分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題 第八章重組DNA技術(shù)

分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題第八章重組DNA技術(shù)分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題第八章重組DNA技術(shù)分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題第八章重組DNA技術(shù)V:1.0精細(xì)整理，僅供參考分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題第八章重組DNA技術(shù)日期：20xx年X月第八章重組DNA技術(shù)一、選擇單選1、下列哪項不屬于生物工程？

A.PCR技術(shù)B.重組DNA技術(shù)C.蛋白質(zhì)工程D.酶工程E.細(xì)胞工程2、重組DNA技術(shù)中所用的限制酶是哪類？

A.Ⅰ型限制酶B.Ⅱ型限制酶C.Ⅲ型限制酶D.Ⅳ型限制酶E.Ⅴ型限制酶3、可以利用藍白篩選法篩選用pUC轉(zhuǎn)化的重組DNA克隆，是因為pUC包含以下哪種元件？

復(fù)制起點B.ampRC.acZ'D.多克隆位點MCSE.調(diào)節(jié)基因lacI4、關(guān)于λ噬菌體，以下敘述錯誤的是基因組DNA的部分序列并非溶原性生長所必需基因組DNA感染大腸桿菌后形成閉環(huán)結(jié)構(gòu)在溶原性生長時進行滾環(huán)復(fù)制復(fù)制時形成多聯(lián)體結(jié)構(gòu)其轉(zhuǎn)化的細(xì)菌經(jīng)過培養(yǎng)形成噬菌斑5、pBR322質(zhì)粒包含兩個抗性基因：氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因，據(jù)此可以利用哪種方法篩選重組DNA克隆？

α互補B.PCRC.插入失活D.核酸分子雜交E.藍白篩選6、制備重組DNA首先要制備目的DNA，要保證目的DNA的量和純度能滿足重組要求。常用的制備方法不包括PCR擴增B.從組織細(xì)胞分離基因組DNAC.化學(xué)合成D.逆轉(zhuǎn)錄合成cDNAE.限制酶截取7、第一種應(yīng)用于臨床的重組蛋白是基因工程疫苗B.基因工程抗體C.激素D.生長因子E.細(xì)胞因子8、在重組DNA技術(shù)中，目的DNA與載體在體外連接的過程稱為DNA的體外重組。體外重組的方法不包括：加人工接頭連接B.加同聚物尾連接C.互補黏端連接D.連接E.平移連接9、重組DNA的宿主細(xì)胞有原核細(xì)胞和真核細(xì)胞。用于制備基因文庫的宿主細(xì)胞主要是哺乳動物細(xì)胞B.大腸桿菌C.酵母D.枯草桿菌E.昆蟲細(xì)胞10、哪種方法要求宿主細(xì)胞必須是感受態(tài)細(xì)胞？

CaCl2法B.病毒感染法C.脂質(zhì)體載體法D.顯微注射法E.穿刺法11、藍白篩選屬于篩選重組DNA克隆方法的哪種？

PCR分析B.插入失活分析C.核酸分子雜交分析D.酶切分析E.免疫分析12、重組DNA技術(shù)領(lǐng)域常用的質(zhì)粒DNA是

A.T病毒基因組DNA的一部分

B.細(xì)菌染色體外的獨立遺傳單位

C.細(xì)菌染色體DNA的一部分

D.真核細(xì)胞染色體外的獨立遺傳單位

E.真核細(xì)胞染色體DNA的一部分13、某限制性內(nèi)切核酸酶切割5’…GGGGGG▼AATTCC…3’序列后產(chǎn)生

A.5’突出末端B.5’或3’突出末端

C.D.3’突出末端14、“克隆”某一目的DNA的過程不包括

A.重組DNA分子導(dǎo)人受體細(xì)胞

B.外源基因與載體的拼接

C.基因載體的選擇與構(gòu)建

D.篩選并無性繁殖含重組分子的受體細(xì)胞

E.表達目的基因編碼的蛋白質(zhì)15、關(guān)于基因文庫及其構(gòu)建，以下敘述錯誤的是基因文庫包括基因組文庫和cDNA文庫構(gòu)建基因組文庫常用的克隆載體是λ噬菌體、粘粒和酵母人工染色體系統(tǒng)目前構(gòu)建的cDNA文庫可以包含一種生物基因組所含的全部編碼序列真核生物cDNA文庫中的目的基因可以在原核細(xì)胞內(nèi)表達活性產(chǎn)物構(gòu)建cDNA文庫要用到逆轉(zhuǎn)錄酶多選：1、用目的DNA和質(zhì)粒制備重組DNA，下列哪些工具酶是必需的？

DNA聚合酶B.核酸酶C.連接酶D.限制酶E.修飾酶2、影響限制酶切割效率的因素有那些？

底物純度B.底物甲基化程度C.底物結(jié)構(gòu)D.反應(yīng)溫度E.反應(yīng)體系組成3、哪些因素會降低限制酶的特異性?

高濃度限制酶高濃度甘油低離子強度用Mn2+取代Mg2+高pH值4、限制酶的應(yīng)用非常廣泛，包括:DNA重組B.質(zhì)粒改造C.DNA雜交D.探針制備E.基因定位5、關(guān)于重組DNA技術(shù)使用的DNA連接酶用以將目的DNA與載體共價連接成重組DNA包括大腸桿菌DNA連接酶和T4DNA連接酶大腸桿菌DNA連接酶需要NAD，而T4DNA連接酶需要ATP大腸桿菌DNA連接酶用于連接切口或互補黏端T4DNA連接酶用于連接互補黏端或平端6、重組DNA技術(shù)常用的DNA聚合酶有DNA聚合酶ⅠB.Klenow片段C.TaqDNA聚合酶D.逆轉(zhuǎn)錄酶E.T4DNA聚合酶7、載體分為克隆載體和表達載體兩類?？寺≥d體含有以下基本元件復(fù)制起點B.克隆位點C.選擇標(biāo)記D.啟動子E.核糖體結(jié)合位點8、表達載體的哪些元件是克隆載體不需要的？

復(fù)制起點B.克隆位點C.選擇標(biāo)記D.啟動子E.核糖體結(jié)合位點9、原核細(xì)胞表達載體的表達元件有核糖體結(jié)合位點B.加尾信號C.啟動子D.增強子E.轉(zhuǎn)錄終止信號10、真核細(xì)胞表達載體的哪些表達元件是原核表達載體沒有的核糖體結(jié)合位點加尾信號啟動子增強子轉(zhuǎn)錄終止信號11、以下哪些是真核載體？

質(zhì)粒B.噬菌體C.酵母人工染色體D.逆轉(zhuǎn)錄病毒E.腺病毒12、以下哪些DNA分子可以通過化學(xué)合成法制備？

CdnaB.PCR引物C.寡核苷酸探針D.較小的基因E.人工接頭13、將外源DNA導(dǎo)入原核細(xì)胞，常用CaCl2法B.電穿孔法C.病毒感染法D.脂質(zhì)體載體法E.顯微注射法14、以下哪些是真核生物基因在原核細(xì)胞內(nèi)表達存在的問題？

真核生物基因的啟動子不能被原核生物的RNA聚合酶識別真核生物基因含有內(nèi)含子，原核細(xì)胞沒有相應(yīng)的剪接系統(tǒng)真核生物mRNA翻譯起始位點不能被原核生物核糖體識別真核生物基因的表達產(chǎn)物往往需要后加工，原核細(xì)胞沒有相應(yīng)的加工系統(tǒng)真核生物基因表達的蛋白質(zhì)容易被原核細(xì)胞的蛋白酶降解。15、基因工程藥物包括激素B.細(xì)胞因子C.生長因子D.基因工程疫苗E.基因工程抗體二、填空DNA克隆是從染色體中分離特定DNA片段，與一個DNA載體連接成，將其導(dǎo)入宿主細(xì)胞進行復(fù)制，并隨細(xì)胞分裂而擴增，最終得到該特定DNA片段的。重組DNA技術(shù)的核心內(nèi)容之一是DNA重組，即將與連接成重組DNA。限制酶是一種內(nèi)切核酸酶，由細(xì)菌產(chǎn)生，能識別雙鏈DNA的位點，并水解該位點內(nèi)部或附近的鍵。DNA重組需要連接酶，常用的DNA連接酶包括DNA連接酶和DNA連接酶。載體的化學(xué)本質(zhì)是DNA。載體不但能與重組，能導(dǎo)入，還能利用自身的調(diào)控系統(tǒng)，使目的DNA在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制或表達。載體分為載體和載體兩類?？寺≥d體含有以下基本元件：復(fù)制起點、和。常用的載體有以原核細(xì)胞為宿主的載體和噬菌體載體，以真核細(xì)胞為宿主的載體。質(zhì)粒是游離于之外、能的閉環(huán)雙鏈DNA，根據(jù)與宿主的相互關(guān)系分為寄生型質(zhì)粒和共生型質(zhì)粒。pBR322質(zhì)粒包含兩個抗性基因：抗性基因和抗性基因。λ噬菌體感染細(xì)菌后可以進行生長和生長。λ噬菌體的DNA為線性雙鏈分子，在分子兩端各有12nt的，是天然黏端，稱為位點。制備目的DNA就是要保證目的DNA的量和純度能滿足重組要求。常用的制備方法有分離純化、、和化學(xué)合成?；瘜W(xué)合成法主要用于合成、、人工接頭和較小的基因。在重組DNA技術(shù)中，與載體在體外連接的過程稱為DNA的體外重組。體外重組的產(chǎn)物稱為。體外連接的方法有平端連接、端連接、加同聚物尾連接、連接。外源DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞，使其獲得新的遺傳表型，稱為；其中通過噬菌體或病毒完成的轉(zhuǎn)化稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)或，外源DNA轉(zhuǎn)化培養(yǎng)的真核細(xì)胞稱為轉(zhuǎn)染。將外源DNA導(dǎo)入原核細(xì)胞，常用法、法和病毒感染法。將大腸桿菌懸浮在CaCl2溶液中，并置于低溫（0～5℃）環(huán)境下一段時間，Ca2+使的結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，增加，外源DNA可以進入，這種細(xì)胞稱為感受態(tài)細(xì)胞。許多載體的選擇標(biāo)記內(nèi)都有，插入目的DNA將導(dǎo)致該選擇標(biāo)記失活，稱為。與克隆載體相比，表達載體應(yīng)具備表達元件，主要包括、和轉(zhuǎn)錄終止信號等。基因文庫是已經(jīng)闡明的各物種基因的總稱，包括文庫和文庫?；蚪M文庫是應(yīng)用重組DNA技術(shù)構(gòu)建的一個，它包含了一種生物的全部DNA序列。三、解釋重組DNA技術(shù)克隆DNA克隆宿主細(xì)胞限制酶載體克隆載體表達載體DNA重組轉(zhuǎn)化感染轉(zhuǎn)染感受態(tài)細(xì)胞基因組文庫cDNA文庫四、問答1、DNA克隆的基本步驟2、簡述克隆載體及其基本元件3、簡述表達載體及其基本元件4、簡述pBR322質(zhì)粒載體及其基本元件5、簡述pUC質(zhì)粒載體及其基本元件6、將外源DNA導(dǎo)入原核細(xì)胞的常用方法7、真核生物基因在原核細(xì)胞內(nèi)表達存在那些問題8、用原核細(xì)胞表達真核生物基因應(yīng)注意什么