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文檔簡介
第二十九章人乳頭(rǔtóu)瘤病毒
(HumanPapillomavirus,HPV)
是乳多空病毒科(Papovaviridae)、乳頭瘤病毒屬的一個種。引起人皮膚(pífū)、粘膜的增生性病變,臨床表現(xiàn)為良性疣或乳頭狀瘤。
HPV也是尖銳濕疣(condylomaacminatum,CA)的病原體。某些型別的HPV可使組織發(fā)生癌變,引起子宮頸癌等。第一頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白
球形,直徑52-55nm,20面體對稱,無包膜,環(huán)狀dsDNA,3個基因區(qū)組成早期區(qū)含有6個ORFE1、E2基因:與病毒復(fù)制轉(zhuǎn)錄調(diào)控有關(guān)E5、E6、E7基因:誘導(dǎo)細(xì)胞轉(zhuǎn)化,
晚期區(qū)編碼結(jié)構(gòu)蛋白(dànbái)L1和L2
是衣殼的主要蛋白和次要蛋白。上游調(diào)控區(qū)
復(fù)制起點和調(diào)控元件
一)生物學(xué)性狀(xìngzhuàng)第二頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白HPV增殖方式獨特,與上皮細(xì)胞的分化階段相關(guān),因此(yīncǐ)不能在常規(guī)組織細(xì)胞中培養(yǎng)。成熟病毒僅在角質(zhì)細(xì)胞中產(chǎn)生,抗原接觸免疫系統(tǒng)的機會少,免疫原性低,易形成持續(xù)感染。一)生物學(xué)性狀(xìngzhuàng)第三頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白HPV具有高度的宿主和組織特異性,對人的皮膚和粘膜上皮細(xì)胞具有特殊的親嗜性,在易感細(xì)胞核內(nèi)增殖形成核內(nèi)嗜酸性包涵體,使感染細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榭张菁?xì)胞。HPV不能在實驗動物(dòngwù)中增殖,組織培養(yǎng)也未成功。
一)生物學(xué)性狀(xìngzhuàng)培養(yǎng)(péiyǎng)特性第四頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白傳播途徑直接接觸感染先天感染(產(chǎn)道感染)性感染所致疾病不引起病毒血癥臨床表現(xiàn)多樣性與宮頸癌有關(guān)二)致病性與免疫性第五頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白扁平疣:常由HPV3和10型引起。6、11、16、18、31和33等型別為粘膜嗜性HPV,感染泌尿生殖道及口腔(kǒuqiāng)。生殖器疣又稱尖銳濕疣(condylemataacuminata):性傳播疾?。⊿TD),主要由HPV-6感染所致,也可由HPV-11引起。77個血清型,根據(jù)感染部位不同可將HPV分為(fēnwéi)嗜皮膚性和嗜粘膜性兩大類,兩類之間有一定交叉。二)致病性與免疫性第六頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白某些型別HPV與一些肛門(gāngmén)、生殖器腫瘤發(fā)生密切相關(guān)。根據(jù)HPV的致癌潛力將其分為:高危型:主要包括HPV16、18、31、33、45、35、39、51、52和58等型別,其中16、18、33型與子宮頸癌發(fā)生密切相關(guān);低危型:主要包括HPV6和11型。二)致病性與免疫性第七頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白扁平疣尖銳濕疣肛周疣第八頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白三)微生物學(xué)(wēishēnɡwùxué)檢查(一)醋酸白試驗(二)細(xì)胞學(xué)檢查(jiǎnchá)
(三)組織病理學(xué)檢查(四)核酸分子雜交技術(shù)
1.斑點雜交法
2.原位雜交法
3.DNA印跡法
(五)聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)第九頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白防治:加強教育、嚴(yán)格社會管理(guǎnlǐ)治療:
1.局部敷藥,如5%5-咪奎莫特,5%5-氟尿嘧啶;25%竹葉脂液。2.用激光、冷凍、電灼或者手術(shù)去除疣;3.局部注射干擾素。4.復(fù)發(fā)應(yīng)連續(xù)或者綜合治療。四)防治(fángzhì)原則第十頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白第三十一章
狂犬病毒(Rabiesvirus)第十一頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白
狂犬病是人畜共患的自然疫原性傳染病,目前尚無有效的治療方法,一旦發(fā)病,死亡率近乎100%。
狂犬病病毒是一種嗜神經(jīng)性病毒。屬于彈狀病毒科(Rhabdoviridae)、狂犬病毒屬(Lyssavirus)。
多種野生動物和家畜等可以發(fā)生狂犬病病毒的自然感染與傳播,并且可以通過(tōngguò)咬傷、抓傷或密切接觸等形式感染人類而引起狂犬病。第十二頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白一)生物學(xué)性狀(xìngzhuàng)形態(tài)(xíngtài)與結(jié)構(gòu)子彈頭形狀:一端鈍圓,另一端扁平,平均大小為130-300nm×60-85nm核酸:-ssRNARNA基因組編碼5種蛋白(dànbái):3’-N,P,M,G,L-5’有一層磷脂層包被,包膜上嵌有釘狀突起第十三頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白在易感動物或人的中樞神經(jīng)細(xì)胞、主要是大腦(dànǎo)海馬回的錐體細(xì)胞中增殖時,可以在胞質(zhì)內(nèi)形成一個或多個、圓形或橢圓形、直徑為20-30nm的嗜酸性包涵體,稱內(nèi)基小體(Negribody)。培養(yǎng)(péiyǎng)特性一)生物學(xué)性狀(xìngzhuàng)第十四頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白糖蛋白G:病毒表面,刺激機體(jītǐ)產(chǎn)生中和抗體、血凝抑制抗體和細(xì)胞免疫應(yīng)答;核蛋白N:病毒核心,屬特異性抗原,能夠以核蛋白(RNP)的形式誘生保護性的細(xì)胞免疫應(yīng)答,但不能刺激機體產(chǎn)生中和抗體。主要(zhǔyào)抗原一)生物學(xué)性狀(xìngzhuàng)第十五頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白野毒株(wildstrain)或街毒株(streetstrain):
從自然感染(gǎnrǎn)的動物體內(nèi)分離到的病毒,潛伏期長,毒力強固定毒株(fixedstrain):將野毒株接種實驗動物腦內(nèi),并連續(xù)傳50代以上獲得的潛伏期為4-6天的毒株,潛伏期短,毒力弱。變異(biànyì)一)生物學(xué)性狀(xìngzhuàng)第十六頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白病毒抵抗力不強。對熱敏感(mǐngǎn),60℃經(jīng)30min或100℃2min即可滅活。易被強酸、強堿、乙醇、乙醚等滅活。肥皂水、離子型或非離子型去垢劑亦有滅活作用。抵抗力一)生物學(xué)性狀(xìngzhuàng)第十七頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白主要是病犬(80-90%),其次是由貓和狼。發(fā)達(dá)國家的野生動物如狐貍、食血蝙蝠、臭鼬和浣熊等逐漸成為重要傳染源。隱性感染的犬、貓等動物亦有傳染性?;疾游锿僖褐泻?hányǒu)大量的病毒,于發(fā)病前5d即具有傳染性傳染源二)致病性與免疫性第十八頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白病毒主要通過(tōngguò)被咬傷、抓傷的皮膚損傷處進(jìn)入人體。粘膜也是病毒的侵入門戶,如患病動物的唾液污染眼結(jié)膜等,也可發(fā)病。傳播(chuánbō)途徑二)致病性與免疫性第十九頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白狂犬病的傳播(chuánbō)動物狂犬病
1-
野生動物
2-家畜動物
人類狂犬病野生食肉動物翼手目動物
狐貍、臭鼬、獾、狼吸血蝙蝠食果類C.S.食蟲類
家畜型食肉動物家畜型
食草動物狗貓牛綿羊山羊人類
人類第二十頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白發(fā)病(fābìng)機制
人被病犬咬傷病毒隨犬唾液經(jīng)傷口進(jìn)入人體(病毒在入侵部位的肌細(xì)胞中增殖)通過神經(jīng)(shénjīng)肌肉接頭侵入外周神經(jīng)(shénjīng)細(xì)胞-細(xì)胞間傳遞形式神經(jīng)節(jié)直至中樞神經(jīng)系統(tǒng)(腦組織中病毒迅速增殖擴散)沿傳出神經(jīng)傳至唾液腺及其他組織。二)致病性與免疫性第二十一頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白laboratorydiagnosisdogsandcatsinarabiesendemicareashouldbeheldfor10daysforobservationHistopathology:NegribodiesRapidvirusantigendetectiontherapywoundtreatmentpassiveimmunizationhorseanti-rabiesserumhumanrabiesimmuneglobulinactiveimmunization:inactivatedvaccine第二十二頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白犬患狂犬病按癥狀分為狂暴型和麻痹型兩種:狂暴型分前驅(qū)期、興奮期、麻痹期;麻痹型病犬以麻痹癥狀為主,興奮期極短或無。犬狂犬病整個(zhěnggè)病程不超過5-6d。病貓以狂暴型為多,病程較短,癥狀與犬相似。因其與人接觸密切,咬傷人的危險性甚大。二)致病性與免疫性第二十三頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白前驅(qū)期
發(fā)熱、頭痛、乏力、周身不適等癥狀,對痛、聲、光等刺激(cìjī)較敏感,并有咽喉緊縮感。約50~80%病人傷口部位及其附近有麻木或蚊走感;興奮期或痙攣期
處于興奮狀態(tài),如極度恐懼、煩燥,對水聲、風(fēng)等刺激非常敏感,易于引起發(fā)作性咽肌痙攣、呼吸困難等。部分患者出現(xiàn)特殊的恐水癥狀,在飲水、見水、流水聲或談及飲水時,可引起嚴(yán)重咽喉肌痙攣,稱為“恐水癥”(hydrophobia)。隨后,部分病人出現(xiàn)精神失常、定向力障礙、幻覺、譫妄等。病程進(jìn)展很快;麻痹期
痙攣減少或停止,出現(xiàn)弛緩性癱瘓,神志不清,最終因呼吸麻痹和循環(huán)衰竭而死亡。
二)致病性與免疫性典型(diǎnxíng)臨床表現(xiàn)第二十四頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白體液免疫:感染后機體產(chǎn)生中和抗體。有中和游離(yóulí)狀態(tài)的病毒、阻斷病毒進(jìn)入神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的作用。細(xì)胞免疫:殺傷性T淋巴細(xì)胞特異性地作用于病毒的蛋白抗原,引起病毒溶解;單核細(xì)胞產(chǎn)生的IFN和IL-2具有抑制病毒復(fù)制和抵抗病毒攻擊的作用。免疫性二)致病性與免疫性第二十五頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白(一)標(biāo)本直接檢查(jiǎnchá)
1.顯微鏡檢查內(nèi)基小體
2.抗原檢查
(1)免疫熒光法(2)免疫酶法(3)斑點免疫結(jié)合法(DIA)
3.核酸檢測:用RT-PCR法檢測標(biāo)本中狂犬病病毒RNA。三)微生物學(xué)(wēishēnɡwùxué)檢查法(二)分離培養(yǎng)(三)抗體檢測(四)捕捉(bǔzhuō)動物觀察
第二十六頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白捕捉消滅野犬,加強家犬的管理和普及接種犬用狂犬疫苗是預(yù)防狂犬病的重要措施。
人被患病動物咬傷、抓傷或其他帶毒的實驗用具傷害皮膚和肌肉(jīròu)時,應(yīng)采取妥善處理傷口和特異性防治相結(jié)合的措施。四)防治(fángzhì)原則第二十七頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白傷口處理
立即用20%肥皂水、清水充分沖洗數(shù)分鐘,然后用5%碘酒燒灼傷口。若傷口過深,可作清創(chuàng)術(shù)。再用3%H2O2溶液,0.1%高錳酸鉀或0.1%新潔爾滅處理。最后傷口周圍用抗狂犬病病毒免疫(miǎnyì)球蛋白作浸潤性注射。劑量為40IU/kg。四)防治(fángzhì)原則第二十八頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白預(yù)防接種
接種狂犬疫苗是預(yù)防發(fā)病的重要措施。即所謂的預(yù)防性治療。由于狂犬病的潛伏期長,從被咬傷到發(fā)病一般經(jīng)過幾十天或幾個月,在此期間盡早接種疫苗可免于發(fā)病。
嚴(yán)重咬傷者,除應(yīng)給予高效價免疫血清進(jìn)行被動免疫外,仍需要(xūyào)接種狂犬疫苗,可收到更佳效果。四)防治(fángzhì)原則第二十九頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白第三十二章朊粒(prion)傳染性蛋白粒子(proteinaceousinfectiousparticle)個體微小(<300nm),不含核酸,構(gòu)象(ɡòuxiànɡ)異常的蛋白酶抗性蛋白,稱為朊蛋白(PrP)。對各種理化作用的抵抗力強,具有傳染性。傳染性海綿狀腦病(transmissiblespongiformencephalopathies,TSEs)的病原體。第三十頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白是一種不含核酸和脂類的疏水性(shuǐxìng)糖蛋白。細(xì)胞朊蛋白(cellularisoformofPrP,
PrPC):
正常人和動物的神經(jīng)細(xì)胞編碼的一種糖基化膜蛋白,分子量為33-35103,稱為PrP33-35,命名PrPC,它對蛋白酶、去污劑敏感。羊瘙癢病朊蛋白(scrapieisoformofPrP,PrPSC):
分子量為27-30103,稱為PrP27-30,能抵抗蛋白酶的消化作用。PrPC和PrPSC的一級結(jié)構(gòu)完全相同,但其空間結(jié)構(gòu)不同一)生物學(xué)性狀(xìngzhuàng)第三十一頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白第三十二頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白PrPcPrPsc分子構(gòu)型4個α-螺旋,無β折疊2個α-螺旋
4個β折疊對蛋白酶K抗性敏感抗性存在正常及感染動物感染動物致病性無害具致病性與傳染性
PrPc和PrPsc主要(zhǔyào)區(qū)別第三十三頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白對理化因素的抵抗力強對甲醛、乙醇、蛋白酶和放射性核素等具有抵抗力消毒(xiāodú)常用5%次氯酸鈉或2mol/L的氫氧化鈉浸泡手術(shù)器械2h,高壓滅菌需用202kPa、134℃處理1h,以徹底滅活朊粒一)生物學(xué)性狀(xìngzhuàng)抵抗力第三十四頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白共同特征:潛伏期長(可達(dá)數(shù)年至數(shù)十年之久)一旦發(fā)病即呈慢性進(jìn)行性發(fā)展,最終死亡。病理特點:朊粒致中樞神經(jīng)系統(tǒng)退化性病變,大腦和小腦的神經(jīng)細(xì)胞融合、消失,形成多數(shù)小空泡并伴有星狀膠質(zhì)細(xì)胞增生(zēngshēng),出現(xiàn)海綿狀改變?yōu)樘卣?,病變部位無炎癥反應(yīng),而是由朊粒蛋白(PrP)大量堆積在神經(jīng)組織里,形成淀粉樣斑塊二)致病性與免疫性第三十五頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白
腦組織海綿樣改變(gǎibiàn),空泡形成第三十六頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白臨床表現(xiàn):癡呆、共濟失調(diào)、震顫等中樞神經(jīng)系統(tǒng)(xìtǒng)癥狀。致病機制:未明。目前認(rèn)為,PrPC轉(zhuǎn)變?yōu)镻rPSC是疾病發(fā)生的基本條件,PrPSC在中樞神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞內(nèi)聚集而導(dǎo)致疾病的發(fā)生。二)致病性與免疫性第三十七頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白動物prion病人類prion病羊瘙癢病(scrapieofsheepandgoat)
庫魯病(Kurudisease)
水貂傳染性腦病(transmissibleminkencephalopathy,TMM)克-雅病(Creutzfeld-Jakobdisease,CJD)鹿慢性退行性變(chronicwastingdiseaseofdeer,CWD)格斯特曼綜合征(Grestmann-StrausslerSyndrome,GSS)牛海綿狀腦病(bovinespongiformencephalopathy,BSE)致死性家庭失眠癥(fatalfamilialinsomnia,FFI)
貓海綿狀腦病(felinespongiformencephalopathy,FSE)克-雅病變種(variantCJD,v-CJD)
人和動物(dòngwù)prion病第三十八頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白normal第三十九頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白在歐洲已流行了近300年(第一個被發(fā)現(xiàn)的TSE),感染動物表現(xiàn)為消瘦、步態(tài)不穩(wěn)、脫毛、麻痹等,因病羊由于(yóuyú)瘙癢而常在圍欄上摩擦身體而得名,病死率極高。1.羊瘙癢(sàoyǎng)病(scrapieofsheepandgoat)第四十頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白俗稱瘋牛病(madcowdisease),1986年首次在英國報道。該病潛伏期4-5y,發(fā)病初期表現(xiàn)為體質(zhì)變差,體重減輕,產(chǎn)奶量下降等非特異性癥狀。隨后神經(jīng)系統(tǒng)癥狀逐步(zhúbù)明顯,出現(xiàn)運動失調(diào)、震顫等,由于病牛常表現(xiàn)出感覺過敏、恐懼甚至狂亂,因此俗稱“瘋牛病”。2.牛海綿狀腦病(bovinespongiformencephalopathy,BSE)第四十一頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白3.顫抖(chàndǒu)病
(KuruDisease)病人小腦受損,產(chǎn)生共濟失調(diào)和震顫。“Kuru”一詞是當(dāng)?shù)胤窖?,用來形容本病顫抖和跳動的特征Kuru病的潛伏期為5-30年,早期癥狀(zhèngzhuàng)為運動失調(diào)、顫抖,晚期出現(xiàn)癡呆。病程一般不超過1年,大多在6-9個月內(nèi)死亡當(dāng)?shù)赜凶诮绦允呈瑦毫?xí),這是感染本病的原因第四十二頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白Kurudisease第四十三頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白4.克雅?。–JD)又稱傳染性癡呆病或早老性癡呆病,是一種致命性人海綿狀腦病潛伏期可達(dá)數(shù)十年,開始出現(xiàn)精神、感覺方面的癥狀,隨后出現(xiàn)運動失調(diào),晚期出現(xiàn)肌肉痙攣并伴有癡呆,多在5-12個月內(nèi)死亡現(xiàn)已證實此病是由朊粒蛋白PrPSC大量沉積在神經(jīng)組織里,形成淀粉(diànfěn)樣斑塊,引起致死性中樞神經(jīng)系統(tǒng)慢性退化性疾病第四十四頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白有傳染(chuánrǎn)型、家族遺傳型和散發(fā)型等三型傳染型:占10%,主要由醫(yī)源性傳播,如角膜移植和硬腦膜移植等,或使用污染的手術(shù)器械,或使用人垂體制備的生長激素等,多于手術(shù)后18個月發(fā)病家族遺傳型:占10-15%,GSS綜合征:主要臨床特征是小腦運動失調(diào),眼球震顫和步態(tài)異常,后期出現(xiàn)癡呆;致死性家族性失眠:是一種特別罕見的遺傳性失調(diào),臨床特點是睡眠紊亂與智力下降散發(fā)型:最為常見,占75-80%第四十五頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白一種新型的人類傳染性海綿狀腦病,1996年由英國CJD監(jiān)測中心首次報導(dǎo)。本病與典型的CJD在好發(fā)年齡、臨床特征、腦電圖和病理等方面有明顯(míngxiǎn)變化,因此被認(rèn)為是新變種(newvariantCJD,v-CJD)。5.
克-雅病變(bìngbiàn)種(variantCJD,v-CJD)第四十六頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白1.免疫組化技術(shù)是目前確認(rèn)TSE的有效手段。2.免疫印跡技術(shù)蛋白印跡(Westernblotting)檢測PrPSC是一種簡單而敏感的診斷(zhěnduàn)方法。
3.基因分析從病人外周血白細(xì)胞中提取DNA,對20號染色體prion基因進(jìn)行分子遺傳學(xué)分析,可協(xié)助診斷家族性CJD患者。三)微生物學(xué)(wēishēnɡwùxué)檢查法第四十七頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白朊粒感染所致疾病目前均無治療方法應(yīng)及早建立長期監(jiān)督、監(jiān)測和報道疫情的機構(gòu),采取有效措施(cuòshī),杜絕PrP的傳入和擴散杜絕醫(yī)源性感染:患者和任何退行性神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者的器官移植禁止用任何動物臟器加工成?;蚱渌麆游锏娘暳希訌娺M(jìn)口牛、羊制品和飼料的檢疫強化消毒:由于朊粒對理化因子的抵抗力強,高壓滅菌時需134℃,處理1小時,手術(shù)器械如需化學(xué)消毒時選用有效制劑(如5%次氯酸鈉等)浸泡1小時以上四)防治(fángzhì)原則第四十八頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白性傳播疾病(sexuallytransmitteddisease,STD):通過(tōngguò)性行為引起流行的傳染病。淋球菌---淋病,HSV-2-----生殖器皰疹,HIV-----AIDS,HPV-----尖銳濕疣,溶脲脲原體、沙眼衣原體---非淋菌性尿道炎,梅毒螺旋體---梅毒可引起(yǐnqǐ)性傳播疾病的微生物第四十九頁,共五十八頁。細(xì)胞朊蛋白結(jié)核(jiéhé)分枝桿菌、鏈球菌屬(鏈球菌、肺炎鏈球菌)、腦膜炎奈瑟菌流行性感冒病毒、麻疹病毒、冠狀病毒和SARS冠狀病毒肺炎支原體其它:白喉棒狀桿菌、百日咳鮑特菌、軍團菌、流感嗜血桿菌、肺炎克雷伯菌、副流感病毒、水痘-帶狀皰疹病毒、風(fēng)疹
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