杏仁核腦片場電位的記錄及其應用

1、杏仁核腦片場電位的記錄及其應用【關鍵詞】杏仁核；場電位；長時程增強0引言1材料和方法1.2方法1.2.1杏仁核腦片制備將SD大鼠以氟烷麻醉后斷頭，迅速取腦，放置在低于4的冰冷人工腦脊液中并進展修塊.人工腦脊液中各種離子成分及其濃度(l/L)為：Nal124，Kl3.0，al21.5，gl21.5，NaH2P31.25，NaH325,葡萄糖11.人工腦脊液始終充以950L/L2和50L/L2，pH7.27.4.用振動切片機把含有杏仁核或海馬的大腦局部切成腦片橫切面，厚度500.腦片實驗記錄前在常溫人工腦脊液中孵育至少1h.1.2.2杏仁核腦片場電位記錄將腦片移至界面型記錄槽(自制)，通過尼龍網與

2、槽內人工腦脊液接觸，以12L/in持續(xù)灌流腦片,腦脊液溫度控制在(301)，用950L/L2和50L/L2混合氣體彌散在腦片周圍.在解剖顯微鏡下將雙極不銹鋼刺激電極置于外囊，記錄微電極置于基底外側杏仁核(baslateralaygdale,BLA)區(qū)，其尖端置于腦片外表下約200處.刺激電極與記錄部位之間的間隔 約為2.微電極內充灌3l/LNal溶液，阻抗為25.場電位經微電極放大器放大后，輸出信號用數據采集系統(tǒng)R6240進展信號的記錄、分析和處理.場電位記錄基線穩(wěn)定20in后才開場下一步的實驗.場電位的斜率用平均根底值標準化.常規(guī)刺激的單相方波信號由R6240的程控刺激器產生.刺激方波的波寬

3、為0.1s，頻率為0.1Hz，并調整刺激強度使突觸反響等于最大突觸電位的一半.LTP的引導應用兩串頻率為100Hz的高頻刺激，每串持續(xù)1s，串間隔為10in.記錄海馬場電位時刺激電極放置于海馬rnuanis1,A1區(qū)的Shafer側支通路上，記錄電極位于海馬A1區(qū).1.2.3藥物參加實驗過程中應用的藥物均參加到灌流腦片的人工腦脊液中.統(tǒng)計學處理:采用SPSS10.0統(tǒng)計分析軟件進展數據錄入和整理，實驗數據用xs表示，組間采用方差分析.P0.05為差異具有統(tǒng)計學意義.2結果2.1杏仁核與海馬場電位的比擬海馬A1區(qū)場電位的幅度為(1.460.10)Vn=10，圖1.BLA的電位為(0.130.05

4、)Vn=9，其放大倍數為海馬的10倍，杏仁核的場電位只有海馬A1場電位的1/10.2.3杏仁核LTP的誘導在場電位記錄穩(wěn)定10in后，間隔10in應用兩串高頻刺激外囊，同時觀察場電位幅度和斜率的變化情況.BLA場電位的幅度和斜率的變化趨勢一致(表1)，兩串高頻刺激后，場電位明顯增大，之后場電位逐漸下降，高頻刺激15in后場電位根本穩(wěn)定，但仍顯著大于根底值n=9,P0.01,這種增強作用持續(xù)30in以上.通過對場電位斜率用根底值標準化后，可見兩串高頻刺激后30in增強的場電位的斜率仍然維持在根底值的(146.16.9)(n=9,P0.01，圖3).表1兩串高頻刺激前后場電位幅度和斜率的變化3討論

5、杏仁核又稱杏仁復合體，是大多數哺乳類動物共有的構造，位于顳葉內.杏仁核可分為許多大小不等的核團，通常將這些核群分為皮質內側群、基底外側核群和前杏仁區(qū)、皮質杏仁移行區(qū)兩大過渡區(qū)4.杏仁核與皮層和皮層下構造有著廣泛的纖維聯絡，隨著神經科學的開展，杏仁核的功能倍受關注5.然而由于解剖構造的關系，很難通過電生理的手段直接記錄到在體動物杏仁核的神經細胞的活動，而且在體實驗易受到血壓、呼吸和血腦屏障等的影響.腦片標本具有有序的神經元和纖維排列及比擬完好的神經解剖通路，可在解剖顯微鏡下直接定位，便于電生理操作，腦片可以復制出整體動物大多數電生理現象，模擬在體實驗，因此腦片是研究杏仁核功能的比擬理想的標本.在

6、杏仁核的腦片上，刺激外囊可以在BLA記錄到突觸后反響，來自皮層的神經纖維經外囊投射至BLA，刺激外囊可模擬皮層的興奮輸入8.由皮層投射到BLA的纖維主要是谷氨酸能神經元，BLA記錄到的主要是興奮性的突觸后電位.在灌流液中參加谷氨酸，場電位明顯增大；參加APA受體阻斷劑NQX后，場電位的幅度顯著降低，進一步參加NDA受體拮抗劑APV后，場電位幾乎完全被阻斷，洗去阻斷劑后場電位根本恢復，提示外囊至BLA的突觸聯絡主要以谷氨酸為神經遞質，由APA受體和NDA受體介導，以前者為主.也提示在灌流液中參加藥物，通過觀察藥物對場電位的作用討論藥物對杏仁核功能的影響.腦片場電位常用于研究海馬的突觸可塑性如LTP和LTD，LTP和LTD被認為是學習記憶的根本機制9.研究說明杏仁核參與情緒情感相關的學習與記憶過程，提示杏仁核的場電位有可能誘導出LTP.結果說明，我們的實驗系統(tǒng)在杏仁核可以誘導出LTP,實驗中相隔10in予以外囊高頻刺激，觀察到記錄的BLA場電位的幅度和斜率均明顯增大，而且持續(xù)時間在30in以上.杏仁核的LTP可能參與