羅氏試劑盒說(shuō)明書(shū) Ferritin 04366522001-en-t

1、鐵蛋白Ferritin04366522001V9鐵蛋白FerritinElecsys 和 cobas e 分析儀 4/5 2009-09， V 9 中文2009-09， V 9 中文 5/5 Elecsys 和 cobas e 分析儀REF03737551 190 100測(cè)試本試劑盒適用的分析儀Elecsys 1010Elecsys 2010MODULAR ANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601主要用途用免疫學(xué)方法定量測(cè)定人血清或血漿中鐵蛋白的含量。電化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定試劑，適用于羅氏Elecsys和cobas e免疫測(cè)定分析儀。臨床應(yīng)用鐵蛋白是一種大分子蛋白，

2、分子量至少達(dá)440kD（視其內(nèi)鐵含量多少而定），其中包括一個(gè)由24個(gè)亞單元構(gòu)成的蛋白質(zhì)外殼（去鐵鐵蛋白）和一個(gè)平均約含2500個(gè)三價(jià)鐵離子的鐵芯（在肝臟和脾臟的鐵蛋白中）。1鐵蛋白傾向于形成寡聚物。當(dāng)其在存儲(chǔ)器官的細(xì)胞中過(guò)量存在時(shí)，易在溶酶體中形成半結(jié)晶狀的血鐵黃素。在等電聚焦技術(shù)的幫助下，鐵蛋白至少可以被識(shí)別出20中異質(zhì)體。2它們之間的微觀差異主要是由于所含的酸性H亞單位和弱堿性的L亞單位的不同所致。主要的鐵蛋白異質(zhì)體負(fù)責(zé)鐵的長(zhǎng)期存儲(chǔ)功能，其大部分存在于肝臟，脾臟和骨髓中。1,3酸性的鐵蛋白異質(zhì)體主要存在于心肌、胎盤(pán)和腫瘤組織中。它們的鐵含量較低，可能的功能是在多種綜合體中充當(dāng)鐵轉(zhuǎn)移的中間體

3、。4,5,6鐵蛋白的測(cè)定是明確鐵代謝狀況的適用方法。在治療初期對(duì)鐵蛋白含量進(jìn)行測(cè)定是對(duì)體內(nèi)鐵含量進(jìn)行估計(jì)的典型方法。網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)（RES）中的鐵存量的缺乏可以在極早期就被檢測(cè)出。7臨床上，可將20g/L（ng/mL）作為檢測(cè)潛伏前期鐵缺乏的臨界值。該值可作為可靠指標(biāo)用于提示可供合成血紅蛋白動(dòng)員的鐵儲(chǔ)備的耗竭。潛在的鐵缺乏被定義為鐵蛋白的閾值低于12g/L（ng/mL）。以上兩種判斷值都不需要其它實(shí)驗(yàn)室說(shuō)明，即使在血象提供的形態(tài)學(xué)指標(biāo)仍然正常的情況下仍是如此。如低下的鐵蛋白水平同時(shí)伴有小細(xì)胞低色素性貧血，則提示鐵缺乏。1如鐵蛋白水平升高并同時(shí)可排除鐵分布紊亂的可能性，則表示體內(nèi)鐵含量過(guò)高。400

4、g/L（ng/mL）為判斷閾值。鐵蛋白的升高同時(shí)可見(jiàn)于以下腫瘤：急性白血病，霍奇金病以及肺、結(jié)腸、肝臟和前列腺的惡性腫瘤。鐵蛋白的檢測(cè)對(duì)肝臟轉(zhuǎn)移性腫瘤也具有診斷價(jià)值。研究表明76%的肝臟轉(zhuǎn)移性腫瘤患者的鐵蛋白水平均高于400 g/L（ng/mL）。鐵蛋白值的升高可能是由于細(xì)胞壞死、紅細(xì)胞生成障礙或腫瘤組織中合成增多造成的。兩種小鼠單克隆抗體-M-4.184和M-3.170-在檢測(cè)中被用于形成抗原抗體夾心復(fù)合物。檢測(cè)原理雙抗體夾心法，總檢測(cè)時(shí)間：18分鐘第一次孵育：10l標(biāo)本、生物素化的抗鐵蛋白單克隆抗體和釕（Ru）a標(biāo)記的抗鐵蛋白特異性單克隆抗體一起反應(yīng)形成抗原抗體夾心復(fù)合物。第二次孵育：添加

5、包被鏈霉親和素的磁珠微粒。該復(fù)合物通過(guò)生物素和鏈霉素之間的反應(yīng)結(jié)合到微粒上。將反應(yīng)液吸入測(cè)量池中，通過(guò)電磁作用將磁珠吸附在電極表面。未與磁珠結(jié)合的物質(zhì)通過(guò)ProCell被去除。給電極加以一定的電壓，使復(fù)合體化學(xué)發(fā)光，并通過(guò)光電倍增器測(cè)量發(fā)光強(qiáng)度。儀器自動(dòng)通過(guò)2點(diǎn)校正的定標(biāo)曲線和試劑條形碼提供的主曲線計(jì)算得到檢測(cè)結(jié)果。a)Tris(2,2-bipyridyl) ruthenium(II) -complex (Ru(bpy)三聯(lián)吡啶釕試劑工作溶液M包被鏈霉親和素的磁珠微粒（透明瓶蓋），1瓶，6.5ml；包被鏈霉親和素的磁珠微粒，0.72mg/ml；防腐劑。R1 生物素化的抗鐵蛋白抗體（灰蓋），1瓶

6、，10mL：生物素化抗鐵蛋白單克隆抗體（小鼠）3.0mg/L；磷酸鹽緩沖液100mmol/L，pH值7.2；防腐劑。R2 Ru(bpy)32+標(biāo)記的抗鐵蛋白抗體（黑蓋），1瓶，10mL；釕標(biāo)記的抗鐵蛋白單抗6.0mg/L；磷酸鹽緩沖液100mmol/L，pH 值7.2；防腐劑。警告和注意事項(xiàng)僅用于體外診斷。在使用本試劑盒時(shí)必需遵循所有試驗(yàn)室試劑操作的注意事項(xiàng)。所有廢棄物必需按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)進(jìn)行處置。專(zhuān)業(yè)人員可要求獲得安全數(shù)據(jù)報(bào)告。避免試劑和樣本（樣本、定標(biāo)液和質(zhì)控品）產(chǎn)生氣泡。試劑處理試劑盒（M、R1和R2）為即用型，不能分開(kāi)使用。試劑相關(guān)信息可以通過(guò)試劑條形碼讀取。儲(chǔ)存及穩(wěn)定性存放于28請(qǐng)垂直擺

7、放Elecsys 鐵蛋白STAT試劑盒，確保使用前儀器通過(guò)自動(dòng)攪拌能夠完全混勻磁珠微粒。穩(wěn)定性：未開(kāi)封試劑，28有效期內(nèi)均可使用開(kāi)封試劑，2812周放置分析儀MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601上6周放置分析儀Elecsys 2010和cobas e 411上6周放置分析儀Elecsys 1010上4周（試劑交替放置于冰箱和20-25的分析儀中，持續(xù)開(kāi)蓋的情況下至多20小時(shí)樣本的采集和準(zhǔn)備僅以下羅列的樣本通過(guò)檢測(cè)要求。血清樣本須用標(biāo)準(zhǔn)試管。肝素鋰、肝素鈉、K3-EDTA和枸櫞酸鈉抗凝的血漿都適用。使用枸櫞酸鈉抗凝的血漿時(shí)，結(jié)果必須按10校正。標(biāo)準(zhǔn)：回收率在血清值

8、的90-110%以?xún)?nèi)或斜率0.9-1.1截距0.95。穩(wěn)定性：2-8保存7天，-20保存12選擇合適的試管進(jìn)行不同類(lèi)型樣本的采集，不是所有的試管均可用于檢測(cè)。不同廠商的樣本采集系統(tǒng)可能含有不同的物質(zhì)，某些情況下會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。如果使用原始管進(jìn)行檢測(cè)（樣本前處理系統(tǒng)）時(shí)，應(yīng)遵循生產(chǎn)商所提供的指導(dǎo)。有沉淀的樣本和冰凍樣本檢測(cè)前必須先作離心處理。避免使用熱滅活的樣本。避免使用添加疊氮化合物的樣本和質(zhì)控品。檢測(cè)前，樣本、定標(biāo)液及質(zhì)控品須室溫平衡(20-25由于蒸發(fā)因素的影響，樣本、定標(biāo)液及質(zhì)控品在分析儀上的檢測(cè)必須2小時(shí)內(nèi)完成。提供的物品參閱“試劑工作溶液”章節(jié)。需要的物品（未提供）REF037375

9、86190，鐵蛋白定標(biāo)液，規(guī)格41mLREF04415299190，PreciControl Anemia，規(guī)格22mL，分別為PreciControl Anemia 1、2和3，或者REF11776452122，PreciControl腫瘤標(biāo)志物，規(guī)格23mL，分別為PreciControl腫瘤標(biāo)志物1和2（美國(guó)專(zhuān)用）REF11732277122，Diluent Universal，216ml樣本稀釋液，或者REF03183971122，Diluent Universal，236ml樣本稀釋液實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)設(shè)備Elecsys 1010、2010、MODULAR ANALYTICS E170或co

10、bas e分析儀Elecsys 1010/2010和cobas e 411分析儀所需材料：REF11662988122，ProCell，6380 mL，系統(tǒng)緩沖液REF11662970122，CleanCell，6380mL，測(cè)量池洗液 REF11930346122，Elecsys SysWash，1500mL，附加洗液REF11933159001，SysClean適配器REF11706829001，Elecsys 1010分析杯，1232反應(yīng)管REF11706802001，Elecsys 2010分析杯，6060反應(yīng)管REF11706799001，Elecsys 2010分析吸頭，30120

11、移液管吸頭cobas e 601分析儀所需材料：REF04880340190，ProCell M，22LREF04880293190，CleanCell M，22LREF12135027190，CleanCell M，12L測(cè)量池洗液REF03023141001，PC/CC杯，12個(gè)用于在檢測(cè)前預(yù)熱Procell M及Cleancell MREF03005712190，ProbeWash M，1270mL 清洗液，用于在檢測(cè)完畢后或更換試劑時(shí)清洗試劑針REF12102137001，反應(yīng)杯/吸頭組合裝84反應(yīng)杯/吸頭組合裝48盒，廢物袋 REF03023150001，WasteLiner，廢物袋

12、 REF03027651001，系統(tǒng)清潔適配器M所有分析儀需要：REF11298500316，Elecsys SysClean，5100mL系統(tǒng)清洗液REF11298500160，Elecsys SysClean，5100mL系統(tǒng)清洗液（美國(guó)專(zhuān)用）檢測(cè)要優(yōu)化檢測(cè)性能，請(qǐng)遵照本說(shuō)明書(shū)中有關(guān)分析儀的相關(guān)指導(dǎo)，并參照分析儀操作手冊(cè)。試劑使用前分析儀自動(dòng)攪拌磁珠微粒，使其處于懸浮狀態(tài)。試劑相關(guān)信息可通過(guò)條形碼自動(dòng)讀取，在特殊情況下，分析儀無(wú)法自動(dòng)讀取條碼信息時(shí)，請(qǐng)輸入條碼標(biāo)簽上的15位數(shù)字序列。MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys2010和cobas e分析儀：將冷藏試劑室溫平

13、衡至20C左右，放置分析儀的試劑盤(pán)（20C）內(nèi)。避免泡沫產(chǎn)生。分析儀能自動(dòng)調(diào)節(jié)試劑溫度和開(kāi)、關(guān)各試劑盒瓶蓋。Elecsys 1010 分析儀: 將冷藏試劑室溫平衡至20-25C左右，放置分析儀的試劑盤(pán)（20- 25C）內(nèi)。避免泡沫產(chǎn)生。使用前后手動(dòng)開(kāi)關(guān)試劑盒瓶蓋。使用后保存于2定標(biāo)溯源性：采用Elecsys鐵蛋白檢測(cè)（REF11820982）對(duì)Elecsys鐵蛋白檢測(cè)（REF03737551）進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。Elecsys鐵蛋白檢測(cè)（REF11820982）采用Enzymun-Test鐵蛋白法進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。后者又采用第一國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)（IS）NIBSC（國(guó)家生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品研究所）“鐵蛋白試劑（人肝臟

14、）”80/602進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。采用更新的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)（第二國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)IS 80/578和第三國(guó)際標(biāo)準(zhǔn) IS 94/572）執(zhí)行包括一個(gè)已發(fā)表的研究9的回收率研究評(píng)估Elecsys鐵蛋白檢測(cè)的溯源性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)一致性很好。每個(gè)Elecsys鐵蛋白試劑組都有一張條形碼編碼的標(biāo)簽，其中含有定標(biāo)各個(gè)試劑批次的專(zhuān)用信息。通過(guò)使用Elecsys鐵蛋白定標(biāo)液，預(yù)定義的廠商定標(biāo)曲線適用于分析儀。定校頻率：新鮮試劑必須進(jìn)行定標(biāo)（新試劑盒注冊(cè)后在分析儀上放置不能超過(guò)24小時(shí)）。以下情況建議重新進(jìn)行定標(biāo)：MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys 2010和cobas e分析儀：使用同一批號(hào)試劑，1個(gè)月（2

15、8天）后7天后（同一試劑盒在分析儀上使用）Elecsys 1010分析儀：使用每個(gè)試劑盒7天后（室溫20-253天后（室溫20-32所有分析儀：根據(jù)需要：如失控。質(zhì)控可使用Elecsys PreciControl Anemia 1、2和3或Elecsys PreciControl 腫瘤標(biāo)志物1和2。多個(gè)濃度范圍的質(zhì)控品至少每24小時(shí)內(nèi)檢測(cè)一次，每次更換試劑盒或定標(biāo)后也須進(jìn)行質(zhì)控。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)各自的情況設(shè)定合適的控制限和質(zhì)控周期。質(zhì)控值必須處于規(guī)定的控制限內(nèi)。若失控每個(gè)試驗(yàn)室必須采取相應(yīng)的糾正措施。質(zhì)控應(yīng)遵循適用的政府法規(guī)和當(dāng)?shù)刂敢?。?jì)算分析儀自動(dòng)計(jì)算每份樣本的分析物濃度（以g/mL或ng/

16、mL為單位）。干擾因素本測(cè)定法不受黃疸（膽紅素1112mol/L或65mg/dL）、溶血（血紅蛋白0.31mmol/L或0.5g/dL）、脂血（脂肪乳劑3300mg/dL）和生物素205nmol/L或5mg/天），必須在末次生物素治療8小時(shí)后采集樣本。濃度為2500 IU/ml的類(lèi)風(fēng)濕因子對(duì)檢測(cè)無(wú)影響。鐵蛋白濃度為100000g/L（ng/mL）沒(méi)有觀察到高劑量鉤鐮效應(yīng)。體外對(duì)19種常用藥物進(jìn)行試驗(yàn)，未發(fā)現(xiàn)會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。治療濃度的Fe2+和Fe3+不會(huì)影響Elecsys鐵蛋白檢測(cè)。少數(shù)病例中極高濃度分析物特異性抗體，鏈霉素抗體或釕抗體會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。合適的試驗(yàn)設(shè)計(jì)可將影響因素降到最低。作為診

17、斷指標(biāo)，必須結(jié)合患者病史，臨床檢查和其他臨床資料來(lái)綜合評(píng)估檢測(cè)結(jié)果。檢測(cè)范圍0.500-2000g/L（ng/mL）（通過(guò)最低檢出限和廠商定標(biāo)曲線的最高值確定）。低于檢出限的值報(bào)告2000 g/L （ng/mL）(或1：50稀釋結(jié)果可報(bào)告至100000g/L（ng/mL）)。稀釋高于檢測(cè)范圍的標(biāo)本可用通用稀釋液（Elecsys Diluent Universal）稀釋。建議1：50稀釋?zhuān)∕ODULAR ANALYTICS E170、Elecsys 1010/2010 或cobas e分析儀可以自動(dòng)稀釋?zhuān)部梢允止は♂專(zhuān)?。稀釋?biāo)本的鐵蛋白濃度必須高于40 g/L （ng/mL）。如用手工稀釋?zhuān)Y(jié)

18、果應(yīng)乘稀釋倍數(shù)。如果是機(jī)器自動(dòng)稀釋?zhuān)琈ODULAR ANALYTICSE170、Elecsys 1010/2010 和cobas e軟件會(huì)自動(dòng)計(jì)算結(jié)果。期望值10采用Enzymun-Test方法測(cè)試224名健康受試者（104名女性大部分處于絕經(jīng)前期和120名男性）標(biāo)本的結(jié)果如下。該值表示為第5至第95百分位數(shù)。男性，2060歲：20400 g/L （ng/mL）女性：1760歲：13150 g/L （ng/mL）每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定參考范圍的適用性，必要時(shí)建立本實(shí)驗(yàn)室的參考范圍。特殊的性能指標(biāo)試劑在各分析儀上的性能試驗(yàn)數(shù)據(jù)如下。各實(shí)驗(yàn)室得出的數(shù)據(jù)可能會(huì)稍有差異。精密度應(yīng)用Elecsys試劑

19、盒、人血清樣本和質(zhì)控品驗(yàn)證精密度，按照CLSI（臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)研究所）的改良協(xié)議（EP5-A）執(zhí)行：每天6次，共10天(n=60)；在MODULAR ANALYTICS E170分析儀上的可重復(fù)性，n=21。下面是獲得的結(jié)果。b）可重復(fù)性批內(nèi)精密度c）TM腫瘤標(biāo)志物分析靈敏度（最低檢出限）0.50g/L（ng/mL）最低檢出限指區(qū)別于零濃度的分析物最低檢測(cè)濃度。最低檢出限是最低濃度標(biāo)準(zhǔn)品+2SD得到的濃度（廠商定標(biāo)品1+2SD，批內(nèi)精密度，n=21）。方法學(xué)比較使用臨床標(biāo)本比較Elecsys鐵蛋白檢測(cè)，REF03737551（y）和Elecsys鐵蛋白檢測(cè)，REF11820982（x），相關(guān)

20、性數(shù)據(jù)如下：檢測(cè)標(biāo)本數(shù)：134Passing/Bablok11 線性回歸y1.00 x0.72 y0.99x4.11r0.984 r0.999樣本濃度在2.68至1891g/L（ng/mL）之間。分析特異性人肝臟鐵蛋白回收率100人脾臟鐵蛋白回收率85人心臟鐵蛋白回收率1參考文獻(xiàn)1. Wick M, Pinggera W, Lehmann P. Ferritin in Iron Metabolism - Diagnosis of Anemieas (second edition). Springer-Verlag 1995;ISBN 3-211-82525-8 and ISBN 0-387-8

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