羅氏試劑盒說明書 Anti-HBs

1、11899040001V15Anti-HBs乙肝病毒表面抗體PAGE 2 2008-06 V5 中文 Elecsys 和cobas e分析儀11820524 122 100人次 試劑盒適用于以下分析儀Elecsy 1010Elecsys 2010MODULARANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601主要用途：用免疫學(xué)方法定量測定人血清或血漿中的抗乙肝表面抗原抗體(抗HBs)。電化學(xué)發(fā)光免疫測定試劑，適用于羅氏Elecsys和cobas e免疫測定分析儀。臨床應(yīng)用: 抗HBs (一般是IgG)出現(xiàn)在感染乙肝病毒或接種乙肝疫苗以后?？贵w針對HBsAg 的a決定簇及各

2、亞類的決定簇。在乙肝疫苗方面，抗HBs檢測可以檢查接種疫苗的必要性和效果。此外，抗HBs檢測還可用于乙肝感染急性期以后的病程監(jiān)測。Elecsys 抗HBs檢測采用從人血清提純的HBsAg亞型ad和ay抗原。原理：采用雙抗原夾心法原理，整個過程18分鐘完成。 第1步：40l標(biāo)本中的抗HBs、生物素化的HBsAg（ad/ay）和釕（Ru）標(biāo)記的HBsAg（ad/ay）混勻，形成夾心復(fù)合物。 第2步：加入鏈霉親和素包被的微粒，讓上述形成的復(fù)合物通過生物素與鏈霉親和素間的反應(yīng)結(jié)合到微粒上。 第3步：反應(yīng)混和液吸到測量池中，微粒通過磁鐵吸附到電極上，未結(jié)合的物質(zhì)被清洗液洗去，電極加電壓后產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，通

3、過光電倍增管進(jìn)行測定。檢測結(jié)果由機器自動從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出。此曲線由試劑條形碼掃描入儀器的原版標(biāo)準(zhǔn)曲線通過2點定標(biāo)得到。試劑：M：鏈霉親和素包被的微粒（透明瓶蓋），1瓶，6.5ml。粒子濃度0.72mg/ml，含防腐劑。R1：生物素化的HBsAg（灰蓋），1瓶，10ml，濃度高于0.5mg/l，MES緩沖液85mmol/l，pH6.5，含防腐劑。R2：Ru(bpy)32+標(biāo)記的HBsAg（黑蓋），1瓶，8ml。濃度高于0.3mg/l，MES緩沖液0.085mol/l，pH 6.5含防腐劑。Cal 1 定標(biāo)液（白蓋）1，2瓶，1.3ml/瓶 ，含抗HBs，人血清, 含防腐劑Cal 2 定標(biāo)液（黑蓋

4、）2，2瓶，1.3ml/瓶, 含抗HBs,人血清, 含防腐劑警告和注意事項僅用于體外診斷。在使用本試劑盒時必需遵循所有試驗室試劑操作的注意事項。所有廢棄物必需按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)進(jìn)行處置。專業(yè)人員可要求獲得安全數(shù)據(jù)單。所有人來源材料必須視為有潛在感染性的物質(zhì)。來源于人血液的所有產(chǎn)品由獻(xiàn)血者血液單獨特殊制備而成，并經(jīng)檢測HBSAg、HCV抗體、HIV抗體，均為陰性。所應(yīng)用的檢測方法經(jīng)FDA認(rèn)可或符合歐洲法令98/79/EC附件II列表A。所采用的HBsAg原始材料在使用生物素或釕復(fù)合物標(biāo)記前，均經(jīng)60C加熱15分鐘滅活病毒。另外，所有病毒顆粒都經(jīng)超速離心法去除。但由于任何實驗方法都不能絕對地排除潛在感染

5、的危險，故該產(chǎn)品仍需視作病人標(biāo)本一樣仔細(xì)處理。接觸者必須遵循健康專業(yè)機構(gòu)相應(yīng)的法規(guī)9.10。若試劑超過保質(zhì)期，則不能再使用。避免試劑和標(biāo)本（標(biāo)本、定標(biāo)液和質(zhì)控液）產(chǎn)生泡沫。試劑處理試劑置于與系統(tǒng)相容的瓶內(nèi)即可立即使用.Elecsys1010/2010和cobas e 411分析儀：在2025C定標(biāo)過程中定標(biāo)液應(yīng)放在分析儀上。使用后，應(yīng)盡快關(guān)閉瓶蓋，并將其儲存在28C。因為可能會發(fā)生蒸發(fā)，每瓶定標(biāo)液定標(biāo)次數(shù)不宜超過5次。MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析儀：除非定標(biāo)需要全部量，否則將即用型定標(biāo)液裝入空的有蓋小瓶，并將提供的標(biāo)簽貼在分裝的其余小瓶上，儲存在28

6、C。每瓶分裝定標(biāo)液只可用一次。正確操作的有關(guān)信息請參見各試劑條形碼。儲存和穩(wěn)定性：存放在2-8 度，請垂直擺放試劑盒，以確保使用前微粒自動混合完全有效。未開封，可穩(wěn)定至標(biāo)明的保質(zhì)期。M，R1 ，R2試劑開封后，2-8 度, 8周；在儀器上(Elecsys 2010和cobas e 411)，4周，在儀器上(MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601)，8周，在儀器上(Elecsys 1010)， 3周（在分析儀上室溫放置和冰箱交替放置）；開瓶后使用時間累計約20小時。Cal 1，Cal 2開封后， 28 度, 8周；在儀器上(Elecsys 2010和cobas e

7、4112025)，5小時，在儀器上(MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601)，只能使用一次。注意：請勿倒置定標(biāo)液，保證瓶蓋內(nèi)未積存定標(biāo)液。標(biāo)本采集和準(zhǔn)備：血清：使用標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)本管或含分離膠管采集血漿：EDTA-K3抗凝。標(biāo)準(zhǔn)：在血清測定值90110范圍內(nèi)波動或斜率0.91.1截距0.95如用肝素鋰、枸櫞酸鈉或氟化鈉/草酸鉀抗凝，測定值會降低約25%。請勿使用含分離膠的肝素鋰血漿管采集標(biāo)本。標(biāo)本在28度可穩(wěn)定6天，-20度可穩(wěn)定3個月。標(biāo)本可凍融6次。所示標(biāo)本種類均和商品化標(biāo)本采集管一起進(jìn)行測定。不同生產(chǎn)商制造的標(biāo)本采集管含不同材料可能會影響測定結(jié)果。在樣品采集管中處理

8、樣品過程中，謹(jǐn)遵標(biāo)本采集管生產(chǎn)商的操作規(guī)程。有沉淀的標(biāo)本和凍融標(biāo)本使用前需離心。不可使用加熱滅活的標(biāo)本。標(biāo)本和質(zhì)控品禁用疊氮鈉防腐。標(biāo)本、定標(biāo)液和質(zhì)控品在測定前應(yīng)置于室溫。因為可能會發(fā)生蒸發(fā)，樣品和定標(biāo)液需在2小時內(nèi)完成檢測。提供的材料：參見“試劑工作液”章節(jié)26瓶標(biāo)簽需要的材料（未提供）：貨號11876317, PreciControl 抗-HBs, 8 x 1.3 mL PreciControl Anti-HBs1 and 2 貨號11732277, 通用稀釋液, 2 x 16 mL 或貨號03183971, 通用稀釋液, 2 x 36 mL 貨號11776576,定標(biāo)液Vials, 2

9、x 56帶蓋小瓶常規(guī)實驗室儀器 Elecsys 2010, MODULAR ANALYTICS E170 或 cobas e 分析儀Elecsys 2010 and cobas e 411 分析儀配件:系統(tǒng)緩沖液,ProCell,貨號11662988, 6 x 380 mL 測量池清潔液, CleanCell,貨號11662970,6 x 380 mL 附加洗液,Elecsys SysWash,貨號11930346, 1 x 500 mL SysClean接合器,貨號11933159, Elecsys 2010 反應(yīng)杯,貨號11706802, 60 x 60 Elecsys 2010 吸頭,貨

10、號11706799, 30 x 120 MODULAR ANALYTICS E170 and cobas e 601 分析儀配件:系統(tǒng)緩沖液, ProCell M，貨號04880340, 2 x 2 L 測量池清潔液，CleanCell M,貨號04880293, 2 x 2 L PC/CC-杯, 貨號0302314112 杯，用于測定前預(yù)熱 ProCell M和 CleanCell M 探針清潔液，ProbeWash M,貨號03005712, 12 x 70 mL，用于更換試劑后的清潔。檢測清潔液, PreClean M,貨號03004899 , 吸頭/反應(yīng)杯試劑盒 M，貨號1210213

11、7, 48 盒x 84 反應(yīng)皿 或 吸頭, 廢物袋廢物袋,貨號03023150 SysClean Adapter M，貨號03027651, 所有 分析儀配件:系統(tǒng)清潔液, Elecsys SysClean，貨號11298500, 5 x 100 mL 檢測方法：按儀器操作說明進(jìn)行操作。檢查試劑與消耗品是否充足。使用前需混勻微粒。儀器通過掃描試劑盒條形碼自動輸入測試所需的特異性參數(shù)，不需手工輸入。如果特殊情況下儀器無法閱讀條形碼，可以手工輸入15位數(shù)字。MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 and cobas e： 將冷藏試劑預(yù)溫到20 度后放置于儀器的試劑

12、盤上，避免產(chǎn)生泡沫。系統(tǒng)自動控制試劑溫度和開/關(guān)試劑瓶蓋。Elecsys1010：將冷藏試劑預(yù)溫到2025度后放置于儀器的樣品/試劑盤上（室溫2025度），避免產(chǎn)生泡沫。使用前手工打開試劑瓶蓋，使用后手工關(guān)閉試劑瓶蓋并放回28 度。將抗HBs Cal 1和Cal 2放在分析儀的標(biāo)本測試區(qū)。只在標(biāo)定時打開瓶蓋。條形碼自動提供定標(biāo)所需的數(shù)據(jù)資料。定標(biāo)完成后，將Cal 1和Cal 2放回28 度保存或直接棄去（MODULAR ANALYTICS E170 和 cobas e 601 分析儀）。定標(biāo)：溯源性：該方法已經(jīng)過WHO1977第一標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)化。每一個Elecsys抗HBs試劑盒條形碼內(nèi)都含有該試

13、劑盒定標(biāo)信息。通過使用抗HBs定標(biāo)液1和2將預(yù)定義標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)用于分析儀。定標(biāo)頻率：每批抗HBs試劑盒必須用新鮮試劑和抗HBs Cal 1,Cal 2定標(biāo)一次。另外，以下情況需要再次定標(biāo)：Elecsys2010： 一個月（同一批號試劑） 7天（放置儀器上的同一試劑盒）Elecsys1010： 每一試劑盒做一次 7天（室溫2025 度） 3天（室溫2532 度）各種分析儀均適用的情況： 根據(jù)要求進(jìn)行定標(biāo)：如質(zhì)控結(jié)果超出范圍時。 根據(jù)規(guī)定進(jìn)行多次標(biāo)定。定標(biāo)液范圍（IU/l）： Cal 1： 4-15；Cal 2： 350-600質(zhì)控：用 Elecsys 抗- HBs質(zhì)控品1和2 （PreciCont

14、rol）。質(zhì)控品1和質(zhì)控品2至少每24小時或每一次定標(biāo)后測定一次。質(zhì)控間隔期應(yīng)適用于各實驗室的具體要求。檢測值應(yīng)落在確定的范圍內(nèi)，如出現(xiàn)質(zhì)控值落在范圍以外，應(yīng)采取校正措施。如果需要，重復(fù)測定相關(guān)標(biāo)本。計算：對每一個標(biāo)本，儀器會自動計算抗- HBs含量，單位是IU/l。干擾因素：該方法不受黃疸（膽紅素513mol/L或30mg/dL）、溶血（血紅蛋白0.93mmol/L或1.5g/dl）、脂血（脂質(zhì)1500mg/dl）和生物素5mg/天）治療的病人，至少要等最后一次攝入生物素8小時后才能采血。不受類風(fēng)濕因子干擾（2100U/ml）。抗HBs濃度高達(dá)150，000IU/ml可能出現(xiàn)鉤狀效應(yīng)。罕見病

15、例中抗HBs濃度低于150，000IU/ml不能完全排除鉤狀效應(yīng)。如出現(xiàn)測定值過低，比如再次疫苗之后，應(yīng)考慮1：100稀釋樣品后重新測定。17種常用藥物經(jīng)試驗對本測定無干擾。偶爾會遇到抗鏈酶親和素抗體和抗釕抗體的干擾。檢測中的添加劑可最大程度地減少影響。MODULAR ANALYTICS E170 and cobas e 601 分析儀: 如果同時進(jìn)行Elecsys HBsAg, HBsAg II/抗HBs 和 HBeAg/抗HBe檢測，請確保在軟件的“Special Wash”和“Step1” (wash execute)部分輸入這些檢測項目。具體請參見操作手冊。Elecsys 抗HBsAg

16、測定結(jié)果應(yīng)結(jié)合病人病史、臨床其他檢查結(jié)果綜合起來進(jìn)行診斷。檢測范圍：2.001000IU/ml(由最低檢測限以及標(biāo)準(zhǔn)曲線最大檢測值來定義)低于最低檢測限的測定值報告為 1000 IU/l（或100倍稀釋測定值高達(dá)100，000 IU/l）稀釋：高于檢測范圍的標(biāo)本可用通用稀釋液稀釋。建議1:100稀釋（由MODULAR ANALYTICS E170，Elecsys1010/2010和cobas e自動稀釋或手工稀釋）稀釋后抗HBs含量必須高于10IU/ml。如用手工稀釋，結(jié)果應(yīng)乘上稀釋倍數(shù)。如果是機器自動稀釋，機器會自動計算結(jié)果。手工稀釋也可用陰性人血清進(jìn)行。注意：抗HBs抗體為異質(zhì)性，所以在某

17、些情況下可能會導(dǎo)致非線性稀釋效應(yīng)。期望值：結(jié)果的解釋：標(biāo)本的抗HBs含量10IU/l判斷為抗HBs無反應(yīng)性。標(biāo)本的抗HBs含量10IU/l判斷為抗HBs有反應(yīng)性。注意：由于抗體的多樣性，抗HBs的測定值可根據(jù)檢測方法的不同而改變。用不同廠家生產(chǎn)的試劑測出的結(jié)果可相差4倍（偶有相差10倍者）。在疫苗接種效果觀察過程中，如因檢測方法改動引起的含量變化，必須用對照方法作平行測定。在高危人群的疫苗應(yīng)取決于抗HBs測定值。由國家和地區(qū)制定各自的疫苗推薦標(biāo)準(zhǔn)。特異性參數(shù)：以下所列舉為Elecsys分析儀具代表性資料。各實驗室所測結(jié)果可能有所差異。精密度：利用Elecsys試劑,重復(fù)檢測人類混合血清和質(zhì)控液

18、（批內(nèi)n21，批間n10）,按照修正NCCLS (National Committee for Clinical Laboratory Standards)公布的實驗方法(EP5-A)執(zhí)行 :每天測試6次,進(jìn)行10天(n=60),在E170上測試一次運轉(zhuǎn)內(nèi)的精確度,重復(fù)21次,得到下列結(jié)果:Elecsys 2010 and cobas e 411分析儀批內(nèi)精密度批間精密度樣品均值IU/LSDIU/LCV%均值IU/LSDIU/LCV%HSd，陰性8.70.576.67.730.769.9HS，弱陽性15.40.523.412.91.4211.0HSe，陽性6039.301.560520.63.

19、4Cal110.70.676.311.01.7916.2Cal249814.12.851418.43.6d) HS = 人血清 MODULAR ANALYTICS E170 and cobas e 601分析儀批內(nèi)精密度批間精密度樣品均值IU/LSDIU/LCV%均值IU/LSDIU/LCV%HSd，陰性2.00-2.00-HS，弱陽性9.420.414.38.521.1813.9HSe，陽性91611.21.291037.34.1PCeA-HBs12.00-1000150110001501:10010001501:10010001501:5003101501:5002611501:10001

20、611091:100013699.01:250069.534.31:250059.036.51:500036.517.91:500031.817.11:1000019.88.41:1000016.59.01:2000010.34.31:200008.54.3分析特異性：所使用的單株抗體對HBc具高度特異性,未測到針對HAV,HCV,HEV,CMV,EBV,HIV,弓形蟲, 風(fēng)疹病毒和梅毒螺旋體的任何交叉反應(yīng)。以上各抗原均至少使用5份針對該抗原的抗體陽性血清或血漿樣品檢測。臨床靈敏度：經(jīng)對照方法檢測對抗HBs有反應(yīng)性的不同患者群組中進(jìn)行樣品抽樣，使用Elecsys抗HBs和對照方法進(jìn)行平行測定。

21、樣品特點樣品分類測定標(biāo)本數(shù)Elecsys測定有反應(yīng)性對照方法測定有反應(yīng)性靈敏度康復(fù)患者，陽性指標(biāo)：a-HBc, a-HBe, a-HBs20320120399.0吸毒者，陽性指標(biāo)：a-HBc，a-HBs535252100住院患者，陽性指標(biāo)：a-HBc, a-HBs86788097.5接種疫苗人數(shù)133131131100總計47546246699.0臨床特異性：運用隨機選擇健康獻(xiàn)血者和住院患者標(biāo)本檢測Elecsys 抗HBs檢測法的臨床特異性。分組檢測標(biāo)本數(shù)Elecsys檢測假陽性特異性獻(xiàn)血者a-HBs10IU/L(對照方法)1469399.8住院患者，陰性指標(biāo)：a-HBc，a-HBs29701

22、00參考文獻(xiàn)：1. Lander JJ, Holland PV, Alter HJ, Chanock RM, Purcell RH.Antibody to hepatitis-associated antigen. Frequency andpatterns of response as detected by radioimmuno-precipitation.J Am Med Assoc 1972;220:1079-1082.2. Gold JW, Alter HJ, Holland PV, Gerin JL, Purcell RH. Passivehemagglutination assay for antibody to subtypes of hepatitis Bantigen. J Immunol 1974;112;1100-1106.3. Jilg W, Schmidt M, Deinhardt F. Immune Response to Hepatitis BRevaccination. J Med Virol 1988;24:377-384.4. European Consensus Group on Hepat