II型糖尿病模型的建立

1、II 型糖尿病模型的建立一、概述糖尿病是一組由于遺傳和環(huán)境因素相互作用，胰島素相對或絕對缺乏以及靶組織對胰島 素敏感性降低（胰島素抵抗）引起的碳水化合物、脂肪及蛋白質(zhì)代謝紊亂的綜合征，是一種持續(xù)高血糖為特征的、慢性、全身性代謝性疾病。起病后若未得到有效治療，隨著病程的延長，可出現(xiàn)廣泛的微血管及大血管病變，出現(xiàn)神經(jīng)、泌尿、循環(huán)等多系統(tǒng)的病理改變。目前1999(WHO)型糖尿?。阂葝u （及特發(fā)性。這類糖尿病患者必須用胰島素治療，過去又稱胰島素依賴型糖尿病。型糖尿?。阂葝u素抵抗為主伴胰島素相對缺乏，或胰島素分泌不足為主伴有胰島素抵抗。這類患其他特殊類型：由胰腺內(nèi)、外原因和其他疾病、藥物引起的繼 發(fā)妊

2、娠糖尿病。我國糖尿病患者中15.6%2型糖尿93.7%0.7%1。上世紀(jì) 80 年全球糖尿病病人1.94億。有研究者預(yù)測到2010221千萬。其潛在的最大增長人群在亞洲，約占總增長的 65%2。中國糖尿病患病率近年上升近 3 倍以上， 20 1980 1.0%1996 3.2%，患病人數(shù)占全球糖尿病病人的約 1/5學(xué)試驗方案。二、相關(guān)藥效學(xué)試驗基本內(nèi)容1、動物選擇：選用健康成年動物，常用小鼠或大鼠，也可選用兔、犬及猴等。2、動物模型 細(xì)胞，誘發(fā)動物高血糖，屬于胰島素低下型高血糖動物模型。但對于化學(xué)試劑誘發(fā)的高血糖動物模型無明顯作用。自發(fā)性糖尿病動物：可分為二型：低血清胰島素型，如BB 鼠；高血

3、清胰島素型，如obese/SHRSHR/N-cp大鼠，ob/ob、db/db、KK小鼠等。腎上腺素性高血糖模型：可根據(jù)情況選用。3、觀察指標(biāo)血糖值測定：實驗前動物禁食（自由飲水小時，然后給藥，給藥后1-3 測定血清葡萄糖值。給藥一般可采用一次性或連續(xù)數(shù)日給藥。糖耐量試驗：試驗時動物先禁食取血（為零時）， 糖（2g/kg）或口服葡萄糖（2.5g/kg）。淀粉（3-5g/kg）或蔗糖等雙糖（2.5g/kg），測定 00.512小時的血糖值或計算血糖曲線下面積。糖尿病動物進行血清胰島素水平的測定。三、藥效學(xué)試驗注意點1、關(guān)于模型制備四氧嘧啶誘導(dǎo)的高血糖動物模型模型制備的成功與否受很多因素影響，如動物

4、選擇、給藥劑量、途徑等。一般大鼠對四 靜注，給藥速度宜快。相同劑量下，腹腔注射成功率較低，而皮下注射需要增加4-5 倍量。禁食是影響造型結(jié)果的另一因素，如大鼠禁食48 小時，20mg/kg 靜注可使大多模型成功。 4 大鼠、小鼠部分動物，大約 30 天可自發(fā)性緩解至正常；造型給藥幾小時內(nèi)，有些動物，尤其家兔，有低血糖反應(yīng)，甚至死亡，可靜注葡萄糖急救。造型時四氧嘧啶應(yīng)新鮮配制，分組時各組動物的平均血糖值相差不宜大于20mg/dl，血糖值升高不符合要求的動物應(yīng)剔除。鏈脲霉素誘導(dǎo)的高血糖動物模型STZ 5min 50mg/kg15mg/kg3 天也可。大鼠或ip，小鼠STZ 誘導(dǎo)的高血糖動物模型一般

5、不自STZ 0.1mol/L 72h 血糖可穩(wěn)定升高，有三多癥狀。血糖在11.1mmol/L 以上可作為成功模型選用。造型時STZ 其它高血糖動物模型BB 大鼠，NOD 小鼠及中國地鼠；高血清胰島素型可選用ob/ob db/db KK 2 型糖尿病特點。但要求飼養(yǎng)條新藥的進一步評價時，選用這類動物是有意義的。另外，腎上腺素（）240g/kg 皮下注射。其機制是進入體內(nèi)促進肝Freunds +Freunds 佐劑免疫動物，均可2 種模型由于與臨床情況有一定差異，不太常用。2、關(guān)于 2 型糖尿病動物模型的制備問題目前最常應(yīng)用的糖尿病動物模型不管是四氧嘧啶及STZ 與 1 型糖尿病的發(fā)34。雖然自發(fā)

6、性糖尿病動物可有高胰島素血癥及胰島素抵抗，類似人類 2 型糖尿病特點，但其較高的要求條件使其在藥效學(xué)研究中的應(yīng)用受到很大限制。針對 2 型糖尿病的特點，目前有關(guān) 2 型糖尿病模型制備常采取下列方法567：(10%)一個月，誘發(fā)出胰島素抵抗，繼以低劑量STZ點。 周后可出現(xiàn)體重?zé)o明顯變2型糖尿病臨床癥狀相符。用STZ2型糖尿病表現(xiàn)。2型糖尿病模型采用占攝入熱卡61%主要是飽和脂肪酸的動物脂肪，其中蛋白質(zhì)占19%，碳水化合物占20%，脂肪占61%)7周后，大鼠可下丘腦性糖尿病，用電凝法或注射硫代葡萄糖損傷丘腦下部腹內(nèi)側(cè)核（）樞,直至產(chǎn)生糖尿病。自發(fā)性 II 自然的情況下發(fā)生糖尿病。已用于研究的自發(fā)

7、性糖尿病動物約 20 種，可分為兩類：一類為另一類為胰島素抵抗性高血糖癥，其II型糖尿病模型。3、模型選擇的合理性由于 1 2 1 型糖尿病的胰島 細(xì)胞被破壞，導(dǎo)致胰8。選用模型不當(dāng)對正確評價1 2 型糖尿病類似的動物模型為主進行藥效學(xué)試驗。4、其它應(yīng)根據(jù)受試藥物的藥理作用特點選擇不同的試驗方案，如能夠促進胰島 細(xì)胞分泌胰島一些糖尿病的離體試驗，如分離、培養(yǎng)脂肪細(xì)胞、胰島細(xì)胞進行有關(guān)糖代謝試驗?？傊?，結(jié)合受試藥物的作用特點、擬定適應(yīng)癥制備合適的動物模型，選擇合理的觀察指 參考文獻向紅丁.糖尿病的流行病學(xué)、診斷分型及防治原則.中華醫(yī)學(xué)信息導(dǎo)報.2004，19（5）：18-19嚴(yán)桂民.II.2003；3（6）：3-5嵇揚，張癸榮，王文俊.建立四氧嘧啶糖尿病模型的研究.中醫(yī)藥學(xué)刊.2003；21（7