梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及分析課件

1、梅毒螺旋體梅毒是一種性傳播疾病，病原體為梅毒螺旋體，屬于密螺旋體屬，蒼白密螺旋體蒼白亞種(Treponema pallidum subspecies pallidum) 極細(xì)亞種 雅司病地方亞種 地方性梅毒蒼白亞種 梅毒蒼白螺旋體品他螺旋體品他病 密螺旋體屬梅毒螺旋體梅毒是一種性傳播疾病，病原體為梅毒螺旋體，屬于密青島大學(xué)附屬醫(yī)院梅毒螺旋體的生物學(xué)特性1、直徑 0.100.15m，有814個(gè)致密而規(guī)則的小螺旋 ，兩端尖直。2、原生質(zhì)圓柱體上緊繞著34根周漿鞭毛，故運(yùn)動(dòng)活躍，運(yùn)動(dòng)方式多樣。3、G-，但不易著色，鍍銀染色呈棕褐色。4、在無活細(xì)胞的人工培養(yǎng)基中難培養(yǎng)，生長(zhǎng)慢。5、抵抗力極弱，對(duì)溫度和

2、干燥特別敏感；對(duì)青霉素、四環(huán)素、紅霉素等抗生素敏感。在干燥條件下不易生存。肥皂水和一般消毒劑以及加溫42以上均極易將其殺滅。青島大學(xué)附屬醫(yī)院梅毒螺旋體的生物學(xué)特性1、直徑 0.100 梅毒螺旋體 梅毒螺旋體傳播途徑性接觸是主要的傳染途徑 未經(jīng)治療的患者在感染后的1年內(nèi)最具有傳染性 隨著病期的延長(zhǎng)，傳染性越來越小 到感染后2年，通過性接觸一般無傳染性母嬰傳播 在妊娠7周時(shí)，梅毒螺旋體即可通過胎盤傳染未經(jīng)治療者，雖已無性傳播（病期2年），但妊娠時(shí)仍可傳染給胎兒病期越長(zhǎng)，傳染性越小;輸血傳染間接傳播：日常用品、接吻、哺乳、醫(yī)療器械等途徑（接觸部位附有梅毒螺旋體） 。傳播途徑性接觸是主要的傳染途徑梅毒

3、的分期梅毒的分期 梅毒的診斷梅毒的診斷早期梅毒（一期、二期和早期隱性梅毒）和晚期梅毒（三期和晚期隱性梅毒）必須依靠病史、癥狀及實(shí)驗(yàn)檢查進(jìn)行綜合分析梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果對(duì)診斷有決定性意義 梅毒的診斷梅毒的診斷 常用梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法病原學(xué)檢測(cè)血清學(xué)檢測(cè) 常用梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法病原學(xué)檢查取材方法一期、二期梅毒時(shí)，取硬下疳、扁平濕疣、黏膜斑等皮損部位組織液或淋巴結(jié)穿刺術(shù)得到的組織液病原學(xué)檢查取材方法暗視野顯微鏡暗視野顯微鏡鍍銀染色鍍銀染色病原學(xué)檢查的臨床意義病原學(xué)方法直接鏡檢到梅毒螺旋體，在臨床可確診梅毒，且具有快速、方便、易操作的特點(diǎn)。 螺旋體檢查是診斷早期現(xiàn)癥梅毒的最佳方法，對(duì)于患者的早期診斷、

4、及時(shí)治療、預(yù)后和盡早切斷傳染源都有十分重要的意義。 如未見到梅毒螺旋體，并不能排除患梅毒的可能性。病原學(xué)檢查的臨床意義病原學(xué)方法直接鏡檢到梅毒螺旋體，在臨床梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn) （非特異性梅毒抗體）梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn) （特異性梅毒抗體）梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法梅毒螺旋體非特異性抗體血清學(xué)試驗(yàn)原理（抗心磷脂抗體）：人體感染了梅毒螺旋體后，組織受到破壞，釋放出來的一種類脂成分，與梅毒螺旋體結(jié)合形成完全抗原，刺激機(jī)體產(chǎn)生類脂質(zhì)抗體（反應(yīng)素）。主要是IgM和IgG混合抗體?？贵w產(chǎn)生時(shí)間 感染3周-4周，硬下疳出現(xiàn)1周-2周 抗體作用無保護(hù)作用，治療監(jiān)測(cè)。未經(jīng)治療的病人，其血清內(nèi)

5、的反應(yīng)素可長(zhǎng)期存在。經(jīng)正規(guī)治療后，反應(yīng)素可以逐漸減少至轉(zhuǎn)為陰性。梅毒螺旋體非特異性抗體血清學(xué)試驗(yàn)原理（抗心磷脂抗體）：原理和方法反應(yīng)原理抗原抗體結(jié)合形成復(fù)合物，凝集成網(wǎng)狀沉淀顆粒被肉眼所見抗原基本成分心磷脂、卵磷脂和膽固醇方法包括：快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)(RPR)不加熱血清反應(yīng)素(USR) 甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)（TRUST）性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)(VDRL)等。原理和方法反應(yīng)原理RPR定量試驗(yàn)中等至大的凝塊為陽性（圈4和7）有明確凝塊但很小的為弱陽性（圈2和3）顆粒均勻分布（圈1,5,8-10）或稍粗糙（圈6）為陰性RPR定量試驗(yàn)中等至大的凝塊為陽性（圈4和7）有明確凝塊但TRUST試驗(yàn)結(jié)果

6、TRUST試驗(yàn)結(jié)果臨床意義早期梅毒（一期、二期）經(jīng)足量規(guī)則抗梅毒治療后3個(gè)月，梅毒抗體滴度下降2個(gè)稀釋度，6個(gè)月下降4個(gè)稀釋度。 一期梅毒1年后轉(zhuǎn)為陰性 二期梅毒2年后轉(zhuǎn)為陰性。 晚期梅毒治療后血清滴度下降緩慢，2年后約50%病人血清反應(yīng)仍為陽性早期梅毒硬下疳出現(xiàn)1周-2周后，血清可呈陽性。經(jīng)治療后血清滴度可下降并陰性，故可作為療效觀察、判斷痊愈、復(fù)發(fā)或再感染的指征。臨床意義早期梅毒（一期、二期）經(jīng)足量規(guī)則抗梅毒治療后3個(gè)月，假陽性問題假陽性：非梅毒患者的血清反應(yīng)呈陽性技術(shù)性假陽性由于標(biāo)本的保存不當(dāng)（如細(xì)胞污染或溶血）、試劑質(zhì)量差或過期、或?qū)嶒?yàn)室操作錯(cuò)誤所造成。生物學(xué)假陽性是由于患者有其他疾病

7、或生理狀態(tài)發(fā)生變化，使梅毒血清試驗(yàn)出現(xiàn)陽性假陽性問題假陽性：非梅毒患者的血清反應(yīng)呈陽性急性生物學(xué)假陽性反應(yīng)的疾病風(fēng)疹水痘傳染性單核細(xì)胞增多癥傳染性肝炎上呼吸道感染肺炎球菌性肺炎病毒性肺炎牛痘疹急性生物學(xué)假陽性反應(yīng)的疾病風(fēng)疹慢性生物學(xué)假陽性反應(yīng)的疾病系統(tǒng)性紅斑狼瘡 自身免疫性溶血性貧血盤狀紅斑狼瘡 結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎 橋本氏甲狀腺炎風(fēng)濕性心臟病干燥綜合征毒品癮者 慢性腎炎肝硬化老年 麻風(fēng) (是唯一產(chǎn)生慢性生物學(xué)假陽性的感染性疾病)慢性生物學(xué)假陽性反應(yīng)的疾病系統(tǒng)性紅斑狼瘡 風(fēng)濕性心臟病特異性梅毒螺旋體抗體試驗(yàn)原理檢測(cè)血中以梅毒螺旋體特異蛋白為抗原的抗體（ IgG 和IgM ）。特異性I

8、gM型抗梅毒螺旋體抗體，感染2周后即可測(cè)出。特異性梅毒螺旋體抗體試驗(yàn)原理檢測(cè)血中以梅毒螺旋體特異蛋白為抗實(shí)驗(yàn)方法 梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA) 梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)(TPHA) 梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（TP-ELISA） 梅毒免疫層析法-梅毒快速檢測(cè)(RT) 熒光螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（FTA-ABS） 化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIA） 梅毒螺旋體蛋白印跡試驗(yàn)（WB）實(shí)驗(yàn)方法 梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)TPPA/TPHA原理TPPA試驗(yàn)原理與TPHA試驗(yàn)基本相同TPPA試驗(yàn)用梅毒螺旋體致敏明膠顆粒TPHA試驗(yàn)中梅毒螺旋體致敏羊紅細(xì)胞特點(diǎn)梅毒螺旋體(Nichols株)全抗原TPPA/TP

9、HA原理TPPA試驗(yàn)原理與TPHA試驗(yàn)基本相梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及分析課件TP-ELISA原理用重組梅毒螺旋體抗原包被固相板條，加上梅毒血清和單克隆抗體酶標(biāo)記物，形成抗原抗體復(fù)合物與酶標(biāo)記物結(jié)合，用酶標(biāo)儀判定試驗(yàn)陽性反應(yīng)。特點(diǎn)本法可用于大規(guī)模血清檢測(cè)。TP-ELISA原理免疫層析免疫層析梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及分析課件臨床應(yīng)用梅毒螺旋體特異性抗體試驗(yàn)的作用是作為證實(shí)試驗(yàn)，以TPPA/TPHA的特異性和敏感性最高。它們可以幫助確定非梅毒螺旋體試驗(yàn)陽性反應(yīng)是真陽性還是假陽性。 一旦這些試驗(yàn)呈陽性，則患者終身陽性。臨床應(yīng)用梅毒螺旋體特異性抗體試驗(yàn)的作用是作為證實(shí)試驗(yàn)，以TP方法特點(diǎn)特異性強(qiáng)，敏感性高很少出現(xiàn)假陽性

10、。據(jù)統(tǒng)計(jì)，在普通人群中，有1%的生物學(xué)假陽性發(fā)生。 如系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清可使試驗(yàn)呈假陽性反應(yīng)，但大多數(shù)病例中螺旋體呈串株?duì)顭晒狻?傳染性單核細(xì)胞增多癥，可能由于嗜異性抗體所致，可使TPHA呈假陽性。麻風(fēng)患者也可使特異試驗(yàn)呈陽性。方法特點(diǎn)特異性強(qiáng)，敏感性高梅毒特異性抗體檢測(cè)的應(yīng)用作為RPR初篩陽性標(biāo)本的確證試驗(yàn)。不能作為療效觀察的指標(biāo)。陽性不能區(qū)分既往感染和現(xiàn)癥感染，應(yīng)結(jié)合RPR結(jié)果進(jìn)行診斷。老年人抗體陽性的問題：這些老年患者所患的基礎(chǔ)疾病可能使機(jī)體釋放誘導(dǎo)產(chǎn)生抗類脂抗體和/或抗梅毒抗體的交叉抗原；TPPA敏感性高，特異性好，作為確證實(shí)驗(yàn)。梅毒特異性抗體檢測(cè)的應(yīng)用作為RPR初篩陽性標(biāo)本的確證

11、試驗(yàn)。臨床病例分析1病例：某患者，男，65歲，梅毒抗體檢測(cè)結(jié)果為： TP抗體（時(shí)間分辨）：1.25 S/CO(1.0) 陽性 TPPA檢測(cè)結(jié)果：陰性 時(shí)間分辨敏感性太高，假陽性。臨床病例分析1病例：某患者，男，65歲，梅毒抗體檢測(cè)結(jié)果臨床病例分析2病例：某患者，男，40歲，梅毒檢測(cè)結(jié)果為： TP抗體（時(shí)間分辨）:24.65 S/CO(1.0) 陽性 TPPA:陽性 TRUST:陰性梅毒既往感染，已治愈。臨床病例分析2病例：某患者，男，40歲，梅毒檢測(cè)結(jié)果為：臨床病例分析3病例：某患者，男，30歲，梅毒檢測(cè)結(jié)果為： TP抗體（時(shí)間分辨）：陽性 TPPA:陽性 TRUST:陽性，滴度1:32.梅毒螺旋體現(xiàn)癥感染，活動(dòng)期。臨床病例分析3病例：某患者，男，30歲，梅毒檢測(cè)結(jié)果為臨床病例分析4病例：某患者，男，61歲，梅毒檢測(cè)結(jié)果為： TP抗體（時(shí)間分辨）0.14 S/CO(1.0) TPPA:陰性 TRUST:陽性，滴度1:1陽