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1、2020屆-二輪復(fù)習(xí)-生物技術(shù)實(shí)踐-課件-47-張-(全國(guó)通用)2020屆-二輪復(fù)習(xí)-生物技術(shù)實(shí)踐-課件-47-張-(知識(shí)主線思維串聯(lián)尿素稀釋涂布平板法剛果紅染色法醋酸菌乳酸菌高壓蒸汽滅菌法平板劃線法碳源、氮源、水和無機(jī)鹽水蒸氣蒸餾法紙層析法鑒定知識(shí)主線思維串聯(lián)尿素稀釋涂布平板法剛果紅染色法醋酸菌乳酸菌1.培養(yǎng)基制備與微生物純化技術(shù)微專題1 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用稱量滅菌接種環(huán)梯度稀釋1.培養(yǎng)基制備與微生物純化技術(shù)微專題1 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)提醒:為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格,微生物實(shí)驗(yàn)一般會(huì)設(shè)置空白對(duì)照:隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板培養(yǎng)基在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成。平板劃線
2、法只適用于微生物的純化,不適合進(jìn)行計(jì)數(shù),并且在最后一次劃線的末端處的菌種最純。末端可分離得到一個(gè)單獨(dú)的細(xì)菌細(xì)胞提醒:為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格,微生物實(shí)驗(yàn)一般會(huì)設(shè)置空2.微生物分離與計(jì)數(shù)的兩個(gè)實(shí)例酚紅變紅纖維素纖維素分解菌纖維素消失透明圈2.微生物分離與計(jì)數(shù)的兩個(gè)實(shí)例酚紅變紅纖維素纖維素分解菌纖維1.(2019全國(guó)卷,37)生物選修1:生物技術(shù)實(shí)踐(15分)已知一種有機(jī)物X(僅含有C、H兩種元素)不易降解,會(huì)造成環(huán)境污染。某小組用三種培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解X的細(xì)菌(目標(biāo)菌)。號(hào)培養(yǎng)基:在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入X(5 g/L)。號(hào)培養(yǎng)基:氯化鈉(5 g/L),硝酸銨(3 g/L),其他無
3、機(jī)鹽(適量),X(15 g/L)。號(hào)培養(yǎng)基:氯化鈉(5 g/L),硝酸銨(3 g/L),其他無機(jī)鹽(適量),X(45 g/L)。1.(2019全國(guó)卷,37)生物選修1:生物技術(shù)實(shí)回答下列問題。(1)在號(hào)培養(yǎng)基中,為微生物提供氮源的是_。、號(hào)培養(yǎng)基中為微生物提供碳源的有機(jī)物是_。(2)若將土壤懸浮液接種在號(hào)液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)一段時(shí)間后,不能降解X的細(xì)菌比例會(huì)_,其原因是_。(3)號(hào)培養(yǎng)基加入瓊脂后可以制成固體培養(yǎng)基,若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)目標(biāo)菌并對(duì)菌落進(jìn)行計(jì)數(shù),接種時(shí),應(yīng)采用的方法是_。(4)假設(shè)從號(hào)培養(yǎng)基中得到了能高效降解X的細(xì)菌,且該菌能將X代謝為丙酮酸,則在有氧條件下,丙酮酸可為該菌的生長(zhǎng)
4、提供_和_。回答下列問題。解析(1)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中,牛肉膏、蛋白胨為微生物提供了氮源,而號(hào)、號(hào)培養(yǎng)基中除X外的其他物質(zhì)均不含碳,所以能為微生物提供碳源的有機(jī)物是X。(2)因?yàn)樘?hào)培養(yǎng)基中碳源只有X,相當(dāng)于是選擇培養(yǎng)基,只有能降解X的細(xì)菌才能增殖,而不能降解X的細(xì)菌因缺乏碳源不能增殖。(3)要對(duì)菌落進(jìn)行計(jì)數(shù),應(yīng)采用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種。(4)在有氧條件下,丙酮酸參與細(xì)菌的有氧呼吸,可以為該菌的生長(zhǎng)提供能量和合成其他物質(zhì)的原料。答案(1)牛肉膏、蛋白胨X(2)下降不能降解X的細(xì)菌因缺乏碳源不能增殖,而能降解X的細(xì)菌能夠增殖(3)稀釋涂布平板法(4)能量合成其他物質(zhì)的原料解析(1)牛肉膏蛋白胨
5、培養(yǎng)基中,牛肉膏、蛋白胨為微生物提供2.(2019包頭質(zhì)檢)有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑,長(zhǎng)期使用會(huì)污染環(huán)境。某生物興趣小組的同學(xué)設(shè)計(jì)如圖所示的實(shí)驗(yàn)流程來分離純化高效降解苯磺隆的微生物。據(jù)此回答下列問題:2.(2019包頭質(zhì)檢)有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑,長(zhǎng)期使(1)實(shí)驗(yàn)所用的培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為_,原因是_。(2)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌,常采用的方法是_,檢測(cè)滅菌是否徹底的方法是_。(3)圖示分離純化菌株時(shí),所用的接種方法是_,由圖推測(cè)該同學(xué)接種時(shí)可能的操作失誤是_。多次重復(fù)a、b過程的目的是_。(4)為測(cè)定所獲微生物降解苯磺隆的能力,其基本思路是_。(1)實(shí)驗(yàn)所用的培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為_,原因
6、解析(1)分離降解苯磺隆的微生物的培養(yǎng)基應(yīng)以苯磺隆作唯一碳源,不能分解苯磺隆的微生物難以在此培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng)和繁殖而達(dá)到分離目的。(2)培養(yǎng)基滅菌常用高壓蒸汽滅菌法;檢測(cè)滅菌是否徹底,一般會(huì)設(shè)置空白對(duì)照,即將滅菌冷卻后的培養(yǎng)基在恒溫箱中倒置培養(yǎng)一段時(shí)間,觀察是否有菌落產(chǎn)生,若有說明滅菌不徹底。(3)分離純化菌株時(shí),常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法,圖示接種為稀釋涂布平板法;該同學(xué)未涂布均勻,導(dǎo)致培養(yǎng)基有的地方菌落較多,有的地方無菌落;多次重復(fù)a、b過程是為了分離高效降解苯磺隆的菌株。(4)為測(cè)定所獲微生物降解苯磺隆的能力,可將篩選出的一定量的菌株加入到苯磺隆溶液中,檢測(cè)單位時(shí)間內(nèi)苯磺
7、隆的分解速率。解析(1)分離降解苯磺隆的微生物的培養(yǎng)基應(yīng)以苯磺隆作唯一碳答案(1)唯一碳源只有能降解苯磺隆的微生物才能在此培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng)和繁殖,從而達(dá)到分離目的(2)高壓蒸汽滅菌法將滅菌冷卻后的培養(yǎng)基在恒溫箱中倒置培養(yǎng)一段時(shí)間,觀察是否有菌落產(chǎn)生(3)稀釋涂布平板法涂布不均勻進(jìn)一步篩選純化獲得高效降解苯磺隆的菌株(4)將篩選出的一定量的菌株加入到苯磺隆溶液中,檢測(cè)單位時(shí)間內(nèi)苯磺隆的分解速率(合理即可)答案(1)唯一碳源只有能降解苯磺隆的微生物才能在此培養(yǎng)基3.(2019天一大聯(lián)考)有些耐熱、抗輻射的細(xì)菌具有吸附重金屬和降解芳烴類物質(zhì)的特性,極端干燥炎熱的沙漠環(huán)境中耐熱和抗輻射的細(xì)菌數(shù)量較多。
8、請(qǐng)回答下列相關(guān)問題:(1)若要獲得所需菌株,可從吐魯番庫木塔格沙漠中采集土樣,原因是_。(2)培養(yǎng)微生物要制作培養(yǎng)基,雖然各種培養(yǎng)基的配方不同,但一般都含有_和無機(jī)鹽,對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌的目的是_。培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或微堿性,pH調(diào)節(jié)應(yīng)在滅菌之_(填“前”或“后”)。3.(2019天一大聯(lián)考)有些耐熱、抗輻射的細(xì)菌具有吸附重(3)為了增加耐熱、抗輻射菌的濃度,可在稀釋涂布到培養(yǎng)基之前進(jìn)行_培養(yǎng),采用_法或平板劃線法進(jìn)行接種,在進(jìn)行平板劃線時(shí),第二次及其后的劃線操作總是從上一次劃線的末端開始,原因是_。將培養(yǎng)基放在高溫輻射(50 、紫外線照射5 min)條件下培養(yǎng)的目的是_
9、。(3)為了增加耐熱、抗輻射菌的濃度,可在稀釋涂布到培養(yǎng)基之前解析(1)根據(jù)目的菌株對(duì)生存環(huán)境的要求,應(yīng)到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找,若要獲得耐熱、抗輻射的菌體可從吐魯番庫木塔格沙漠中采集土樣。(2)一般培養(yǎng)基中都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽,高壓蒸汽滅菌可將物體內(nèi)外所有的微生物殺滅。為了保證培養(yǎng)基不被雜菌污染,pH調(diào)節(jié)應(yīng)在滅菌之前。(3)可采用選擇培養(yǎng)增加耐熱、抗輻射菌的濃度。微生物的接種方法包括稀釋涂布平板法和平板劃線法,在進(jìn)行平板劃線時(shí),線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少,因此第二次以及其后的劃線操作總是從上一次劃線的末端開始,這樣便于獲得單個(gè)菌落。為了篩選耐熱、抗輻射的菌體,需將培養(yǎng)基放在高溫輻
10、射(50 、紫外線照射5 min)條件下培養(yǎng)。解析(1)根據(jù)目的菌株對(duì)生存環(huán)境的要求,應(yīng)到相應(yīng)的環(huán)境中去答案(1)根據(jù)目的菌株對(duì)生存環(huán)境的要求,需到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找(答案合理即可)(2)水、碳源、氮源殺滅培養(yǎng)基中的所有微生物,為所需微生物的培養(yǎng)提供一個(gè)無菌環(huán)境前(3)選擇稀釋涂布平板線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少,易得到單個(gè)菌落篩選得到耐熱、抗輻射的菌體答案(1)根據(jù)目的菌株對(duì)生存環(huán)境的要求,需到相應(yīng)的環(huán)境中去1.理清“4”種傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作技術(shù)微專題2傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用有氧、無氧1.理清“4”種傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作技術(shù)微專題2傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)有氧有氧無氧有氧有氧無氧2.把握控制雜菌的“四大
11、措施”(1)通過發(fā)酵條件控制雜菌。無氧發(fā)酵時(shí)的無氧環(huán)境可以抑制好氧菌。乳酸菌發(fā)酵、酒精發(fā)酵形成的酸性環(huán)境抑制雜菌繁殖。(2)利用鹽控制雜菌:如腐乳的制作。(3)利用酒精控制雜菌:如果酒、腐乳的制作。(4)利用香辛料控制雜菌:如腐乳、泡菜的制作。2.把握控制雜菌的“四大措施”3.理解乳酸菌、乳酸、亞硝酸鹽的數(shù)量(含量)隨時(shí)間變化的曲線3.理解乳酸菌、乳酸、亞硝酸鹽的數(shù)量(含量)隨時(shí)間變化的曲線題型傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用(2019四川宜賓二診)回答下列關(guān)于生物技術(shù)實(shí)踐的問題。(1)某同學(xué)利用鮮蘋果汁來制作果酒和果醋時(shí),在發(fā)酵裝置的排氣口上連接的膠管長(zhǎng)而彎曲的目的是_。利用果酒進(jìn)行果醋發(fā)酵之前,需要調(diào)整
12、的發(fā)酵條件是_。(2)在泡菜的腌制過程中,需要進(jìn)行密封發(fā)酵,原因是_;并注意控制腌制的_等:還要跟蹤檢測(cè)腌制過程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽的含量,其原理是在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與_發(fā)生重氮化反應(yīng)后,與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。題型傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用(3)腐乳制作過程中防止雜菌污染的措施有_(答出兩點(diǎn)即可)。腐乳易被人體吸收的原因是_。答案(1)防止空氣中微生物的污染通入氧氣,將溫度設(shè)置為3035 (2)乳酸菌是厭氧菌時(shí)間、溫度和食鹽用量對(duì)氨基苯磺酸(3)用來腌制腐乳的玻璃瓶洗刷干凈后要用沸水消毒;裝瓶時(shí)操作要迅速、小心;整齊地?cái)[放好豆腐、加入鹵湯后,要用膠條將瓶口密封;封瓶時(shí),最好將
13、瓶口通過酒精燈的火焰,防止瓶口被污染(其他合理答案也給分)毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶將蛋白質(zhì)分解為小分子肽和氨基酸,脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸(3)腐乳制作過程中防止雜菌污染的措施有_1.圖解酶的應(yīng)用與固定化微專題3酶的應(yīng)用1.圖解酶的應(yīng)用與固定化微專題3酶的應(yīng)用2.比較固定化酶與固定化細(xì)胞2.比較固定化酶與固定化細(xì)胞3.加酶洗衣粉的洗滌效果的探究實(shí)驗(yàn)及變量分析3.加酶洗衣粉的洗滌效果的探究實(shí)驗(yàn)及變量分析題型一酶在食品加工及洗滌中的應(yīng)用1.據(jù)圖分析回答下列問題:題型一酶在食品加工及洗滌中的應(yīng)用(1)酶所降低的活化能可用圖1中_段來表示。如果將酶催化改為無機(jī)催化劑催化該反應(yīng),則b在縱軸上將_
14、(上移/下移)。(2)圖2中能正確表示酶量增加1倍時(shí),底物濃度和反應(yīng)速率關(guān)系的是_(填“A”或“B”)。(3)某實(shí)驗(yàn)小組為探究洗衣粉加酶后的洗滌效果,將一種無酶洗衣粉分成3等份,進(jìn)行了3組實(shí)驗(yàn)。甲、乙組在洗衣粉中加入1種或2種酶,丙組不加酶,在不同溫度下清洗同種化纖布上的2種污漬,其他實(shí)驗(yàn)條件均相同,下表為實(shí)驗(yàn)記錄:(1)酶所降低的活化能可用圖1中_段來表示。如2020屆-二輪復(fù)習(xí)-生物技術(shù)實(shí)踐-課件-47-張-(全國(guó)通用)甲組在洗衣粉中加入的酶是_;乙組在洗衣粉中加入的酶是_。如果甲、乙和丙3組均在水溫為90 時(shí)洗滌同一種污漬,請(qǐng)比較這3組洗滌液效果之間的差異并說明理由。解析(1)酶能降低化
15、學(xué)反應(yīng)的活化能,由圖可知,ab段表示酶所降低的活化能。由于無機(jī)催化劑的催化效率沒有酶高,因此將酶催化改為無機(jī)催化劑催化,b在縱軸上將上移。(2)酶濃度增加,酶促反應(yīng)速率加快,選B。(3)由表格數(shù)據(jù)可推知,甲組在洗衣粉中加入的酶是蛋白酶。乙組在洗衣粉中加入的酶是蛋白酶和脂肪酶。如三組的水溫都在90 ,則三組洗滌效果幾乎沒有差別,因?yàn)楦邷厥姑缸冃允Щ睢4鸢?1)ab上移(2)B(3)蛋白酶蛋白酶和脂肪酶沒有差異,因?yàn)楦邷厥姑缸冃允Щ罴捉M在洗衣粉中加入的酶是_;乙組在洗衣粉中加題型二酶和細(xì)胞的固定化技術(shù)及應(yīng)用2.下圖1表示制備固定化酵母細(xì)胞的某步操作,圖2是利用固定化酵母細(xì)胞進(jìn)行酒精發(fā)酵的示意圖,請(qǐng)
16、據(jù)圖分析回答:題型二酶和細(xì)胞的固定化技術(shù)及應(yīng)用(1)圖1中,將溶化好的海藻酸鈉溶液_,加入已活化的酵母細(xì)胞,進(jìn)行充分?jǐn)嚢?,使其混合均勻,再轉(zhuǎn)移至注射器中。(2)圖1中X溶液為_,其作用是_。(3)某同學(xué)在圖1過程結(jié)束后得到圖3所示的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,出現(xiàn)此結(jié)果的可能原因有海藻酸鈉濃度過_(“高”或“低”)或注射器中的混合液推進(jìn)速度過_(“快”或“慢”)。(4)圖1中制備的凝膠珠用_后再轉(zhuǎn)移到圖2裝置中,發(fā)酵過程中攪拌的目的是_。(1)圖1中,將溶化好的海藻酸鈉溶液_,加入已解析(1)將溶化的海藻酸鈉冷卻至室溫,才能與活化的酵母細(xì)胞混合,以免高溫使酵母細(xì)胞失活。(2)將混合液滴加到CaCl2溶液中固定化
17、酵母細(xì)胞,故圖1中X溶液為CaCl2溶液,作用是使海藻酸鈉形成凝膠珠。(3)圖3中所示的凝膠珠不是圓形或橢圓形,可能原因是海藻酸鈉濃度偏高或注射器中的混合液推進(jìn)速度過快。(4)制備的凝膠珠用蒸餾水洗滌后再轉(zhuǎn)移到圖2裝置中進(jìn)行發(fā)酵,發(fā)酵過程中攪拌的目的是使培養(yǎng)液與酵母細(xì)胞充分接觸,以利于發(fā)酵過程的順利進(jìn)行。答案(1)冷卻至室溫(2)CaCl2溶液使海藻酸鈉形成凝膠珠(3)高快(4)蒸餾水洗滌使培養(yǎng)液與酵母菌充分接觸解析(1)將溶化的海藻酸鈉冷卻至室溫,才能與活化的酵母細(xì)胞1.蛋白質(zhì)的提取與分離(1)原理與方法微專題4蛋白質(zhì)及植物有效成分的提取、分離分子的形狀和大小電荷瓊脂糖凝膠電泳1.蛋白質(zhì)的提
18、取與分離微專題4蛋白質(zhì)及植物有效成分的提取、(2)實(shí)驗(yàn)血紅蛋白的提取和分離樣品處理與粗分離去除雜蛋白血紅蛋白溶液透析小分子雜質(zhì)(2)實(shí)驗(yàn)血紅蛋白的提取和分離去除雜蛋白血紅蛋白溶液透析純化與純度鑒定凝膠色譜法移動(dòng)速度不同純化與純度鑒定凝膠色譜法移動(dòng)速度不同2.植物有效成分的提取(1)水蒸氣蒸餾、壓榨、萃取三種方法的比較2.植物有效成分的提取2020屆-二輪復(fù)習(xí)-生物技術(shù)實(shí)踐-課件-47-張-(全國(guó)通用)(2)把握物質(zhì)分離的5種方法分離油水混合物:分液法。除去固體物和殘?jiān)哼^濾法。除去液體中質(zhì)量較小的固體殘留物:離心法。除去芳香油中的殘留水分:加入無水硫酸鈉后過濾。除去萃取液中的有機(jī)溶劑:蒸餾法。
19、注:胡蘿卜素不溶于水,其萃取劑應(yīng)為具有較高沸點(diǎn)的水不溶性有機(jī)溶劑如石油醚(丙酮、乙醇為水溶性有機(jī)溶劑,則不宜使用)萃取加熱時(shí)要加裝回流冷凝裝置,目的是防止加熱時(shí)有機(jī)溶劑揮發(fā)。胡蘿卜素在人體肝臟中可被氧化成兩分子的維生素A,因此可用于治療因缺乏維生素A引起的夜盲癥等。(2)把握物質(zhì)分離的5種方法題型一蛋白質(zhì)的提取、分離1.下列為凝膠色譜法分離血紅蛋白時(shí)樣品的加入(甲圖)和洗脫(乙圖)示意圖,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題:題型一蛋白質(zhì)的提取、分離(1)裝填凝膠色譜柱時(shí),需要一次性_(填“緩慢”或“快速”)倒入,并輕輕敲打使凝膠裝填緊密而不具有氣泡,否則必須重裝。(2)用吸管加樣時(shí)必須注意正確操作以避免破壞凝
20、膠面,加樣操作應(yīng)如甲圖所示吸管口沿管壁環(huán)繞移動(dòng)進(jìn)行,形成_(填“滴灌加樣”或“貼壁加樣”)。(3)凝膠色譜法分離血紅蛋白的基本過程:樣品加入后進(jìn)行洗脫,而后收集血紅蛋白。全過程中,共需要_次打開下端的流出口。收集血紅蛋白樣品時(shí)需把握好時(shí)機(jī),即待_時(shí),用試管連續(xù)收集流出液。最后收集到的血紅蛋白與剛洗脫時(shí)收集到的蛋白質(zhì)相比,后者相對(duì)分子質(zhì)量較_(填“大”或“小”),原因是_。(1)裝填凝膠色譜柱時(shí),需要一次性_(填“緩慢(4)電泳是指帶電顆粒在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過程。某同學(xué)利用電泳技術(shù)將得到的蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行分離,在電泳過程中,影響蛋白質(zhì)遷移速度的因素包括蛋白質(zhì)分子的_、_以及分子的形狀等。而在
21、測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量時(shí)通常使用的電泳方法為_。(4)電泳是指帶電顆粒在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過程。某同學(xué)利解析(1)裝填凝膠色譜柱時(shí),需要一次性緩慢倒入色譜柱內(nèi),并輕輕敲打色譜柱,使凝膠裝填均勻。(2)加樣操作應(yīng)如甲圖所示吸管口沿管壁環(huán)繞移動(dòng)進(jìn)行,形成貼壁加樣,這樣有利于保護(hù)凝膠面。(3)凝膠色譜法分離血紅蛋白的過程是先加入樣品再進(jìn)行洗脫而后收集血紅蛋白,該過程的操作為調(diào)節(jié)緩沖液面,打開下端流出口,使緩沖液下降到與凝膠面平齊后,關(guān)閉下端出口加入蛋白質(zhì)樣品打開下端出口,使樣品滲入凝膠床內(nèi),等樣品完全進(jìn)入凝膠層后,關(guān)閉下端出口色譜柱上端連接緩沖液洗脫瓶打開下端出口,收集分裝蛋白質(zhì),即可分離得到血紅蛋白。所以全過程共需要3次打開下端的流出口。相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)通過色譜柱的路程較短、移動(dòng)速率較快。(4)蛋白質(zhì)在進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳時(shí)的遷移率取決于它所帶凈電荷的多少以及分子的大小等因素。為了消除凈電荷對(duì)遷移率的影響,可以在凝膠中
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