齊魯醫(yī)學實驗十 醋酸纖維薄膜電泳－－血清白蛋白分析

1、實驗十、醋酸纖維薄膜電泳 血清蛋白分析和 人體動脈血壓的測定2021/9/301一、目的和要求 、了解電泳的原理，掌握醋酸 纖維薄膜電泳的操作 、學習動脈血壓的原理，測定 收縮壓與舒張壓2021/9/302二、實驗原理 （一）電泳 在外界電場的作用下，生物大分子從電極一側(cè)向另一側(cè)移動的現(xiàn)象 1、蛋白質(zhì) 由氨基酸通過肽鍵連接而成2021/9/3032021/9/3042、等電點 (isoelectric point, pI) 在一定的pH條件下，當其正、負電荷數(shù)相等時，整體便失去了所有電荷，這時的pH稱為等電點（pI）。 氨基酸在等電點時電泳移動速度為零 在堿性環(huán)境中，蛋白分子 負電 陽極 在酸

2、性環(huán)境中，蛋白分子 正電 陰極2021/9/3053、醋酸纖維素薄膜 (Cellulose Acetate Membranes) 采用醋酸纖維素為支持物的電泳方法叫醋酸纖維薄膜電泳，具有很高的流速和熱穩(wěn)定性以及非常低的吸附，將其溶于丙酮等有機溶劑中，即可涂布成均一細密的微孔薄膜2021/9/3062021/9/3074、血清蛋白電泳 將抽取的血液置入不加抗凝劑的試管中，使血凝固后，析出的上清液就是血清。 血清中主要含白蛋白、球蛋白。2021/9/308 血清蛋白電泳是一種臨床化驗檢查項目。 由于蛋白的絕大部分均由肝臟合成，所以，各種蛋白質(zhì)的質(zhì)與量的變化，除與免疫性疾病等有關外，主要反映肝臟的生

3、理、病理情況2021/9/309 血清中各種蛋白質(zhì)的等電點均低于pH 7.0，在pH 8.6的緩沖液中帶負電，向正極移動，分子小且?guī)щ姾啥嗾?，則 移動速度較快2021/9/3010pI %球蛋白 6.867.3 1220球蛋白 5.12 6.512 2球蛋白 5.06 49 1球蛋白 5.06 25清蛋白 4.6457722021/9/3011（二）血壓測定 1、血壓 是指血管內(nèi)的血液對于單位面積血管壁的側(cè)壓，目前采用千帕(KPa)為單位。以前采用 mmHg 表示。 收縮壓：收縮期動脈血壓的最高值 (高壓) 舒張壓：舒張期動脈血壓的最低值 (低壓) 2021/9/30122、血壓測定方法 此次

4、實驗采用Korotkoff氏聽診法 正常的收縮壓/舒張壓 (mmHg) 收縮壓: 130 mmHg 舒張壓: 85 mmHg2021/9/3013無光澤面座位號1.50.5三、實驗方法（一）電泳 1、薄膜的使用 在毛（無光澤）面劃線，并寫上座位號（如右圖） 2、浸潤2021/9/30143、點樣 （毛細管，一根，放回）4、電泳 點樣面朝下 點樣端置于負極5、染色 染色10min6、漂洗 脫色各5min（、） 最后，水洗2021/9/3015（二）側(cè)血壓 1、血壓計的構造：減壓計、袖帶、 氣球 2、安靜時收縮壓/舒張壓 （120/80mmHg） 3、運動后的收縮壓/舒張壓2021/9/30162021/9/3017四、實驗報告