小白鼠缺氧耐受性試驗

1、關(guān)于小白鼠缺氧耐受性試驗第1頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三5.細胞內(nèi)氧化代謝外呼吸內(nèi)呼吸氣體運輸?shù)?頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三乏氧性 血液性 循環(huán)性 組織性缺氧類型供氧 用氧 第3頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三實驗目的復制乏氧性、血液性和組織性缺氧 動物模型，掌握缺氧的分類；觀察不同類型缺氧時 呼吸、皮膚粘膜顏色的變化，了解 解救措施；了解成年、新生小鼠對缺氧耐受性的差異， 并分析機制。第4頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三實驗動物成年小白鼠（7只）新生小白鼠（1只） 單獨放置第5頁

2、，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三實驗器材和藥品 缺氧瓶+軟膠塞，CO中毒瓶+解救瓶、燒杯 鈉石灰，鐵紗網(wǎng)， 鑷子，注射器， 氧氣，CO，5 亞硝酸鈉 , 1 美蘭 0.1 氰化鉀, 10 硫代硫酸鈉 ，生理鹽水第6頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三實驗步驟乏氧性缺氧一氧化碳中毒性缺氧亞硝酸鈉中毒性缺氧氰化物中毒性缺氧動物尸檢第7頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三成年小白鼠新生小白鼠步驟1觀察正常狀態(tài),一般指標(呼吸頻率,口唇顏色)步驟2缺氧瓶 + 鈉石灰 + 成年鼠 + 鐵網(wǎng)包裹乳鼠觀察指標呼吸頻率(次/10秒,每隔3分鐘

3、觀察)、口唇、皮膚顏色、存活時間、肝臟顏色1.乏氧性缺氧呼吸頻率觀察小白鼠腹部的起伏實驗中盡量減少對小白鼠的刺激第8頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三2. CO中毒性缺氧小白鼠A (中毒)小白鼠B(中毒解救)步驟1觀察正常狀態(tài)，一般指標步驟2放入 中毒瓶放入 中毒解救瓶步驟3注入 3 ml CO注入 3 ml CO步驟4軟癱后立即輸入O2觀察指標呼吸頻率(次/10秒,每隔3分鐘觀察) ，口唇、皮膚顏色、存活時間、肝臟顏色第9頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三3. NaNO2中毒性缺氧小白鼠A(中毒)小白鼠B (中毒解救)步驟1分別用燒杯罩住，觀察

4、正常狀態(tài)及一般指標步驟2背部皮下注射 0.3ml NaNO2背部皮下注射 0.3ml NaNO2步驟3腹腔注射 0.3ml 生理鹽水 腹腔注射 0.3ml 1美蘭 觀察指標呼吸頻率(次/10秒,每隔3分鐘觀察)口唇、皮膚顏色、存活時間、肝臟顏色防止美蘭沾到身體、衣物及地面 第10頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三4. 氰化物中毒性缺氧小白鼠A ( 中毒 )小白鼠B ( 中毒解救 )步驟1分別用燒杯罩住，觀察正常狀態(tài)一般指標步驟2背部皮下注射0.3ml KCN背部皮下注射0.3ml KCN步驟3腹腔注射 0.4ml 生理鹽水腹腔注射0.4ml Na2S2O3觀察指標呼吸頻

5、率(次/10秒,每隔3分鐘觀察)口唇、皮膚顏色、存活時間、肝臟顏色防止KCN沾到身體、衣物及地面第11頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三動物尸檢觀察對象實驗1、2、3、4中的小鼠觀察指標1皮膚顏色觀察指標2肝臟顏色（剖腹）血液顏色第12頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三實驗結(jié)果缺氧類型缺氧前缺氧后存活時間肝臟顏色R(次/10秒)皮膚口唇顏色3,6,9 乏氧性缺氧成幼CO中毒ABNaNO2中毒ABKCN中毒AB第13頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三小鼠捕捉技巧右手抓鼠尾略向后拉左手的拇指和食指抓住小鼠兩耳后項背部皮毛無名指

6、及小指夾住鼠尾左手翻轉(zhuǎn)使鼠腹部朝上，頭略朝下 小白鼠的捉拿方法 第14頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三三通管的使用第15頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三腹腔注射 鼠頭朝下針頭傾斜45度不要太靠近中線針頭尖向下避開肝臟和膀胱圖2 小白鼠的腹腔注射 第16頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三皮下注射 第17頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三實驗結(jié)果缺氧類型缺氧前缺氧后存活時間肝臟顏色R(次/10秒)皮膚口唇顏色3,6,9 乏氧性缺氧成幼CO中毒ABNaNO2中毒ABKCN中毒AB第18頁，共29頁，2

7、022年，5月20日，23點20分，星期三一、乏氧性缺氧鈉石灰有何作用？成鼠、幼鼠哪個存活時間長？為什么？小白鼠呼吸頻率有何變化？為什么？小白鼠是否出現(xiàn)發(fā)紺？什么叫發(fā)紺?實驗分析 第19頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三1. 鈉石灰= CaO+NaOH, 吸收CO2 ,消除CO2對實驗的影響2. 成鼠、幼鼠哪個存活時間長？為什么？幼鼠新陳代謝低，耗氧量少，相對成鼠需氧量少；幼鼠呼吸中樞發(fā)育不完善，對缺氧不敏感；幼鼠Hb含量高，相對不易缺氧；幼鼠主要靠糖酵解供能，成鼠主要以有氧呼吸供能，故幼鼠需氧少。第20頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三呼吸頻率

8、變化 先加快，后減慢，最后死亡PaO2呼吸中樞(+)，呼吸深快 化學感受器(+) 頸動脈體 主動脈體 呼吸中樞(-), 呼吸減慢PaO24. 乏氧性缺氧時，毛細血管中氧合Hb減少，脫氧Hb濃度增多超過5g/dL以上，可使皮膚與粘膜呈青紫色，稱發(fā)紺。第21頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三二、CO中毒性缺氧 CO中毒性缺氧屬于哪種類型的缺氧? 什么叫血液性缺氧? CO中毒性缺氧的發(fā)生機制是什么? 櫻桃紅色是哪種物質(zhì)的顏色? 第22頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三 失去攜氧能力 COHb HbCO (櫻桃紅色)與1個血紅素結(jié)合，其余對氧親和力 CO

9、中毒機制 抑制RBC糖酵解， 2,3-DPG 氧離曲線左移, 親和力 , 釋氧 親和力高 第23頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三三、NaNO2中毒性缺氧 屬于哪種類型的缺氧? 發(fā)生機制是什么? 注射美蘭的小白鼠是否存活，為什么? 4. 咖啡色是哪種物質(zhì)的顏色? 第24頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三不能 攜氧 其余Fe2+-O2親和力 Hb-Fe3+-OH 氧化劑 硝酸鹽亞硝酸鹽腸道 細菌 (棕褐色)高鐵血紅蛋白血癥 Hb-Fe2+氧離曲線左移, 釋氧 還原劑 第25頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三四、KCN中毒性缺氧 1. 屬于哪種類型的缺氧？ 2. 發(fā)生機制是什么? 3. 注射Na2S2O3的小白鼠是否存活？為什么？ 4. 玫瑰紅色是怎樣產(chǎn)生的? 第26頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三 KCN與氧化型細胞色素酶的三價鐵結(jié)合為氰化高鐵細胞色素氧化酶，使之不能還原成還原型細胞色素氧化酶，呼吸鏈中斷，組織細胞不能利用氧。cytaa3Fe3+cytaa3Fe3+- CNCN- +氧化型 氰化高鐵細胞色素氧化酶 cytaa3Fe2+還原型 第27頁，共29頁，2022年，5月20日，23點20分，星期三3、存活 機制：Na