果蔬制品檢測方法課件

1、果蔬制品檢測方法context蔬菜制品包括：醬腌菜、蔬菜干制品、食用菌制品、其他蔬菜制品水果制品包括：蜜餞、水果制品（水果干制品、果醬）前言1. 醬腌菜山梨酸、苯甲酸 高效液相色譜法(根據(jù)GB2760-2008食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準規(guī)定，防腐劑苯甲酸、山梨酸最大使用量不得大于0.5g/kg)蔬菜制品對羥基苯甲酸酯類蔬菜制品氣相色譜測定方法高效液相色譜測定方法高效毛細管電泳(HPCE ) 或毛細管電泳分離法( CESM )國標(biāo)采用方法金屬元素（鉛、砷、鎂、鋅、銅、錳、鎘）1）原子吸收分光光度法（測定速度較慢，操作繁瑣）；2）電感耦合等離子體發(fā)射光譜法（ICP-AES）（同時測定醬腌菜中的鉛、砷、

2、鎂、鋅、銅、錳、鎘等7 種金屬元素方法簡便、快速、準確, 結(jié)果令人滿意。）蔬菜制品N-亞硝基化合物1）液- 液提取和固相萃??；2）氣相色譜/質(zhì)譜(GC/MS)；3）氣相色譜/熱能分析儀(GC/TEA)；4）氣相色譜/質(zhì)譜/質(zhì)譜(GC/CI/MS/MS)；5）高效液相色譜硝酸鹽紫外檢測離子色譜法蔬菜制品沙門氏菌1）國家標(biāo)準（GB4789.4-94）2) 自動熒光酶標(biāo)分析儀(MINI VIDAS）蔬菜制品含水量1）國家行業(yè)標(biāo)準SN/T 023011-93 出口脫水蔬菜檢驗規(guī)程中所規(guī)定的方法,即105 常壓干燥法（測定結(jié)果偏低）；2）130 常壓干燥法（檢測時間短,結(jié)果與甲苯法無顯著性差異）；3）甲

3、苯法（定量準確,但測定時間較長）；蔬菜制品金黃色葡萄球菌腸毒素 血清學(xué)試驗方法（具有靈敏度高、特異性強、簡便快速等優(yōu)點，在毒素檢測方面發(fā)展很快）（比較酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)試驗和反向間接血球凝集(RPHA)的試驗結(jié)果可以看出，ELISA的檢測靈敏度比RPHA高，但兩者的檢測靈敏度相近。據(jù)報道ELISA檢測靈敏度為2.5ng/ml，而RPHA檢測靈敏度的下限為3ng/ml。由于進行ELISA試驗的藥品靠進口，價格昂貴，著改用RPHA試驗將會節(jié)約大量外匯。蔬菜制品多菌靈高效液相二極管陣列檢測器測定；固相萃取、固相微萃取、超臨界流體萃取、微波輔助萃取、加速溶劑萃取和凝膠滲透萃??；蔬菜制品防腐劑和

4、甜味劑（糖精鈉(SA)、乙?；前匪徕?安賽蜜，AK)、苯甲酸(BA)、山梨酸(SOA)和脫氫乙酸(DHA)。）測定食品中防腐劑和甜昧劑的方法主要有：薄層色譜法(TLC)、高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜法(GC)等。其中以HPLC法最為常用。傳統(tǒng)方法中，安賽蜜按GBT 5009.140.2003方法進行測定，苯甲酸、山梨酸按GBT 5009.29.2003方法進行測定，糖精鈉按GBT 5009.28.2003方法進行測定，脫氫乙酸采用HPLC進行測定。反相高效液相色譜法。此法操作簡便、快速、靈敏、準確，樣品處理簡便易行，用于監(jiān)測蜜餞中食品添加劑。水果制品1.蜜餞甘素（對乙氧基苯脲）采用高效

5、液相色譜法對蜜餞中的甘素進行測定，結(jié)果準確，精密度高，適用于常規(guī)化學(xué)實驗室分析。美國AOACl7thedn，2000官方方法95711 Dulein in Food規(guī)定食品中甘素的測定原理為比色法，美國食品添加劑手冊中規(guī)定食品中甘素的測定原理亦為薄層色譜分離、比色法(定性和半定量分析)。水果制品 防腐劑攪拌棒吸附萃取(SBSE) 是一種自身攪拌吸附萃取的固相萃取技術(shù),1999年比利時Sandra教授開發(fā)出,由德國Gerstel公司商品化。攪拌棒萃取技術(shù)具有富集倍數(shù)高、重復(fù)性好和操作簡單等優(yōu)點,可以將食品稀釋一定的倍數(shù)以減少甚至消除食品的基質(zhì)效應(yīng),并且能夠保證較低的檢出限。氣相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜聯(lián)

6、用技術(shù)(GC-MS/MS)是一種應(yīng)用廣泛檢測分析的技術(shù)。在色譜法中不能被完全分離的組分, 利用串聯(lián)質(zhì)譜的質(zhì)譜多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)技術(shù)可以在同一時間對不同的離子碎片進行監(jiān)測。并且, MRM 技術(shù)通過兩級離子選擇,排除了大量干擾離子,使質(zhì)譜的化學(xué)背景大大降低, 目標(biāo)檢測物的信噪比顯著提高,使分析過程中的定性假陽性率大大降低。防腐劑的檢測方法目前主要有液相色譜法、氣相色譜法、液相色譜/質(zhì)譜法、氣相色譜/質(zhì)譜法、毛細管電泳法、薄層色譜法和紅外光譜法,但氣相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜方法尚沒有報道。本文采用攪拌棒吸附萃取前處理技術(shù),簡化了前處理步驟, 對飲料和果醬中苯甲酸、山梨酸、對羥基苯甲酸甲酯、丙酯、異丙酯、

7、異丁酯和庚酯進行氣相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜( GC-MS/MS)方法研究,為食品添加劑的日常檢測提供簡便而準確的技術(shù)手段。2. 果醬納他霉素 納他霉素(natamycin)作為一種食品防腐劑被廣泛使用于乳制品、肉類、水果、飲料等食品。美國食品及藥物管理局(FDA) 于1982年正式批準納他霉素作為食品添加劑使用,1996年我國食品添加劑委員會對納他霉素進行評價并建議批準使用,現(xiàn)已列入食品添加劑使用標(biāo)準,其商品名稱為霉(NatamaxinTM)。FDA/WHO 規(guī)定,人體每天納他霉素最大攝入量(ADI) 為0.3 mg/kg (體重)。我國食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(GB27602007) 規(guī)定,納他霉素

8、在蛋黃醬和沙拉醬中的最大使用量為0.02g/kg ,在果蔬汁(漿)中的最大。使用量為0.3 g/kg ,殘留量均小于10mg/kg?，F(xiàn)有文獻報道關(guān)于納他霉素的分析方法主要有分光光度法、微生物法、滴定法、液相色譜法等。分光光度法和滴定法雖然較為簡單,但靈敏度低,特異性差,很難滿足殘留限量的要求。而微生物法由于檢測周期長,且選擇性較差,使其應(yīng)用受到了限制。液相色譜- 紫外檢測法是目前報道的使用較多的分析方法,也基本能夠滿足殘留限量檢測的要求,但由于食品基質(zhì)的復(fù)雜性,該方法往往難以消除基質(zhì)干擾,同時目前已有的分析方法多采用乙酸水溶液提取直接分析,從而使得基質(zhì)雜質(zhì)較多, 方法的靈敏度、選擇性和特異性還

9、有待提高。 液相色譜- 串聯(lián)四極桿質(zhì)譜技術(shù)操作簡便、快速,能有效地去除果醬中基質(zhì)的干擾。該方法靈敏度高、選擇性好,適合于果醬中痕量納他霉素的確證和定量分析,為果醬中相關(guān)物質(zhì)的測定提供了有效的技術(shù)手段。 水果制品對羥基苯甲酸酯 對羥基苯甲酸酯，又稱尼泊爾金酯, 是一類非揮發(fā)性的防腐劑, 因其pH適用范圍廣、殺菌性能穩(wěn)定而在果蔬、醬油、水果汁等食品以及化妝品中應(yīng)用廣泛, 目前使用較多的是對羥基苯甲酸甲酯(MHB)、對羥基苯甲酸乙酯(EHB)、對羥基苯甲酸異丙酯(IPHB)、對羥基苯甲酸丙酯(PHB)、對羥基苯甲酸異丁酯(IBHB )和對羥基苯甲酸丁酯(BHB)。由于對羥基苯甲酸酯的酸性和腐蝕性較強

10、, 胃酸過多的病人和兒童不宜食用含此類防腐劑的食品。Routledge等首次發(fā)現(xiàn)對羥基苯甲酸酯具有弱雌激素活性, 這一發(fā)現(xiàn)對原有的“對羥基苯甲酸酯低毒性”的觀點提出了挑戰(zhàn)。歐洲經(jīng)濟共同體( EEC)明確規(guī)定: 以對羥基苯甲酸計, 食品中對羥基苯甲酸酯的最高允許含量為0.1%；當(dāng)幾種對羥基苯甲酸酯復(fù)配使用時, 其總量不得超過0.1%。我國GB 2760食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準規(guī)定: 對羥基苯甲酸酯類化合物及其鈉鹽(以對羥基苯甲酸計)用于新鮮水果蔬菜保鮮的最大允許使用量為0.012 g/kg, 果汁型飲料、果醬(不含罐頭)、醬油、醬料中的限量為0.25g /kg等。 目前,對羥基苯甲酸酯類化合物的測

11、定方法主要有高效液相色譜法(HPLC) 、薄層色譜法、毛細管電泳法、氣相色譜法等。GB 5009.31-2003采用氣相色譜氫火焰離子化檢測器測定醬油、醋等食品中的對羥基苯甲酸酯,但該方法存在樣品前處理步驟繁瑣、靈敏度不高的弱點,且只測定兩種酯類( EHB 和PHB), 從而限制了它的使用范圍。有關(guān)水果、果醬制品中對羥基苯甲酸酯的液相色譜測定方法尚未見報道。本文建立了固相萃取(SPE)-HPL同時檢測水果和果醬中上述6種對羥基苯甲酸酯的方法。水果制品棒曲霉素 棒曲霉素(patulin)，又叫展青霉素，它是由一些毛霉目真菌種類(青霉菌、曲霉菌和絲衣菌等)產(chǎn)生的一種有毒的次級新陳代謝產(chǎn)物1，多產(chǎn)生在發(fā)霉的水果、谷類和其他食品中。目前國內(nèi)外測定棒曲霉素多采用TLCS法和HPLC法。TLCS法操作較為復(fù)雜、費時，并且只能提供半定