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1、病毒的感染和檢查方法案例24-1:患者男性,30歲,間歇性黃疸一年余。病人自訴一年來(lái)經(jīng)常腹瀉、伴皮疹和體重減輕。一年前曾因在交通事故中受傷而接受過(guò)輸血。無(wú)靜脈毒品注射史,無(wú)神經(jīng)精神病家族史。查體:黃疸,肝脾大,有觸痛;無(wú)腹水征象,無(wú)Kayser-Fleischer環(huán)。 實(shí)驗(yàn)室檢查:直接高膽紅素血癥,血清轉(zhuǎn)氨酶顯著增高,HBV血清標(biāo)記物陰性,抗-HAV陰性。肝活檢顯示肝細(xì)胞呈氣球樣變形,肝實(shí)質(zhì)或緊鄰肝門區(qū)域呈局灶性炎癥并伴有肝細(xì)胞壞死。診斷為丙型肝炎病毒引起的輸血后肝炎,90%的丙肝病例與輸血傳播有關(guān)。2病毒的感染和檢查方法 思考:1.丙型肝炎病毒的傳播方式是什么?病毒還有哪些感染方式?2.病毒

2、引起感染的類型有哪些? 3.病毒性疾病怎樣進(jìn)行病原學(xué)診斷?3病毒的感染和檢查方法第一節(jié) 病毒的感染一、感染方式與途徑水平傳播 1.通過(guò)粘膜傳播 2.通過(guò)皮膚傳播 3.醫(yī)源性傳播 垂直傳播 4病毒的感染和檢查方法二、感染類型隱性感染 病毒侵入機(jī)體內(nèi)不引起臨床癥狀者為隱性感染又稱亞臨床感染。 隱性感染者也可向體外排出病毒,成為傳染源,在流行病學(xué)上有十分重要的意義。 5病毒的感染和檢查方法顯性感染 顯性感染是病毒侵入機(jī)體后,引起明顯的臨床癥狀,即病毒性傳染病。 1.急性感染 一般潛伏期短,發(fā)病急,病程數(shù)日至數(shù)周 2.持續(xù)性感染 持續(xù)性感染指病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)持續(xù)數(shù)月至數(shù)十年、甚至終身??沙霈F(xiàn)也可不出現(xiàn)

3、癥狀,但長(zhǎng)期攜帶病毒,成為重要的傳染源。 6病毒的感染和檢查方法持續(xù)性病毒感染可分為三種: (1)慢性感染:病毒感染機(jī)體后,病毒長(zhǎng)期存在體內(nèi),機(jī)體表現(xiàn)有臨床癥狀,病程持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)。如艾滋病、慢性乙型肝炎、傳染性軟疣等。 7病毒的感染和檢查方法 (2)潛伏感染:原發(fā)感染后,病毒長(zhǎng)期潛伏于機(jī)體的某一特定組織內(nèi)、既不增殖又不引起臨床癥狀、與機(jī)體處于相對(duì)平衡狀態(tài)。 8病毒的感染和檢查方法(3)遲發(fā)感染 較少見(jiàn)但后果嚴(yán)重。其特點(diǎn)是潛伏期較長(zhǎng),可達(dá)數(shù)月至數(shù)年、甚至數(shù)十年,一旦出現(xiàn)臨床癥狀,病情多呈亞急性進(jìn)行性發(fā)展過(guò)程,直至死亡。 9病毒的感染和檢查方法三、病毒的致病機(jī)制細(xì)胞水平的致病機(jī)制 1.殺細(xì)胞效應(yīng)

4、指病毒進(jìn)入機(jī)體后在細(xì)胞內(nèi)增殖,導(dǎo)致宿主細(xì)胞溶解、死亡的作用。 10病毒的感染和檢查方法 2.細(xì)胞膜改變 有些病毒感染宿主細(xì)胞后并不使細(xì)胞發(fā)生溶解、死亡,而是引起宿主細(xì)胞膜的改變: 細(xì)胞融合 細(xì)胞膜上出現(xiàn)新抗原 11病毒的感染和檢查方法12病毒的感染和檢查方法 3.包涵體形成 在某些病毒感染的細(xì)胞漿和細(xì)胞核內(nèi),用 普通顯微鏡觀察到的非正常的斑塊狀結(jié)構(gòu),即包涵體。病毒包涵體的染色性、形態(tài)大小、存在部位則因病毒不同而異。 13病毒的感染和檢查方法14病毒的感染和檢查方法 4.細(xì)胞轉(zhuǎn)化 有些病毒在侵入宿主細(xì)胞后,病毒核酸可整合于宿主細(xì)胞的基因組中,使宿主細(xì)胞的遺傳性狀發(fā)生改變,引起細(xì)胞轉(zhuǎn)化。轉(zhuǎn)化細(xì)胞的

5、特征是: 獲得旺盛生長(zhǎng)力; 轉(zhuǎn)化細(xì)胞表面可出現(xiàn)新抗原。15病毒的感染和檢查方法 5.細(xì)胞凋亡 細(xì)胞凋亡是由宿主細(xì)胞基因所指令發(fā)生的一種生物學(xué)過(guò)程。16病毒的感染和檢查方法第二節(jié) 病毒感染的檢查方法一、標(biāo)本的采集與送檢采集標(biāo)本 必須根據(jù)臨床診斷及病程不同采集不同的標(biāo)本。如鼻咽分泌物、糞便、腦脊液、血液等。檢測(cè)病毒抗體或分離病毒時(shí),應(yīng)在發(fā)病初期即急性期采集標(biāo)本;檢測(cè)抗病毒抗體時(shí),應(yīng)取雙份血清,即在急性期和恢復(fù)期各取一份血清標(biāo)本。 18病毒的感染和檢查方法標(biāo)本的處理 要盡可能做到無(wú)菌取材;對(duì)本身就含有細(xì)菌的標(biāo)本,應(yīng)加入抗生素進(jìn)行處理;對(duì)不能馬上送檢的標(biāo)本,應(yīng)置于含有抗生素的50%甘油緩沖鹽水中低溫保

6、存。 19病毒的感染和檢查方法低溫保存 標(biāo)本采集后應(yīng)立即送實(shí)驗(yàn)室檢查,不能立即檢查的標(biāo)本,應(yīng)置于-70保存。 20病毒的感染和檢查方法二、病毒的分離動(dòng)物接種 這是最原始的病毒培養(yǎng)方法。常用的動(dòng)物有小鼠、大鼠、豚鼠、兔和猴等,接種的途徑有鼻內(nèi)、皮下、皮內(nèi)、腦內(nèi)、腹腔內(nèi)、靜脈等。根據(jù)病毒種類不同,選擇敏感動(dòng)物及適宜部位接種。21病毒的感染和檢查方法雞胚培養(yǎng) 雞胚對(duì)多種病毒敏感。根據(jù)病毒種類不同,可將標(biāo)本接種于雞胚的羊膜腔、尿囊腔、卵黃囊或絨毛尿囊膜上。22病毒的感染和檢查方法23病毒的感染和檢查方法24病毒的感染和檢查方法細(xì)胞培養(yǎng) 細(xì)胞培養(yǎng)最常用于培養(yǎng)病毒,根據(jù)細(xì)胞的來(lái)源,染色體特性及傳代次數(shù)又可

7、分為下列類型:原代和次代細(xì)胞培養(yǎng),二倍體細(xì)胞株和傳代細(xì)胞系。25病毒的感染和檢查方法26病毒的感染和檢查方法 病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖可引起細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變,稱為細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE)。常見(jiàn)的CPE有細(xì)胞圓縮、空泡、聚集、拉絲、脫落、融合形成多核巨細(xì)胞、形成包涵體等。 27病毒的感染和檢查方法28病毒的感染和檢查方法三、病毒感染的血清學(xué)診斷 原理 是用已知病毒抗原來(lái)檢測(cè)病人血清中有無(wú)相應(yīng)抗體,故須待病人感染后體內(nèi)產(chǎn)生抗體時(shí)才能檢出。 另外,在采取臨床標(biāo)本及病人血清應(yīng)注意病程,必須采取患者急性期血清與恢復(fù)期血清 (雙份血清) 進(jìn)行血清學(xué)試驗(yàn)。若第2次血清抗體滴度比第1次高出4倍以上時(shí),才有診斷意義。29病毒的感染和檢查方法四、病毒感染的快速檢查 普通顯微鏡檢查電子顯微鏡檢查 免疫標(biāo)記技術(shù) 病毒核酸的檢測(cè) 30病毒的感染和檢查方法五、病毒感染的防治原則人工自動(dòng)免疫 1.滅活疫苗 流行性乙型腦炎疫苗、狂犬病疫苗和流感疫苗。 2.減毒活疫苗 脊髓灰質(zhì)炎疫苗、麻疹

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