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基因工程一輪復(fù)習(xí)導(dǎo)學(xué)案基因工程一輪復(fù)習(xí)導(dǎo)學(xué)案基因工程一輪復(fù)習(xí)導(dǎo)學(xué)案資料僅供參考文件編號(hào):2022年4月基因工程一輪復(fù)習(xí)導(dǎo)學(xué)案版本號(hào):A修改號(hào):1頁(yè)次:1.0審核:批準(zhǔn):發(fā)布日期:基因工程學(xué)案【考綱內(nèi)容】1、基因工程的誕生Ⅰ2、基因工程的原理及技術(shù)Ⅱ3、基因工程的應(yīng)用Ⅱ4、蛋白質(zhì)工程Ⅰ【基礎(chǔ)知識(shí)梳理】一、基因工程的概念:按照人們的愿望,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì),并通過(guò)____________和________等技術(shù),賦予生物以新的遺傳特性,從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的____________和____________。由于基因工程在_______分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的,因此又叫做________________。二、DNA重組技術(shù)的基本工具1、限制酶(全稱:________________)(1)來(lái)源:主要從____________中分離純化出來(lái)(2)特點(diǎn):識(shí)別____________分子的_________________,并且使每一條鏈中特定部位的____________之間的____________鍵斷開(kāi)。(3)結(jié)果:產(chǎn)生黏性末端或平末端2、DNA連接酶(1)類型:根據(jù)酶的來(lái)源不同,可分為_(kāi)________________和__________________,(2)作用:連接雙鏈DNA片段,恢復(fù)被限制酶切開(kāi)的兩個(gè)核苷酸之間的________________。3、載體(1)種類:通常利用____________作為載體,另外還有________________、____________等質(zhì)粒的化學(xué)本質(zhì):________________________分子(2)特點(diǎn):能____________、有________________________、有____________三、基因工程的基本操作程序1、____________的獲?。?)目的基因:編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。(2)獲取目的基因的方法:___________________________、__________________________、____________________________。(3)PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因①原理:_________________②過(guò)程:第一步:加熱至90~95℃DNA_________第二步:冷卻到55~60℃,____________第三步:加熱至70~75℃,_________________酶從引物起始互補(bǔ)鏈2、_________________的構(gòu)建是實(shí)施基因工程的第二步,也是基因工程的____________。(1)目的:使目的基因在受體細(xì)胞中_________________,并且可以_________________,使目的基因能夠_________________。(2)組成:_______________+_____________+_____________+____________(如抗生素基因)①啟動(dòng)子:是一段有特殊結(jié)構(gòu)的_________片段,位于______________,是___________酶識(shí)別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動(dòng)基因_______________,最終獲得所需的蛋白質(zhì)。②終止子:也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的_________________,位于_______________。③標(biāo)記基因的作用:___________________________________________________________________。常用的標(biāo)記基因是抗生素基因。3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞生物種類植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞微生物細(xì)胞常用方法________________________________________________________________受體細(xì)胞體細(xì)胞_________________原核細(xì)胞轉(zhuǎn)化過(guò)程將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T—DNA上→____________→導(dǎo)入植物細(xì)胞→整合到受體細(xì)胞的DNA→表達(dá)將含有目的基因的表達(dá)載體提純→取卵(受精卵)→________→受精卵發(fā)育→獲得具有新性狀的動(dòng)物____處理細(xì)胞→微生物細(xì)胞壁的通透性增加→重組質(zhì)粒與_________混合→感受態(tài)細(xì)胞吸收__________4、目的基因的檢測(cè)與鑒定(1)利用________________檢測(cè)目的基因的有無(wú);(2)利用________________檢測(cè)目的基因的轉(zhuǎn)錄;(3)利用________________檢測(cè)目的基因的翻譯;(4)利用___________生物學(xué)水平的檢測(cè)鑒定重組性狀的表達(dá)。四、基因工程的應(yīng)用1、植物基因工程(1)主要用于提高農(nóng)作物的抗逆能力(如_________、________、________、________和_________)。(2)改良農(nóng)作物的___________。(3)利用植物生產(chǎn)________等方面。2、動(dòng)物基因工程(1)用于提高動(dòng)物_______速度。(2)用于改良畜產(chǎn)品的___________。(3)建立________,用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)__________。(4)用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作___________的供體。3、基因治療(1)概念:把____________導(dǎo)入病人體內(nèi),使該基因的表達(dá)產(chǎn)物___________。(2)效果:治療___________的最有效的手段。(3)分類:__________和__________。4、基因工程藥物:___________、_________、___________、激素等。五、蛋白質(zhì)工程1、概念理解:①基礎(chǔ):蛋白質(zhì)分子的_____________及其與______________的關(guān)系。②操作:______________或_____________。③結(jié)果:__________________________________。④目的:滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。(2)操作過(guò)程:____________________________→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→___________________→_____________________________→合成DNA→基因表達(dá)→產(chǎn)生需要的蛋白質(zhì)。判斷正誤:(1)E·coliDNA連接酶既可連接平末端,又可連接黏性末端()(2)質(zhì)粒是小型環(huán)狀DNA分子,是基因工程常用的載體()(3)載體的作用是攜帶目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞中,使之穩(wěn)定存在并表達(dá)()(4)抗蟲基因即使成功地插入到植物細(xì)胞染色體上也未必能正常表達(dá)(2014·江蘇,23D)()(5)應(yīng)用DNA探針技術(shù),可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達(dá)(2011·四川,5D)()(6)將人的干擾素基因重組到質(zhì)粒后導(dǎo)入大腸桿菌,獲得能產(chǎn)生人干擾素的菌株()(7)由大腸桿菌工程菌獲得人的干擾素后可直接應(yīng)用 ()(8)利用乳腺生物反應(yīng)器能夠獲得一些重要的醫(yī)藥產(chǎn)品,如人的血清白蛋白,這是因?yàn)閷⑷说难灏椎鞍谆驅(qū)肓藙?dòng)物的乳腺細(xì)胞中()(9)蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對(duì)蛋白質(zhì)分子直接進(jìn)行操作,定向改變分子的結(jié)構(gòu)()(10)目前在抗菌性和溶血性均較強(qiáng)的多肽P1的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的多肽藥物,首先要做的是依據(jù)P1氨基酸序列設(shè)計(jì)多條模擬肽(2013·廣東3C)()(11)為培育抗除草劑的作物新品種,導(dǎo)入抗除草劑基因時(shí)只能以受精卵為受體 ()(12)目前,植物基因工程技術(shù)主要應(yīng)用于提高農(nóng)作物的抗逆性、生產(chǎn)某些天然藥物、改良農(nóng)作物的品質(zhì)、作器官移植的供體 ()(13)基因工程藥物主要來(lái)源于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn) ()【課后習(xí)題】1.如圖為DNA分子在不同酶的作用下所發(fā)生的變化,圖中依次表示限制酶、DNA聚合酶、DNA連接酶、解旋酶作用的正確順序是()A.①②③④ B.①②④③C.①④②③ D.①④③②2.下列關(guān)于載體的敘述中,錯(cuò)誤的是()A.載體與目的基因結(jié)合后,實(shí)質(zhì)上就是一個(gè)重組DNA分子B.對(duì)某種限制酶而言,載體最好只有一個(gè)切點(diǎn),但還要有其他多種酶的切點(diǎn)C.目前常用的載體有質(zhì)粒、λ噬菌體的衍生物和動(dòng)植物病毒D.載體具有某些標(biāo)記基因,便于對(duì)其進(jìn)行切割3.若要利用某目的基因(見(jiàn)圖甲)和P1噬菌體載體(見(jiàn)圖乙)構(gòu)建重組DNA(見(jiàn)圖丙),限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)分別是BglⅡ(A↓GATCT)、EcoRⅠ(G↓AATTC)和Sau3AⅠ(↓GATC)。下列分析合理的是()A.用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體B.用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體C.用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體D.用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體4.右圖表示用化學(xué)方法合成目的基因Ⅰ的過(guò)程。據(jù)圖分析,下列敘述正確的是()A.過(guò)程①需要DNA連接酶B.過(guò)程②需要限制性核酸內(nèi)切酶C.目的基因Ⅰ的堿基序列是已知的D.若某質(zhì)粒能與目的基因Ⅰ重組,則該質(zhì)粒和目的基因Ⅰ的堿基序列相同5.下列用于判斷目的基因是否轉(zhuǎn)移成功的方法中,不屬于分子檢測(cè)的是()A.通過(guò)害蟲吃棉葉看其是否死亡B.轉(zhuǎn)基因生物基因組DNA與DNA探針能否形成雜交帶C.轉(zhuǎn)基因生物中提取的mRNA與DNA探針能否形成雜交帶D.轉(zhuǎn)基因生物中提取的蛋白質(zhì)能否與抗體形成雜交帶6.將ada(腺苷酸脫氨酶基因)通過(guò)質(zhì)粒pET28b導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達(dá)腺苷酸脫氨酶。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.每個(gè)大腸桿菌細(xì)胞至少含一個(gè)重組質(zhì)粒B.每個(gè)重組質(zhì)粒至少含一個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)C.每個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)至少插入一個(gè)adaD.每個(gè)插入的ada至少表達(dá)一個(gè)腺苷酸脫氨酶分子7.在用基因工程技術(shù)構(gòu)建抗除草劑的轉(zhuǎn)基因煙草過(guò)程中,下列操作錯(cuò)誤的是()A.用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草茶葉病毒的核酸B.用DNA連接酶連接經(jīng)切割的抗除草劑基因和載體C.重組DNA分子導(dǎo)入原生質(zhì)體D.除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞8.2008年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了“發(fā)現(xiàn)和發(fā)展了水母綠色熒光蛋白“的三位科學(xué)家。將綠色熒光蛋白基因的片段與目的基因連接起來(lái)組成一個(gè)融合基因,再將該融合基因轉(zhuǎn)入真核生物細(xì)胞內(nèi),表達(dá)出的蛋白質(zhì)就會(huì)帶有綠色熒光。綠色熒光蛋白在該研究中的主要作用是A.追蹤目的基因在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制過(guò)程B.追蹤目的基因插入到染色體上的位置C.追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布D.追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)9.抗菌肽對(duì)治療癌癥有一定作用,下圖表示抗菌肽合成過(guò)程。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()eq\x(\a\al(克隆目,的基因))?eq\x(\a\al(導(dǎo)入畢,赤酵母菌))?eq\x(\a\al(篩選,菌種))?eq\x(\a\al(甲醇誘導(dǎo),抗菌肽表達(dá)))?eq\x(\a\al(分離,純化))?eq\x(\a\al(功能,研究))A.用PCR克隆目的基因不需要DNA解旋酶B.基因表達(dá)載體含有啟動(dòng)子和終止子C.篩選菌種時(shí)用基因探針檢測(cè)相關(guān)蛋白質(zhì)D.分離純化的目的是獲得較純凈的抗菌肽非選擇題:1.回答有關(guān)基因工程的問(wèn)題: (1)構(gòu)建基因工程表達(dá)載體時(shí),用不同類型的限制酶切割DNA后,可能產(chǎn)生黏性末端,也可能產(chǎn)生末端。若要在限制酶切割目的基因和質(zhì)粒后使其直接進(jìn)行連接,則應(yīng)選擇能使二者產(chǎn)生(相同、不同)黏性末端的限制酶。(2)利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素時(shí),構(gòu)建的表達(dá)載體含有人胰島素基因及其啟動(dòng)子等,其中啟動(dòng)子的作用是。在用表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí),常用處理大腸桿菌,以利于表達(dá)載體進(jìn)入;為了檢測(cè)胰島素基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,可用標(biāo)記的胰島素基因片段作探針與mRNA雜交,該雜交技術(shù)稱為。為了檢測(cè)胰島素基因轉(zhuǎn)錄的mRNA是否翻譯成,常用抗原—抗體雜交技術(shù)。(3)如果要將某目的基因通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入植物細(xì)胞,先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的中,然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞,通過(guò)DNA重組將目的基因插入植物細(xì)胞的上。(4)重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了。2.科學(xué)家從預(yù)期人的生長(zhǎng)激素的功能出發(fā),推測(cè)相應(yīng)的脫氧核苷酸序列,并人工合成了雙鏈DNA片段,獲得雙鏈DNA??茖W(xué)家將人的生長(zhǎng)激素基因與大腸桿菌的質(zhì)粒進(jìn)行重組,并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)。已知限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-G↓GATCC-,限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-↓GATC-。據(jù)圖回答:(1)獲得生長(zhǎng)激素基因的方法有______________________________________。用PCR技術(shù)擴(kuò)增基因時(shí)用到的耐高溫酶通常是指_________________________;步驟②用到的酶有_______________________。(2)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),必須有__________、目的基因、終止子以及__________。(3)為了精確地獲取圖中的目的基因,應(yīng)用__________切割質(zhì)粒,用_____切割目的基因。(4)將基因表達(dá)載體導(dǎo)入細(xì)菌B之前,要將細(xì)菌B放入一定濃度的_____________溶液中處理,使之成為感受態(tài)的細(xì)菌。人的基因之所以能與大腸桿菌的質(zhì)粒進(jìn)行重組并發(fā)揮其功能,是因?yàn)槎叩目臻g結(jié)構(gòu)都是_____________________。(5)人體的生長(zhǎng)激素基因能在細(xì)菌體內(nèi)成功表達(dá)是因?yàn)開(kāi)________________________。(6)將得到的大腸桿菌B涂布在一個(gè)含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上,能夠生長(zhǎng)的,說(shuō)明已導(dǎo)入了________________________,反之則沒(méi)有導(dǎo)入。導(dǎo)入重組質(zhì)粒以后,往往還需要進(jìn)行檢測(cè)和篩選,可用____________________制成探針,檢測(cè)是否導(dǎo)入了重組基因,在培養(yǎng)基中加入______________可將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。(7)上述方法制備人的生長(zhǎng)激素,運(yùn)用的現(xiàn)代生物工程技術(shù)是_____________________。3.胰島素可以用于治療糖尿病,但是胰島素被注射到人體后,會(huì)堆積在皮下,要經(jīng)過(guò)較長(zhǎng)的時(shí)間才能進(jìn)入血液,而進(jìn)入血液的胰島素又容易分解,因此,治療效果受到影響。如圖是用蛋白質(zhì)工程設(shè)計(jì)速效胰島素的生產(chǎn)過(guò)程,請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問(wèn)題:(1)構(gòu)建新的蛋白質(zhì)模型是蛋白質(zhì)工程的關(guān)鍵,圖中構(gòu)建新的胰島素模型的主要依據(jù)是________________。(2)通過(guò)DNA合成形成的新基因應(yīng)與____________結(jié)合后轉(zhuǎn)移到____________________中才能得到準(zhǔn)確表達(dá)。(3)若要利用大腸桿菌生產(chǎn)速效胰島素,需用到的生物工程有____________、____________和發(fā)酵工程。(4)圖中從胰島素模型到新的胰島素基因合成的基本思路是什么____________________________________________________________________________________________________________。4.如圖是從酵母菌中獲取棉株需要的某種酶基因的流程,結(jié)合所學(xué)知識(shí)及相關(guān)信息回答下列問(wèn)題。(1)圖中cDNA文庫(kù)________(填“大于”、“等于”或者“小于”)基因組文庫(kù)。(2)①過(guò)程提取的DNA需要_____________的切割,B是_____________過(guò)程。(3)為在短時(shí)間內(nèi)大量獲得目的基因,可用_____________擴(kuò)增的方法,其原理是____________________。(4)農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA具有_______________________

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