臨床微生物標(biāo)本的采集與運(yùn)送課件

1、大家好大家好臨床微生物標(biāo)本的采集和運(yùn)送2015年9月16日2臨床微生物標(biāo)本的采集和運(yùn)送260%以上實(shí)驗(yàn)誤差發(fā)生在分析前1997年，一位意大利著名檢驗(yàn)專家就對(duì)急診檢驗(yàn)誤差發(fā)生的種類和發(fā)生率進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)。結(jié)果顯示，約有68.2%的檢驗(yàn)誤差發(fā)生在檢驗(yàn)前期，而來(lái)自于檢驗(yàn)中期和檢驗(yàn)后期的誤差率分別為13.3%和18.5%。2007年，這位檢驗(yàn)專家又進(jìn)行了類似統(tǒng)計(jì)，結(jié)果顯示，檢驗(yàn)前期的誤差發(fā)生率仍高達(dá)61.9%。360%以上實(shí)驗(yàn)誤差發(fā)生在分析前3一、臨床微生物檢查標(biāo)本送檢的意義正確采集、轉(zhuǎn)運(yùn)與保存微生物標(biāo)本直接關(guān)系到致病微生物培養(yǎng)的正確性與陽(yáng)性率，是從臨床微生物檢驗(yàn)獲得正確結(jié)果的最關(guān)鍵一步。4一、臨床微生物

2、檢查標(biāo)本送檢的意義4血標(biāo)本采集時(shí)存在的問題 1. 血培養(yǎng)瓶存放于冰箱，取出后立即采血進(jìn)行培養(yǎng)，過(guò)低的溫度抑制細(xì)菌生長(zhǎng)。采血前把血培養(yǎng)瓶從冰箱拿出后，待恢復(fù)至室溫后采集，采集后切勿放回冰箱。 2. 血液標(biāo)本采集后放置于冰箱，低溫抑制細(xì)菌生長(zhǎng)。 3 .血液標(biāo)本采集后，放于機(jī)外時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)菌生長(zhǎng)已達(dá)衰老期。 4. 標(biāo)本采集量少，兒童少于1ml，成人少于3ml，會(huì)明 顯降低陽(yáng)性率。 5. 標(biāo)本采集時(shí)機(jī)不合適，未抓住菌血癥時(shí)期，或在剛使用抗生素不久。采血最好在：體溫升高前半小時(shí)，使用抗生素前，或停用抗生素24小時(shí)。 6.標(biāo)本消毒時(shí)消毒酒精未完全揮發(fā)。5血標(biāo)本采集時(shí)存在的問題 1. 血培養(yǎng)瓶存放于冰箱，取

3、出后立即血培養(yǎng)的指征：1. 當(dāng)懷疑血流感染或膿毒癥時(shí)，應(yīng)常規(guī)行血培養(yǎng)2. 懷疑患者有血流感染的癥狀有：（1） 不明原因的發(fā)燒(38)或體溫過(guò)低(36)（2） 白細(xì)胞增多（ 10,000/ul），粒細(xì)胞減少（ 1,000ul）（3） 休克，寒顫，僵直（4） 嚴(yán)重的局部感染(腦膜炎，心內(nèi)膜炎，肺炎，腎盂腎炎，腹部術(shù)后感染，)（5） 心率異常加快（6） 低血壓或高血壓（7） 呼吸頻率加快6血培養(yǎng)的指征：1. 當(dāng)懷疑血流感染或膿毒癥時(shí)，應(yīng)常規(guī)行血培養(yǎng)采集血培養(yǎng)樣本的最佳時(shí)間1.盡可能在患者寒戰(zhàn)或開始發(fā)熱時(shí)采血2.在患者接受抗生素治療前采血3. 如患者已經(jīng)應(yīng)用抗菌藥物進(jìn)行治療，應(yīng)在下一次用藥之前采血培養(yǎng)

4、。7采集血培養(yǎng)樣本的最佳時(shí)間1.盡可能在患者寒戰(zhàn)或開始發(fā)熱時(shí)采血 基本概念1.成人“一套血培養(yǎng)”應(yīng)該包括需氧瓶和厭氧瓶各一個(gè)，也叫“一份”。 注意：一次穿刺采血，算“一套”，采集第二套應(yīng)從另一個(gè)穿刺點(diǎn)獲得。2. 兒童一般只做需氧培養(yǎng)，但仍需從多個(gè)部位采集多次。特殊患者考慮厭氧培養(yǎng)。8 基本概念1.成人“一套血培養(yǎng)”應(yīng)該包括需氧瓶和厭8應(yīng)該采集幾套血液標(biāo)本？1.每位患者采血最少2套， 3套更好2. 初發(fā)患者，絕不能只采1套標(biāo)本3.多個(gè)穿刺部位采血。因多部位同時(shí)發(fā)生污染的幾率較小，便于對(duì)結(jié)果進(jìn)判斷9應(yīng)該采集幾套血液標(biāo)本？1.每位患者采血最少2套， 3套更好9標(biāo)本間隔多久采集？1.對(duì)于非持續(xù)性菌血癥

5、，同時(shí)或短時(shí)間內(nèi)采集23套血培養(yǎng)， 因?yàn)轶w內(nèi)巨噬細(xì)胞吞噬系統(tǒng)會(huì)在1530min內(nèi)清除掉進(jìn)入人體內(nèi)的細(xì)菌。2. 可疑急性心內(nèi)膜炎患者要立即取血作血培養(yǎng)，30分鐘內(nèi)完成3套血培養(yǎng)的采集，采集后立即進(jìn)行抗菌藥的經(jīng)驗(yàn)治療。如果24小時(shí)內(nèi)報(bào)告陰性，則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng)。3.可疑的亞急性心內(nèi)膜炎患者每間隔30分鐘至1h采集1套，連續(xù)采集3套標(biāo)本。如果24小時(shí)內(nèi)報(bào)告陰性，則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng)。10標(biāo)本間隔多久采集？1.對(duì)于非持續(xù)性菌血癥，同時(shí)或短時(shí)間內(nèi)采集應(yīng)該采多少血量？采血量是影響靈敏度最關(guān)鍵因素1.成人一份標(biāo)本2個(gè)培養(yǎng)瓶（需氧厭氧），每瓶810ml，共20ml；要求至少采兩份標(biāo)本，即40ml。 2.兒童

6、一般只需采集需氧瓶，在保證采集血量1總血量下，一般為13ml。3.采血量不足時(shí)應(yīng)優(yōu)先保證需氧瓶，因臨床90以上的感染為需氧菌或兼性需氧菌感染。11應(yīng)該采多少血量？采血量是影響靈敏度最關(guān)鍵因素11采各種血液標(biāo)本的先后順序？血培養(yǎng)對(duì)無(wú)菌操作的要求比注射、采集生化、凝血等其它標(biāo)本要高。所以要最先采集血培養(yǎng)標(biāo)本。污染率的指標(biāo)是 3%12采各種血液標(biāo)本的先后順序？血培養(yǎng)對(duì)無(wú)菌操作的要求比注射、采集皮膚消毒程序：推薦使用碘町、洗必泰或碘伏作為皮膚消 毒劑。 碘町作用1min 碘伏作用1.5-2min 洗必泰作用時(shí)間與碘町一樣（但不能用于少于2個(gè)月嬰兒皮膚消毒）13皮膚消毒程序：推薦使用碘町、洗必泰或碘伏作

7、為皮膚消13培養(yǎng)瓶的消毒程序：1.去掉培養(yǎng)瓶口的塑料瓶蓋。2.75%酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞子60秒。3.自然待干。4.將標(biāo)本注入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。5. 顛倒混勻標(biāo)本與肉湯，以避免血液凝集。14培養(yǎng)瓶的消毒程序：1.去掉培養(yǎng)瓶口的塑料瓶蓋。14保存血培養(yǎng)標(biāo)本瓶：1.未用的：不需冷藏，更不能冷凍。保存在1525的室溫即可。2. 采集好的標(biāo)本：存在室溫即可不能冷藏也不能放入35 的溫箱。過(guò)夜不會(huì)對(duì)檢測(cè)造成影響，但仍需盡快送檢。15保存血培養(yǎng)標(biāo)本瓶：1.未用的：不需冷藏，更不能冷凍。保存在1采集血標(biāo)本的基本原則1.及時(shí)采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查2.在抗菌藥物使用前采集標(biāo)本3.采樣時(shí)嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作4.采樣后立

8、即送檢5.標(biāo)本容器須滅菌處理，但不得使用消毒劑6.送檢標(biāo)本應(yīng)注明來(lái)源和檢驗(yàn)?zāi)康?.不可以從靜脈留置針處采血，除非是采集留置針相關(guān)感染目的的標(biāo)本16采集血標(biāo)本的基本原則1.及時(shí)采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查16痰標(biāo)本的采集方法自然咳痰：采集標(biāo)本前，應(yīng)冷開水漱口刷牙，然后用力從氣管深部咳出痰液，放入痰杯內(nèi)。下呼吸道肺泡灌洗，支氣管刷洗，氣管抽吸：將抽吸物或灌洗液直接放入痰杯內(nèi)，刷出物放入1ml無(wú)菌生理鹽水的痰杯中。誘導(dǎo)咳痰：刷完牙齦和舌頭后讓患者用水漱口，借助噴霧器使患者吸入約25ml 3%5%的無(wú)菌鹽水誘導(dǎo)咳痰。17痰標(biāo)本的采集方法自然咳痰：采集標(biāo)本前，應(yīng)冷開水漱口刷牙，然后痰培養(yǎng)的送檢次數(shù)對(duì)于普通

9、細(xì)菌性肺炎，痰標(biāo)本送檢每天1次，連續(xù)23天。不建議24h內(nèi)多次采集，除非痰液外觀性狀出現(xiàn)改變； 懷疑分枝桿菌感染者，應(yīng)連續(xù)收集3天清晨痰液送檢； 懷疑軍團(tuán)菌或深部真菌感染，痰標(biāo)本理想的送檢次數(shù)尚無(wú)定論。18痰培養(yǎng)的送檢次數(shù)對(duì)于普通細(xì)菌性肺炎，痰標(biāo)本送檢每天1次痰培養(yǎng)的運(yùn)送和保存盡快（2h）送至實(shí)驗(yàn)室。 如不能及時(shí)送達(dá)，應(yīng)將標(biāo)本暫存于4，但放置時(shí)間不可超過(guò)24h。 厭氧培養(yǎng)標(biāo)本的最佳運(yùn)送時(shí)間取決于標(biāo)本量。 被口咽部菌群污染的標(biāo)本如咳痰等不可用于厭氧菌培養(yǎng)。19痰培養(yǎng)的運(yùn)送和保存盡快（5個(gè)/HP；2.體溫38;3.重癥腹瀉；4.膿血便；5.未經(jīng)抗菌藥物治療的持續(xù)性腹瀉病人；6.來(lái)自腸道傳染疫區(qū)的患

10、者。26糞便標(biāo)本采集指征：當(dāng)病人出現(xiàn)以下一種情況時(shí)應(yīng)該采集糞便標(biāo)本進(jìn)糞便標(biāo)本的采集方法自然排便采集標(biāo)本時(shí)，取有膿血、粘液、組織碎片部份的糞便13g（花生米大?。?。 液體糞便則取絮狀物，一般取13ml，直接裝入糞便容器或運(yùn)送培養(yǎng)基中送檢。直腸拭子采集糞便標(biāo)本：先以肥皂、水和70%酒精，將肛門周圍洗凈，然后用經(jīng)無(wú)菌鹽水濕潤(rùn)的棉拭子插入肛門超越肛門括約肌約2-4cm，與直腸粘膜表面接觸，輕輕旋轉(zhuǎn)，必須將棉拭子置于運(yùn)送培養(yǎng)基中送檢。27糞便標(biāo)本的采集方法自然排便采集標(biāo)本時(shí)，取有膿血、粘液、糞便標(biāo)本的運(yùn)送一般糞便標(biāo)本裝于無(wú)菌封閉廣口塑料杯；直腸拭子置于腸道運(yùn)送培養(yǎng)基。做霍亂弧菌檢查的糞便標(biāo)本置于堿性蛋白

11、胨水試管中。 糞便標(biāo)本：室溫1小時(shí)內(nèi)送至。 直腸拭子：室溫1小時(shí)內(nèi)送至。 高度懷疑霍亂弧菌感染的標(biāo)本室溫1小時(shí)內(nèi)送至，運(yùn)送必須符合特殊標(biāo)本的安全要求。有腹部痙攣的患者在發(fā)病6h內(nèi)采集到的血便或液狀便的效果最好。28糞便標(biāo)本的運(yùn)送一般糞便標(biāo)本裝于無(wú)菌封閉廣口塑料杯；直腸拭子置腦脊液標(biāo)本采集與運(yùn)送采集：按脊椎穿刺操作規(guī)程，采集約3-5ml腦脊液于3支無(wú)菌試管中，每支試管至少1-2ml，然后馬上將第2支（或第1支）送至實(shí)驗(yàn)室。做腦脊液培養(yǎng)時(shí)，建議同時(shí)做血培養(yǎng)。腰穿時(shí)必須作徹底消毒和無(wú)菌操作。運(yùn)送：常溫立即送檢，實(shí)驗(yàn)室收到標(biāo)本后應(yīng)立即接種。29腦脊液標(biāo)本采集與運(yùn)送采集：29穿刺液標(biāo)本采集與運(yùn)送采集：2

12、%碘酊消毒要穿刺的皮膚后，由臨床醫(yī)生穿刺采集標(biāo)本（2ml左右），裝入無(wú)菌密封容器立即送檢。運(yùn)送：采集后應(yīng)正確蓋好，防止泄漏或容器外部留有殘留物。 保溫立即送檢，保證在15min內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn) 室收到標(biāo)本后應(yīng)立即接種。為提高陽(yáng)性率，像胸腹水等標(biāo)本，可接種到血培養(yǎng)瓶中送檢。30穿刺液標(biāo)本采集與運(yùn)送采集：30手術(shù)切口感染標(biāo)本的采集與運(yùn)送采集方法：先用無(wú)菌生理鹽水徹底沖洗切口表面，去除表面的滲出和碎屑，再用拭子深入傷口的基底部或者傷口與正常組織邊緣采集，放入無(wú)菌試管中，運(yùn)送：及時(shí)送檢。31手術(shù)切口感染標(biāo)本的采集與運(yùn)送采集方法：31軟組織感染標(biāo)本采集與運(yùn)送采集方法：未破裂膿腫：不能用拭子。消毒覆于膿腫表面的皮膚，用注射器將膿腫內(nèi)容物吸出。然后切開膿腫、引流，取部分膿腫壁送檢。用于厭氧培養(yǎng)。 開放病灶和膿腫：盡量去除表面菌群，用