泌尿外科解剖和生理培訓課件

1、泌尿外科解剖和生理泌尿外科解剖和生理泌尿系統(tǒng)的解剖腎上腺腎輸尿管膀胱尿道前列腺陰囊內(nèi)容物泌尿外科解剖和生理2泌尿系統(tǒng)的解剖腎上腺泌尿外科解剖和生理2腎上腺的解剖腎上腺（suprarenal gland）位于腹膜后隙，腎臟的上方,左側(cè)為半月形，右側(cè)似三角形。腎上腺的動脈有三支： 膈下動脈腎上腺上動脈腹主動脈腎上腺中動脈 腎動脈腎上腺下動脈一、腎上腺的解剖泌尿外科解剖和生理3腎上腺的解剖腎上腺（suprarenal gland）位于腹左腎上腺靜脈左腎靜脈右腎上腺靜脈下腔靜脈少數(shù)匯入右膈下靜脈右腎靜脈泌尿外科解剖和生理4左腎上腺靜脈左腎靜脈泌尿外科解剖和生理4二、腎上腺的生理 腎上腺皮質(zhì)由外向內(nèi)可分

2、為層即球狀帶、束狀帶和網(wǎng)狀帶。球狀帶主要分泌醛固酮，又稱為鹽皮質(zhì)激素，其主要功能是促進腎臟對鈉離子的主動重吸收和對鉀離子的排泄，維持體內(nèi)水的恒定，增加組織液和血量，這對生命至關(guān)重要。束狀帶及網(wǎng)狀帶分泌糖皮質(zhì)激素，主要為皮質(zhì)醇。皮質(zhì)醇主要作用是促進糖異生和升高血糖。促使蛋白質(zhì)分解，使脂肪組織中脂肪分解并在體內(nèi)重新分布。皮質(zhì)醇在機體處于應激狀態(tài)時可提高其耐受能力。皮質(zhì)醇還具有抗炎抗過敏和抑制免疫功能的作用。腎上腺髓質(zhì)由嗜鉻細胞構(gòu)成，主要分泌腎上腺素，也可分泌少量去甲腎上腺素。腎上腺素和去甲腎上腺素對心血管、內(nèi)臟平滑肌的活動有調(diào)節(jié)作用。腎上腺髓質(zhì)是人體極重要的內(nèi)分泌腺，髓質(zhì)分泌功能障礙將引起人體失去

3、有效的應急能力泌尿外科解剖和生理5二、腎上腺的生理 腎上腺皮質(zhì)由外向內(nèi)可分為層即球狀帶、束狀腎臟的解剖與生理一、腎臟的解剖： 腎的位置腎（kidney）位于脊柱兩側(cè)，貼附于腹后壁 泌尿外科解剖和生理6腎臟的解剖與生理一、腎臟的解剖： 泌尿外科解剖和生理6腎的毗鄰（前面觀）泌尿外科解剖和生理7腎的毗鄰（前面觀）泌尿外科解剖和生理7腎的毗鄰（后面觀）泌尿外科解剖和生理8腎的毗鄰（后面觀）泌尿外科解剖和生理8腎蒂的結(jié)構(gòu)和排列腎蒂（renal pedicle）由出入腎門的腎血管、腎盂、神經(jīng)和淋巴管組成。由前向后為：靜、動、盂；由上向下為：動、靜、盂。泌尿外科解剖和生理9腎蒂的結(jié)構(gòu)和排列腎蒂（renal

4、 pedicle）由出入腎門腎血管與腎段泌尿外科解剖和生理10腎血管與腎段泌尿外科解剖和生理10腎靜脈泌尿外科解剖和生理11腎靜脈泌尿外科解剖和生理11腎的被膜腎的被膜有三層：由外向內(nèi)依次為腎筋膜、脂肪囊和纖維囊。泌尿外科解剖和生理12腎的被膜腎的被膜有三層：由外向內(nèi)依次為腎筋膜、脂肪囊和纖維囊腎的被膜（縱面觀）泌尿外科解剖和生理13腎的被膜（縱面觀）泌尿外科解剖和生理13輸尿管的解剖輸尿管(ureters)：全長2530cm。可分三部：腹部（腰段），從腎盂與輸尿管交界處至跨越髂血管處； 盆部（盆段），從跨越髂血管處至膀胱壁；壁內(nèi)部（膀胱壁段），斜行穿膀胱壁。泌尿外科解剖和生理14輸尿管的解剖

5、輸尿管(ureters)：全長2530cm。可輸尿管動脈泌尿外科解剖和生理15輸尿管動脈泌尿外科解剖和生理15腹膜后大血管泌尿外科解剖和生理16腹膜后大血管泌尿外科解剖和生理16膀胱的位置與毗鄰膀胱(urinary bladder)位于盆腔前部，空虛時上界約與骨盆上口相當，膀胱體上面有腹膜覆蓋，下外側(cè)面緊貼恥骨后隙的疏松結(jié)締組織、肛提肌和閉孔內(nèi)肌。男性膀胱底上部借直腸膀胱陷凹與直腸相鄰，下部與精囊和輸精管壺腹相鄰；膀胱頸與前列腺相接。女性的膀胱底與子宮頸和陰道前壁相貼，膀胱頸與尿生殖膈相鄰。泌尿外科解剖和生理17膀胱的位置與毗鄰膀胱(urinary bladder)位于盆膀胱的血供髂內(nèi)動脈前干

6、膀胱上動脈膀胱下動脈膀胱上中部膀胱下部髂內(nèi)靜脈泌尿外科解剖和生理18膀胱的血供髂內(nèi)動脈前干膀胱上動脈膀胱下動脈膀胱上中部膀胱下部前列腺的位置泌尿外科解剖和生理19前列腺的位置泌尿外科解剖和生理19陰囊的層次泌尿外科解剖和生理20陰囊的層次泌尿外科解剖和生理20腎上腺的解剖1. 選題背景 2.研究現(xiàn)狀3.研究目標和研究內(nèi)容4. 技術(shù)路線5. 本課題特點6. 部分預實驗結(jié)果7. 實驗進展安排泌尿外科解剖和生理21腎上腺的解剖1. 選題背景 2.研究現(xiàn)狀3.研究目標和研究內(nèi)泌尿外科解剖和生理22泌尿外科解剖和生理222 HIF-1結(jié)構(gòu)功能及其靶基因 1 胃癌化療及多藥耐藥研究概況3 HIF-1腫瘤中

7、表達及與生物行為關(guān)系4 HIF-1與化療耐藥的關(guān)系5 p53基因與HIF-1表達的關(guān)系泌尿外科解剖和生理232 HIF-1結(jié)構(gòu)功能及其靶基因 1 胃癌化療及多藥耐藥 1 胃癌化療及多藥耐藥研究概況胃癌是常見的消化道惡性腫瘤，化療仍是治療中晚期胃癌的主要手段，但由于腫瘤的多藥耐藥（MDR），化療的效果并不理想。目前認為mdr-1基因與MDR有關(guān)，其編碼p-糖蛋白(p-gp)，能把結(jié)構(gòu)功能不同的藥物泵出細胞外而降低藥物濃度, 從而引發(fā)腫瘤耐藥但是對于癌癥中p-gp過表達的調(diào)節(jié)機制目前尚不清楚。泌尿外科解剖和生理24 1 胃癌化療及多藥耐藥研究概況胃癌是常見的消化道惡性腫瘤，MDR的基本概念 MDR

8、是指抗某種細胞毒藥物的耐藥細胞系對許多結(jié)構(gòu)上無關(guān)的和作用機制不同的其它抗癌藥物產(chǎn)生的交叉抗藥性,是一種獨特的廣譜耐藥現(xiàn)象泌尿外科解剖和生理25MDR的基本概念 MDR是指抗某種細胞毒耐藥分類: 原藥耐藥PDR 多藥耐藥MDR 腫瘤耐藥機制 藥理耐藥 . 生化耐藥 凋亡耐藥 細胞動力學耐藥 泌尿外科解剖和生理26耐藥分類:腫瘤耐藥機制 藥理耐藥 . 生化耐藥 凋亡耐藥 經(jīng) 典 M D RMDR1的基因產(chǎn)物一種細胞膜糖蛋白稱為P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)分子量為170KD(P170) P-gp具有能量依賴性“藥泵”功能 表達水平與耐藥程度成正比泌尿外科解剖和生理27經(jīng) 典

9、 M D RMDR1的基因產(chǎn)物泌尿外科解剖和生理27P-gp介導的抗癌藥物阿霉素、柔紅霉素、表阿霉素米托蒽醌長春花堿、長春新堿乙托泊苷（Etoposide）紫杉醇、泰素帝Actinomycin D泌尿外科解剖和生理28P-gp介導的抗癌藥物阿霉素、柔紅霉素、表阿霉素泌尿外科解剖惡性腫瘤生長迅速 ,當腫瘤細胞生長超過血管生成的速度時,極易發(fā)生缺氧.因此腫瘤缺氧是腫瘤惡性進展的重要特征.腫瘤細胞可通過多種途徑對缺氧進行適應性調(diào)節(jié).缺氧誘導因子1（Hypoxia inducible factor 1, HIF-1）是調(diào)節(jié)細胞缺氧反應的主要轉(zhuǎn)錄因子 .泌尿外科解剖和生理29惡性腫瘤生長迅速 ,當腫瘤細

10、胞生長超過血管生成的速度時,極易泌尿外科解剖和生理30泌尿外科解剖和生理30Till Acker ，et al. A role for hypoxia and hypoxia-inducible transcription factors in tumor physiology。 J Mol Med , 2002, 80:562575.泌尿外科解剖和生理31Till Acker ，et al. A role for 缺氧誘導因子1（Hypoxia inducible factor 1, HIF-1）HIF-1 活性調(diào)節(jié)亞單位HIF-1 可能與穩(wěn)定HIF-1及二聚化有關(guān) 2. HIF-1結(jié)構(gòu)功能

11、代謝及其靶基因 泌尿外科解剖和生理32缺氧誘導因子1（Hypoxia inducible fac泌尿外科解剖和生理33泌尿外科解剖和生理33泌尿外科解剖和生理34泌尿外科解剖和生理34泌尿外科解剖和生理35泌尿外科解剖和生理35缺氧誘導因子1的代謝泌尿外科解剖和生理36缺氧誘導因子1的代謝泌尿外科解剖和生理36 缺氧 癌基因激活 HER2 FRAP HRAS CSRC 抑癌基因失活 VHL PTEN p53 生長因子或細胞因子 IGR、Insulin、EGF、IL-1 HIF-1的表達調(diào)節(jié)因素泌尿外科解剖和生理37 缺氧 HIF-1的表達調(diào)節(jié)因素泌尿外科解剖和生理37二. 研 究 現(xiàn) 狀1.

12、HIF-1在腫瘤細胞中表達位于細胞核內(nèi). 2.HIF-1在多種腫瘤中的表達 ,在腫瘤 附近正常組織中不能測及 . 3.在結(jié)腸癌、肺癌、乳腺癌及前列腺癌的研究中發(fā)現(xiàn)，HIF-1蛋白表達隨乳腺癌惡性度升高而增加，且與浸潤、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān) 泌尿外科解剖和生理38二. 研 究 現(xiàn) 狀1. HIF-1在腫瘤細胞中表達位于4. 發(fā)現(xiàn)HIF-1-/-組劑量反應曲線較HIF-1+/+組明顯左移,IC50也顯著減少. 5.對腫瘤細胞的研究發(fā)現(xiàn)HIF-1-/-腫瘤細胞對放療和化療藥物的敏感度都有所增加。 6.多藥耐藥基因MDR1是 HIF-1的靶基因。 泌尿外科解剖和生理394. 發(fā)現(xiàn)HIF-1-/-組劑量反應曲

13、線較HIF-1+/7.利用乏氧誘導肺腺癌細胞459表達HIF-1，發(fā)現(xiàn)p-gp和MRP隨著HIF-1表達而增加，并且對表阿霉素和順鉑的耐藥性增強。 8.國外的研究也發(fā)現(xiàn)，缺氧能導致p-gp和HIF-1過表達，從而產(chǎn)生對VP-16、博萊霉素和蒽環(huán)類耐藥。 9.國外對卵巢癌的研究已表明突變型P53過表達會引起HIF-1表達升高. 泌尿外科解剖和生理407.利用乏氧誘導肺腺癌細胞459表達HIF-1，發(fā)現(xiàn)p-g待解決問題目前關(guān)于HIF-1與胃癌生物行為及多藥耐藥機制關(guān)系的研究報道甚少。 目前對于HIF-1與的研究多用基因轉(zhuǎn)染方法，應用原代胃癌體外細胞藥物敏感性進行研究的報道甚少泌尿外科解剖和生理41

14、待解決問題目前關(guān)于HIF-1與胃癌生物行為及多藥耐藥機制關(guān) 三.研究目標和研究內(nèi)容1. 研究目標研究HIF-1蛋白表達與p-gp表達的相關(guān)性，探討其與胃癌細胞多藥耐藥的關(guān)系。探討HIF-1表達與胃癌生物學行為的關(guān)系 .探討HIF-1蛋白表達與突變P53過表達的相關(guān)性 . 泌尿外科解剖和生理42 三.研究目標和研究內(nèi)容1. 研究目標研究HIF-1蛋白表2. 研究內(nèi)容 對例新鮮胃癌標本進行細胞純化，短期原代培養(yǎng)，應用流式細胞技術(shù)和MTT法檢測其對常用化療藥物的敏感性應用免疫組化技術(shù)檢測60例胃癌石蠟標本P53、P-gp、HIF-1蛋白表達，并收集臨床病理資料。泌尿外科解剖和生理432. 研究內(nèi)容

15、對例新鮮胃癌標本進行細胞純化，短期應用RT-PCR方法檢測相同60例新鮮胃癌細胞HIF-1mRNA的表達水平。 應用TUNEL、熒光顯微鏡等方法檢測化療藥誘導胃癌細胞凋亡后的形態(tài)學改變。泌尿外科解剖和生理44應用RT-PCR方法檢測相同60例新鮮胃癌細胞HIF-1四. 技術(shù)路線HIF-1RT-PCR 免疫組化胃癌手術(shù)標本細胞分離、短期培養(yǎng)及流式技術(shù)檢測化療藥物體外敏感性HIF-1、p-gp 、P53 免疫組化化療藥誘導胃癌細胞凋亡后形態(tài)學改變對結(jié)果進行統(tǒng)計分析泌尿外科解剖和生理45四. 技術(shù)路線HIF-1RT-PCR 免疫組化胃癌手術(shù)標本泌尿外科解剖和生理培訓課件 實用性探討HIF-1蛋白表達

16、與p-gp表達的相關(guān)性，可望從一新角度闡述耐藥發(fā)生機制。 研究HIF-1表達與胃癌生物學行為的關(guān)系，探討其作為一種新的獨立預后參數(shù)的可能性。 探討HIF-1蛋白表達與P53過表達關(guān)系有助于更好理解胃癌病理生物學特征。泌尿外科解剖和生理47 實用性探討HIF-1蛋白表達與p-gp表達的相關(guān)性， 國外已有類似的文獻報道?？尚行允中g(shù)標本充足 ，設備齊全，預實驗結(jié)果 科學性泌尿外科解剖和生理48 國外已有類似的文獻報道?？尚行允中g(shù)標本充足 ，設備齊全免疫組化判斷標準：P53:無陽性細胞或陽性細胞 5 %為陰性, ( + ) , ( ) ， 強陽性( ) ，為（）。P-gp 為胞質(zhì)和(或) 胞膜陽性,陽

17、性細胞 5 %為陰性,5 %15 %為+ , 16 %為 。HIF-1判斷標準：為陰性，為（），為（），為（）泌尿外科解剖和生理49免疫組化判斷標準：P53:無陽性細胞或陽性細胞 5 %為陰藥物敏感性判斷：高度敏感:抑制率 50 %;中度敏感:抑制率30 %50 %;不敏感:抑制率 30 %。 泌尿外科解剖和生理50藥物敏感性判斷：高度敏感:抑制率 50 %;中度敏感:抑制HIF-1陽性 HIF-1陰性p-gp 陽性p-gp 陰性HIF-1陽性 HIF-1陰性藥物敏感性與HIF-1的關(guān)系泌尿外科解剖和生理51HIF-1陽性 HIF-1陰性p-gp 陽性p-gp 陰HIF-1表達與胃癌生物學行為

18、的研究 按臨床病理分期、組織類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否分組泌尿外科解剖和生理52HIF-1表達與胃癌生物學行為的研究 按臨床病理分期、組織HIF-1蛋白表達與P53過表達關(guān)系 HIF-1陽性 HIF-1陰性P53 陽性p53陰性泌尿外科解剖和生理53HIF-1蛋白表達與P53過表達關(guān)系 HIF-1陽性 H 部分預實驗結(jié)果泌尿外科解剖和生理54 部分預實驗結(jié)果泌尿外科解剖和生理5胃癌中突變p53蛋白的表達 （10*20倍） 細胞核內(nèi)表達 泌尿外科解剖和生理55胃癌中突變p53蛋白的表達 （10*20倍） 細胞核內(nèi)表胃癌中p-gp的表達 （10*20倍） 細胞膜/漿表達泌尿外科解剖和生理56胃癌中p-gp的表達 （10*20倍） 細胞膜/漿預實驗結(jié)果小結(jié)基本掌握胃癌細胞分離和短期原代培養(yǎng)的方法原代胃癌細胞法體外藥物敏感實驗基本掌握免疫組織化學的實驗流程泌尿外科解剖和生理57預實驗結(jié)果小結(jié)基本掌握胃癌細胞分離和短期原代培養(yǎng)的方法原凋亡細胞DNA片斷電泳分析 1.未加化療藥組 2.順鉑1ppc 24小時3.順鉑 10ppc24小