高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定水果蔬菜中的多菌靈殘留量方法的研

1、高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定水果蔬菜中的多菌靈殘留量方法的研【關(guān)鍵詞】高效液相色譜質(zhì)譜多菌靈農(nóng)藥殘留水果蔬菜多菌靈(arbendazi)又稱(chēng)苯駢咪唑44號(hào)，化學(xué)名稱(chēng)為2-(甲氧基氨基甲酰)苯駢咪唑，是一種廣譜、高效、內(nèi)吸性殺真菌農(nóng)藥，對(duì)菌核并炭疽并枯萎病等都有防治效果，已廣泛應(yīng)用于水果蔬菜消費(fèi)。由于其化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，可以持久地殘留在果品蔬菜中，導(dǎo)致多菌靈殘留累積，可通過(guò)食物鏈影響人體安康。研究說(shuō)明，多菌靈能引起肝病，還能導(dǎo)致染色體畸變等病癥1。目前測(cè)定多菌靈的分析方法主要有液相色譜法2，3、分光光度法4。高效液相色譜法常用紫外檢測(cè)器，由于其選擇性差，靈敏度受到限制，不同的樣品必須采用不同的色譜條

2、件，對(duì)檢測(cè)干擾極大，方法的通用性和耐用性不強(qiáng)。為此，本實(shí)驗(yàn)采用高選擇性、高靈敏度的質(zhì)譜檢測(cè)器，以常見(jiàn)水果蔬菜為研究對(duì)象，建立了檢測(cè)多菌靈殘留的液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法。實(shí)驗(yàn)局部主要儀器與試劑：1100型高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(Agilent科技)，配在線脫氣機(jī)、四元低壓泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、二極管陣列檢測(cè)器、電噴霧四級(jí)桿質(zhì)譜檢測(cè)器，儀器控制和數(shù)據(jù)采集分析使用heStatin工作站；超純水系統(tǒng)(歷元電子儀器公司)，KS-300D系列超聲波清洗器，300(科生儀器廠)。R2200型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(Buhi公司)；甲醇(分析純)，四氫呋喃、甲醇(色譜純，erk公司)；Nal、NaH、石油醚(沸程306

3、0)、二氯甲烷(分析純)；無(wú)水硫酸鈉：使用前在500馬弗爐中灼燒4小時(shí)；Hl(分析純)；多菌靈標(biāo)準(zhǔn)品(Dr.Ehrenstrfer公司)。標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：準(zhǔn)確稱(chēng)取標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇溶解配成濃度為100g/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)藏液。使用時(shí)用甲醇逐級(jí)稀釋成濃度為0.0202.0g/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液。樣品預(yù)處理：準(zhǔn)確稱(chēng)取粉碎混勻后的樣品25.0g于100l具塞三角燒瓶中，參加50l甲醇和10l0.1l/LHl，攪拌均勻，超聲振蕩提取2小時(shí)，用布氏漏斗抽濾，以少量甲醇清洗殘?jiān)喜V液于150l圓底燒瓶中，在40水浴上濃縮，根本除去甲醇。將濃縮液轉(zhuǎn)移至125l分液漏斗中，參加10l0.1l/L鹽酸和50l10%Nal溶液

4、，混合均勻，再參加25l石油醚劇烈振蕩。靜置分層后，棄去石油醚，水相用2l/LNaH溶液調(diào)節(jié)pH至6.58.5，用二氯甲烷萃取3次，每次20l。合并二氯甲烷，以無(wú)水硫酸鈉枯燥，將濾液轉(zhuǎn)移至150l圓底燒瓶中，在40水浴中減壓蒸發(fā)至干，最后用甲醇溶解定容至1.0l。高效液相色譜-質(zhì)譜條件：色譜柱，DikaDiansil18(4.6i.d.250，5)；流動(dòng)相，4%四氫呋喃水溶液(A)甲醇(B)=73；流速，0.6l/分；柱溫，30；檢測(cè)波長(zhǎng)，282n；進(jìn)樣量，10l。質(zhì)譜檢測(cè)選擇正離子選擇離子檢測(cè)(SI)形式，以/z192和/z160為定性檢測(cè)離子對(duì)，/z192為定量檢測(cè)離子，枯燥氣為氮?dú)?，流?/p>

5、10L/分，枯燥氣溫度350，毛細(xì)管電壓3500V，裂解電壓100V。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.結(jié)果與討論樣品前處理?xiàng)l件的選擇：多菌靈是一種兩性化合物，在中性和偏堿性水溶液中溶解度低，微溶于丙酮、乙酸乙酯和氯仿等有機(jī)溶劑。實(shí)驗(yàn)比擬了在酸性條件下，甲醇和水提取多菌靈的效果。取空白蔬菜，參加多菌靈標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后分別用水和甲醇提取，同前述方法凈化。結(jié)果甲醇-鹽酸法回收率高，而水提法回收率不到50%，應(yīng)選擇醇提法。在甲醇中參加酸液使多菌靈成鹽，用石油醚除去脂溶性物質(zhì)。再參加NaH溶液，調(diào)整pH至6.58.5，使多菌靈轉(zhuǎn)成原形，再用有機(jī)溶劑萃取，從而到達(dá)純化、富集多菌靈的目的。流動(dòng)相的選擇：實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)以甲醇

6、-水為流動(dòng)相洗脫時(shí)，多菌靈峰型寬而且拖尾。經(jīng)過(guò)反復(fù)實(shí)驗(yàn)，選擇了四氫呋喃作為調(diào)節(jié)劑，使峰型得到改善；采用4%四氫呋喃水溶液(A)甲醇(B)=73。質(zhì)譜方法的優(yōu)化：實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，用DAD檢測(cè)器在紫外波長(zhǎng)282n下進(jìn)展檢測(cè)，多菌靈信號(hào)被掩蓋，無(wú)法準(zhǔn)確定量。而用靈敏度和選擇性更高的質(zhì)譜檢測(cè)器在選擇離子監(jiān)測(cè)形式下進(jìn)展檢測(cè)，多菌靈響應(yīng)明顯。與DAD檢測(cè)器相比，質(zhì)譜檢測(cè)器采用SI形式后，檢測(cè)靈敏度顯著進(jìn)步，目的物在紫外光下無(wú)響應(yīng)，但在質(zhì)譜中有很強(qiáng)的響應(yīng)。同時(shí)質(zhì)譜抗干擾強(qiáng)，檢出限低，定量結(jié)果更趨準(zhǔn)確和真實(shí)，方法耐用性更強(qiáng)；用掃描形式在/z120220范圍掃描。質(zhì)譜中的準(zhǔn)分子離子/z192+H+為基峰，/z16為-

7、H3+，/z214為+Na+。因此，實(shí)驗(yàn)選取/z192和/z160作為監(jiān)測(cè)離子對(duì)進(jìn)展定性，將/z192用于多菌靈的定量測(cè)定。標(biāo)準(zhǔn)曲線及方法檢出限：將標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)藏液用甲醇稀釋成濃度分別為0.02、0.04、0.10、0.20、0.40、0.80、1.00、2.00、3.00和4.00g/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液。在一樣的色譜及質(zhì)譜條件下，測(cè)定多菌靈的峰面積。以峰面積對(duì)進(jìn)樣濃度作圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)校正曲線。在含量為0.024.00g/L范圍內(nèi)得出標(biāo)準(zhǔn)曲線，線性回歸方程為Y=5.028107X+2.324105，相關(guān)系數(shù)r=0.9994。取空白樣品提取液，參加一定量的多菌靈標(biāo)準(zhǔn)品，以信噪比的3倍來(lái)確定方法的檢出限為0.1

8、2g/L(RSD5%)。實(shí)際樣品的測(cè)定結(jié)果：測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1，多菌靈的平均加樣回收率為95.5%103.2%；最大相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏向?yàn)?.3%。測(cè)定結(jié)果令人滿意。不同產(chǎn)品中多菌靈的最高殘留限量為0.5g/kg，本方法的靈敏度完全可以到達(dá)分析要求。采用三波長(zhǎng)分光光度法測(cè)定水果蔬菜中多菌靈的殘留量，方法簡(jiǎn)單，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確，方法重現(xiàn)性好。【參考文獻(xiàn)】1張建新,杜雙奎,楊小姣.陜西省主要蔬菜產(chǎn)區(qū)多菌靈農(nóng)藥殘留分析與評(píng)價(jià).平安與環(huán)境學(xué)報(bào),2022,5(6):78-80.2李桂風(fēng),郝征紅,董淑敏,等.花生中多菌靈殘留量的高效液相色譜分析方法的研究.分析測(cè)試學(xué)報(bào),1998,17(3):69-70.3BernalJ.L.,delNzal.J,etal.High-perfraneliquidhratgraphideterinatinfbenylandarb