?qū)胧荏w菌的過程稱（）A.轉(zhuǎn)化B.轉(zhuǎn)染C.感染D.轉(zhuǎn)導E.轉(zhuǎn)移.最常用的篩選轉(zhuǎn)化細菌是否含質(zhì)粒的方法是（）A.營養(yǎng)互補篩選B.抗藥性篩選C.免疫學方法D.PCR篩選E.分子雜交篩選.a-互補篩選法屬于（）A.抗藥性標志篩選B.酶免檢測分析C.標志補救篩選D.原位雜交篩選E.免疫學方法.F因子從一個細胞轉(zhuǎn)移至另一個細胞的基因轉(zhuǎn)移過程稱為（）A.轉(zhuǎn)化B.轉(zhuǎn)導C.轉(zhuǎn)染D.轉(zhuǎn)座E.接合.由插入

7、序列和轉(zhuǎn)座子介導的基因移位或重排稱為（）A.轉(zhuǎn)化B.轉(zhuǎn)導C.轉(zhuǎn)染D.轉(zhuǎn)座E.接合.發(fā)生在同源序列間的重組稱為（）A.位點特異的重組B.非位點特異的重組C.基本重組D.隨機重組E.人工重組.在重組DNA技術中催化形成重組DNA分子的是DNA（）A.聚合酶B.解鏈酶C.連接酶D.拓撲酶E.內(nèi)切酶.在重組DNA技術領域所說的分子克隆是指（）A.建立單克隆抗體B.建立多克隆抗體C.構建重組DNA分子D.無性繁殖DNAE.有性繁殖DNA.無性繁殖依賴DNA載體的最基本性質(zhì)是（）A.青霉素抗性B.卡那霉素抗性C.自我復制能力D.自我轉(zhuǎn)錄能力E.自我表達能力.在已知序列的情況下獲得目的DNA最常見的是（）A

8、.化學合成法B.篩選基因組文庫C.篩選cDNA文庫D.聚合酶鏈式反應E.DNA合成儀合成.重組DNA技術領域常用的質(zhì)粒DNA是（）A.細菌染色體DNA的一部分B.細菌染色體外的獨立遺傳單位C.病毒基因組DNA的一部分D.真核細胞染色體DNA的一部分E.真核細胞染色體外的獨立遺傳單位.直接針對目的DNA進行篩選的方法是（）A.青霉素抗藥性B.氨芐青霉素抗藥性C.分子雜交D.分子篩E.電泳.“克隆”某一目的DNA的過程不包括（）A.基因載體的選擇與構建B.外源基因與載體的拼接C.重組DNA分子導入受體細胞D.篩選并無性繁殖含重組分子的受體細胞E.表達目的基因編碼的蛋白質(zhì).表達人類蛋白質(zhì)的最理想的細

9、胞體系是（）A.E.coli表達體系B.原核表達體系C.酵母表達體系D.昆蟲表達體系E.哺乳類細胞表達體系.不能用作克隆載體的DNA是（）A.質(zhì)粒DNAB.噬菌體DNAC.細菌基因組DNAD.腺病毒DNAE.逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA.關于重組體的敘述，下列哪項是錯誤的（）A.包括外源性的目的基因B.包括載體C.重組體有獨立繁殖的能力D.重組體要回到細胞水平表達E.目的基因和載體通過連接酶連接.基因組代表一個細胞或生物體的（）A.部分遺傳信息B.整套遺傳信息C.可轉(zhuǎn)錄基因D.非轉(zhuǎn)錄基因E.可表達基因.下列常用于原核表達體系的是（）A.酵母細胞B.昆蟲細胞C.哺乳類細胞D.真菌E.大腸桿菌.構建基因組DN

10、A文庫時，首先需分離細胞的（）A,染色體DNAB.線粒體DNAC.總mRNAD.tRNAE.rRNA.構建cDNA文庫時，首先需分離細胞的A,染色體DNAB.線粒體DNAC.總mRNAD.tRNAE.rRNA【X型題】1.限制性內(nèi)切核酸酶作用特性是（）A.在對稱序列處切開DNAB.DNA兩鏈的切點常不在同一位點C.酶切后產(chǎn)生的DNA片段多半具有粘性互補末端D.DNA兩鏈的切點常在同一位點E.限制酶通常識別46堿基對，有些識別8個或8個以上堿基對.一般來說限制性內(nèi)切核酸酶（）A.只識別一種核苷酸序列B.其識別不受DNA來源的限制C.不同生物的DNA經(jīng)同一限制性內(nèi)切核酸酶切割后產(chǎn)生相同末端D.對雙

11、鏈DNA和單鏈DNA一視同仁E.可識別多種不同的核苷酸序列.經(jīng)限制性內(nèi)切核酸酶切割后的DNA可產(chǎn)生以下哪些情況（）A.產(chǎn)生帶有5磷酸基團的伸出股B.產(chǎn)生3-OH的伸出股C.粘性末端D.鈍性末端E.以上均不對.大腸桿菌質(zhì)粒經(jīng)ECoRI切割后，可與經(jīng)ECoRI切割后的目的DNA重組結合，為得到重組體，需經(jīng)（）A.加熱B.混合C.退火D.RNA連接酶催化E.DNA連接酶催化.有關載體和目的基因連接方法的敘述，正確的是（）A.平端切口可直接連接B.平端切口可采用“尾接法”C.載體與目的基因通過非共價鍵連接D.利用人工連接器也可連接E.需要DNA連接酶參與.自然界基因轉(zhuǎn)移可能伴發(fā)基因重組的有（）A.接合

12、作用B.轉(zhuǎn)化作用C.轉(zhuǎn)導作用D.轉(zhuǎn)座E.以上都不是.在分子克隆中，目的DNA可來自（）A.原核細胞染色體DNA.真核細胞染色體DNAC.真核細胞mRNA反轉(zhuǎn)錄獲得的cDNAD.聚合酶鏈反應E.人工合成的DNA.從基因組DNA文庫或cDNA文庫分離、擴增某一感興趣基因的過程就是（）A.基因克隆B.分子克隆E.構建cDNA文庫E.真核細胞基因組DNAE.E.構建cDNA文庫E.真核細胞基因組DNAE.感染E.RNA的制備.可用作克隆基因載體的DNA有（）A.細菌質(zhì)粒DNAB.噬菌體DNAC.病毒DNAD.酵母人工染色體TOC o 1-5 h z.將重組DNA分子導入受體細菌的方法有（）A.接合B.

13、轉(zhuǎn)座C.轉(zhuǎn)化D.轉(zhuǎn)染.下述操作可能用于DNA克隆過程的是（）A.DNA的制備和降解B.不同來源DNA的拼接C.核酸分子雜交D.細菌的生長和繁殖.關于質(zhì)粒DNA的敘述正確的是（）A.是基因組DNA的組成部分B.具有獨立復制功能C.可以賦予宿主細胞額外的生物學特性D.含有感興趣的目的DNAE.含有各種抗生素抗性基因.重組DNA時，外源基因又稱（）A.目的基因B.目的RNAC.目的DNAD.外源RNAE.重組DNA.作為載體的質(zhì)粒應具備下列哪些特點（）A.分子量相對小B.常用的質(zhì)粒載體有pBR322和pUC系列等C.用作基因工程載體的常是接合型質(zhì)粒D.在復制子以外的適當位置，存在幾個單一的限制性內(nèi)切

14、核酸酶位點E.具有插入失活的篩選標記15載體必需具備下列哪些特點()A.本身是一個復制單位，具有復制起點B.插入外源性DNA后并不影響載體本身的復制C.進入細胞后用本身的酶系進行復制D.易進入受體細胞E.易于鑒定和篩選16.DNA重組的步驟包括()A.用PCR技術合成大量的重組DNAB.用連接酶將外源性DNA與載體連接C.通過轉(zhuǎn)化將重組DNA引入受體細胞D.培養(yǎng)細胞以擴增重組DNAE.篩選出含有重組體的克隆二、填空題.通過自動獲取或人為地供給外源，使細胞或培養(yǎng)的受體細胞獲得新的，這就是轉(zhuǎn)化作用。.由和介導的基因移位或重排，稱為轉(zhuǎn)座。.基因重組包括、和等類型。.依賴整合酶，在兩個DNA序列的特異

15、位點間發(fā)生的整合稱。.發(fā)生在同源序列間的重組稱為，又稱。.一個完整的基因克隆過程應包括：目的基因的獲取，的選擇與改造，的連接，重組DNA分子導入受體細胞，篩選出含感興趣基因的重組DNA轉(zhuǎn)化細胞。.限制性內(nèi)切核酸酶是一類識別的核酸酶。.科學家感興趣的外源基因又稱,其來源有幾種途徑：化學合成、酶促合成cDNA、制備的基因組DNA及技術。.根據(jù)采用的克隆載體性質(zhì)不同，將重組DNA分子導入細菌的方法有、及感染。三、名詞解釋.DNA克隆5.回文結構.cDNA文庫(cDNAlibrary)6.Vector.基因組DNA文庫(genomicDNAlibrary)7.目的基因.Plasmid8.restric

16、tionendonuclease四、簡答題.何謂DNA克??？試述DNA克隆的基本過程。.試述基因組文庫的定義和制備方法。.試述質(zhì)粒的特性及天然質(zhì)粒作為基因載體必須具備的條件。參考答案一、選擇題【A型題】TOC o 1-5 h z1.B2.C3.C4.A5.D6.C7.E8.C9.C10.E11.D12.A13.B14.C15.E16.D17.C18.C19.D20.C21.D22.B23.C24.E25.E26.C27.C28.B29.E30.A31.C【X型題】1.ABCE2.ABC3.ABCD4.BCE5.ABDE6.ABCD7.ABCDE8.ABC9.ABCD10.CDE11.ABCDE

17、12.BC13.AC14.ABDE15.ABDE16.BCDE解析【A型題】如有幫助，歡迎下載支持！1.B考察要點為回文結構特點?；匚慕Y構是指該DNA片段的堿基序列在其互補鏈上正讀、反讀都相同。C考察要點為質(zhì)粒的特點。常見錯誤選D或E。質(zhì)粒是存在于細菌染色體外的小型環(huán)狀雙鏈DNA分子，其本身是含有復制功能的遺傳結構，能在宿主細胞獨立自主地進行復制，又依賴細菌的繁殖而復制。理想的質(zhì)粒對同一限制性內(nèi)切核酸酶只有一個切口。質(zhì)粒往往帶有一個或一個以上的抗藥性基因，根據(jù)質(zhì)粒賦予細菌的表型，可識別質(zhì)粒的存在，是篩選轉(zhuǎn)化子細菌的根據(jù)，這是質(zhì)粒作為載體的特性。質(zhì)粒的分子小于人噬菌體，能容納的插入片斷也較小。如

18、pBR322只能容納小于10kb的外源基因。而入噬菌體可插入20kb以上的DNA片段。E考察要點是基因工程操作的基本原理。常見錯誤選A,基因工程是一項較為復雜的技術，其操作基本過程可簡單概括為：（1）分-分離提純載體和目的基因；（2）切-限制性核酸內(nèi)切酶的應用（切割載體和目的基因）；（3）接-將載體和目的基因連接成重組體；（4）轉(zhuǎn)-把重組體導入宿主菌；（5）篩-重組體的篩選與鑒定。C考察要點為cDNA文庫的概念。常見錯誤選B或D。cDNA文庫的建立首先是從特定組織或細胞中提取總的mRNA,然后經(jīng)反轉(zhuǎn)錄作用合成與mRNA互補的DNA（complementaryDNA,cDNA）,再復制成雙鏈cD

19、NA片斷，與適當載體連接后轉(zhuǎn)入受體菌，即獲得cDNA文庫。建立cDNA文庫所用的mRNA只來自某一特定組織或細胞，所以此文庫包含了一個生物組織或細胞所表達的各種mRNA信息。E重組DNA技術中常用的工具酶為考察要點。常見錯誤為選B或D或C。在重組DNA技術中的許多工作都涉及到對DNA進行切割和重組，或?qū)NA進行修飾或合成。這些工作都是通過酶的作用來完成的。常用的一些基本工具酶：（1）限制性內(nèi)切核酸酶：它能識別雙鏈DNA內(nèi)部特異位點，并在準確的位置上切割DNA,使較大的DNA分子成為一定大小的DNA片段；（2）DNA連接酶：將DNA片段與克隆載體共價連接構建重組DNA分子；（3）反轉(zhuǎn)錄酶：用于

20、以mRNA為模板合成cDNA,構建cDNA文庫；DNA-pol：利用其5-3聚合活性及核酸外切酶活性，主要用于合成雙鏈cDNA的第二條鏈，填補3末端，DNA序列分析及切口平移標記DNA探針等。D考察要點為目的基因及其來源。常見錯誤為選E或A。目的基因本質(zhì)是DNA,所以A,B,C不是，而mRNA經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與其互補的cDNA可作為目的基因，答案E只有基因組DNA可作為目的基因。A考察要點是將外源DNA導入受體菌的方法。常見錯誤為選B或D?；蚬こ讨袑⑼庠碊NA導入宿主菌的方法，根據(jù)重組DNA時所采用的載體性質(zhì)不同有轉(zhuǎn)化（transformation）、轉(zhuǎn)染（transfection）及感染（i

21、nfection）等不同手段。轉(zhuǎn)化是指以質(zhì)粒作為載體，將外源DNA導入受體菌，并使其獲得新的表型的過程。感染是以入噬菌體和真核細胞病毒為載體的重組DNA分子，在體外經(jīng)過包裝成為具有感染能力的病毒和噬菌體顆粒,感染適當細胞,并在細胞內(nèi)擴增。由噬菌體和細胞病毒介導的遺傳信息轉(zhuǎn)移也稱為轉(zhuǎn)導（transduction）。轉(zhuǎn)染是由轉(zhuǎn)化和感染兩個詞構成的新詞。指真核細胞主動攝取或被動導入外源DNA片段而獲得新的表型的過程。B考察要點為質(zhì)粒的特點。常見錯誤：選A或C。B是針對載體攜帶某種或某些標志基因和目的基因而設計的篩選方法。其特點是直接測定基因或基因表型。如質(zhì)粒攜帶有某種抗藥性標志基因（如ampr,te

22、tr）,轉(zhuǎn)化后只有含這種抗藥性基因的轉(zhuǎn)化子細菌才能在含有該抗菌素的培養(yǎng)板上幸存并形成菌落,這樣就可直接將含質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化菌與非轉(zhuǎn)化菌區(qū)分開,是篩選含有質(zhì)粒轉(zhuǎn)化菌的最常用方法。標志補救篩選,是利用克隆的基因在宿主菌表達產(chǎn)物與宿主菌（營養(yǎng)突變株）的營養(yǎng)缺陷互補進行篩選。免疫學方法是利用特異抗體與目的基因表達產(chǎn)物相互作用進行篩選。其特異性強,靈敏度高,適用于選擇不為宿主菌提供任何選擇標志的基因。免疫學方法又分為免疫化學方法和酶免檢測分析。分子雜交篩選是利用32P標記的探針與轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜上的轉(zhuǎn)化子DNA或克隆的DNA片斷進行分子雜交,直接選擇并鑒定目的基因。PCR（ploymerasechainre

23、action）技術及酶切鑒定也是篩選和鑒定目的基因的方法。C考察要點為重組篩選的方法及原理。常見錯誤：選不出答案。a互補是指質(zhì)粒pUC18載體攜帶有細菌的LacZ基因，它編碼B半乳糖苷酶的一段由146個氨基酸殘基組成的a片段（酶的N端）。而突變型細菌可表達該酶的3片段（酶的C端）。單獨存在的a及3片段均無B半乳糖苷酶的活性，只有突變型細菌與pUC18載體同時共表達兩個片段時，突變型細菌內(nèi)才有完整的B半乳糖苷酶活性，使特異性作用物變?yōu)樗{色化合物，這就是所謂的a互補。就是利用載體在細菌的表達與細菌的營養(yǎng)缺陷互補，所以這種篩選方法屬于標志補救法。答案D是分子雜交篩選中的一種。如有幫助，歡迎下載支持！

24、27C重組體為目的基因與載體用連接酶連接而成，是利用細胞內(nèi)各種酶系復制、表達，沒有獨立的繁殖能力。建型題】ABDE考察要點為外源基因與載體的連接方式。常見錯誤：漏選A或D，多選C。目的(外源)基因與載體連接方式：粘性末端連接：同一限制酶切割位點連接；不同限制酶切位點(即配伍末端)連接。平末端連接，限制酶切割DNA后產(chǎn)生的平端屬配伍末端，可彼此相互連接。平端切口加尾連接，即在DNA片段末端加上同聚物序列，制造出粘性末端，經(jīng)退火作用完成連接，此方式屬粘性末端連接的一種特殊形式。人工連接器連接：指在平端DNA片段或載體DNA末端接上人工合成的含有某些限制酶切位點的寡核苷酸片段，而后用相應的限制酶切割

25、產(chǎn)生粘性末端，在DNA連接酶的作用下形成共價結合的重組DNA分子。二、填空題DNA；遺傳表型插入序列；轉(zhuǎn)座子位點特異的重組；同源重組；轉(zhuǎn)座重組位點特異的重組同源重組；基本重組克隆基因載體；目的基因與載體DNA特異序列；內(nèi)切目的基因；PCR轉(zhuǎn)化；轉(zhuǎn)染三、名詞解釋.應用酶學的方法，在體外將目的基因與載體DNA結合成具有自我復制能力的DNA分子一一復制子，繼而通過轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染宿主細胞、篩選出含有目的基因的轉(zhuǎn)化子細胞，再進行擴增，提取獲得大量同一DNA分子的過程。DNA克隆又稱基因克隆或重組DNA。.以mRNA為模板，利用反轉(zhuǎn)錄酶合成與mRNA互補的DNA(complementaryDNA,cDNA),

26、再復制成雙鏈cDNA片段，與適當載體連接后轉(zhuǎn)入受體菌，這些受體菌包含了細胞所表達的基因信息，稱為cDNA文庫。.利用限制性內(nèi)切核酸酶將組織或細胞染色體DNA切割后，與適當載體連接后轉(zhuǎn)入受體菌，這些受體菌包含了所有基因組DNA信息，稱基因組DNA文庫。(或存在于轉(zhuǎn)化細菌內(nèi)，由克隆載體所攜帶的所有基因組DNA片段的集合稱基因組DNA文庫)。.Plasmid即質(zhì)粒，是存在于細菌染色體外的小型環(huán)狀雙鏈DNA分子。質(zhì)粒分子本身是含有復制功能的遺傳結構，能在宿主細胞獨立自主地進行復制，并在細胞分裂時恒定地傳給子代細胞。質(zhì)粒帶有某些遺傳信息，所以會賦予宿主細胞一些遺傳性狀。因為質(zhì)粒DNA有自我復制功能及所攜

27、帶的遺傳信息等特性，故可作為重組DNA操作的載體。.大部分限制性內(nèi)切核酸酶為II類酶，識別DNA位點的核苷酸序列呈二元旋轉(zhuǎn)對稱，通常稱這種特殊的結構順序為回文結構。.Vector即基因載體，或稱克隆載體，是在基因工程中為“攜帶”感興趣的外源DNA、實現(xiàn)外源DNA的無性繁殖或表達有意義的蛋白質(zhì)所采用的一些DNA分子，具有自我復制和表達的功能。其中，為使插入的外源DNA序列可轉(zhuǎn)錄、進而翻譯成多肽鏈而特意設計的克隆載體又稱表達載體?？寺≥d體有質(zhì)粒DNA、噬菌體DNA和病毒DNA,它們經(jīng)適當改造后仍具有自我復制能力，或兼有表達外源基因的能力。.應用重組DNA技術有時是為分離、獲得某一感興趣的基因或DNA序列，或是為獲得感興趣基因的表達產(chǎn)物一蛋白質(zhì)。這些感興趣的基因或DNA序列就是目的基因，又稱目的DNA。.Restrictionendonuclease即限制性核酸內(nèi)切酶，就是識別DNA的特異序列，并在識別位點或如有幫助，歡迎下載支持！其周圍切割雙鏈DNA的一類核酸內(nèi)切酶。限制性核酸內(nèi)切酶存在于細菌體內(nèi)，與相伴