實(shí)驗(yàn)室菌種管理規(guī)程

1、實(shí)驗(yàn)室菌種管理規(guī)程目的：保證菌種合理、有效地使用和保存，最大限度降低變異率，確保菌種的溯源性與穩(wěn)定性，保證實(shí)驗(yàn)室和社會的生物安全。職責(zé)：主管負(fù)責(zé)菌種的出入庫保管、保存、分發(fā)，組員負(fù)責(zé)菌種的確認(rèn)、傳代、使用及銷毀。范圍：本規(guī)程適用于實(shí)驗(yàn)室菌種的管理，包括菌種的保存、傳代、使用及銷毀等。菌種的保存工作用菌種的保存工作用菌種采用平板低溫保存法。將菌種接種在適宜的固體培養(yǎng)基上，待菌生長充分以后，轉(zhuǎn)移至28冰箱中保存。此法僅用于工作用菌種的短期保存，并應(yīng)隨時檢查其污染雜菌和變異等情況，發(fā)現(xiàn)異常情況，經(jīng)應(yīng)滅活處理后銷毀。保存時間為1周，超過該期限前挑取單菌落重新于瓊脂平板劃線活化，若菌落活力下降則從-80

2、冰箱中取用甘油冷凍管。傳代用菌種的保存采用甘油冷凍管保藏法。甘油冷凍管保存法用無菌接種環(huán)輕輕刮平板上的單菌落并接種至適宜的液體培養(yǎng)內(nèi)，置于適宜的培養(yǎng)條件下培養(yǎng)，菌液充分振蕩后取適宜體積加入到已滅菌的冷凍管內(nèi)，再加入等體積的無菌甘油（濃度40%），即為20%甘油菌懸液，輕輕振搖，使內(nèi)容物充分混合，在-80冷凍條件下保存，保存期限為3年。每個菌株保存至少30個無菌冷凍管。使用時，取出一支放至室溫，接種增菌培養(yǎng)或接種至瓊脂平板復(fù)蘇，挑取純菌落傳代或工作用。菌種的傳代工作用菌種的傳代當(dāng)工作用菌種代數(shù)小于5時，在規(guī)定保存期限內(nèi)，可直接用上一代工作用菌種轉(zhuǎn)接下一代工作用菌種。取在冰箱28保存的工作用菌種用

3、普通瓊脂平板傳代，并將新傳代的培養(yǎng)物替代原有的菌種，作為工作用菌種。也可取用“甘油冷凍管保藏法”保存的菌種，進(jìn)行復(fù)蘇，直接作為工作用菌種。菌種每1周傳代一次，當(dāng)超過5代，須用“甘油冷凍管保藏法”保存的原始菌種傳代。傳代用菌種的傳代首先劃線接種確認(rèn)，根據(jù)日常檢驗(yàn)工作的需要量，挑取純菌落轉(zhuǎn)接平板，作為工作用菌種；同時，結(jié)合菌種的代數(shù)和最長保存期限，挑取純菌落制成菌懸液，按“1.2”的方法制備甘油冷凍管數(shù)支，作為傳代用菌種。2.3傳代時注意事項(xiàng)無菌操作，使菌株不死亡，不污染、不丟失。同時實(shí)驗(yàn)人員也要采取有效的預(yù)防措施進(jìn)行自我保護(hù)，如工作時必須穿工作服，佩帶無菌手套，實(shí)驗(yàn)完成以后消毒實(shí)驗(yàn)進(jìn)行的區(qū)域、實(shí)

4、驗(yàn)儀器和器具。如發(fā)生意外，如菌種泄漏或人員受傷，應(yīng)立即向主管報告以便及時進(jìn)行處理。菌種的保管實(shí)驗(yàn)室全部菌種都應(yīng)由菌種負(fù)責(zé)人記錄在冊，并輸入電腦以電子版形式存檔，以便查找。菌種上應(yīng)貼上明顯的標(biāo)簽，標(biāo)明名稱、培養(yǎng)基、保種人、日期、編號等。菌種設(shè)專人加鎖保管，并對所保存的菌種建立菌種保存、領(lǐng)用登記臺賬（附表3）。菌種的定期檢查在菌種的保存期間，應(yīng)每天檢查保存菌種冰箱的溫度、菌種管的塞子是否松動或生霉，如有異常應(yīng)及時處理。所保管的菌種，不能隨意轉(zhuǎn)讓其他單位和個人，需要時應(yīng)有單位證明和批準(zhǔn)手續(xù)以及李愛科組長簽字方可供應(yīng)。菌種的領(lǐng)用與使用實(shí)驗(yàn)室人員根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，需到主管領(lǐng)取工作用菌種或傳代用菌種，同時填寫

5、菌種領(lǐng)用登記臺賬相關(guān)內(nèi)容。實(shí)驗(yàn)室人員從主管領(lǐng)取工作用菌種或傳代用菌種，用于日常檢驗(yàn)或驗(yàn)證試驗(yàn)，使用后及時填寫菌種使用登記臺賬（附表6），以便追蹤菌種使用歷史。菌種（廢棄）的銷毀下列情況的菌種或培養(yǎng)物或被污染的器具等，必須采用121、45分鐘濕熱滅活處理：新一代菌種制備成功后的上一代菌種；使用完后的菌種和帶有標(biāo)準(zhǔn)菌種的器具和培養(yǎng)物；超過有效期的菌種；凡被污染、變異、可疑等異常情況菌種；其他應(yīng)廢棄的菌種。附則附表1：檢定菌接收記錄附表2：檢定菌種傳代、分離記錄附表3：檢定菌種保存、領(lǐng)用登記臺賬附表4：檢定菌種觀察記錄附表5：檢定菌種鑒定記錄附表6：檢定菌種使用登記臺賬附表7：廢棄菌種（物品）銷毀處

6、理記錄菌種資源詳細(xì)信息（密）此項(xiàng)信息不對外公布，保存核心成員手中。菌種登記：編號+詳細(xì)名稱+來源+特性+動物實(shí)驗(yàn)+，隨時補(bǔ)充，留照片。附表附表1：菌種接收記錄記錄名稱菌種接收記錄代碼頁次1共頁名稱及編號數(shù)量代數(shù)來源接收日期接收人檢查情況保存條件附表附表2：菌種傳代、分離、保存記錄記錄名稱菌種傳代、分離記錄代碼頁次1共1頁名稱及編號購進(jìn)（領(lǐng)?。┤掌谀暝氯諄碓磦鞔熬N保存方法傳代用培養(yǎng)基傳代日期傳代用菌種編號總數(shù)量傳代用菌種工作用菌種操作人數(shù)量編號有效期保存方法數(shù)量編號有效期保存方法分離與純化過程純度檢查結(jié)果操作人：復(fù)核人：附表附表 ：菌種使用登記臺賬記錄名稱菌種使用登記臺賬代碼頁次1共1頁領(lǐng)用

7、日期名稱及編號數(shù)量使用人制備菌懸液濃度(CFU/ml)用于檢驗(yàn)的產(chǎn)品批號附表附表7：廢棄菌種（物品）銷毀記錄記錄名稱廢棄菌種（物品）銷毀處理記錄代頁日期被處理菌種（物品）名稱銷毀原因處理方式批準(zhǔn)備注：廢棄菌種要標(biāo)明編號、數(shù)量（支）3、通過活動，使學(xué)生養(yǎng)成博覽群書的好習(xí)慣。B比率分析法和比較分析法不能測算出各因素的影響程度。JC采用約當(dāng)產(chǎn)量比例法，分配原材料費(fèi)用與分配加工費(fèi)用所用的完工率都是一致的。XC采用直接分配法分配輔助生產(chǎn)費(fèi)用時，應(yīng)考慮各輔助生產(chǎn)車間之間相互提供產(chǎn)品或勞務(wù)的情況。錯C產(chǎn)品的實(shí)際生產(chǎn)成本包括廢品損失和停工損失。JC成本報表是對外報告的會計(jì)報表。義C成本分析的首要程序是發(fā)現(xiàn)問題、分析原因。義C成本會計(jì)的對象是指成本核算。義C成本計(jì)算的輔助方法一般應(yīng)與基本方法結(jié)合使用而不單獨(dú)使用。JC成本計(jì)算方法中的最基本的方法是分步法。XD當(dāng)車間生產(chǎn)多種產(chǎn)品時，“廢品損失”、“停工損失”的借方余額，月末均直接記入該產(chǎn)品的產(chǎn)品成本中。義D