酚類化合物的測(cè)定-液相色譜分析法

酚類化合物的測(cè)定----液相色譜分析法1范圍1.1本法規(guī)定了液相色譜法測(cè)定水中苯酚、4-硝基酚、3-甲基酚、2，4-二氯酚、2，4，6-三氯酚和五氯酚。1.2本法適用于生活飲用水、地下水和地表水中苯酚、4-硝基酚、3-甲基酚、24-二氯酚、2，4，6-三氯酚和五氯酚的測(cè)定。1.3本法的最低檢測(cè)質(zhì)量濃度：取水樣1.0L，固相萃取后溶劑洗脫，定容1.0mL，進(jìn)樣體積40μL，最低檢測(cè)質(zhì)量濃度（μg/L）見下表。最低檢測(cè)質(zhì)量濃度苯酚0.160.612，4-二氯酚0.093五氯酚0.0720.27S0.140.54p，0.120.560.35μg/Li2原理用固相小柱吸附水中酚類化合物，然后用溶劑洗脫，經(jīng)氮吹氣濃縮至一定體積后，用反相高壓液相色譜法分析。在反相色譜柱上以甲醇（水+乙酸）為流動(dòng)相把經(jīng)預(yù)處理的酚類化合物分離，用二極陣列檢測(cè)器或紫外檢測(cè)器，測(cè)定各種酚的峰高或峰面積，以外標(biāo)法定量。3試劑3.1流動(dòng)相3.1.1甲醇：HPLC級(jí)，經(jīng)0.22μm濾膜過(guò)濾。3.1.2高純水：經(jīng)0.22μm濾膜過(guò)濾。3.2標(biāo)準(zhǔn)物酚類標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液各組分濃度（μg/mL）苯酚200504-硝基酚3-甲基酚2002002002002，4-二氯酚2，4，6-三氯酚五氯酚3.3四氫呋喃：重蒸餾。3.4正己烷：重蒸餾。3.5硫酸：0.5mol/L。3.6冰乙酸。3.7無(wú)水亞硫酸鈉。4儀器4.14.24.34.44.5高效液相色譜儀：可編程紫外檢測(cè)器。微量注射器：50μL、100μL。色譜柱：C或C柱。188化學(xué)工作站。尖底濃縮瓶：10ml具刻度。4.6富集柱。5樣品5.1水樣采集及貯存方法：樣品應(yīng)貯于棕色玻璃瓶中避光，用硫酸調(diào)pH至＜2存，應(yīng)盡快過(guò)柱，檢測(cè)。5.2樣品的預(yù)處理5.2.1富集柱的活化：首先用10~15ml甲醇活化，再用30ml純水活化，然后浸在純水。5.2.21.0L0.5mol/L硫酸使pH達(dá)到1.5~25~10ml/min的流速使水樣通過(guò)富集柱。若樣品是飲用水，先用無(wú)水硫酸鈉脫氯，若是地面水則用快速定量濾紙過(guò)濾后過(guò)柱。樣品富集完畢后將小柱在空氣中干燥10min，再用2ml四氫呋喃洗脫置于尖底濃縮瓶?jī)?nèi)。若有雜峰影響苯酚等的測(cè)定，可先用正己烷2ml洗脫后，再用四氫呋喃洗脫，定容體積均為1.0ml，分別貯存。5.2.3樣品測(cè)定時(shí)，抽取洗脫液進(jìn)樣，可平行測(cè)定三次。若用正己烷洗脫，則分別測(cè)定，將定量結(jié)果相加。6步驟6.1調(diào)整儀器6.1.1化學(xué)工作站：選擇各種色譜條件。6.1.2柱箱溫度：35℃~40℃。??6.1.3流動(dòng)相：A—甲醇/(CHCOOH)=1%；B—純水/(CHCOOH)=1%。336.1.4流速：0.6~1.2ml/min(微徑柱0.2~0.4ml/min)。6.1.5梯度：根據(jù)各自儀器分離情況確定，以下條件供參考。7.5minA：B=45：550.6ml/min9.5min4.0min9.0minA=901.2ml/min1.2ml/min0.6ml/minB=90A：B=45：556.1.6檢測(cè)器：在柱壓穩(wěn)定后開啟檢測(cè)器設(shè)立波長(zhǎng)變換程序表。各酚類特征波長(zhǎng)2，4-二氯酚五氯酚波長(zhǎng)，nm2753202752952953056.2定量方法：外標(biāo)法。6.3標(biāo)準(zhǔn)樣品6.3.150μL儲(chǔ)備液+950μL甲醇混合后為使用液。標(biāo)準(zhǔn)樣品每個(gè)樣品進(jìn)樣三次，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于7%即可認(rèn)為儀器穩(wěn)定。每批樣品必須同時(shí)制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。6.3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線制作：按下表配制標(biāo)準(zhǔn)溶液。使用液進(jìn)樣體積，μL苯酚4-硝基酚3-甲基酚2，4-二氯酚2，4，6-三氯酚五氯酚5.01020401002004001002004001002004001002004001002004001006.4進(jìn)樣操作6.4.1進(jìn)樣方式：微量注射器手工進(jìn)樣。6.4.2進(jìn)樣量：20~40μL。6.5定性分析6.5.1各組分出峰順序：苯酚、4-硝基酚、3-甲基酚、24-二氯酚、246-三氯酚和五氯酚。6.5.2保留時(shí)間：以苯酚出峰時(shí)間為1的相對(duì)保留時(shí)間見下表。各酚類相對(duì)保留時(shí)間五氯酚相對(duì)保留時(shí)間2753202752952953056.6定量分析6.6.1色譜峰的測(cè)量：測(cè)量峰高或峰面積，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算定量，或由化學(xué)工作站根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算定量。6.6.2計(jì)算：被測(cè)樣濃度按下式計(jì)算：ρ=(ρ×h×V×V)/(h×V×V)iisi12is34式中：ρ—試樣中酚類質(zhì)量濃度，μg/L；iρ—標(biāo)樣中酚類質(zhì)量濃度，μg/μL；ish—樣品峰高，mm；ih—標(biāo)樣峰高，mm；isV—標(biāo)樣進(jìn)樣體積，μL；1V—樣品濃縮液體積，μL；2V—樣品濃縮液進(jìn)樣體積，μL；3V—被提取的樣品體積，L。47注意事項(xiàng)7.1使用標(biāo)準(zhǔn)樣品條件7.1.1標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)樣體積與試樣體積相同，標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度應(yīng)接近試樣的濃度。7.1.2標(biāo)準(zhǔn)樣品盡可能同時(shí)分析，直接與單個(gè)標(biāo)樣比較以測(cè)定濃度。7.2安全7.2.1所用有機(jī)溶劑甲醇有毒性，四