生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)

生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)2006.5目錄實(shí)驗(yàn)一糖類的定量測(cè)定實(shí)驗(yàn)二紙層析法分析氨基酸實(shí)驗(yàn)三血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳實(shí)驗(yàn)四酵母RNA的提取及含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)五

凝膠層析法測(cè)定蛋白質(zhì)分子量

實(shí)驗(yàn)六

蛋白質(zhì)含量測(cè)定的二種方法實(shí)驗(yàn)七園盤電泳分離血清蛋白實(shí)驗(yàn)一糖類的定量測(cè)定—3，5-二硝基水楊酸比色定糖法

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?．掌握3，5一二硝基水楊酸法定糖的原理及方法。2．用3，5一二硝基水楊酸比色法測(cè)定山芋粉中總糖。3．熟悉分光光度計(jì)的原理及使用方法。

二、實(shí)驗(yàn)原理糖類的測(cè)定方法有物理方法和化學(xué)方法兩類。由于化學(xué)方法比較準(zhǔn)確，常常用于還原糖的測(cè)定。是糖定量測(cè)定的基本方法。還原糖是指含有自由醛基和酮基的糖類。3，5一二硝基水楊酸與還原糖共熱后被還原成棕紅色的氨基化合物，在一定范圍內(nèi)，棕紅色物質(zhì)顏色的深淺程度與還原糖的量成正比。因此，我們可以利用比色法測(cè)定樣品中還原糖以及總糖的含量。該法是半微量定糖法，操作簡(jiǎn)便、快速，雜質(zhì)干擾較少。三、實(shí)驗(yàn)操作

（一）樣品中總糖的水解及提取準(zhǔn)確稱取山芋粉1g，放入小三角燒瓶中，加入10ml6NHCL和15ml蒸餾水，混勻。在沸水浴加熱30min后，用KI-I2溶液檢查水解程度。若已水解完全，則不呈現(xiàn)藍(lán)色。冷卻后加入酚酞試劑一滴，以10%NaOH中和至溶液呈微紅色。過濾并定容至100ml。再精確吸取上述溶液10ml，放入100ml容量瓶，稀釋到刻度，備用。表1-1制作葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)各試劑用量項(xiàng)目空白123456含糖總量（mg）00.40.60.81.01.21.4葡萄糖液（ml）00.40.60.81.01.21.4蒸餾水（ml）2.01.61.41.21.00.80.6DNS試劑(m1)1.51.51.51.51.51.51.5加熱均在沸水浴中加熱5min冷卻立即用流動(dòng)冷水冷卻蒸餾水(ml)21.5

21.521.521.521.521.521.5光密度(O.D．520)

將以上各管溶液混勻后，用分光光度計(jì)(520nm)進(jìn)行比色測(cè)定，用空白管溶液調(diào)零點(diǎn)，記錄光密度值，以葡萄糖濃度為橫坐標(biāo)，光密度為縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線。一大組同學(xué)做一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線（三）樣品中含糖量的測(cè)定取4支大試管，分別按表1—2加入各種試劑。將各管混勻后，按制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)同樣的操作測(cè)定各管的光密度，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的總糖含量，按下述公式計(jì)算出山芋粉總糖百分含量。總糖=（水解后還原mg數(shù)×樣品稀釋倍數(shù)×100％）/樣品重量

四、實(shí)驗(yàn)要求1.實(shí)驗(yàn)過程中所有的試管要干凈，加入各種試劑量要準(zhǔn)確。2.試劑不可倒出試劑瓶，用干凈的移液管吸取，用后蓋好瓶塞，防回原處。3.分光光度計(jì)使用：溶液不要倒太多；毛邊不要對(duì)著透光處；用后用自來水沖洗干凈，防回原處。4.移液管使用：有色看外邊緣，無色看中間凹處。5.實(shí)驗(yàn)室中所有的儀器上面不能放置燒杯、試管、試劑瓶等，以防試劑污染儀器。6.每組同學(xué)離開實(shí)驗(yàn)室時(shí)，須經(jīng)實(shí)驗(yàn)老師檢查并同意后，方可離開。7.值日生打掃干凈實(shí)驗(yàn)室后，方可離開。

實(shí)驗(yàn)二紙層析法分析氨基酸一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握紙上層析的一般原理和操作方法。2.了解氨基酸的特征性顏色反應(yīng)。3.學(xué)會(huì)分析未知樣品的氨基酸成分。

紙上層析的原理：常以水和有機(jī)溶劑作為展層劑；水和有機(jī)溶劑互溶后形成兩個(gè)相：一個(gè)是飽和了有機(jī)溶劑后的水相，一個(gè)是飽和了水后的有機(jī)溶劑相。由于濾紙纖維素上的羥基和水分子有較大的親和力，而與有機(jī)溶劑的親和力相對(duì)較弱，因此我們認(rèn)為水相為固定相，有機(jī)溶劑相為移動(dòng)相。由于物質(zhì)的極性大小不同，在兩相中分配比例有所差異。極性小的物質(zhì)在有機(jī)相中分配較多，隨有機(jī)相移動(dòng)較快；而極性大的物質(zhì)在水相中分配較多，移動(dòng)相對(duì)較慢，從而將極性不同的物質(zhì)分開。一般來說，在相同的條件下，每種物質(zhì)都有其固定的Rf值。Rf值的定義：Rf=(原點(diǎn)到層析斑點(diǎn)中心的距離)/（原點(diǎn)到溶劑前沿的距離）影響Rf值的因素有：

①物質(zhì)本身的化學(xué)結(jié)構(gòu)；②展層所用溶劑系統(tǒng)；③展層劑pH值；④展層時(shí)的溫度；⑤展層所用濾紙；⑥展層的方向(橫向，上行或下行)。用紙層析鑒定樣品時(shí)，一般都與標(biāo)準(zhǔn)品相比較。若沒有標(biāo)準(zhǔn)品，可選擇文獻(xiàn)記載的該物質(zhì)層析條件，根據(jù)文獻(xiàn)Rf值進(jìn)行鑒定。3．層析

將點(diǎn)好樣的濾紙縱向卷起來，點(diǎn)樣面向里，點(diǎn)樣點(diǎn)位于一端，用針線縫成筒狀，不要使濾紙兩邊接觸(見圖1)。將培養(yǎng)皿中放入2／3量的展層劑，放入層析缸中，然后將濾紙直立于層析缸的培養(yǎng)皿中，樣品端向下垂直放置，切勿使展層劑浸到樣品點(diǎn)，開始層析。當(dāng)溶劑前沿到達(dá)離上端2cm處，取出濾紙，用鉛筆描出溶劑前沿，晾干。圖1.濾紙的縫合4．顯色用噴霧器向?yàn)V紙上均勻噴灑0.1%茚三酮，晾干后，將濾紙放入烘箱中(80-100℃)，烘烤5分鐘后，濾紙上即顯出紫紅色的氨基酸斑點(diǎn)。用鉛筆描出斑點(diǎn)輪廓(見圖2)

四.結(jié)果處理

用尺量出原點(diǎn)到斑點(diǎn)中心距離以及原點(diǎn)到溶劑前沿距離，計(jì)算各標(biāo)準(zhǔn)氨基酸和混合氨基酸的Rf值。圖2.層析譜

1．原點(diǎn)；2．層析點(diǎn)；3．溶劑前沿五、實(shí)驗(yàn)建議(1)在整個(gè)操作過程中，手只能接觸濾紙邊緣，否則手指上的氨基酸會(huì)造成濾紙上眾多斑點(diǎn)。(2)在點(diǎn)樣時(shí)，不要將毛細(xì)管插錯(cuò)了試劑瓶。(3)展層結(jié)束后，切勿忘記用鉛筆描出溶劑前沿。(4)點(diǎn)樣斑點(diǎn)不能太大（其直徑應(yīng)小于0.5cm），防止氨基酸斑點(diǎn)重復(fù)；吹風(fēng)溫度不宜過高，否則斑點(diǎn)變黃。(5)根據(jù)目的、要求，選擇合適溶劑系統(tǒng)。

實(shí)驗(yàn)三血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.學(xué)習(xí)醋酸纖維素薄膜電泳的基本原理。2.了解醋酸纖維素薄膜電泳的操作技術(shù)。3.掌握電泳分離血清蛋白質(zhì)及其定性定量的方法。

本實(shí)驗(yàn)以醋酸纖維素為電泳支持物，分離各種血清蛋白。血清中含有清蛋白、a一球蛋白、β一球蛋白、γ一球蛋白和各種脂蛋白等。各種蛋白質(zhì)由于氨基酸組分、立體構(gòu)象、分子量、等電點(diǎn)及形狀不同，在電場(chǎng)中遷移速度不同。分子量小、等電點(diǎn)低，在相同堿性pH緩沖體系中，帶負(fù)電荷多的蛋白質(zhì)顆粒在電場(chǎng)中遷移速度快。例如，以醋酸纖維薄膜為支持物，正常人血清在pH8．6的緩沖體系中電泳1h左右，染色后可顯示5條區(qū)帶。清蛋白泳動(dòng)最快，其余依次為α1-、α2-、β-、γ-球蛋白。這些區(qū)帶經(jīng)洗脫后可用分光光度法定量，也可直接進(jìn)行光吸收掃描，自動(dòng)繪出區(qū)帶吸收峰及相對(duì)百分比，臨床醫(yī)學(xué)常用它們間相對(duì)百分比的改變或異常區(qū)帶的出現(xiàn)作為臨床鑒別診斷的依據(jù)。

三、實(shí)驗(yàn)操作（一）儀器與薄膜的準(zhǔn)備1.醋酸纖維素薄膜的潤(rùn)濕與選擇2.電泳槽的準(zhǔn)備在兩個(gè)電極槽中，各倒人等體積的電極緩沖液，在電泳槽的兩個(gè)膜支架上各放兩層濾紙條，使濾紙一端的長(zhǎng)邊與支架前沿對(duì)齊，另一端浸入電極緩沖液內(nèi)。當(dāng)濾紙條全部潤(rùn)濕后，用玻璃棒輕輕擠壓在膜支架上的濾紙以驅(qū)逐氣泡，使濾紙的一端能緊貼在膜支架上。濾紙條是兩個(gè)電極槽聯(lián)系醋酸纖維素薄膜的橋梁，故稱為濾紙橋。3.電極槽的平衡圖3—1醋酸纖維素薄膜規(guī)格及點(diǎn)樣位置示意圖虛線處為點(diǎn)樣位置

（三）電泳先恒流，后恒壓用竹夾子將點(diǎn)樣端的薄膜平貼在陰極電泳槽支架的濾紙橋上(點(diǎn)樣面朝下)、另一端平貼在陽(yáng)極端支架上(如圖所示)。要求薄膜緊貼濾紙橋并繃直，中間不能下垂。如一電泳槽中同時(shí)安放幾張薄膜，則薄膜之間應(yīng)相隔幾毫米。蓋上電泳槽蓋，使薄膜平衡10min。用導(dǎo)線將電泳槽的正、負(fù)極與電泳儀的正、負(fù)極分別連接，注意不要接錯(cuò)，在室溫下電泳，打開電源開關(guān)，用電泳儀上細(xì)調(diào)節(jié)旋鈕調(diào)到每厘米膜寬電流強(qiáng)度為0.3mA（8片薄膜則為4.8mA）通電10～15min，將電壓調(diào)節(jié)到90～110V，電泳時(shí)間50～60min。電泳后調(diào)節(jié)旋鈕電流為O，關(guān)閉電泳儀切斷電源。圖3一2正常人血清醋酸纖維素薄膜電泳示意圖1為清蛋白；2，3，4，5分別為α1-，α2-，β-及γ-球蛋白；6為點(diǎn)樣原點(diǎn)

此法由于操作簡(jiǎn)單快速、分辨率高及重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)，目前已成為臨床生化檢驗(yàn)的常規(guī)操作之一。它不僅可用于分離血清蛋白，還可用于分離脂蛋白、血紅蛋白及同工酶的分離測(cè)定。

（四）染色和漂洗電泳完畢立即取出薄膜，直接浸入染色液中，染色5min，然后取出，先用自來水沖洗，再用漂洗液漂洗，連續(xù)更換3次漂洗液，可使顏色脫去，得到色帶清晰的電泳圖譜。

（五）透明將脫色吹干后的薄膜浸入透明甲液中2min，取出立即放入透明乙液中浸泡1min，取出后立即緊貼于干凈玻璃板上，兩者間不能有氣泡。5～10min薄膜完全透明。若透明太慢可用透明乙液少許在薄膜表面淋洗一次，垂直放置，待其自然干燥或用吹風(fēng)機(jī)冷風(fēng)吹干且無酸味，再將玻璃板放在流動(dòng)的自來水下沖洗，當(dāng)薄膜完全潤(rùn)濕后用單面刀片撬開薄膜的一角，用手輕輕將透明的薄膜取下，用濾紙吸干所有的水分，壓干。此薄膜透明，區(qū)帶著色清晰，可用于光吸收計(jì)掃描。長(zhǎng)期保存不褪色。

四、實(shí)驗(yàn)建議

(1)醋酸纖維素薄膜的預(yù)處理市售醋酸纖維素薄膜均為干膜片，薄膜的浸潤(rùn)與選膜是電泳成敗的關(guān)鍵之一。為防止指紋污染，取膜時(shí)應(yīng)戴指套或用夾子。所選薄膜應(yīng)厚薄均勻，否則應(yīng)棄去不用，以免造成電泳區(qū)帶扭曲，界線不清，背景脫色困難，結(jié)果難以重復(fù)。由于薄膜吸水性比紙小，浸泡30min以上是保證膜片上有一定量緩沖液，并使其恢復(fù)到原來多孔的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，最好讓薄膜吸滿緩沖液后自然下沉，這樣可將膜片上聚集的小泡趕走。點(diǎn)樣時(shí)薄膜上的緩沖液不宜太多，但也不能太干。(2)緩沖液的選擇本實(shí)驗(yàn)常用的pH8．6巴比妥緩沖液，其濃度為0．05～O．09mol／L。選用何種濃度與樣品及薄膜的厚薄有關(guān)。緩沖液濃度過低，則區(qū)帶泳動(dòng)速度快，并由于擴(kuò)散變寬；緩沖液濃度過高，則區(qū)帶泳動(dòng)速度慢，區(qū)帶分布過于集中，不易分辨。

(3)加樣量加樣品量的多少與電泳條件、樣品性質(zhì)、染色方法與檢測(cè)手段靈敏度密切相關(guān)。作為一般原則，檢測(cè)方法越靈敏，加樣量越少，對(duì)分離更有利。如加樣量過大，則電泳后區(qū)帶分離不清楚，甚至相互干擾，染色也較費(fèi)時(shí)。點(diǎn)樣好壞是獲得理想圖譜的重要環(huán)節(jié)之一，以印章法加樣時(shí)，動(dòng)作應(yīng)輕、穩(wěn)，用力不能太重，以免將薄膜弄破或印出凹陷而影響電泳區(qū)帶分離效果。

(4)電量選擇電泳過程應(yīng)選用合適的電流強(qiáng)度，一般為0.3～0．5mA／cm寬膜。電流強(qiáng)度高，則熱效應(yīng)高，可能引起蛋白質(zhì)變性或由于緩沖液蒸發(fā)造成膜片干涸。電流過低，則樣品泳動(dòng)速度慢且易擴(kuò)散。(5)染色液的選擇染色液應(yīng)根據(jù)樣品的特點(diǎn)加以選擇。其原則是染料對(duì)被分離樣品有強(qiáng)的著色力，背景易脫色，應(yīng)盡量采用水溶性染料，不宜選擇醇溶性染料，以免使薄膜溶解。

應(yīng)控制染色時(shí)間。時(shí)間太長(zhǎng)，薄膜底色深不易脫去；時(shí)間太短，著色淺不易區(qū)分，或造成染色不均勻，必要時(shí)可進(jìn)行復(fù)染。(6)透明及保存透明液應(yīng)臨用前配制，以免冰乙酸和乙醇揮發(fā)而影響透明效果。這些試劑最好選用分析純。透明前薄膜應(yīng)完全干燥。透明時(shí)間應(yīng)掌握好。如在透明乙液中浸泡時(shí)間太長(zhǎng)則薄膜溶解，太短則透明度不佳。透明后的薄膜完全干燥后才能浸入液體石蠟中，使薄膜軟化。如有水，則液體石蠟不易浸入，薄膜不易展平。五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告及作業(yè)1．根據(jù)人血清中血清蛋白各組分等電點(diǎn)，如何估計(jì)它們?cè)趐H8．6的巴比妥一巴比妥鈉電極緩沖液中移動(dòng)的相對(duì)位置?2.簡(jiǎn)述醋酸纖維素薄膜電泳原理及優(yōu)點(diǎn)。3.繪出酸纖維素薄膜電泳結(jié)果。4.造成電泳圖譜不整齊的原因有哪些？實(shí)驗(yàn)四酵母RNA的提取及含量測(cè)定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握RNA提取的原理及方法。2.學(xué)會(huì)使用地衣酚法測(cè)定RNA的含量。二、實(shí)驗(yàn)原理一般的生物細(xì)胞中同時(shí)含有DNA和RNA，在酵母中RNA比DNA的含量高得多，DNA則少于2％(O．03％～O．516％)，故在實(shí)驗(yàn)室常用酵母作為RNA提取的材料。若要制備具有生物活性的RNA，常用苯酚法；若對(duì)生物活性沒有要求，則可使用濃鹽法，稀堿法等。從化學(xué)組成來說，RNA由堿基、磷酸和戊糖組成。在酸性條件下，戊糖轉(zhuǎn)化成糠醛，其可與地衣酚生成綠色復(fù)合物，反應(yīng)如下：

這種復(fù)合物在670nm波長(zhǎng)處有最大光吸收。當(dāng)RNA的濃度于10～100ug／ml范圍內(nèi)，其濃度與光密度值成線性關(guān)系。樣品中少量脫氧核糖核酸(DNA)存在對(duì)測(cè)定無干擾，蛋白質(zhì)、粘多糖也干擾測(cè)定。

本實(shí)驗(yàn)采用的稀堿，既可加速細(xì)胞的破裂，又可增大RNA的溶解度。當(dāng)堿被中和后，可用乙醇將RNA沉淀，此為RNA的粗品。

(一)RNA的提取稱5g干酵母粉于150ml三角燒瓶中，加30mlO.2％的NaOH，沸水浴中攪拌提取30min。冷卻后滴加乙酸使其略偏酸性。離心(4000r／min，15min)，去除沉淀。向上清液中加入30ml95％乙醇，稍攪拌后靜置。待完全沉淀后離心(4000r／min，15min)，去上清液。沉淀加10ml95％乙醇，攪拌后再次離心。沉淀再依次用10ml的無水乙醇、乙醚(×2)洗滌。稱重，計(jì)算RNA的初步得率（a)。

三、實(shí)驗(yàn)操作(二)RNA的鑒定取沉淀約O.2g，加2ml10％H2SO4→沸水浴中加熱2min→加1.5ml地衣酚試劑→沸水浴中加熱→觀察顏色變化。(三)地衣酚法測(cè)定RNA含量

1．標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作取6支試管，按下表1編號(hào)及加入試劑。

表l.制作RNA標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)各試劑用量試劑(m1)

012345RNA標(biāo)準(zhǔn)液

00.40.81.21.62.0蒸餾水

2.01.61.20.80.40地衣酚試劑

2.02.02.02.02.02.0試劑加完后，搖勻，置沸水浴中煮45min。冷卻后，在670nm波長(zhǎng)處測(cè)各管光密度值。以光密度為縱坐標(biāo)，每管標(biāo)準(zhǔn)液ml數(shù)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2．樣品中RNA的測(cè)定

將(一)中制備的RNA粗品，按標(biāo)準(zhǔn)RNA液的溶解方法溶解，并配成200ug／ml的樣品液。取2支試管，分別加入1．Oml和2．Oml樣品液，用水補(bǔ)足至2.0ml后，各加2.0ml地衣酚試劑。余步按標(biāo)準(zhǔn)曲線制作方法。測(cè)得光密度值后，折算成1.Oml樣品液光密度值，并計(jì)算其平均值。

四、計(jì)算

根據(jù)所測(cè)得平均光密度值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上找出相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)RNA溶液ml數(shù)(b)，可通過下式計(jì)算酵母中RNA的含量。酵母中RNA含量=b×100×a×100％/200

五、實(shí)驗(yàn)建議(1)戊糖或含戊糖的物質(zhì)對(duì)本法有干擾。(2)因不同時(shí)期酵母RNA含量有所變化，若樣品光密度值均不在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍，可減少加樣品液量或增加RNA粗品溶液的濃度。實(shí)驗(yàn)六蛋白質(zhì)含量的測(cè)定—Folin-酚試劑法（Lowry法）和考馬斯亮藍(lán)法（Brodford法）

一Folin-酚試劑法（Lowry法）目的和要求學(xué)習(xí)Folin-酚法測(cè)定蛋白質(zhì)含量的原理和方法。進(jìn)一步掌握分光光度法——求標(biāo)準(zhǔn)曲線、準(zhǔn)確測(cè)定未知樣品、正確使用儀器

實(shí)驗(yàn)原理蛋白質(zhì)濃度可以從它們的物理化學(xué)性質(zhì)，如折射率、比重紫外吸收等測(cè)定而得知：或用化學(xué)方法，如定氮、雙縮脲反應(yīng)、Folin-酚試劑反應(yīng)等方法來求算。其中雙縮脲法和Folin-酚法是一般實(shí)驗(yàn)室中經(jīng)常使用的方法。它們操縱簡(jiǎn)便、迅速，不需要復(fù)雜而昂貴的設(shè)備，又能適合一般實(shí)驗(yàn)室的要求，若作一般的濃度測(cè)定較為適應(yīng)。Folin-酚法靈敏度高，較雙縮脲法靈敏100倍。本實(shí)驗(yàn)采用的是Folin-酚法。Folin-酚法所用的試劑由兩部分組成。試劑甲相當(dāng)于雙縮脲試劑，可與蛋白質(zhì)中的肽鍵起顯色反應(yīng)。試劑乙（磷鎢酸和磷鉬酸混合液）在堿性條件下極不穩(wěn)定，易被酚類化合物還原而呈藍(lán)色反應(yīng)（鉬藍(lán)和鎢藍(lán)的混合物）。由于蛋白質(zhì)中含有帶酚基的酪氨酸，故有此顏色反應(yīng)。因此，用Folin-酚法測(cè)定蛋白質(zhì)含量靈敏度較高。實(shí)驗(yàn)步驟標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作：按下表操作管號(hào)BSA（300μg／mL）H2OPr.含量μg步驟12345600.20.40.60.81.01.00.80.60.40.20050100150200250各試管加入試劑甲5.0mL，混合后放置10分鐘，加入試劑乙0.5mL，立即混合，37度恒溫反應(yīng)20分鐘。以1號(hào)為參比，測(cè)A750的值。2.樣品（小白菜）液的提取稱取小白菜1-4克（菜桿2-4克，菜葉1-2克）置于研缽中，加5mL蒸餾水在低溫下研磨成勻漿，全部轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，并定容至刻度，然后抽濾，在3000rpm離心20分鐘，上層清液為提取液，待用。樣品的測(cè)定吸取提取液和稀釋250倍的血清液各1.0mL于試管中（三次重復(fù)），分別加5.0mL試劑甲，放置10分鐘后，加試劑乙0.5mL，立即混勻，恒溫37度反應(yīng)20分鐘，測(cè)A750的值。管號(hào)小白菜T或A管號(hào)血清T或A123123小白菜用mg／g，血清用mg／mL。目的和要求：1、掌握盤狀聚丙烯酰胺凝膠電泳的基本原理。2、學(xué)習(xí)盤狀聚丙烯酰胺凝膠電泳的操作技術(shù)，包括制膠、灌膠、加樣、電泳、剝膠、染色及脫色等。3、了解盤狀聚丙烯酰胺凝膠電泳的應(yīng)用，利用盤狀聚丙烯酰胺凝膠電泳分離血清蛋白質(zhì)和血清球蛋白-血清清蛋白-鐵氧還原蛋白的混合液