齊魯醫(yī)學(xué)缺血修飾白蛋白的臨床研究與應(yīng)用進(jìn)展

1、缺血修飾白蛋白的臨床研究與應(yīng)用進(jìn)展中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院檢驗(yàn)科 蔣洪敏2021/9/301概述：目前臨床應(yīng)用的心臟標(biāo)志物種類繁多，大致有：反映心肌組織損傷的標(biāo)志物：CK-MB、Mb、cTn反映心肌缺血的標(biāo)志物：IMA、PAPP-A、NEFA、 膽堿、CD40配體等。反映心臟功能的標(biāo)志物：B-BNP、NT-proBNP等心血管炎癥的標(biāo)志物等：CRP 、IL-6、-TNF等。2021/9/302 2007年6月4日衛(wèi)生部關(guān)于印發(fā)醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目目錄的通知中確定了目前各醫(yī)療機(jī)構(gòu)可以開(kāi)展的有關(guān)心肌疾病的實(shí)驗(yàn)診斷項(xiàng)目有：肌酸激酶同工酶MB、-羥丁酸脫氫酶、肌鈣蛋白T、肌鈣蛋白I、肌紅蛋白、缺血修飾白蛋白

2、、腦鈉肽、N端-前腦鈉肽、妊娠相關(guān)蛋白、同型半胱氨酸。 2021/9/303缺血修飾白蛋白（Ischemia Modified Albumin，IMA） 1999年-等觀察到不穩(wěn)定心絞痛和心肌梗死發(fā)病早期患者的人血清白蛋白(Human serum albumin, HSA) N 末端部份分子顯著改變或喪失，使外源性鈷與人血清白蛋白結(jié)合能力降低。其-末端受損或銅離子占據(jù)的S稱為缺血修飾白蛋白(ischemia modified albumin, IMA)。 2021/9/304形成機(jī)制2021/9/305 2021/9/306 2021/9/307 2021/9/308 2021/9/309 2

3、021/9/3010 Droy通過(guò)化學(xué)方法生成ROS并利用 OH 清除劑巰丙酰甘氨酸(mercap top rop ionylglycine, MPG) 體外模擬IMA的形成過(guò)程, 發(fā)現(xiàn)通過(guò)Fenton反應(yīng)產(chǎn)生OH的一組血清中的IMA迅速升高。在15min的反應(yīng)過(guò)程中, IMA吸光值比基線水平最大增高43.6% , 而另一組中加入OH清除劑后, IMA 產(chǎn)生的量與血清對(duì)照組(不加入任何試劑) 無(wú)明顯差別。說(shuō)明ROS, 尤其是OH 可能改變白蛋白的化學(xué)結(jié)構(gòu),導(dǎo)致IMA的產(chǎn)生。2021/9/3011的測(cè)定 試驗(yàn)是利用結(jié)合過(guò)渡金屬Co2+的能力減弱的性質(zhì)進(jìn)行測(cè)定。正常血清標(biāo)本中白蛋白以活性形式存在,

4、加人氯化鈷溶液后, Co2+即可與白蛋白末端結(jié)合,溶液中存在的游離Co2+濃度較低;而缺血個(gè)體的血清標(biāo)本中含有較多,加人同樣濃度的氯化鈷溶液,由于與Co2+結(jié)合的能力弱,溶液中存在較高濃度的游離Co2+ 。利用二硫蘇糖醇()可以與游離Co2+產(chǎn)生紅色反應(yīng),含量與顏色程度呈正比,在470505處檢測(cè)吸光度,可間接對(duì)進(jìn)行定量測(cè)定。2021/9/30122021/9/3013臨床研究Cho最新報(bào)道, IMA在急性冠脈痙攣誘發(fā)的短暫性心肌缺血中明顯升高, 是一種靈敏度很高的心肌缺血標(biāo)志物。研究對(duì)象為26名接受麥角新堿激發(fā)實(shí)驗(yàn)的患者、18名接受心臟介入手術(shù)的患者和10名冠脈造影術(shù)顯示正常的病人, 結(jié)果顯

5、示激發(fā)實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性的病人血清中IMA的中位數(shù)明顯高于基線水平。2021/9/3014 而激發(fā)實(shí)驗(yàn)陰性的病人IMA與其基線水平相比較并不升高。經(jīng)皮冠脈介入手術(shù)后的病人血清中IMA 亦較基線水平升高。而冠脈造影術(shù)后的病人IMA并不升高。激發(fā)試驗(yàn)后IMA升高大于9U /ml時(shí)即可判斷冠脈發(fā)生痙攣, 因而缺血修飾白蛋白可能作為冠脈痙攣誘發(fā)的一過(guò)性心肌缺血的標(biāo)志物。2021/9/3015 ACB試驗(yàn)作為評(píng)估心肌缺血的早期診斷指標(biāo), IMA值的高低與心肌缺血的程度相關(guān), 但對(duì)于心肌缺血的個(gè)體是否發(fā)生心肌梗死不敏感。Sbarouni等連續(xù)對(duì)40例接受射頻消融術(shù)的病人(男、女各20例, 平均年齡為47 16歲)

6、研究發(fā)現(xiàn), IMA在術(shù)前、術(shù)中、術(shù)后2h、術(shù)后1d無(wú)明顯變化, 而CK、CK - MB、cTn I 較術(shù)前明顯升高( P 104U/ml的病例占40%，IMA80%),但特異性不高(46%)。5. IMA能很好區(qū)分有無(wú)心肌缺血的患者,但很難區(qū)分有無(wú)MI的心肌缺血患者。 2021/9/3032IMA檢測(cè)標(biāo)本采集與處理 受檢者的準(zhǔn)備：病人采集靜脈血樣 ; 如果病人服用抗凝血藥物，血液在30分鐘內(nèi)不能凝固，結(jié)果解釋?xiě)?yīng)慎重。血清應(yīng)通過(guò)物理方法盡快與血細(xì)胞分離。推薦時(shí)間最長(zhǎng)不要超過(guò)2小時(shí); 靜脈采血： 除非是臥床的病人，一般在采血時(shí)取坐位。體位影響水分在血管內(nèi)外的分布，會(huì)影響測(cè)試項(xiàng)目的濃度。在采血前至少應(yīng)靜坐5分鐘，一般從肘靜脈取血，使用止血帶的時(shí)間不超過(guò)1分鐘，穿刺成功后立即松開(kāi)止血帶。 2021/9/3033 標(biāo)本處理 ：血樣采集后，應(yīng)及時(shí)離心分離血清，血清樣本應(yīng)不溶血。測(cè)試盡可能在血液提取后2.5小時(shí)內(nèi)完成；如果測(cè)試不能及時(shí)完成，必須立即在-20或更低溫度下冷凍血清；解凍凍結(jié)的樣品需在28或室溫下進(jìn)行，應(yīng)充分混合，測(cè)試必須在樣品解凍后1.5小時(shí)內(nèi)獲得，不得含有EDTA、枸櫞酸鈉等鰲合劑的抗凝劑2021/9/3034ACB與IMA的區(qū)別ACB-白蛋白鈷結(jié)合力:直接反映每毫升血清中白蛋白結(jié)合鈷的能力。ACB越