實驗二 蘆薈粗多糖的提取

1、實驗二蘆薈粗多糖的提取一、實驗?zāi)康?、掌握“水提醇沉”法提取多糖的原理和方法2、掌握高速冷凍離心機、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器等儀器的用法二、實驗原理一一“水提醇沉”三、95%乙醇“無水乙醇”、dH2O四、儀器及器皿燒杯、玻璃棒、小刀、量筒、紗布、電子天平、高速冷凍離心機五、步驟蘆薈（約50g）洗凈、去葉尖、葉底*dH2O浸泡0.5h（除去黃色汁液）去表皮內(nèi)層凝膠切成小片3倍體積dH2O、55oC45h_k雙層紗布過濾-上清液濃縮至原體積的1/36倍體積冷的無水乙醇（緩慢加入并不斷攪拌1530min,收集，2h后沉淀物）六、作業(yè)1、描述實驗步驟現(xiàn)象描述：洗凈的蘆薈浸泡后水中會有絲狀的流體，且清水稍微變黃；切塊

2、后置于水浴加熱后的塊狀蘆薈部分融化變?yōu)樾鯛睿眉啿歼^濾后留下清夜；用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮后液體顏色變深,往濃縮液中加入6倍體積冷的無水乙醇后會有絮狀沉淀產(chǎn)生，放置lOmin、20min、30min后悔發(fā)現(xiàn)沉淀不斷增加。2、原理水提醇沉法是先以水為溶劑提取藥材有效成分，再用不同濃度乙醇沉淀除去提取液中雜質(zhì)的方法。它是利用中藥中的大多數(shù)成分易溶于水和醇的特性，用水提出，并將提取液濃縮，加入適當(dāng)?shù)囊掖蓟蛩磸?fù)數(shù)次沉降，除去其不溶解的物質(zhì)，最后制得澄明的液體。3、如何進行定量（1）精密稱取105C干燥至恒重的無水葡萄糖lOOmg于100mL容量瓶中，加水溶解，并稀釋至刻度，作為對照品溶液。此標準溶液l.Om

3、L含葡萄糖l.Omg。（2）精密量取該溶液0.5mL、l.OmL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL分別置于100mL容量瓶中，加蒸餾水定容，吸取上述溶液各2.0mL，再加入5%苯酚溶液l.OmL，搖勻。迅速加入硫酸5.0mL，搖勻。室溫放置5min，90C水浴加熱15min，冷卻至室溫，以蒸餾水作參比，測定在波長490nm處的吸光度，得濃度（c）與吸光度（A）的線性回歸方程。(3)精密稱取干燥至恒重的蘆薈粗多糖10mg于100mL容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度。取1.0mL，加入5%苯酚溶液2.0mL，然后按第2步操作，測定其吸光度。并由標準曲線方程求出溶液濃度，得出蘆薈粗多糖中的總糖含量。4、如何鑒定沉淀物為多糖對蘆薈多糖的鑒定利用改進的苯酚一硫酸法。苯嘞一硫酸試劑能與蘆薈多糖中的己糖起顯色反應(yīng)，在一定波長下其吸光度的變化與多糖含量呈線性關(guān)系。采用苯酚一硫酸顯色法鑒定蘆薈多糖，蘆薈中的多糖在硫酸的作用下，先水解成單糖，并迅速脫水生