062 中藥大黃的薄層色譜鑒別

1、中藥大黃的薄層色譜鑒別適用對象 生物工程、藥學(xué)、藥物制劑、中藥學(xué)、制藥工程、中藥學(xué)（國際交流方向）專 業(yè)實驗學(xué)時 3 學(xué)時一、實驗?zāi)康恼莆誄MC-Na硅膠H板對大黃中蒽醌類化學(xué)成分的分離。掌握色譜斑點的檢出識別方法。計算5中成分的Rf值和以大黃素為標(biāo)準(zhǔn)的4種成分的R值fst二、實驗原理中藥大黃中含有5種蒽醌成分，由于取代基不同，引起結(jié)構(gòu)的 極性不同，利用薄層色譜法可將5種成分進(jìn)行分離，并利用對照品進(jìn) 行鑒別。由于大黃中成分具有多環(huán)共軛體系，因此可通過日光下檢視斑 點的黃色和紫外光燈下檢視斑點的熒光進(jìn)行鑒別，此外大黃中成分具 有蒽醌結(jié)構(gòu)還可以用氨熏使之變色進(jìn)行鑒別。三、儀器設(shè)備儀器：層析缸，玻璃

2、板，毛細(xì)管，紫外分析儀試劑：大黃酸水解乙醚提取液，氯仿、石油醚30-60 C）、甲 酸乙酯、甲酸、硅膠H,羧甲基維素鈉色譜分離的原理是利用組分在固定相和流動相中分配系數(shù)的不同而得到分離薄層色譜中展開劑極性的選擇依據(jù)薄層色譜板的制備方法平板色譜的操作程序薄層色譜法進(jìn)行定性鑒別的依據(jù)及色譜斑點的鑒別方法點樣方法及注意事項展開時的方法及方法的選擇五、實驗步驟（一）CMC-Na硅膠H板的制備稱取羧甲基纖維素鈉（CMC-Na） 0.75g于100ml水中，加熱使 溶解，混勻，將硅膠H33g加入其中調(diào)成糊狀。取此吸附劑混懸液適 量放在清潔的餓玻璃板上（7x10cm板鋪板），晃動玻璃板，使其均勻 流動布滿整

3、塊玻璃板上，而獲得均勻的薄層。將玻璃板涼干，在于 110OC活化1小時，儲存于干燥器中備用。（ 二） 點樣將薄層板平放在水平面上，用毛細(xì)管吸附少量提取液點在離板底 斷約1-2cm位置處。要注意點樣方法。（ 三） 飽和將調(diào)好極性的展開劑倒入層析缸中，密閉15min，形成展開劑的 飽和蒸氣壓。（四）展開將點好樣的薄層板放入層析缸內(nèi)進(jìn)行展開。采用傾斜上行展開 法，展開劑：石油醚（30-60OC）-甲酸乙酯-甲酸（15： 5： 1），展距 15cm。然后取出薄層板在空氣中涼干。注意在本實驗中的展開方法。（五）色譜鑒別1）日光下檢視黃色斑點。2）置薄層板于密閉的氨水中熏 10 分鐘，斑點應(yīng)為紅色。3）置

4、氨熏后的薄層斑點于 365nm 紫外光燈觀察斑點的熒光顏色。（六）計算Rf值。量取斑點和展開劑的遷移距離并計算Rf值和R值fst六、實驗報告要求要求有原始數(shù)據(jù)，薄層板展開后的模擬圖，實驗時間，實驗注意事項，實驗合作人七、思考題如何將分離得到的 5 種成分按極性大小進(jìn)行排列如果要將本實驗分離得到的 5 個斑點鑒別分別是什么化合物， 應(yīng)如何進(jìn)行。展開劑的極性如何進(jìn)行選擇在薄層色譜法中的展開中可以有那些展開方法，展開過程中 應(yīng)注意些什么？點樣時要注意寫些什么？在展開時如何防止拖尾及前傾？八、實驗成績評定辦法實驗成績的評定包括實驗操作（包括薄層板的制備、點樣操作、 展開方法、展開劑極性的調(diào)節(jié)、展開后斑點的分布情況、點樣位置、 斑點鑒別方法、斑點和展開劑遷移距離