9微生物檢驗(yàn)質(zhì)量控制

1、微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制溫州醫(yī)學(xué)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院溫州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院周鐵麗微生物檢檢驗(yàn)的質(zhì)質(zhì)量控制制質(zhì)量控制制（Quality control）是臨床微微生物學(xué)學(xué)實(shí)驗(yàn)室室為了保保證檢驗(yàn)驗(yàn)結(jié)果實(shí)實(shí)事求是是地反映映客觀存存在而建建立的操操作程序序體系。室內(nèi)質(zhì)量量控制室內(nèi)質(zhì)量量控制是是由實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室內(nèi)部部制定并并實(shí)施的的，是質(zhì)質(zhì)量保證證的核心心和基礎(chǔ)礎(chǔ)。室間質(zhì)量量控制評(píng)評(píng)價(jià)室間質(zhì)量量控制評(píng)評(píng)價(jià)是由由實(shí)驗(yàn)室室外部的的組織或或機(jī)構(gòu)對(duì)對(duì)實(shí)驗(yàn)室室進(jìn)行的的質(zhì)量評(píng)評(píng)價(jià)。檢驗(yàn)前的的質(zhì)量保保證 檢驗(yàn)前程程序：又又叫分析析前期。指從臨床床醫(yī)生開開醫(yī)囑開開始，到到分析檢檢驗(yàn)程序序啟動(dòng)時(shí)時(shí)終止的的步驟。包括括檢驗(yàn)申請(qǐng)請(qǐng)標(biāo)本的采采集

2、、運(yùn)運(yùn)送與接接收微生物檢檢驗(yàn)中的的質(zhì)量保保證人員的組組織與管管理規(guī)范的操操作規(guī)程程試劑 培養(yǎng)基設(shè)備 檢驗(yàn)過(guò)程程試劑、培培養(yǎng)基的的質(zhì)量控控制有效期外觀性能測(cè)試試保存各種試劑劑的監(jiān)控控菌種試試劑“x+v” 因子試劑條流感嗜血桿菌副流感嗜血桿菌嗜沫嗜血桿菌硝酸鹽還原試劑大腸埃希菌醋酸鈣不動(dòng)桿菌每批，以后每次靛基質(zhì)試劑大腸埃希菌產(chǎn)氣腸桿菌每批，以后每天甲基紅試劑大腸埃希菌產(chǎn)氣腸桿菌每批，以后每周V-P試劑產(chǎn)氣腸桿菌大腸埃希菌每批，以后每周常用試驗(yàn)驗(yàn)、染液液的推薦薦菌株試驗(yàn)名稱陽(yáng)性對(duì)照菌陰性對(duì)照菌血漿凝固酶試驗(yàn)金黃色葡萄球菌表皮葡萄球菌觸酶試驗(yàn)金黃色葡萄球菌肺炎鏈球菌氧化酶試驗(yàn)銅綠假單胞菌大腸埃希菌桿菌

3、肽試驗(yàn)A群鏈球菌B群鏈球菌奧普托欣試驗(yàn)肺炎鏈球菌草綠色鏈球菌革蘭染液金黃色葡萄球菌大腸埃希菌抗酸染液結(jié)核分枝桿菌混合非抗酸菌測(cè)定各種種培養(yǎng)基基性能的的菌種培養(yǎng)基質(zhì)質(zhì)控控菌株判判定定標(biāo)準(zhǔn)羊血瓊脂脂平板金黃色葡葡萄球菌菌ATCC25923生長(zhǎng)生長(zhǎng)試驗(yàn)驗(yàn)大腸埃希希菌ATCC25922生長(zhǎng)溶血反應(yīng)應(yīng)肺炎鏈球球菌ATCC19615生長(zhǎng)，溶血化膿性鏈鏈球菌ATCC6305生長(zhǎng)，溶血桿菌肽敏敏感（紙紙片法）化膿性鏈鏈球菌ATCC630510mm，敏感B群鏈球菌菌10mm，耐藥Optochin敏感（紙紙片法）肺炎鏈球球菌1518mm，敏感涎鏈球菌菌15mm，耐藥測(cè)定各種種培養(yǎng)基基性能的的菌種巧克平板板生長(zhǎng)試驗(yàn)

4、驗(yàn)淋病奈瑟瑟菌腦膜炎奈奈瑟菌流感嗜血血桿菌肺炎鏈球球菌生長(zhǎng)SS平板鼠傷寒沙沙門菌傷寒沙門門菌福志賀菌菌大腸埃希希菌腸球菌生長(zhǎng)，黑黑色菌落落中心生長(zhǎng)，無(wú)無(wú)色透明明菌落生長(zhǎng)，無(wú)無(wú)色透明明菌落部分抑制制生長(zhǎng)，紅色混混濁菌落落部分抑制制生長(zhǎng)測(cè)定各種種培養(yǎng)基基性能的的菌種麥康凱平平板大腸埃希希菌生長(zhǎng)長(zhǎng)，紅色混濁濁菌落傷寒沙門門菌生長(zhǎng)長(zhǎng)，無(wú)色透明明菌落中國(guó)藍(lán)瓊瓊脂大腸埃希希菌生長(zhǎng)，藍(lán)藍(lán)色菌落落傷寒沙門門菌生長(zhǎng)，無(wú)無(wú)色菌落落營(yíng)養(yǎng)瓊脂脂金黃色葡葡萄球菌菌大量生長(zhǎng)長(zhǎng)福志賀菌菌大量生長(zhǎng)長(zhǎng)厭氧血平平板脆弱擬桿桿菌生長(zhǎng)產(chǎn)氣莢膜膜梭菌生長(zhǎng)，溶血堿性蛋白白胨水霍亂弧菌菌大量生長(zhǎng)長(zhǎng)大腸埃希希菌抑制生長(zhǎng)長(zhǎng)測(cè)定各種種培養(yǎng)基基性

5、能的的菌種彎曲菌瓊瓊脂空腸彎曲曲菌生長(zhǎng)大腸埃希希菌部分抑制制TCBS平板霍亂弧菌菌生長(zhǎng)，黃黃色菌落落副溶血性性弧菌生長(zhǎng)，藍(lán)藍(lán)綠色菌菌落沙保弱瓊瓊脂白色念珠珠菌生長(zhǎng)大腸埃希希菌部分或完完全抑制制需氧血液液增菌液液肺炎鏈球球菌生長(zhǎng)化膿性鏈鏈球菌銅綠假單單胞菌白色念珠珠菌厭氧血液液增菌液液脆弱擬桿桿菌生長(zhǎng)各種鑒別別培養(yǎng)基基的測(cè)試試菌種培養(yǎng)基陽(yáng)陽(yáng)性對(duì)對(duì)照菌陰陰性對(duì)照照菌賴氨酸脫脫羧酶遲緩愛(ài)德德華菌費(fèi)枸櫞酸酸桿菌鳥氨酸脫脫羧酶產(chǎn)氣腸桿桿菌費(fèi)枸櫞酸酸桿菌精氨酸雙雙水解酶酶陰溝腸桿桿菌普通變形形桿菌蛋白胨水水（靛基基質(zhì)）大腸埃希希菌陰溝腸桿桿菌各種鑒別別培養(yǎng)基基的測(cè)試試菌種培養(yǎng)基陽(yáng)陽(yáng)性性對(duì)照菌菌陰陰性對(duì)對(duì)照

6、菌MR大腸埃希希菌陰溝腸桿桿菌V-P陰溝腸桿桿菌大腸埃希希菌枸櫞酸鹽鹽（西蒙蒙氏）產(chǎn)氣腸桿桿菌遲緩愛(ài)德德華菌苯丙氨酸酸脫氨酶酶雷極變形形桿菌費(fèi)枸櫞酸酸桿菌O-F試驗(yàn)管銅綠假單單胞菌（氧化型型）洛菲不動(dòng)動(dòng)桿菌（不利用用）大腸埃希希菌（發(fā)發(fā)酵型）硝酸鹽還還原大腸埃希希菌洛菲不動(dòng)動(dòng)桿菌各種鑒別別培養(yǎng)基基的測(cè)試試菌種培養(yǎng)基陽(yáng)陽(yáng)性對(duì)對(duì)照菌陰陰性對(duì)照照菌膽汁-七葉苷糞腸球菌菌化膿性鏈鏈球菌脫氧核糖糖核酸瓊瓊脂粘質(zhì)沙雷雷菌表皮葡萄萄球菌氰化鉀肉肉湯產(chǎn)氣腸桿桿菌遲緩愛(ài)德德華菌丙二酸鹽鹽產(chǎn)氣腸桿桿菌遲緩愛(ài)德德華菌尿素瓊脂脂雷極變形形桿菌（快）大腸埃希希菌肺炎克雷雷白菌（慢）半固體瓊瓊脂動(dòng)力力試驗(yàn)大腸埃希希菌肺炎

7、克雷雷白菌儀器設(shè)備備的質(zhì)量量控制設(shè)備控控制范范圍備備注高壓滅菌菌器121定期用嗜嗜熱芽胞胞桿菌測(cè)測(cè)試（每每月）孵育箱351定期加水水水浴箱370.5定期加水水、清潔潔內(nèi)壁冰箱4 2定期清潔潔內(nèi)部CO2箱5-10%淋病奈瑟瑟氏菌檢檢測(cè)效果果厭氧箱美蘭或銅銅綠假單單胞菌測(cè)測(cè)試厭氧氧條件生物安全全柜更換濾網(wǎng)網(wǎng)，紫外外線消毒毒性能檢檢測(cè)（每每三個(gè)月月）血液培養(yǎng)養(yǎng)儀培養(yǎng)瓶進(jìn)進(jìn)行少量量生長(zhǎng)試試驗(yàn)；瓶瓶位定期期校正微生物鑒鑒定儀探測(cè)部位位定期清清潔；鑒鑒定卡、條、板板測(cè)試標(biāo)本檢驗(yàn)驗(yàn)過(guò)程的的質(zhì)量控控制選擇合理理的檢驗(yàn)驗(yàn)項(xiàng)目選擇適當(dāng)當(dāng)?shù)臉?biāo)本本正確書寫寫檢驗(yàn)申申清單直接診斷斷直接發(fā)現(xiàn)現(xiàn)病原體體-膿、腦脊脊液、胸胸

8、腹水等等無(wú)菌部部位標(biāo)本本確定標(biāo)本本是否合合格，并并推測(cè)病病原體-痰液標(biāo)本本發(fā)現(xiàn)病原原體并進(jìn)進(jìn)行初步步計(jì)數(shù)-尿液標(biāo)本本為培養(yǎng)基基和培養(yǎng)養(yǎng)方法的的選擇提提供信息息病原菌的的分離培培養(yǎng)呼吸道標(biāo)標(biāo)本接種血瓊瓊脂平板板、巧克克力平板板、麥康康復(fù)凱平平板和沙沙保弱瓊瓊脂，并并將巧克克力血平平板置5%-10%CO235環(huán)境中培培養(yǎng)。糞便標(biāo)本本接種SS平板、麥麥康凱平平板或中中國(guó)藍(lán)平平板血液培養(yǎng)養(yǎng)在血液增增菌培養(yǎng)養(yǎng)期間，應(yīng)至少少在24h48h盲目翻種種一次，以后有有可疑細(xì)細(xì)菌生長(zhǎng)長(zhǎng)即刻翻翻種，盡盡早發(fā)現(xiàn)現(xiàn)病原菌菌。病原菌的的鑒定菌落形態(tài)態(tài)觀察-涂片染色色鏡檢-生化鑒定定-血清學(xué)試試驗(yàn)-氧化酶試試驗(yàn)不應(yīng)應(yīng)在糖類

9、類發(fā)酵選選擇性平平板上進(jìn)進(jìn)行，以以免假陰陰性結(jié)果果出現(xiàn)。-在腸道選選擇性平平板上應(yīng)應(yīng)挑取菌菌落進(jìn)行行生化反反應(yīng)，生生化反應(yīng)應(yīng)符合，血清學(xué)學(xué)凝集陽(yáng)陽(yáng)性者可可確認(rèn)報(bào)報(bào)告。不能從選選擇性平平板上挑挑取菌落落進(jìn)行血血清學(xué)凝凝集，會(huì)會(huì)因?yàn)榻唤徊婵乖拇嬖谠诨蚩乖膩G失失而導(dǎo)致致假陽(yáng)性性或假陰陰性。每次血清清凝集試試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)用生生理鹽水水作對(duì)照照。防止止粗糙型型菌落造造成的假假凝集藥敏試驗(yàn)驗(yàn)的質(zhì)量量控制要要點(diǎn)培養(yǎng)基紙片菌量操作孵育：時(shí)間、溫溫度、平平板放置置結(jié)果判斷斷質(zhì)控菌株株紙片擴(kuò)散散法的質(zhì)質(zhì)控菌株株金黃色葡葡萄球菌菌ATCC25923大腸埃希希菌ATCC25922大腸埃希希菌ATCC35218（用

10、于內(nèi)酰胺酶酶抑制劑劑復(fù)合制制劑）銅綠假單單胞菌ATCC27853糞腸球菌菌ATCC29212流感嗜血血桿菌（用于HTM培養(yǎng)基）ATCC49247、49766淋病奈瑟瑟菌（用用于GC瓊脂）ATCC49226肺炎鏈球球菌（用用于5%羊血MH瓊脂）ATCC49619失控的常常見(jiàn)的原原因-質(zhì)控結(jié)果果記錄錯(cuò)錯(cuò)誤-量取抑菌菌環(huán)直徑徑時(shí)讀數(shù)數(shù)錯(cuò)誤-標(biāo)準(zhǔn)菌株株被污染染或其它它改變-接種的菌菌懸液太太濃或過(guò)過(guò)淡-0.5管麥?zhǔn)蠞釢岫葮?biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)管未搖搖勻或已已過(guò)期失失效-孵育溫度度或氣體體環(huán)境不不正確-MH培養(yǎng)基質(zhì)質(zhì)量有無(wú)無(wú)問(wèn)題-含藥紙片片失效檢驗(yàn)后的的質(zhì)量保保證檢驗(yàn)后程程序：也也稱分析析后期。指檢驗(yàn)后后全部過(guò)過(guò)程。包

11、 括檢驗(yàn)結(jié)果果的評(píng)審審與報(bào)告告-報(bào)告時(shí)間、分級(jí)報(bào)告告、危急值報(bào)告及記錄標(biāo)本的處處置-感染性廢廢棄物菌種保存存方法培養(yǎng)基保保存法快速冷凍凍法冷凍干燥燥法 菌種保管管定期轉(zhuǎn)種種制備記錄錄卡專人負(fù)責(zé)責(zé)室內(nèi)全面面質(zhì)量控控制全面實(shí)施施各項(xiàng)質(zhì)質(zhì)量控制制內(nèi)容對(duì)人員要要及時(shí)進(jìn)進(jìn)行培訓(xùn)訓(xùn)和考核核嚴(yán)格審核核標(biāo)本和和結(jié)果報(bào)報(bào)告在日常標(biāo)標(biāo)本中摻摻入模擬擬標(biāo)本，進(jìn)行盲盲點(diǎn)試驗(yàn)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)誤差差，應(yīng)及及時(shí)找出出原因，進(jìn)行改改進(jìn)室間質(zhì)量量控制的的實(shí)施組織單位位：各級(jí)臨床床檢驗(yàn)中中心和參參考實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室工作任務(wù)務(wù)：定期或不不定期地地進(jìn)行熟熟練程度度考核和和盲點(diǎn)試試驗(yàn)檢查查。定期或不不定期地地舉辦各各種學(xué)習(xí)習(xí)班，提提高各級(jí)級(jí)技術(shù)人人員的技技術(shù)水平平，學(xué)習(xí)習(xí)新的知知識(shí)。提供或督督促有關(guān)關(guān)部門提提供合格格的標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)化的試試劑、抗抗血清、培養(yǎng)基基等實(shí)驗(yàn)