飼料和飼料添加劑畜禽靶動(dòng)物耐受性評(píng)價(jià)試驗(yàn)指南

1、 PAGE PAGE 142：試行適用范圍本指南規(guī)定了飼料原料和飼料添加劑畜禽靶動(dòng)物耐受性評(píng)價(jià)試驗(yàn)的根本原則、試驗(yàn)方案、試驗(yàn)方法和試驗(yàn)報(bào)告 等要求。本指南適用于為飼料和飼料添加劑、進(jìn)口飼料和 飼料添加劑申報(bào)以及已經(jīng)批準(zhǔn)使用的飼料和飼料添加劑再評(píng)價(jià)而進(jìn)展的畜禽靶動(dòng)物耐受性評(píng)價(jià)試驗(yàn)。畜禽飼料產(chǎn)品的靶動(dòng)物體內(nèi)耐受性評(píng)價(jià)試驗(yàn)可參照 本指南的要求進(jìn)展。根本原則靶動(dòng)物耐受性評(píng)價(jià)試驗(yàn)的目的是為飼料和飼料添加劑以下簡(jiǎn)稱為“受試物”對(duì)靶動(dòng)物的短期毒性供給有限評(píng) 價(jià)；當(dāng)受試物使用劑量超出推舉用量時(shí)，也可用來確立受試 物的安全范圍。應(yīng)依據(jù)中國(guó)的養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)實(shí)際開展靶動(dòng)物耐受性評(píng) 價(jià)試驗(yàn)，以保證評(píng)價(jià)結(jié)果的科學(xué)性、客觀性

2、。靶動(dòng)物耐受性評(píng)價(jià)試驗(yàn)應(yīng)對(duì)受試物所適用的每一種靶動(dòng)物分別進(jìn)展評(píng)價(jià)4.3 以及其他另有規(guī)定的特別狀況除外。靶動(dòng)物耐受性評(píng)價(jià)試驗(yàn)應(yīng)由具備肯定專業(yè)學(xué)問和試驗(yàn)技能的專業(yè)人員在適宜的試驗(yàn)場(chǎng)所、使用適宜的設(shè)備設(shè) 施、依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的操作程序進(jìn)展，并且由試驗(yàn)機(jī)構(gòu)指定的負(fù)責(zé)試驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)安康并且具有相像的遺傳背景；飼養(yǎng)環(huán)境不應(yīng)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果造成影響；受試物和試驗(yàn)日糧不得受到污染。在符合靶動(dòng)物耐受性評(píng)價(jià)試驗(yàn)相關(guān)要求的前提下，靶動(dòng)物耐受性評(píng)價(jià)試驗(yàn)可與靶動(dòng)物有效性評(píng)價(jià)試驗(yàn)合并進(jìn)行。靶動(dòng)物耐受性評(píng)價(jià)試驗(yàn)應(yīng)充分考慮試驗(yàn)動(dòng)物毒理學(xué)爭(zhēng)辯的結(jié)果。試驗(yàn)方案試驗(yàn)開頭前，應(yīng)依據(jù)受試物和靶動(dòng)物的特點(diǎn)，對(duì)試驗(yàn)進(jìn)展系統(tǒng)設(shè)計(jì)，形成試驗(yàn)方案。試驗(yàn)方案應(yīng)包

3、括試驗(yàn)?zāi)康?、試?yàn)方法、儀器設(shè)備、具體的動(dòng)物品種和類別、動(dòng)物數(shù)量、飼試驗(yàn)動(dòng)物：狀況；式；預(yù)飼期的條件要求； 重復(fù)的動(dòng)物數(shù)必需滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)要求、統(tǒng)計(jì)方法； 養(yǎng)分成分含量實(shí)測(cè)值和能量水平；留意依據(jù)受試物特點(diǎn)和使用方法配制日糧，使用的原料應(yīng)符合我國(guó)法規(guī)和相關(guān)標(biāo) 粒度、加工工藝等應(yīng)全都；受試物的測(cè)定： 受試物及其有效成分的通用名稱、生產(chǎn)廠家、規(guī)格、生產(chǎn)批號(hào)、有效成分含量的測(cè)試方法及測(cè) 試結(jié)果、測(cè)試機(jī)構(gòu)，受試物有效成分在試驗(yàn)日糧中的含量；觀測(cè)工程和時(shí)間： 檢測(cè)和觀看工程名稱、實(shí)施和持續(xù)的準(zhǔn)確時(shí)間；疾病治療和預(yù)防措施： 不應(yīng)干擾受試物的作用模式并逐一記錄；突發(fā)狀況處理： 動(dòng)物個(gè)體和各試驗(yàn)組發(fā)生的全部非預(yù)期的突

4、發(fā)狀況，都應(yīng)記錄其發(fā)生的時(shí)間和范圍。試驗(yàn)方法受試物對(duì)于申請(qǐng)產(chǎn)品審定或登記的受試物，應(yīng)與擬生產(chǎn)或擬進(jìn)口的產(chǎn)品完全全都。產(chǎn)品應(yīng)由申報(bào)單位自行研制 并在中試車間或生產(chǎn)線生產(chǎn)，同時(shí)供給產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和使用 說明。試驗(yàn)機(jī)構(gòu)應(yīng)將受試物樣品送國(guó)家或農(nóng)業(yè)部認(rèn)可的 質(zhì)檢機(jī)構(gòu)對(duì)其有效成分的含量進(jìn)展實(shí)際測(cè)定。劑量與分組 組，即比照組、有效劑量組、多倍劑量組。試驗(yàn)劑量比照組通常不應(yīng)含有受試物，但是，對(duì)于某些動(dòng)物機(jī)體 的必需養(yǎng)分素如氨基酸、維生素、微量元素等，可以添 加，但添加量應(yīng)維持在最低必需水平。一般狀況下，有效劑量組應(yīng)中選用最高限量。假設(shè)沒有 最高限量，應(yīng)選用最高推舉劑量。假設(shè)沒有最高推舉量，應(yīng) 2-5 倍作為有效

5、劑量。10 倍。10 價(jià)試驗(yàn)應(yīng)能通過尸檢、組織病理學(xué)以及其他適宜的試驗(yàn)方法 提出反映受試物毒性的特異性指標(biāo)，并計(jì)算出受試物的安全 系數(shù)?；?動(dòng)物數(shù)必需滿足數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析的要求。一般狀況下，每組 6 1 個(gè)動(dòng)物即可為 1 個(gè)重復(fù)，而小動(dòng)物如家禽、兔等則要求每個(gè)重復(fù)的10 只。性別比例應(yīng)一樣。試驗(yàn)期豬：14 天之后至斷奶前進(jìn)展，生長(zhǎng)育肥豬試驗(yàn)開頭體重應(yīng)不大于 35 kg。假設(shè)哺乳仔豬和斷奶仔豬均需要進(jìn)展耐受性評(píng)價(jià)試驗(yàn)，承受一個(gè)組合 14 28 天。假設(shè)已進(jìn)展了斷奶仔豬的耐受性評(píng)價(jià)試驗(yàn)，則不必再進(jìn)展生長(zhǎng)育肥豬 的耐受性評(píng)價(jià)試驗(yàn)。選用 1 日齡雛禽。肉仔雞獲得的靶動(dòng)物耐受性評(píng)價(jià)試驗(yàn)數(shù)據(jù)可以外推至蛋用和種

6、用雛雞，肉用火雞的數(shù)據(jù)也可外推至蛋 1/3 產(chǎn)蛋期進(jìn)展。生產(chǎn)小牛肉的肉用犢牛的試驗(yàn)應(yīng)選用體重不超 70 kg 的犢牛。假設(shè)犢牛和育肥牛均需要進(jìn)展靶動(dòng)物耐受28 天。假設(shè)哺乳期和斷奶期的家兔都需進(jìn)展耐受性評(píng)價(jià)試驗(yàn)，試驗(yàn)應(yīng)自仔兔誕生后 1 周開頭，試驗(yàn)時(shí)間不少于49天，并且母兔應(yīng)與仔兔一同飼養(yǎng)直至斷奶。其他靶動(dòng)物耐受性評(píng)價(jià)試驗(yàn)需要的最短試驗(yàn)期取決于 適用動(dòng)物的種類和生長(zhǎng)階段，具體要求見附錄 A。對(duì)于附錄A 28 天，成42 天。假設(shè)受試物僅適用于動(dòng)物的特定生長(zhǎng)階段并且短于附錄 A ，但不得少于 28 天，而且應(yīng)考察相關(guān)的特異性指標(biāo)假設(shè)在妊娠母豬上使用，應(yīng)考察產(chǎn)活仔數(shù)；假設(shè)在泌乳母豬上使用，則應(yīng)考察

7、斷奶仔豬的體重和斷奶成活率等。觀看與檢測(cè)臨床觀看試驗(yàn)期內(nèi)應(yīng)每天觀看試驗(yàn)動(dòng)物臨床表現(xiàn)、采食和飲水情 況、生長(zhǎng)狀況以及相關(guān)動(dòng)物產(chǎn)品的產(chǎn)量和特性。也應(yīng)具體觀 察和記錄不良反響。對(duì)試驗(yàn)中消滅的不明緣由的死亡應(yīng)進(jìn)展 尸檢，假設(shè)可能，最好進(jìn)展組織學(xué)分析。血液學(xué)檢測(cè)試驗(yàn)開頭和試驗(yàn)完畢必要時(shí)增加試驗(yàn)中期時(shí)每組隨 機(jī)抽檢肯定數(shù)量的動(dòng)物，性別比例適當(dāng)，分別采集血樣進(jìn)展血液常規(guī)、生化指標(biāo)及其他與受試物相關(guān)的各種生理參數(shù)的 檢測(cè)。血液常規(guī)指標(biāo)主要包括白細(xì)胞計(jì)數(shù)WBC數(shù)RBC、血紅蛋白HGB、紅細(xì)胞壓積HCT板計(jì)數(shù)PLT等指標(biāo)；生化指標(biāo)主要指谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶ALASALTPROALBUNCRE、血糖GL、總膽紅素TBI

8、L等指標(biāo)。組織病理學(xué)檢查尸體解剖學(xué)檢查：試驗(yàn)完畢時(shí)，各組屠宰肯定數(shù) 量的試驗(yàn)動(dòng)物(性別比例適當(dāng))，進(jìn)展系統(tǒng)尸體解剖學(xué)檢查，為進(jìn)一步的組織學(xué)檢查供給依據(jù)。臟器系數(shù)測(cè)定：試驗(yàn)完畢時(shí)，各組隨機(jī)屠宰肯定 數(shù)量動(dòng)物(性別比例適當(dāng))，剖檢取心、肝、脾、肺、腎等臟器稱重，并計(jì)算各器官與體重的比值。組織病理學(xué)檢查：試驗(yàn)完畢時(shí)，對(duì)多倍劑量組及尸檢特別動(dòng)物的主要器官進(jìn)展系統(tǒng)的組織病理學(xué)檢查，具體檢查的器官和組織包括：心、肝、脾、肺、腎、胸腺、胰腺、 胃、十二指腸、回腸、直腸、淋巴結(jié)、骨髓等組織。其他特異性觀測(cè)指標(biāo)依據(jù)受試物的作用特點(diǎn)和用途，增加相應(yīng)的特異性觀測(cè)指標(biāo)和敏感性功能指標(biāo)。數(shù)據(jù)記錄 一記錄。數(shù)據(jù)記錄應(yīng)真實(shí)

9、、準(zhǔn)確、完整、標(biāo)準(zhǔn)、清楚，并妥 善保管。 法定計(jì)量單位和國(guó)家推舉使用的單位。統(tǒng)計(jì)分析 計(jì)分析方法進(jìn)展數(shù)據(jù)分析。統(tǒng)計(jì)顯著性差異水平至少應(yīng)到達(dá) P0.05。試驗(yàn)報(bào)告試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)供給試驗(yàn)獵取的全部數(shù)據(jù)，包括全部試驗(yàn)動(dòng)物和試驗(yàn)重復(fù)。未納入統(tǒng)計(jì)分析的數(shù)據(jù)或由于數(shù)據(jù)缺乏、數(shù)據(jù)喪失而無法評(píng)價(jià)的狀況也應(yīng)報(bào)告，并說明在各組別 中的分布狀況。每個(gè)靶動(dòng)物耐受性評(píng)價(jià)試驗(yàn)必需單獨(dú)形成最終報(bào)告。 每個(gè)試驗(yàn)最終報(bào)告中應(yīng)包含試驗(yàn)概述見附錄 B和報(bào)告正文。試驗(yàn)報(bào)告正文至少應(yīng)包括：A、試驗(yàn)名稱；B、摘要；D、受試物；F、試驗(yàn)材料和方法；G、結(jié)果與爭(zhēng)辯；H、結(jié)論；I 據(jù)或由于數(shù)據(jù)缺乏、數(shù)據(jù)喪失而無法評(píng)價(jià)的狀況應(yīng)具體說明；J、參考文獻(xiàn)

10、；K、試驗(yàn)機(jī)構(gòu)和操作人員，包括試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的名稱，試驗(yàn) 加蓋簽發(fā)機(jī)構(gòu)的單位公章或特地的分析測(cè)試章；托付檢測(cè)的數(shù)據(jù)應(yīng)供給檢測(cè)機(jī)構(gòu)出具的檢測(cè)報(bào)告。應(yīng)對(duì)試驗(yàn)報(bào)告每頁進(jìn)展編碼，格式為 “第 頁，共頁”資料存檔最終報(bào)告、原始記錄、圖表和照片、試驗(yàn)方案、受試物 樣品及其檢測(cè)報(bào)告等原始資料應(yīng)存檔備查，保存時(shí)間一般不 5 10 年。附錄A：試驗(yàn)期類 別試驗(yàn)階段*體重或日齡起始完畢日齡 完畢體重kg最短試驗(yàn)期哺乳和 14 日齡2142日齡14 日齡2142120120611353514 天28 天42 天生長(zhǎng) 注：35 kg 120250或 80150依據(jù)當(dāng)?shù)亓?xí) 當(dāng)?shù)亓?xí)慣慣42天*少一個(gè)生殖周期分娩前兩周至斷奶試驗(yàn)

11、階段：指試驗(yàn)用動(dòng)物所處的生長(zhǎng)階段，最短試驗(yàn)期應(yīng)處于所對(duì)應(yīng)的試驗(yàn)階段*假設(shè)已有斷奶仔豬的耐受性評(píng)價(jià)試驗(yàn)數(shù)據(jù)，則不必再進(jìn)展生長(zhǎng)育肥豬的耐受性評(píng)價(jià)試驗(yàn)類別起始試驗(yàn)階段體重或日齡完畢體重類別起始試驗(yàn)階段體重或日齡完畢體重最短試驗(yàn)期完畢日齡kg肉仔雞出殼35 天1.62.435天蛋用雛雞出殼16(20)周齡35天*產(chǎn)蛋雞1621周齡1318月齡56天*育肥用火雞出殼母：710公：122042天種用火雞后備種用火雞開頭產(chǎn)蛋30周齡出殼60 周齡30 周齡母：15公：3056天42天*注：僅當(dāng)肉仔雞的耐受性評(píng)價(jià)試驗(yàn)數(shù)據(jù)無法供給時(shí)進(jìn)展*1/3 產(chǎn)蛋期進(jìn)展*僅當(dāng)育肥用火雞的耐受性評(píng)價(jià)試驗(yàn)數(shù)據(jù)無法供給時(shí)進(jìn)展類別試

12、驗(yàn)階段體重或日齡犢牛起始類別試驗(yàn)階段體重或日齡犢牛起始誕生或60-80 kg70kg全斷奶完畢日齡4 月齡kg145最短試驗(yàn)期42 天生產(chǎn)小牛肉的肉用犢牛6 月齡18025028 天育肥牛1036 月齡35070042 天泌乳奶牛56 天生殖母牛初次受精受精至斷奶，周期類別試驗(yàn)階段體重或日齡最短試驗(yàn)期育成羔羊類別試驗(yàn)階段體重或日齡最短試驗(yàn)期育成羔羊起始誕生3 月齡kg152028 天育肥羔羊誕生6 月齡或以上4028 天泌乳奶綿羊生殖綿羊初次受精42 天至少一個(gè)繁 殖周期類別試驗(yàn)階段體重或日齡起始育成羔羊類別試驗(yàn)階段體重或日齡起始育成羔羊誕生3 月齡kg1520最短試驗(yàn)期28 天育肥羔羊誕生6 月齡或以上4028 天泌乳奶山羊42 天生殖山羊生殖山羊初次受精受精至斷奶，周期6. 家兔類 別哺乳和斷奶兔試驗(yàn)階段體重或日齡開頭完畢日齡誕生后一周最短試驗(yàn)期49 天育肥兔 泌乳母兔斷奶后 811周28 天少一個(gè)生殖周期分娩前兩周至斷奶附錄B：試驗(yàn)概述表試驗(yàn)編號(hào)：受產(chǎn)品類別：試生產(chǎn)單位：物量及包裝規(guī)格：收(抽)樣日期：適用時(shí)試驗(yàn)動(dòng)物品種：性別：試驗(yàn)齡：動(dòng)物飼養(yǎng)條件：時(shí)間 試驗(yàn)起始時(shí)間：與場(chǎng)所 試驗(yàn)場(chǎng)所：分組設(shè)計(jì)方法：試驗(yàn)組數(shù)量(含比照組)：每個(gè)重復(fù)動(dòng)物數(shù)：日糧中有效成分添加量1 頁，共 頁有