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..>臨床生化標準操作程序文件〔臨床生化檢驗SOP文件〕**醫(yī)院檢驗科CS600B全自動生化分析儀標準化操作程序文件單位:山東德棉職工醫(yī)院科室:檢驗科生化室文件:版本:批準施日期:有校期:一年復(fù)審方案:每年復(fù)審,測定系統(tǒng)變化時需進展修訂發(fā)放部門:檢驗科生化室編寫者:鞏建剛審批者:保管者:修訂者:CS-600B全自動生化分析儀標準化操作程序文件【儀器運行條件】為保證儀器的正常運行,儀器必須滿足以下條件:1.灰塵少、通風(fēng)良好的環(huán)境,防止陽光直接照射。2.地面水平良好(斜度<1/200),地面強度要能夠承受儀器的重量〔850kg〕。3.室內(nèi)溫度保持在15~32℃,溫度變化不超過±3℃/小時。4.室內(nèi)相對濕度應(yīng)保持在45~85℃,且不結(jié)露。5.純水供應(yīng):反滲水或離子交換水。出水量:40升/小時,水壓:0.5~3.5kg/cm2。6.電源供應(yīng):220V±10%,50~60Hz,最大功率4KVA。有保護性接地(接地電阻<10Ω下)。7.放置本儀器的房間請不要帶入以下電器:手機、對講機等發(fā)出特定電磁波的小功率電器?!鹃_機程序】1〕開機前檢查1.供電系統(tǒng)〔包括UPS〕是否正常。2.供水系統(tǒng)是否正常。3.檢查樣品針、試劑針、攪拌針、清洗針是否有彎曲、堵塞、污物、漏水等,如有上述情況發(fā)生,參照儀器維護、保養(yǎng)說明書處理。4.檢查清洗液〔迪瑞原廠供應(yīng)〕,包括樣品針、攪拌針、去污劑箱及試劑位45〔抗菌無磷〕和45位〔堿性〕各種清洗液,必要時補足。5.檢查打印機是否正常、打印紙是否安裝好及是否聯(lián)機〔打印機上Online燈亮〕。6.儀器及操作臺面外表干凈、無污物,機房空調(diào)正常開啟。2〕開機為保證試劑艙的冷藏作用,位于儀器右后下方的總電源〔ON〕可長期處于開啟狀態(tài),同時UPS長期處于工作狀態(tài)。1.翻開儀器右側(cè)電源〔ON〕開關(guān),記錄開機時間。2.待儀器自檢及程序裝載〔15分鐘〕完畢,儀器至備用〔Ready〕狀態(tài),如有錯誤〔Trouble〕,根據(jù)錯誤代碼查找維護保養(yǎng)說明書檢查原因,及時處理。3.自動開機在自動開機程序中設(shè)置開機時間:MAINMENUF5:DEFINEF6:DEFINEOPTIONALPARAMETERSF2:FORAUTOMATICSTARTUPCONDITION3〕執(zhí)行開機程序Startup1或Startup2開機程序設(shè)置:MAINMENUF5:DEFINEF6:DEFINEOPTIONALPARAMETERSF3:FORSTARTUP1或F4:FORSTARTUP2開機程序至少應(yīng)包括:1.更換儀器內(nèi)水箱純水一次。2.更換孵育槽內(nèi)純水一次。3.清洗管道3次。4.清洗液清洗探針3次。5.純水清洗探針3次。6.清洗比色杯〔酸、堿、水〕。7.測定水空白。8.根據(jù)具體試劑空白變化情況設(shè)定試劑空白檢查周期。9.檢查剩余試劑體積。四、根據(jù)檢查剩余試劑體積及當日工作量,及時補足當日工作所需試劑量。五、自動開機在自動開機程序中設(shè)置每日開機條件〔同上〕:MAINMENUF5:DEFINEF6:DEFINEOPTIONALPARAMETERSF2:FORAUTOMATICSTARTUPCONDITION【校準程序】將校準物從冰箱取出,凍干校準物按說明書參加蒸餾水復(fù)溶,輕輕顛倒混勻3次,不可用力震搖,室溫放置30分鐘至完全溶解;液體校準物從冰箱取出,室溫放置15分鐘以平衡至室溫。校準物的選擇盡可能選擇配套儀器廠家校準品。[1]MAINMENUF1:WORKLISTF1:ENTER+右空格鍵F4:DEFINECALIBRATIONF1:WORKLIST1[2]用光標鍵選欲校準工程,用"SELECT〞鍵選擇"1〞〔試劑空白〕及"2〞〔校準〕,F(xiàn)5:ENTER。[3]將校準品按屏幕顯示放入綠色校準架相應(yīng)位置,將校準架置入進樣軌道,翻開進樣架〔FEED〕?!举|(zhì)控程序】將質(zhì)控物從冰箱取出,凍干質(zhì)控物按說明書參加蒸餾水復(fù)溶,輕輕顛倒混勻3次,不可用力震搖,室溫放置30分鐘至完全溶解;液體校準物從冰箱取出,室溫放置15分鐘以平衡至室溫。至少有兩水平質(zhì)控品,8小時一次。質(zhì)控物的選擇盡可能選擇配套儀器廠家及人血清基質(zhì)質(zhì)控材料。[1]MAINMENUF1:WORKLISTF1:ENTER+右空格鍵F4:DEFINECONTROLF1:WORKLIST1[2]用光標鍵及SELECT鍵選擇質(zhì)控工程,F(xiàn)5:ENTER。[3]將質(zhì)控品按屏幕顯示放入黃色質(zhì)控架相應(yīng)位置,將質(zhì)控架置入進樣軌道,翻開進樣架〔FEED〕。質(zhì)控在控方可進展標本檢測。【標本檢測程序】1.輸入標本及測定工程:MAINMENUF1:WORKLISTF1:ENTERF1:TESTS[1]輸入順序號〔REQUESTNO〕及樣本〔PATIENTIDNO〕。[2]輸入檢測工程通道號或組合分析〔PROFILE〕代碼[3]F5:ENTER。2.編輯標本架號〔COMPILE〕:[1]MAINMENUF1:WORKLISTF2:COMPILEF1:BYPATIENTS[2]輸入起始順序號〔REQUESTNO,F(xiàn)ROM〕,終止順序號〔REQUESTNO,TO〕,ROUTINE〔1〕,開場架號〔STARTINGRACKNO〕。[3]F5:ENTER。3.將別離好的血清或血漿標本置入設(shè)置好的灰色樣品架上,注意樣本不可有凝塊,樣本量不可少于0.2ml。4.翻開進樣架〔FEED〕。5.測試完畢,執(zhí)行關(guān)機程序〔SHUTDOWN〕或設(shè)置自動關(guān)機。【關(guān)機程序】1.作好各種工作記錄登記:當日工作量登記表,當日校準登記表,室內(nèi)質(zhì)控登記表,儀器維護保養(yǎng)登記表。關(guān)機程序設(shè)置:MAINMENUF5:DEFINEF6:DEFINEOPTIONALPARAMETERSF5:FORSHUTDOWN關(guān)機程序至少應(yīng)包括:[1]清洗管道3次。[2]清洗液清洗探針3次。[3]純水清洗探針3次。[4]清洗比色杯〔酸、堿、水〕。[5]測定水空白。[6]檢查剩余試劑體積。3.自動關(guān)機在自動關(guān)機程序中設(shè)置每日關(guān)機條件〔同上〕:MAINMENUF5:DEFINEF6:DEFINEOPTIONALPARAMETERSF2:FORAUTOMATICSTARTUPCONDITION[1]清擦樣品針、試劑針、攪拌針、清洗針。[2]檢查清洗液〔Shimadzu原廠供應(yīng)〕,包括樣品針、攪拌針、去污劑箱及試劑位31〔ACID〕和32位〔ALKLI〕各種清洗液,必要時補足。[3]關(guān)閉水處理電源。[4]記錄關(guān)機時間。[5]及時補足次日工作所需試劑量。[6]清潔儀器及操作臺面。[7]關(guān)閉機房空調(diào)?!揪S護保養(yǎng)程序】[1]檢查去污劑箱清洗液〔NEWCLEAN,8%〕液面,及時更換。[2]更換樣品針清洗液〔NEWALKLI,5%〕。[3]更換攪拌針清洗液〔NEWALKLI,5%〕。[4]更換去離子水箱純水。[5]更換孵育槽純水。標本的接收與拒收標準化操作程序文件單位:山東德棉職工醫(yī)院科室:檢驗科生化室文件:版本:批準施日期:有校期:一年復(fù)審方案:每年復(fù)審,測定系統(tǒng)變化時需進展修訂發(fā)放部門:檢驗科生化室編寫者:鞏建剛審批者:保管者:修訂者:標本的接收與拒收1病人的準備做血液檢驗工程檢驗的病人,一般要求采血前禁食12~14小時,采血的前一天防止吃高脂肪、高蛋白類食物,防止飲酒。否則,會引起血脂及*些血清酶結(jié)果升高,甚至血清出現(xiàn)混濁,影響整個檢驗結(jié)果;進展葡萄糖耐量試驗的病人,在試驗前3天給予適量的碳水化學(xué)物飲食,有利于取得正確的結(jié)果;做碘131吸收試驗者,在試驗前一個月停服一切含碘的藥物和含碘豐富的食物,如海產(chǎn)品類。2采血時間血液生化檢驗一般要求早晨空腹安靜時采血。因為體內(nèi)的各種化學(xué)成份受許多因素調(diào)節(jié):如飲食后大量葡萄糖及脂類物質(zhì)吸收入血,使血糖和血脂上升,游離脂肪酸及無機磷降低;運動后會使乳酸、丙酮酸、乳酸脫氫酶、轉(zhuǎn)氨酶、肌酸激酶等升高,血糖降低;晝夜變化大的成份有皮質(zhì)醇、血清鐵、膽紅素等;日間變化大的主要是代謝廢物成份如尿素、尿酸等;大量飲水可致血液稀釋等等。所以,做血液生化檢驗時應(yīng)掌握好采血時間。但是,對重癥昏迷或急癥病例,可隨時采血送檢糖、鉀、鈉、鈣、血氣分析、淀粉酶等工程。但在輸液時采血應(yīng)防止送檢工程受輸液成份的影響,如輸液中補鉀、補糖、補鹼時送檢,對血鉀、血糖、二氧化碳結(jié)合力等工程均有影響。3采血部位成人一般取肘部靜脈,肥胖者可用腕背靜脈;嬰兒常用頸部靜脈、股動脈或前囟靜脈竇;剛出生的嬰兒可收集臍帶血;尸體解剖者取心臟血;血氣分析一般采動脈血;檢驗只需微量全血時,成人從耳垂或指尖取血,嬰兒從大腳趾或腳跟取血;輸液病人采血應(yīng)防止在輸液的同一側(cè)上肢或下肢采血,燒傷患者采血應(yīng)防止穿剌炎癥或水腫部,以免影響結(jié)果。4采血操作及送檢的本卷須知4.1采血器械:采血用的注射器、試管必須枯燥清潔。注射器及針頭不宜用酒精消毒。目前多用一次性注射器及試管。4.2采血操作:必須按無菌操作,采血部位皮膚必須枯燥,止血帶不可縛扎過久,抽血時速度不可過快,以免血細胞破裂,采血后應(yīng)卸下針頭再將血液沿管壁徐徐注入試管內(nèi)。4.3防止氣體逸散:采集血氣分析樣本,抽血時注射器內(nèi)不能有空泡,抽出后立即用小橡皮密封針頭,隔絕空氣。因空氣中的氧分壓高于動脈血,二氧化碳分壓低于動脈血;作二氧化碳結(jié)力測定時,盛血標本的容器亦應(yīng)加塞蓋緊,防止血液與空氣接觸過久,影響檢驗結(jié)果。4.4防止分解及自身變化:采血后應(yīng)盡快送檢。因血液中有些化學(xué)成份于離體后極易分解,使其含量改變,如血糖及酶類測定,時間過久,血細胞酵解可使血糖下降,酶活力變化等。有些化學(xué)成份在細胞內(nèi)外相差懸株,離體時間過長,細胞內(nèi)外濃度會發(fā)生變化,影響測定結(jié)果。如肌酸激酶、乳酸脫氫酶、電解質(zhì)等。4.5防止污染:有些檢查工程要求極嚴格,其采血器具及標本容器必須經(jīng)過化學(xué)清潔。如血氨、銅、鋅、鐵等工程,因其含量極低,稍有污染即影響結(jié)果。作淀粉酶測定時,要防止唾液污染,因唾液中含有大量的淀粉酶,污染后會引起假性淀粉酶升高。4.6防止溶血:作各類生化檢驗,要防止血細胞破裂溶血,因溶血引起細胞內(nèi)外濃度改變,可使鉀、膽紅素、氯化物、無機磷、ALT、AST、LDH等升高,鈉、鈣、AKP等降低,溶血對*些實驗的反響過程干擾:如血紅蛋白可直接抑制脂肪酶的活性,使脂肪酶降低。溶血可影響呈色反響終點為紅色的實驗,如酶法測定血糖、膽固醇、甘油三酯、膽紅素的重氮反響、尿素的二乙酰肟法等。5抗凝劑的選擇生化檢驗大部份工程都采用血清,但有些工程需用血漿或全血,采集的血液必須參加抗凝劑??鼓齽┑姆N類較多,如選擇不當,亦會影響檢驗結(jié)果的準確性。下面介紹幾種生化檢驗常用的抗凝劑及其用途:5.1草酸鉀:常用于尿素、肌酐、纖維蛋白原等測定,不能用鉀、鈣等測定,對LDH、丙酮酸激酶、AKP和淀粉酶有抑制作用。5.2肝素:常用于電解質(zhì)、血氣分析、血氨等測定。其鈉鹽可使淀粉酶升高。5.3氟化鈉:常用氟化鈉—草酸鈉混合抗凝劑作血糖測定的抗凝劑,它可抑制血細胞葡萄糖酵解酶的作用,延長標本的保存時間。5.4二乙胺四乙酸鈉鹽〔EDTA-Na2〕:生化常用的抗凝劑,但不能用于鈣、鈉、及含氮物質(zhì)的測定,對淀粉酶、肌酸激酶、AKP、ACP、5’-核苷酸酶等可抑制,對丙酮酸激酶有明顯升高的作用。正確的血液收集方法采集步驟:查看檢驗單,詢問病史,查對檢驗單上病人姓名、性別、年齡等工程與病人是否吻合,耐心檢查需要空腹血檢驗工程要詢問病人是否8小時以內(nèi)沒有能量攝入,詢問病人在檢驗前是否有足夠的休息;需要增添工程時先與出具檢驗申請單的醫(yī)生聯(lián)系。請患者準備?!?請將左手衣袖挽起,手伸直平放,拳頭握緊。〞〕對孩子應(yīng)多哄勸,防止劇烈躁動、哭鬧。對于緊張或有暈血史的病人要進展撫慰〔"您可以側(cè)過身去,不看很快會好〞〕。采血器材準備,選擇相應(yīng)的真空采血管;并記錄采集時間。選擇穿刺血管:扎好壓脈帶,觀察血管走向,選擇穿刺點,松開壓脈帶〔壓脈帶壓迫時間不能超過1分鐘〕,正在輸液的病人絕對不可同側(cè)采血,更不可以利用原有的輸液針頭采血。消毒:以穿刺點為圓心,用蘸有碘伏的棉簽由內(nèi)到外螺旋型涂抹,消毒范圍為直徑大約3厘米,注意消毒過的地方不能重復(fù)涂抹,在涂抹的過程中棉簽必須也要同時旋轉(zhuǎn)。采樣及混勻:等待碘伏干了以后〔必須等到干了以后,否則達不到消毒效果〕,再次扎好壓脈帶,將針頭平面朝上與手臂成15°穿刺,最好一針見血。拔出采血管后立即進展顛倒8次混勻。在抽血時要詢問病人感受〔如有無心慌,頭暈等情況〕,當出現(xiàn)異常時如:"病人出汗、面色蒼白、暈倒時立即拔出針并急救"操作失敗,取得病人諒解,再次進展操作〔"對不起,由于……的原因需要再取一次血,請原諒〞〕。采樣盡量在1分鐘內(nèi)完成。止血:采血完畢后,解開壓脈帶,退針后請病人"手指壓住棉球,手伸直抬高于心臟,保持兩分鐘〞〔如果是有出血傾向患者如紫癜,ITP,血液病等要壓迫5~10分鐘直到無血滲出〕。標本前處理:將采血管與相應(yīng)的檢驗單裹好,分類,盡快送檢驗工程所對應(yīng)的采血管:1.生化檢驗黃頭管2.凝血試驗藍頭管3.血常規(guī)紫頭管采血順序:紅頭管→藍頭管→紫頭管→黃頭管,注:除紅頭管外,其他各種采血管均須顛倒混勻8次。以下檢驗工程須特別注意1.所有生化工程、微量元素、血沉必須用空腹血;乙肝三對最好用空腹血。2.糖耐量試驗:〔方法一〕空腹抽血→吃飯〔3分鐘內(nèi)進食75克葡萄糖或二兩饅頭一個〕→飯后30分鐘抽血→飯后60分鐘抽血→飯后120分鐘抽血〔方法二〕空腹抽血→吃飯〔3分鐘內(nèi)進食50克葡萄糖〕→飯后60分鐘抽血注:血糖正常的人吃葡萄糖,高血糖的人吃饅頭.3.激素檢查:病人必須空腹且在抽血前要靜坐30分鐘,激素全套要抽血5ml。臨床化學(xué)檢驗血液標本的采集和處理臨床檢驗的目的是為臨床提供準確可靠的實驗診斷依據(jù)。為了保證實驗數(shù)據(jù)的可靠性,在檢驗醫(yī)學(xué)中必須堅持全面質(zhì)量控制〔totalqualitycontrol,TQC。即指對影響臨床檢驗結(jié)果可靠性的各方面因素及各個環(huán)節(jié)進展質(zhì)量控制〕和全過程質(zhì)量控制〔即指對實驗工作的全過程進展質(zhì)量控制和質(zhì)量管理〕。全過程質(zhì)量控制包括實驗前〔分析前〕、實驗中〔分析中〕和實驗后〔分析后〕三個階段的質(zhì)量控制。在實驗誤差中實驗前誤差占70%,因而實驗前質(zhì)量保證對減少實驗誤差顯得尤其重要。實驗前質(zhì)量保證包括病人準備、標本收集、處理、貯存和運輸?shù)?,因而能否正確地、標準化地采集和處理標本,是能否做到實驗前質(zhì)量保證的重要內(nèi)容。在臨床化學(xué)檢驗中,血液標本是最多應(yīng)用的生物體液,血液標本因素是影響臨床化學(xué)分析準確性和可靠性的最重要、最直接的因素。我國從我們的國情出發(fā),參考了美國臨床實驗室標準化委員會〔NCCLS〕的有關(guān)規(guī)定,對臨床化學(xué)檢驗血液標本的有關(guān)問題也提出了相應(yīng)的要求。我國衛(wèi)生標準技術(shù)委員會臨床檢驗標準專業(yè)委員會〔CCCLS〕已對"臨床化學(xué)檢驗血液標本的收集與處理〞提出了"中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準〞,旨在通過標本方面的質(zhì)量控制到達臨床化學(xué)分析的質(zhì)量保證。目前該"標準〞文件正在待批中。一、臨床化學(xué)檢驗血液標本的定義臨床化學(xué)檢驗血液標本是指為完成*項或多項臨床化學(xué)檢驗工程而采集的一定量的血液,包括抗凝及非抗凝血。二、血液標本的采取〔一〕采取部位1.靜脈采血:應(yīng)用最多的采血方式。常用的靜脈為肘前靜脈、腕背靜脈,小兒和新生兒有時用頸靜脈和前囟靜脈。2.動脈采血:主要用于血氣分析時。常用的動脈為股動脈、肱動脈、橈動脈和臍動脈。3.毛細血管采血:適用于僅需微量血液的試驗或嬰幼兒。常用部位為耳垂、指端,小兒有時為大趾和足跟。采血針刺入皮膚深度應(yīng)為2mm(<2.5mm),采血局部應(yīng)無炎癥、水腫等?!捕硺吮绢愋团R床化學(xué)檢驗血液標本分為血清、血漿和全血3種。血清和血漿為臨床常用,除前者不含纖維蛋白原外,其余多數(shù)化學(xué)成分無差異;全血只有在紅細胞內(nèi)成分與血漿成分相似時才用;血氣分析、血紅蛋白電泳等時用全血,一般臨床化學(xué)分析多不用全血。三、全血處理為血清或血漿血液標本采取后應(yīng)盡可能早地自然地使血清〔漿〕從與血細胞接觸的全血中別離出來。一般應(yīng)于采血后2h內(nèi)別離出血清或血漿。全血處理為血清或血漿分為離心前、離心中和離心后三個階段,對各不同階段均有具體要求。〔一〕離心前階段即指標本采集到離心處理前的一段時間。1.血清:標本離心前一般應(yīng)令其自行凝集,不可用木棍等剝離凝血塊。通常于室溫〔22~25oC〕放置30~60min血標本可自發(fā)完全凝集;冷藏標本凝集緩慢;加促凝劑時凝集加快〔標本采集后應(yīng)輕輕顛倒混合5~10次,以確保促凝劑作用〕。2.血漿:需用血漿標本時,必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,而且采血后必須立即輕輕顛倒采血管混合5~10次〔以確??鼓齽┌l(fā)揮作用〕,5~10min后即可別離出血漿。3.冷藏標本:標本冷藏可抑制細胞代謝,穩(wěn)定*些溫度依賴性成分但全血標本一般不能冷藏;血鉀測定標本冷藏不得超過2h。血液中兒茶酚胺、pH/血氣、氨、乳酸、丙酮酸、胃泌素、甲狀腺激素等檢測時需用制冷的標本。標本需要冷藏〔2~8oC〕時,標本采取后應(yīng)立即將標本置于冰屑或冰水混合物〔不可用大冰塊〕,并且必須保證標本與制冷物充分接觸,保證制冷物到達標本的高度。4.代謝抑制劑和防腐劑:*些添加劑參加血液標本中能抑制細胞代謝,可以防止血液標本貯存時分析物濃度的變化。血液葡萄糖測定時,如在血液中參加氟化鈉,在血細胞未別離的情況下,葡萄糖在22~25oC時可穩(wěn)定24h,2~8oC時可以穩(wěn)定48h;但在新生兒和兒童標本,由于紅細胞壓積高,用氟化鈉難以控制細胞的糖酵解作用;甲醛-草酸鉀抗凝保存劑不適合血糖測定;氟化鈉-麝香草酚混合劑因能抑制酶活性,不適用于酶學(xué)測定。5.標本采集現(xiàn)場:(1)標本采集后應(yīng)盡快送往實驗室,尤其當收集區(qū)溫度超過22oC時此點更為重要;(2)血液標本采集后血管必須加塞、管口向上、垂直放置,以減少管中內(nèi)容物振動,促進凝血完全,防止標本蒸發(fā)、污染和外濺等;(3)已收集的血液標本應(yīng)溫和地處理,要防止標本管振蕩所造成的溶血;溶血可影響測定結(jié)果。有嚴重影響〔使結(jié)果升高〕的工程有:乳酸脫氫酶、血清門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、血清鉀和血紅蛋白;引起值得注意的影響的工程有:血清鐵〔↑〕、血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶〔↑〕和血清甲狀腺素〔↓〕;輕度受影響〔增加〕的有:總蛋白、白蛋白、血清磷、血清鎂、血清鈣和酸性磷酸酶;(4)應(yīng)防止對光線敏感的分析物暴露在人造光或太陽光〔紫外線〕照射下。如VA、VB6、β-胡蘿卜素、卟啉、膽紅素等測定時,標本管應(yīng)該用鋁箔或類似物質(zhì)包裹保護起來。6.標本運送:全血標本應(yīng)盡快從采血現(xiàn)場運送至實驗室,如果運送距離較遠,特別是因分析物穩(wěn)定性有影響,必要時可于采血現(xiàn)場別離出血清或血漿后,再送往實驗室;標本運送過程中要注意標本的包裝、溫度要求、處理方法等,要確保分析成分的穩(wěn)定性;標本管在運送過程中要保持管口封閉、向上垂直放置。7.實驗室承受標本及離心標本準備:(1)要有標本收取記錄〔應(yīng)認真核對檢驗中清單,對有關(guān)情況要認真記錄,標本接收及處理應(yīng)簽字登記〕;(2)對承受的標本要予以分類準備離心;(3)實驗室承受標本后應(yīng)仍保持標本管于密閉封口、管口向上,垂直位放置。管塞移去后血中CO2喪失,會造成pH增加,離子鈣和酸性磷酸酶減少,尤其pH變化會影響*些檢測結(jié)果的準確性;(4)標本凝集時間要充分;加抗凝劑的血液標本可以立即離心;加促凝劑的標本可于采血后5~15min盡早離心;抗凝的全血標本〔鋅、鋰、原卟啉等測定時〕可以不離心;(5)冷藏〔2~8oC〕標本應(yīng)保持這個溫度直到準備離心。推薦用溫度控制離心機;(6)離心標本前不主張用小木棒或類似器材去剝離附著于試管壁和管塞上的凝塊,人為剝離會誘導(dǎo)溶血。如果必須露出試管壁或取下管塞時,一定要十分注意,動作一定要輕柔?!捕畴x心階段即指標本處于離心機里的一段時間。1.離心時間和相對離心力(RCF):臨床化學(xué)分析血液標本離心時,RCF(1000~1200)×g,離心時間為5~10min。2.溫度控制離心:離心時產(chǎn)熱不利于分析物穩(wěn)定,臨床化學(xué)分析血液標本離心時必須采用溫度控制離心機。一些溫度依賴性分析物〔如促腎上腺皮質(zhì)激素、環(huán)腺苷酸、兒茶酚胺等〕應(yīng)在4oC別離;無特殊溫度要求的分析物,離心溫度應(yīng)設(shè)定在20oC~22oC;溫度低于15oC可以人為地使血鉀測定值增高;冷藏運送的標本必須在要求的溫度下離心。3.關(guān)于再離心:標本離心最好一次完成,假設(shè)需再次離心,應(yīng)距上次離心相隔時間很短;對于含有別離物質(zhì)的血標本絕不可以再離心?!踩畴x心后階段指標本離心后和用于檢測的血清或血漿被取出一定量之前的一段時間。1.血清或血漿與接觸的血細胞和凝塊的別離應(yīng)在采血后盡快〔2h內(nèi)〕完成。2.別離的血清或血漿的貯存:實驗室的室溫和血清或血漿的貯存溫度、時間,是分析物穩(wěn)定性和測定結(jié)果準確性的重要參數(shù)。(1)于22oC~25oC血清或血漿的保存不超過8h;(2)實驗于8h內(nèi)不能完成時,血清或血漿應(yīng)置2oC~8oC保存;(3)48h內(nèi)不能完成的實驗工程,或別離的血清或血漿需貯存48h以上時,應(yīng)于-20oC保存;(4)標本不可反復(fù)凍融〔只能凍融一次〕,且不可貯存于無霜冰箱〔可造成樣品溫度變化〕;(5)離心后別離凝膠〔凝膠屏障〕上面的血清可保存2~5天,但必須保證凝膠的完整性;但應(yīng)用非凝膠別離物質(zhì)時,離心后必須立即將血清或血漿移出。(6)血清或血漿必須保存于密閉的試管中。四、血清或血漿別離物質(zhì)是指將血清或血漿從全血中別離出來的物質(zhì),包括凝膠物質(zhì)與非凝膠物質(zhì)?!惨弧衬z物質(zhì)為一類具有特定粘度和特殊比重〔介于血清或血漿與凝塊之間的比重〕的惰性凝膠物質(zhì),用〔1000~1100〕×gRCF離心10min,能在血清或血漿與凝塊之間形成不可穿透的凝膠屏障,從而將血清或血漿與其接觸的血細胞、凝塊分開。〔二〕非凝膠物質(zhì)是由惰性物質(zhì)〔玻璃、塑料、纖維、毛氈等〕構(gòu)成的小珠、盤、濾器、纖維塞等組成。具有介于血清或血漿與凝塊之間的比重,將其輕輕參加血管中,用(1000~1100)×gRCF離心10min時,可透過血液移動至血清或血漿與血細胞、凝塊之間,形成一個界面,使血清或血漿被別離出來?!踩惩暾哪z管系統(tǒng)該系統(tǒng)是由一個真空采血管〔硅化塑料管〕、內(nèi)含惰性凝膠物質(zhì)、促凝劑或抗凝劑組成。使用時要注意該產(chǎn)品必須具有相應(yīng)性能證書和有效期,并且必須在其有效期內(nèi)正確使用。隨著檢驗方法日益完善,高精檔次的自動化儀器的大量應(yīng)用,以及檢驗的科學(xué)管理和檢驗工作人員技術(shù)水平不斷提高,明顯降低檢測過程中的影響因素和干擾,而分析檢測前的各類影響或干擾因素相對增多?,F(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)對檢測標本的留取與收集提出較高的要求,而廣闊就診患者也必需了解留取標本的根本知識,遵照囑托,配合檢驗人員,以使檢驗結(jié)果更準確準確可靠。門診檢驗常見的標本一般包括血液(指血,靜脈血)、尿、糞便、腦脊液、胸水、腹水、前列腺液、精液、陰道分泌物等,這些標本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。標本采集本卷須知一、血液標本盡量防止生理因素的影響,有些生理因素,如吸煙、進食、運動、情緒波動、妊娠、體位等均可影響血液中*些成分的變化,有些甚至還有晝夜變化。采集血液標本的條件應(yīng)盡量一致為宜,如無法防止,應(yīng)說明在標本上注明該因素。1.外周血一般選取左手無名指內(nèi)側(cè)采血,該部位應(yīng)無凍瘡,炎癥,水腫,破損。如該部位不符合要求,以其他手指部位代替。對燒傷病人,可選擇皮膚完整處采血。由于局部血液常規(guī)檢測(如白細胞計數(shù)、分類等)受生理因素影響波動過大,比較時宜便條件盡量一致。出、凝血功能的檢測工程(如血小板計數(shù),出血時間或凝血時間等)的檢測,不宜服用抗凝、促凝藥物,以免影響測定結(jié)果。2.靜脈血除涉及各種止血和血栓檢測等工程需采用抗凝靜脈血血漿外,目前絕大多數(shù)檢測工程的分析檢測可直接采用靜脈血的血清。在血清檢測工程中,有些(如血糖,血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大,一般以清晨空腹血標本為宜,有些在血中衰變較快(血清酶活性測定如ACP活性等),0~4℃貯存活性減弱也不一,這些工程的檢測必須及時而快速,有些(如肌酸激酶等)受運動等因素影響較大。抽血時防止溶血的發(fā)生也十分重要,尤其涉及血鉀,LDH等的測定。切忌在輸液的同側(cè)靜脈抽血做各項檢驗。二、尿液標本同血標本一樣,尿液標本受飲食、運動、藥物量等因素的影響也較大,特別是飲食的影響,故一般來說晨尿優(yōu)于隨機尿。晨尿是指清晨起床后的第一次尿標本,較濃縮和酸化,有形成分(如血細胞,上皮細胞,管形)相對集中便于觀察。隨機尿即隨意一次尿,留取方便,但受飲食、運動、藥物影響較甚,易于出現(xiàn)假陽性和假陰性結(jié)果,如飲食性蛋白尿,飲食性糖尿,維生素C干擾潛血結(jié)果等。餐后尿(午餐后2小時收集的患者尿液)適用于尿糖,尿蛋白和尿膽原的檢查,此時的尿標本可增加試驗敏感性,檢出較輕微的病變。12小時尿細胞計數(shù),即Addis(前晚8時排空膀胱后留取至次日8時的所有尿液),因時間較長,細菌易繁殖,須參加防腐劑甲醛。24小時尿(第一天晨8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液)中化學(xué)物質(zhì)的定量,包括蛋白,糖,Ca2十等,檢測不同的物質(zhì),選擇不同的防腐劑防腐。清潔中段尿多用于尿細菌培養(yǎng),要求無菌,沖洗外明后留取標本。所有尿標本的收集都應(yīng)足量,最少12m1,最好50ml,定時尿須全部收集,對女性患者應(yīng)防止陰道分泌物、經(jīng)血污染尿標本。三、糞便標本糞便標本的檢測對判斷消化系統(tǒng)疾病有重要參考價值。采集時要求用干凈的件簽選取含有粘液、膿血等異常病變成分的糞便,對外觀無異常的糞便須從外表、深處及糞端多處取材。找寄生蟲蟲體及作蟲卵計數(shù)應(yīng)收集24小時糞便。查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)于排便后立即檢查,從有膿血和稀軟處取材,保溫送檢。查日本血吸蟲蟲卵時應(yīng)取粘液、膿血局部,孵化毛蚴時至少留取30g糞便,且需盡快處理。檢查蟯蟲卵須用透明薄膜拭子于晚12時或清晨排便前自肛門周圍皺處處拭取并立即鏡檢。隱血試驗(化學(xué)法),試驗前3日禁食肉類及含動物血食物并禁服鐵劑,維生素C等。所有糞便標本采集后1小時內(nèi)應(yīng)檢查完畢,以防止有形成分受消化酶及pH的破壞。四、腦脊液標本腦脊液標本采集后立即送檢,放置過久將影響檢驗結(jié)果:如細胞變性,破壞,導(dǎo)致計數(shù)和分類不被:有些化學(xué)物質(zhì)如葡萄糖等將分解含量減少:細菌發(fā)生自溶影響細菌的檢出率。腦脊液抽取后一般分裝三個無菌管,第一管作細菌培養(yǎng),第二管作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查,三管順序不宜顛倒。因標本采集較難,全部送檢和檢測過程應(yīng)注意平安。五、胸腹水標本與腦脊液標本一樣,采集后的標本注意平安,及時送檢。一般也分裝三管,一管作常規(guī)細胞學(xué)檢查,一管生化檢查,一管細菌培養(yǎng),順序以與腦脊液一樣為宜。六、前列腺液標本前列腺液標本由前列腺按摩后采集,液量少時直接滴在載玻片上及時送檢,須注意防止標本蒸干,量多時收集在干凈枯燥的試管中。假設(shè)按摩不出前列腺液,可檢查按摩后的尿液沉渣。七、陰道分秘物標本陰道標本采集前24小時應(yīng)制止房事、盆浴、明道檢查、明道灌洗及局部上藥等.取材所用器械需要清潔。一般用鹽水浸濕棉拭子自陰道或陰道彎后部、宮頸管口取材,制生理鹽水涂片后觀察分泌物標本,經(jīng)期的女性患者不宜檢查陰道分泌物標本。天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶〔速率法〕標準化操作程序文件單位:山東德棉職工醫(yī)院科室:檢驗科生化室文件:版本:批準施日期:有校期:一年復(fù)審方案:每年復(fù)審,測定系統(tǒng)變化時需進展修訂發(fā)放部門:檢驗科生化室編寫者:鞏建剛審批者:保管者:修訂者:天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶〔速率法〕1概述AST廣泛分布于人體,在心,肝,骨骼肌,腎和紅細胞內(nèi)有較高的濃度,這些組織的損傷或疾病,如心肌梗死,病毒性肝炎,肝壞死,肝硬化,和肌營養(yǎng)不良等癥均會引起血清或血漿AST水平的升高。2樣本收集新鮮無溶血標本,血清或血漿樣本均不溶血。血漿樣本只能采用肝素或EDTA抗凝。樣本在4攝氏度可穩(wěn)定7天。采血前病人應(yīng)禁食12小時,采集靜脈3ml,待凝固后〔最好放在37攝氏度水浴箱內(nèi)45分鐘〕通常為加抗凝劑的血液在30-60分鐘凝血析出血清。3000r/min離心5-10分鐘,別離出血清備用。不建議采用血漿標本。3方法原理L-天冬氨酸+a-酮戊二酸------------草酰乙酸+L-古氨酸草酰乙酸+NADH+H+-----------L-蘋果酸+NAD+4劑來源,配置及儲存試劑來源:迪瑞試劑配置:試劑一和試劑二均為液體試劑,可直接使用。啟用后在2-8度可穩(wěn)定30天。假設(shè)試劑混濁,或以蒸餾水為空白在340nm處的光吸收值低于1.1A,應(yīng)予丟棄。試劑儲存:試劑避光儲存2-8攝氏度可穩(wěn)定至標簽所示失效期。5分析儀器CS-600B全自動生化分析儀分析參數(shù):樣品量15u/l試劑量:第一試劑240u/l〔R1〕;第二試劑60u/l測光點23—38測定模式:速率法負反響分析波長:340nm/405nm(主波長/副波長)6計算方法樣本濃度〔U/L〕=樣本管吸光度的變化×校準液濃度〔U/L〕校正管吸光度的變化7線性范圍3----1000U/L8參考范圍:0—40u/新生兒和嬰兒的AST大約是成人的二倍,六個月以后降至成人水平。9失控控理1:立即重測同一質(zhì)控品,如重測后結(jié)果仍不再允許范圍,請進展下一步。2:新開一瓶質(zhì)控品,重測失控工程,如新開的質(zhì)控血清結(jié)果正常,則原來質(zhì)控血清可能過期或在室溫防止時間過長而變質(zhì),如結(jié)果仍不再允許范圍,則進展下一步。3:進展儀器維護,重測失控工程。檢查儀器狀態(tài),查明光源是否更換,比色杯是否需要清洗或更換?對儀器進展清洗等維護。另外還要檢查試劑,此時可更換試劑已查明原因。如果結(jié)果仍不再允許范圍內(nèi),則進展下一步。4:重新校準。重測失控工程。用新的校準液校準儀器,排除校準液的原因。5:請專家?guī)椭H绻拔宀蕉紴槟艿玫皆诳亟Y(jié)果,那可能是儀器或試劑已查明原因,只有和儀器或試劑廠家聯(lián)系請求他們的技術(shù)支援。10本卷須知1:試劑和樣本用量可根據(jù)不同儀器要求按比例改變。2:如測試結(jié)果超出線性范圍,樣本應(yīng)稀釋后測試,調(diào)整因子數(shù)或?qū)⒔Y(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。3:結(jié)果的準確性儀器校正和測定溫度,時間的控制。4:高血脂或黃疸樣本在340nm處有較高的吸光度值。這類樣本的高值A(chǔ)ST耗盡底物后,在340nm處仍維持較高的吸光度值,此時樣本應(yīng)稀釋后在進展測定。5:NADH在334nm和365nm處的毫摩爾消光系數(shù)分別為6.18和3.4.6:假設(shè)試劑混濁,或以水為空白在340nm處吸光度值低于1.1時,則不能使用。7:由醫(yī)生根據(jù)臨床病癥和其他實驗結(jié)果做出臨床診斷8:樣本與廢液等有潛在生物傳染性危險,操作者穎遵守實驗室平安操作規(guī)定并按當?shù)蒯t(yī)療廢棄物,感染性廢棄物,產(chǎn)業(yè)廢棄物等規(guī)定處理廢液。11:臨床意義AST在心肌細胞內(nèi)含量較多,留神肌梗死時,血清中AST活力增高,在發(fā)病后6-12小時之內(nèi)顯著升高,在48小時到達頂峰,約在3-5天恢復(fù)正常。血清中AST也可來源于肝細胞,各種肝病可引起血清AST升高,有時可達1200單位,中毒性肝炎還可更高。肌炎,胸膜炎,腎炎及肺炎等也可引起血清AST升高。臨床上還可通過計算AST/ALT對肝病進展診斷和鑒別診斷酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)測定〔速率丙氨法〕標準化操作程序文件單位:山東德棉職工醫(yī)院科室:檢驗科生化室文件:版本:批準施日期:有校期:一年復(fù)審方案:每年復(fù)審,測定系統(tǒng)變化時需進展修訂發(fā)放部門:檢驗科生化室編寫者:鞏建剛審批者:保管者:修訂者:丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)測定〔速率法〕1概述肝臟內(nèi)含有豐富的酶系統(tǒng),以維持機體的正常生理代謝過程。不少酶是由肝臟合成并由肝膽系統(tǒng)排泄,當肝臟有病時,可由于酶生成亢進或釋出異常,引起血清內(nèi)酶的活性改變。這些改變在一定程度內(nèi)反映了肝臟的功能狀況。人體轉(zhuǎn)氨酶的種類甚多,而以血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶,血清天門冬氨酸轉(zhuǎn)換酶活性最強。此兩種酶廣泛在于機體組織細胞內(nèi),以肝臟,心臟,腎臟及骨骼肌中較多。在肝臟中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)的含量最多,AST以心肌含量最多,此兩種轉(zhuǎn)氨酶較多地釋放在血液中,使血清中兩種酶活性增高。2樣本收集新鮮無溶血標本,血清或血漿樣本均不溶血。血漿樣本只能采用肝素或EDTA抗凝。樣本在4攝氏度可穩(wěn)定7天。采血前病人應(yīng)禁食12小時,采集靜脈3ml,待凝固后〔最好放在37攝氏度水浴箱內(nèi)45分鐘〕通常為加抗凝劑的血液在30-60分鐘凝血析出血清。3000r/min離心5-10分鐘,別離出血清備用。不建議采用血漿標本。3方法原理L-丙氨酸+α-酮戊二酸—————→丙酮酸+L-谷氨酸丙酮酸+NADH—————→L-乳酸+NAD﹢4劑來源,配置及儲存試劑來源:迪瑞試劑配置:試劑一和試劑二均為液體試劑,可直接使用。啟用后在2-8度可穩(wěn)定30天。假設(shè)試劑混濁,或以蒸餾水為空白在340nm處的光吸收值低于1.0A,應(yīng)予丟棄。試劑儲存:試劑避光儲存2-8攝氏度可穩(wěn)定至標簽所示失效期。5分析儀器CS-600B全自動生化分析儀分析參數(shù):樣品量15u/l試劑量:第一試劑240u/l〔R1〕;第二試劑60u/l測光點23—38測定模式:速率法負反響分析波長:340nm/405nm(主波長/副波長)6計算方法樣本濃度〔U/L〕=樣本管吸光度的變化×校準液濃度〔U/L〕校正管吸光度的變化7線性范圍:本實驗的線性范圍:4----1000U/L8參考范圍:男性;:5—40U/L女性:5---35U/L9失控控理1:立即重測同一質(zhì)控品,如重測后結(jié)果仍不再允許范圍,請進展下一步。2:新開一瓶質(zhì)控品,重測失控工程,如新開的質(zhì)控血清結(jié)果正常,則原來質(zhì)控血清可能過期或在室溫防止時間過長而變質(zhì),如結(jié)果仍不再允許范圍,則進展下一步。3:進展儀器維護,重測失控工程。檢查儀器狀態(tài),查明光源是否更換,比色杯是否需要清洗或更換?對儀器進展清洗等維護。另外還要檢查試劑,此時可更換試劑已查明原因。如果結(jié)果仍不再允許范圍內(nèi),則進展下一步。4:重新校準。重測失控工程。用新的校準液校準儀器,排除校準液的原因。5:請專家?guī)椭?。如果前五步都為能得到在控結(jié)果,那可能是儀器或試劑已查明原因,只有和儀器或試劑廠家聯(lián)系請求他們的技術(shù)支援。10本卷須知1:試劑和樣本用量可根據(jù)不同儀器要求按比例改變。2:如測試結(jié)果超出線性范圍,樣本應(yīng)稀釋后測試,調(diào)整因子數(shù)或?qū)⒔Y(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。3:結(jié)果的準確性儀器校正和測定溫度,時間的控制。4:高血脂或黃疸樣本在340nm處有較高的吸光度值。這類樣本的高值A(chǔ)LT耗盡底物后,在340nm處仍維持較高的吸光度值,此時樣本應(yīng)稀釋后在進展測定。5:由醫(yī)生根據(jù)臨床病癥和其他實驗結(jié)果做出臨床診斷。11臨床意義ALT活性高肝膽疾病傳染性肝炎、中毒性肝炎、脂肪肝和膽管炎等。心血管疾病心肌梗死、心肌炎、心力衰竭時肝淤血和腦出血等。藥物和毒物氯丙嗪,異肼、奎寧、水楊酸制劑及乙醇,鉛、ALT活性降低磷酸吡多醛缺乏癥。Y-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶〔速率法〕標準化操作程序文件單位:山東德棉職工醫(yī)院科室:檢驗科生化室文件:版本:批準施日期:有校期:一年復(fù)審方案:每年復(fù)審,測定系統(tǒng)變化時需進展修訂發(fā)放部門:檢驗科生化室編寫者:鞏建剛審批者:保管者:修訂者:Y-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶〔速率法〕1:概述安康人血清γ-GT水平甚低〔<40單位〕,主要來自肝臟,少許由腎、胰、小腸產(chǎn)生。γ-GT在反映肝細胞壞死損害方面不及ALT,但在黃疸鑒別方面有一定意義,肝臟內(nèi)排泄不暢〔肝內(nèi)梗阻〕和肝外梗阻〔如膽道系統(tǒng)阻塞〕以及肝硬化、肝腫瘤中毒性肝病、酒精性肝病、脂肪肝等均可升高。"γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶〔γ-GT〕在人體細胞的微粒體中合成。*些藥物和酒精可使其合成增加。它的主要功能是參與體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝,且廣泛存在于人體各組織及器官中,以腎臟最為豐富,其次是胰肝等處。在肝臟主要存在于肝細胞漿和膽管上皮細胞中。正常成年人血清中γ-GT活性很低,主要來源于肝臟。。2樣本收集新鮮無溶血標本,血清或血漿樣本均不溶血。血漿樣本只能采用肝素或EDTA抗凝。樣本在4攝氏度可穩(wěn)定7天。采血前病人應(yīng)禁食12小時,采集靜脈3ml,待凝固后〔最好放在37攝氏度水浴箱內(nèi)45分鐘〕通常為加抗凝劑的血液在30-60分鐘凝血析出血清。3000r/min離心5-10分鐘,別離出血清備用。不建議采用血漿標本。3方法原理試劑中L-γ-谷氨酰-3羥基-4硝基苯胺和甘氨酸在樣品中γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶的催化作用下,生成色產(chǎn)物5-氨基-2硝基苯甲酸鹽,引起405nm處的吸光值升高,通過監(jiān)測405nm處光吸收值上升的速率,可以測定γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶的活力。4劑來源,配置及儲存試劑來源:迪瑞試劑配置:試劑一和試劑二均為液體試劑,可直接使用。啟用后在2-8度可穩(wěn)定30天。假設(shè)試劑混濁,或以蒸餾水為空白在405nm處的光吸收值低于0.8A,應(yīng)予丟棄。試劑儲存:試劑避光儲存2-8攝氏度可穩(wěn)定至標簽所示失效期。5分析儀器CS-600B全自動生化分析儀分析參數(shù):樣品量50u/l試劑量:第一試劑200u/l〔R1〕;第二試劑50u/l測光點23—38測定模式:速率法正反響分析波長:405nm/505nm(主波長/副波長)6計算方法γ-GT(U/L)=(A/min*Tv*1000)(9.5*Sv*P)式中Tv=總反響體積Sv=樣本體積9.5=NADH在340nm處的毫摩爾消光系數(shù)P=比色杯光徑〔cm〕7線性范圍0—450U/L8參考范圍:0—40u/L新生兒和嬰兒的AST大約是成人的二倍,六個月以后降至成人水平。9失控控理1:立即重測同一質(zhì)控品,如重測后結(jié)果仍不再允許范圍,請進展下一步。2:新開一瓶質(zhì)控品,重測失控工程,如新開的質(zhì)控血清結(jié)果正常,則原來質(zhì)控血清可能過期或在室溫防止時間過長而變質(zhì),如結(jié)果仍不再允許范圍,則進展下一步。3:進展儀器維護,重測失控工程。檢查儀器狀態(tài),查明光源是否更換,比色杯是否需要清洗或更換?對儀器進展清洗等維護。另外還要檢查試劑,此時可更換試劑已查明原因。如果結(jié)果仍不再允許范圍內(nèi),則進展下一步。4:重新校準。重測失控工程。用新的校準液校準儀器,排除校準液的原因。5:請專家?guī)椭H绻拔宀蕉紴槟艿玫皆诳亟Y(jié)果,那可能是儀器或試劑已查明原因,只有和儀器或試劑廠家聯(lián)系請求他們的技術(shù)支援。10本卷須知1:試劑和樣本用量可根據(jù)不同儀器要求按比例改變。2:如測試結(jié)果超出線性范圍,樣本應(yīng)稀釋后測試,調(diào)整因子數(shù)或?qū)⒔Y(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。3:結(jié)果的準確性儀器校正和測定溫度,時間的控制。4:假設(shè)試劑混濁,或以水為空白在405nm處吸光度值低于0.8時,則不能使用。5:由醫(yī)生根據(jù)臨床病癥和其他實驗結(jié)果做出臨床診斷6:樣本與廢液等有潛在生物傳染性危險,操作者穎遵守實驗室平安操作規(guī)定并按當?shù)蒯t(yī)療廢棄物,感染性廢棄物,產(chǎn)業(yè)廢棄物等規(guī)定處理廢液。11:臨床意義1、急性病毒性肝炎是否轉(zhuǎn)為慢性。急性肝炎常引起轉(zhuǎn)氨酶(GPT、GOT)升高。隨著病情好轉(zhuǎn),轉(zhuǎn)氨酶逐漸恢復(fù)正常,如果γ-GT持續(xù)不降,多表示肝炎轉(zhuǎn)為慢性。2、慢性肝炎和肝硬化病人γ-GT持續(xù)升高表示病情不穩(wěn)定或呈惡化傾向;假設(shè)逐漸下降提示肝病轉(zhuǎn)向不活動。3、酒精性肝病轉(zhuǎn)氨酶雖輕度上升,而γ-GT可中度升高。急性酒精肝病γ-GT升高達1000單位。經(jīng)常飲酒者γ-GT常在80單位左右。4、原發(fā)性肝癌膽內(nèi)阻塞膽汁淤滯時,γ-GT多明顯升高,數(shù)倍或數(shù)十倍于常量。5、連續(xù)動態(tài)檢測γ-GT,可查出肝外其他臟器腫瘤是否轉(zhuǎn)移至肝臟。6、阻塞性黃疸查γ-GT,常發(fā)現(xiàn)γ-GT升高程度與黃疸深度呈平行關(guān)系:黃疸越深,γ-GT越高。堿性磷酸酶〔ALP〕測定〔速率法〕標準化操作程序文件單位:山東德棉職工醫(yī)院科室:檢驗科生化室文件:版本:批準施日期:有校期:一年復(fù)審方案:每年復(fù)審,測定系統(tǒng)變化時需進展修訂發(fā)放部門:檢驗科生化室編寫者:鞏建剛審批者:保管者:修訂者:堿性磷酸酶〔ALP〕測定〔速率法〕1:概述堿性磷酸酶英文簡稱AKP或ALP,是廣泛分布于人體各臟器器官中,其中以肝臟為最多其次為腎臟,骨骼、腸、和胎盤等組織,。它不是單一的酶,而是一組同功酶。目前已發(fā)現(xiàn)有AKP1、AKP2、AKP3、AKP4、AKP5與AKP6六種同功酶。堿性磷酸酶〔ALP〕:是從牛腸粘膜或大腸桿菌中提取。從大腸桿菌提取的AP分子量為80kD,酶作用的最適pH為;用小牛腸黏膜提取的AP分子量為l00kD,最適pH為9.6.一般采用對硝基苯磷酸酯〔p-NPP〕作為底物。它可制成片狀試劑,使用方便。產(chǎn)物為黃色的對硝基酚,在405nm有吸收峰。用NaOH終止酶反響后,黃色可穩(wěn)定一段時間。2標本的收集新鮮無溶血標本,血清或血漿樣本均不溶血。血漿樣本只能采用肝素或EDTA抗凝。樣本在4攝氏度可穩(wěn)定7天。采血前病人應(yīng)禁食12小時,采集靜脈3ml,待凝固后〔最好放在37攝氏度水浴箱內(nèi)45分鐘〕通常為加抗凝劑的血液在30-60分鐘凝血析出血清。3000r/min離心5-10分鐘,別離出血清備用。不建議采用血漿標本。3:方法原理樣本中的堿性磷酸酶催化水解磷酸對硝基苯酚,生成游離的對硝基苯酚和磷酸,引起405nm處的光吸收值升高,,通過檢測405nm處光吸收值上升的速率,可以測定堿性磷酸酶的活力。4劑來源,配置及儲存試劑來源:迪瑞試劑配置:試劑一和試劑二均為液體試劑,可直接使用。啟用后在2-8度可穩(wěn)定30天。假設(shè)試劑混濁,或以蒸餾水為空白在405nm處的光吸收值低于0.8A,應(yīng)予丟棄。試劑儲存:試劑避光儲存2-8攝氏度可穩(wěn)定至標簽所示失效期。5分析儀器CS-600B全自動生化分析儀分析參數(shù):樣品量4u/l試劑量:第一試劑200u/l〔R1〕;第二試劑50u/l測光點23—38測定模式:速率法正反響分析波長:405nm/505nm(主波長/副波長)6計算方法ALP(U/L)=(A/min*Tv*1000)(18.8*Sv*P)式中Tv=總反響體積Sv=樣本體積18.8=NADH在405nm處的毫摩爾消光系數(shù)P=比色杯光徑〔cm〕7線性范圍:本實驗的線性范圍:0----850U/L8參考范圍:男性:1---12歲"500U/L12—15歲"750U/L"25歲40--150U/L女性:1---12歲"500U/L"15歲40--150U/L9失控控理1:立即重測同一質(zhì)控品,如重測后結(jié)果仍不再允許范圍,請進展下一步。2:新開一瓶質(zhì)控品,重測失控工程,如新開的質(zhì)控血清結(jié)果正常,則原來質(zhì)控血清可能過期或在室溫防止時間過長而變質(zhì),如結(jié)果仍不再允許范圍,則進展下一步。3:進展儀器維護,重測失控工程。檢查儀器狀態(tài),查明光源是否更換,比色杯是否需要清洗或更換?對儀器進展清洗等維護。另外還要檢查試劑,此時可更換試劑已查明原因。如果結(jié)果仍不再允許范圍內(nèi),則進展下一步。4:重新校準。重測失控工程。用新的校準液校準儀器,排除校準液的原因。5:請專家?guī)椭H绻拔宀蕉紴槟艿玫皆诳亟Y(jié)果,那可能是儀器或試劑已查明原因,只有和儀器或試劑廠家聯(lián)系請求他們的技術(shù)支援。10本卷須知1:試劑和樣本用量可根據(jù)不同儀器要求按比例改變。2:如測試結(jié)果超出線性范圍,樣本應(yīng)稀釋后測試,調(diào)整因子數(shù)或?qū)⒔Y(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。3:結(jié)果的準確性儀器校正和測定溫度,時間的控制。4:由醫(yī)生根據(jù)臨床病癥和其他實驗結(jié)果做出臨床診斷。11:臨床意義臨床上測定ALP主要用于骨骼、肝膽系統(tǒng)疾病的診斷和鑒別診斷,尤其是黃疸的鑒別診斷。對于不明原因的高ALP血清水平,可測定同工酶以協(xié)助明確其器官來源。1.生理性增高:兒童在生理性的骨骼發(fā)育期,堿性磷酸酶活力可比正常人高1~2倍。處于生長期的青少年,以及孕婦和進食脂肪含量高的食物后均可以升高。2.病理性升高:〔1〕骨骼疾病如佝僂病、軟骨病、骨惡性腫瘤、惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移等;〔2〕肝膽疾病如肝外膽道阻塞、肝癌、肝硬化、毛細膽管性肝炎等;〔3〕其他疾病如甲狀旁腺機能亢進。3.病理性降低:見于重癥慢性腎炎、兒童甲狀腺機能不全、貧血等??偰懠t素〔重氮鹽法〕標準化操作程序文件單位:山東德棉職工醫(yī)院科室:檢驗科生化室文件:版本:批準施日期:有校期:一年復(fù)審方案:每年復(fù)審,測定系統(tǒng)變化時需進展修訂發(fā)放部門:檢驗科生化室編寫者:鞏建剛審批者:保管者:修訂者:總膽紅素〔重氮鹽法〕1:概述血清中的[膽紅素大局部來源于衰老紅細胞被破壞后產(chǎn)生出來的血紅蛋白衍化而成,在肝內(nèi)經(jīng)過葡萄糖醛酸化的叫做直接膽紅素,未在肝內(nèi)經(jīng)過葡萄糖醛酸化的叫做間接膽紅素,二者的和就是總膽紅素。2標本的收集新鮮無溶血標本,血清或血漿樣本均不溶血。血漿樣本只能采用肝素或EDTA抗凝。樣本在4攝氏度可穩(wěn)定7天。采血前病人應(yīng)禁食12小時,采集靜脈3ml,待凝固后〔最好放在37攝氏度水浴箱內(nèi)45分鐘〕通常為加抗凝劑的血液在30-60分鐘凝血析出血清。3000r/min離心5-10分鐘,別離出血清備用。不建議采用血漿標本。3:方法原理本試劑采用外表活性劑作為增溶劑,樣品中結(jié)合膽紅素和經(jīng)增溶的未結(jié)合膽紅素與重氮對氨基苯磺酸反響,生成酸性偶氮膽紅素,其在570nm處吸收值的增加與樣品中膽紅素的濃度成正比,通過測定570nm處吸光度值的變化,即可計算出樣品中總膽紅素的濃度。4劑來源,配置及儲存試劑來源:迪瑞試劑配置:。試劑一和試劑二按100:1的比例。即10ml試劑一加試劑二,混合后即成工作液試劑儲存:試劑避光儲存2-8攝氏度可穩(wěn)定至標簽所示失效期。5分析儀器CS-600B全自動生化分析儀分析參數(shù):樣品量25u/l試劑量:250u/l測光點0--41測定模式:1點終點法正反響分析波長:570nm/660nm(主波長/副波長)6計算方法總膽紅素濃度〔μmol/L〕=樣本管吸光度×校準液濃度〔μmol/L〕校正管吸光度7線性范圍:本實驗的線性范圍:0---300μmol/L8—21μmol/L新生兒20—200μmol/L9失控控理1:立即重測同一質(zhì)控品,如重測后結(jié)果仍不再允許范圍,請進展下一步。2:新開一瓶質(zhì)控品,重測失控工程,如新開的質(zhì)控血清結(jié)果正常,則原來質(zhì)控血清可能過期或在室溫防止時間過長而變質(zhì),如結(jié)果仍不再允許范圍,則進展下一步。3:進展儀器維護,重測失控工程。檢查儀器狀態(tài),查明光源是否更換,比色杯是否需要清洗或更換?對儀器進展清洗等維護。另外還要檢查試劑,此時可更換試劑已查明原因。如果結(jié)果仍不再允許范圍內(nèi),則進展下一步。4:重新校準。重測失控工程。用新的校準液校準儀器,排除校準液的原因。5:請專家?guī)椭?。如果前五步都為能得到在控結(jié)果,那可能是儀器或試劑已查明原因,只有和儀器或試劑廠家聯(lián)系請求他們的技術(shù)支援。10本卷須知1:試劑和樣本用量可根據(jù)不同儀器要求按比例改變。2:如測試結(jié)果超出線性范圍,樣本應(yīng)稀釋后測試,調(diào)整因子數(shù)或?qū)⒔Y(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。3:結(jié)果的準確性儀器校正和測定溫度,時間的控制。4:由醫(yī)生根據(jù)臨床病癥和其他實驗結(jié)果做出臨床診斷。5:膽紅素重氮反響對溫度敏感,測定時應(yīng)以恒溫。6:反響形成的色素可穩(wěn)定1小時。7國際換算:μmol/L﹡0.585=mg/dl11臨床意義:臨床上主要用于診斷肝臟疾病和膽道梗阻,當血清總膽紅素有很大增高時,人的皮膚、眼睛鞏膜、尿液和血清呈現(xiàn)黃色,故稱黃疸。當肝臟發(fā)生炎癥、壞死、中毒等損害時均可以引起黃疸,膽道疾病及溶血性疾病也可以引起黃疸。以直接膽紅素升高為主常見于原發(fā)性膽汁型肝硬化、膽道梗阻等。以間接膽紅素升高為主常見于溶血性疾病、新生兒黃疸或者輸血錯誤等。肝炎與肝硬化病人的直接膽紅素與間接膽紅素都可以升高??偰懠t素增高,見于中毒性或病毒性肝炎、溶血性黃疸、惡性貧血、陣發(fā)性血紅蛋白尿癥。紅細胞增多癥、新生兒黃疸、內(nèi)出血、輸血后溶血性黃疸、急性黃色肝萎縮。先天性膽紅素代謝異?!睠rigler-Najjar綜合征、Gilbert綜合征、Dubin-Johnson綜合征〕、果糖不耐受等,以及攝入水楊酸類、紅霉素、利福平、孕激素、安乃近等藥物。直接膽紅素〔重氮鹽法〕標準化操作程序文件單位:山東德棉職工醫(yī)院科室:檢驗科生化室文件:版本:批準施日期:有校期:一年復(fù)審方案:每年復(fù)審,測定系統(tǒng)變化時需進展修訂發(fā)放部門:檢驗科生化室編寫者:鞏建剛審批者:保管者:修訂者:直接膽紅素〔重氮鹽法〕1概述直接膽紅素[1](英文縮寫DBIL)又稱結(jié)合膽紅素。未結(jié)合膽紅素在肝細胞內(nèi)轉(zhuǎn)化,與葡糖醛酸結(jié)合形成結(jié)合膽紅素,結(jié)合膽紅素用凡登伯定性試驗呈直接反響,故將這種膽紅素稱為直接膽紅素。測定直接膽紅素主要用于鑒別黃疸的類型。結(jié)合膽紅素的升高,說明經(jīng)肝細胞處理和處理后膽紅素從膽道的排泄發(fā)生障礙。2標本的收集新鮮無溶血標本,血清或血漿樣本均不溶血。血漿樣本只能采用肝素或EDTA抗凝。樣本在4攝氏度可穩(wěn)定7天。采血前病人應(yīng)禁食12小時,采集靜脈3ml,待凝固后〔最好放在37攝氏度水浴箱內(nèi)45分鐘〕通常為加抗凝劑的血液在30-60分鐘凝血析出血清。3000r/min離心5-10分鐘,別離出血清備用。不建議采用血漿標本。3:方法原理樣品中直接膽紅素與重氮對氨基苯磺酸反響,生成酸性偶氮膽紅素,其在570nm處光吸收值增加與楊品中直接膽紅素的濃度成正比,通過測定570nm處吸光度的變化,即可計算出樣品中直接膽紅素的濃度。4劑來源,配置及儲存試劑來源:迪瑞試劑配置:試劑一和試劑二按100:1的比例。即10ml試劑一加試劑二,混合后即成工作液試劑儲存:試劑避光儲存2-8攝氏度可穩(wěn)定至標簽所示失效期。5分析儀器CS-600B全自動生化分析儀分析參數(shù):樣品量25u/l試劑量:250u/l測光點0--41測定模式:1點終點法正反響分析波長:570nm/660nm(主波長/副波長)6計算方法總膽紅素濃度〔μmol/L〕=樣本管吸光度×校準液濃度〔μmol/L〕校正管吸光度μmol/L7線性范圍:本實驗的線性范圍:0---300μmol/L8—μmol/L9失控控理1:立即重測同一質(zhì)控品,如重測后結(jié)果仍不再允許范圍,請進展下一步。2:新開一瓶質(zhì)控品,重測失控工程,如新開的質(zhì)控血清結(jié)果正常,則原來質(zhì)控血清可能過期或在室溫防止時間過長而變質(zhì),如結(jié)果仍不再允許范圍,則進展下一步。3:進展儀器維護,重測失控工程。檢查儀器狀態(tài),查明光源是否更換,比色杯是否需要清洗或更換?對儀器進展清洗等維護。另外還要檢查試劑,此時可更換試劑已查明原因。如果結(jié)果仍不再允許范圍內(nèi),則進展下一步。4:重新校準。重測失控工程。用新的校準液校準儀器,排除校準液的原因。5:請專家?guī)椭?。如果前五步都為能得到在控結(jié)果,那可能是儀器或試劑已查明原因,只有和儀器或試劑廠家聯(lián)系請求他們的技術(shù)支援。10本卷須知1:試劑和樣本用量可根據(jù)不同儀器要求按比例改變。2:如測試結(jié)果超出線性范圍,樣本應(yīng)稀釋后測試,調(diào)整因子數(shù)或?qū)⒔Y(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。3:結(jié)果的準確性儀器校正和測定溫度,時間的控制。4:由醫(yī)生根據(jù)臨床病癥和其他實驗結(jié)果做出臨床診斷。5:膽紅素重氮反響對溫度敏感,測定時應(yīng)以恒溫。6:反響形成的色素可穩(wěn)定1小時。7國際換算:μmol/L﹡0.585=mg/dl11:臨床意義直接膽紅素增高,屬阻塞性黃疸、肝細胞性黃疸。以直接膽紅素升高為主常見于原發(fā)性膽汁型肝硬化、膽道梗阻等。肝炎與肝硬化病人的直接膽紅素都可以升高。膽紅素總量增高、直接膽紅素增高時,可疑為肝內(nèi)及肝外阻塞性黃疸,胰頭癌,毛細膽管型肝炎及其他膽汁瘀滯綜合征等。1、梗阻性黃疸如果肝外的膽道系統(tǒng)發(fā)生腫瘤或出現(xiàn)結(jié)石,將膽道阻塞,直接膽紅素不能全部排入腸道,而逆流入血,會引起總膽紅素高,而發(fā)生阻塞性黃疸。原發(fā)性膽汁型肝硬化、膽道梗阻、淤膽型肝炎等疾病都是引起直接膽紅素高的原因。2、肝細胞性黃疸如果肝臟不好,肝臟將間接膽紅素轉(zhuǎn)化為直接膽紅素的能力下降,即肝細胞受損,或者因膽紅素不能正常地轉(zhuǎn)化成膽汁,或者因肝細胞腫脹,使肝內(nèi)的膽管受壓,排泄膽汁受阻,這時會引起直接膽紅素和間接膽紅素同時偏高的現(xiàn)象,發(fā)生肝細胞性黃疸。肝臟疾病如乙肝、丙肝、脂肪肝、酒精肝、肝硬化等都是引起直接膽紅素高的原因。引起直接膽紅素高的原因雖然很多,但最常見的是由肝臟疾病引起的直接膽紅素高。因此,發(fā)現(xiàn)直接膽紅素高時,首先要考慮是不是得了肝臟疾病,結(jié)合患者的病史、病癥等進展綜合分析,選擇適宜的檢查工程,確定引起直接膽紅素高的原因,針對病因進展治療。血清直接膽紅素超過4.5umol/L有臨床意義。正常血清中結(jié)合膽紅素僅占總膽紅素的4%-5%,其濃度一般<1umol/L,上限不超過3umol/L。正常血清內(nèi)測的直接膽紅素根本上不反映與葡萄糖醛酸相結(jié)合的膽紅素,而在黃疸時,則根本反映后者的水平。膽汁郁積性黃疸時,由于結(jié)合膽紅素不能從肝細胞和細毛膽管排出,使血清直接膽紅素明顯升高,在總膽紅素中所占比值升高顯著;肝細胞性黃疸時,由于同時有肝細胞攝取、結(jié)合、排泄障礙,以致血清直接膽戲素/總膽紅素比值也升高,但升高幅度不及膽汁郁積性黃疸。在肝細胞性黃疸時比值>40%,而膽汁郁積性黃疸時常在60%以上,最高的可達90%,有一定鑒別診斷價值。直接膽紅素偏高的原因總蛋白〔雙縮脲法〕單位:山東德棉職工醫(yī)院科室:檢驗科生化室文件:版本:批準施日期:有校期:一年復(fù)審方案:每年復(fù)審,測定系統(tǒng)變化時需進展修訂發(fā)放部門:檢驗科生化室編寫者:鞏建剛審批者:保管者:修訂者:總蛋白〔雙縮脲法〕1:概述血清蛋白質(zhì)是各種蛋白的復(fù)雜混合物。可利用不同的方法將其別離。血漿中的白蛋白、a1、a2、β球蛋白,纖維蛋白原,凝血酶原和其它凝血因子等均由肝細胞合成。γ球蛋白主要來自漿細胞。當肝臟發(fā)生病變時,肝細胞合成蛋白質(zhì)的功能減退,血漿中蛋白質(zhì)即會發(fā)生質(zhì)和量的變化。臨床上用各種方法檢測血漿蛋白的含量來協(xié)助診斷肝臟疾患,并作為療效觀察,預(yù)后判斷的指標。2標本的收集新鮮無溶血標本,血清或血漿樣本均不溶血。血漿樣本只能采用肝素或EDTA抗凝。樣本在4攝氏度可穩(wěn)定7天。采血前病人應(yīng)禁食12小時,采集靜脈3ml,待凝固后〔最好放在37攝氏度水浴箱內(nèi)45分鐘〕通常為加抗凝劑的血液在30-60分鐘凝血析出血清。3000r/min離心5-10分鐘,別離出血清備用。不建議采用血漿標本。3:方法原理本試劑采用雙縮脲反響方法,即在堿性溶液中蛋白質(zhì)分子中的肽鍵與兩價銅離子反響生成藍紫色絡(luò)合物,其中每個銅離子與五六個肽鍵絡(luò)合。在試劑中參加碘化物有助于防止堿性銅絡(luò)合物的自動復(fù)原。反響生成藍紫色絡(luò)合物與樣本中總蛋白濃度成正比,通過測定52-560nm處吸光度值的變化,即可計算出樣本中總蛋白的濃度。4劑來源,配置及儲存試劑來源:迪瑞試劑配置:試劑一和試劑二均為液體試劑,可直接使用。啟用后在2-8度可穩(wěn)定30天。假設(shè)試劑混濁,或以蒸餾水為空白在540nm處的光吸收值低于0.15A,應(yīng)予丟棄。試劑儲存:試劑避光儲存2-8攝氏度可穩(wěn)定至標簽所示失效期。5分析儀器CS-600B全自動生化分析儀分析參數(shù):樣品量5u/l試劑量:250u/l測光點0--41測定模式:1點終點法正反響分析波長:546nm/700nm(主波長/副波長)6計算方法總蛋白濃度〔g/L〕=樣本管吸光度×校準液濃度〔g/L〕校正管吸光度7線性范圍:本實驗的線性范圍:0---150g/L8新生兒46~70g/L7月~2周歲51~73g/L1~2周歲56~75g/L>3周歲60--83g/L9失控控理1:立即重測同一質(zhì)控品,如重測后結(jié)果仍不再允許范圍,請進展下一步。2:新開一瓶質(zhì)控品,重測失控工程,如新開的質(zhì)控血清結(jié)果正常,則原來質(zhì)控血清可能過期或在室溫防止時間過長而變質(zhì),如結(jié)果仍不再允許范圍,則進展下一步。3:進展儀器維護,重測失控工程。檢查儀器狀態(tài),查明光源是否更換,比色杯是否需要清洗或更換?對儀器進展清洗等維護。另外還要檢查試劑,此時可更換試劑已查明原因。如果結(jié)果仍不再允許范圍內(nèi),則進展下一步。4:重新校準。重測失控工程。用新的校準液校準儀器,排除校準液的原因。5:請專家?guī)椭?。如果前五步都為能得到在控結(jié)果,那可能是儀器或試劑已查明原因,只有和儀器或試劑廠家聯(lián)系請求他們的技術(shù)支援。10本卷須知1:試劑和樣本用量可根據(jù)不同儀器要求按比例改變。2:如測試結(jié)果超出線性范圍,樣本應(yīng)稀釋后測試,調(diào)整因子數(shù)或?qū)⒔Y(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。3:結(jié)果的準確性儀器校正和測定溫度,時間的控制。4:假設(shè)試劑混濁或以水為空白在540nm處吸光度值大于0.15A時,則不能使用。5:由醫(yī)生根據(jù)臨床病癥和其他實驗結(jié)果做出臨床診斷。11:臨床意義血清總蛋白增高:〔1〕血液濃縮,導(dǎo)致總蛋白濃度相對增高:嚴重腹瀉、嘔吐、高熱時急劇失水,血清總蛋白濃度可明顯升高。休克時,由于毛細血管通透性增加,血液中水分滲出血管。血液可發(fā)生濃縮,慢性腎上腺皮質(zhì)功能減退的患者,由于喪失鈉的同時伴隨水的喪失,血漿也可出現(xiàn)濃縮現(xiàn)象?!?〕血漿蛋白質(zhì)合成增加:主要見于球蛋白合成增加,多發(fā)性骨髓瘤患者醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。血清總蛋白降低:〔1〕血液稀釋,導(dǎo)致總蛋白濃度相對降低:如靜脈注射過多低滲溶液或因各種原因引起的鈉、水潴留?!?〕攝人缺乏和消耗增加:食物中長期缺乏蛋白質(zhì)或慢性胃腸道疾病所引起的消化吸收不良,因患消耗性疾病,如嚴重結(jié)核病,甲狀腺功能亢進,惡性腫瘤等,均可造成血清蛋白濃度降低?!?〕蛋白質(zhì)喪失:嚴重燒傷時大量血漿滲出,大量失血,腎病綜合征時大量蛋白尿,潰瘍性結(jié)腸炎時腸道長期喪失一定量的蛋白質(zhì),這些病理改變均可使血清總蛋白濃度降低。白蛋白〔溴甲酚綠法〕單位:山東德棉職工醫(yī)院科室:檢驗科生化室文件:版本:批準施日期:有校期:一年復(fù)審方案:每年復(fù)審,測定系統(tǒng)變化時需進展修訂發(fā)放部門:檢驗科生化室編寫者:鞏建剛審批者:保管者:修訂者:白蛋白〔溴甲酚綠法〕1概述白蛋白是肝臟合成的,因此血清白蛋白濃度可以反映肝臟的功能,同時血清白蛋白水平的改變能導(dǎo)致一系列的病理性繼發(fā)癥,因此,測定血清白蛋白常用于病人狀態(tài)的非特異監(jiān)視。病理性降低:(1)蛋白質(zhì)喪失,常見于大量出血或嚴重燒傷和腎臟疾病。(2)合成障礙,肝臟功能異常。(3)營養(yǎng)不良或吸收不良??崭?2小時取靜脈血[1]。2標本的收集新鮮無溶血標本,血清或血漿樣本均不溶血。血漿樣本只能采用肝素或EDTA抗凝。樣本在4攝氏度可穩(wěn)定7天。采血前病人應(yīng)禁食12小時,采集靜脈3ml,待凝固后〔最好放在37攝氏度水浴箱內(nèi)45分鐘〕通常為加抗凝劑的血液在30-60分鐘凝血析出血清。3000r/min離心5-10分鐘,別離出血清備用。不建議采用血漿標本。3:方法原理本法以—4.2條件下,白蛋白與溴甲酚綠結(jié)合成藍綠色化合物,反響生成的藍綠色化合物與樣本中白蛋白的濃度成正比,通過測定580-630nm處吸光度值的變化,即可計算出樣本中白蛋白的濃度。4劑來源,配置及儲存試劑來源:迪瑞試劑配置:試劑一和試劑二均為液體試劑,可直接使用。啟用后在2-8度可穩(wěn)定30天。假設(shè)試劑混濁,或以蒸餾水為空白在6300nm處的光吸收值低于0.2A,應(yīng)予丟棄。試劑儲存:試劑避光儲存2-8攝氏度可穩(wěn)定至標簽所示失效期。5分析儀器CS-600B全自動生化分析儀分析參數(shù):樣品量2u/l試劑量:300u/l測光點15測定模式:1點終點法正反響分析波長:600nm/700nm(主波長/副波長)6計算方法白蛋白濃度〔g/L〕=樣本管吸光度×校準液濃度〔g/L〕校正管吸光度7線性范圍:本實驗的線性范圍:0---60g/L8參考范圍成人37—53g/L9失控控理1:立即重測同一質(zhì)控品,如重測后結(jié)果仍不再允許范圍,請進展下一步。2:新開一瓶質(zhì)控品,重測失控工程,如新開的質(zhì)控血清結(jié)果正常,則原來質(zhì)控血清可能過期或在室溫防止時間過長而變質(zhì),如結(jié)果仍不再允許范圍,則進展下一步。3:進展儀器維護,重測失控工程。檢查儀器狀態(tài),查明光源是否更換,比色杯是否需要清洗或更換?對儀器進展清洗等維護。另外還要檢查試劑,此時可更換試劑已查明原因。如果結(jié)果仍不再允許范圍內(nèi),則進展下一步。4:重新校準。重測失控工程。用新的校準液校準儀器,排除校準液的原因。5:請專家?guī)椭H绻拔宀蕉紴槟艿玫皆诳亟Y(jié)果,那可能是儀器或試劑已查明原因,只有和儀器或試劑廠家聯(lián)系請求他們的技術(shù)支援。10本卷須知1:試劑和樣本用量可根據(jù)不同儀器要求按比例改變。2:如測試結(jié)果超出線性范圍,樣本應(yīng)稀釋后測試,調(diào)整因子數(shù)或?qū)⒔Y(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。3:結(jié)果的準確性儀器校正和測定溫度,時間的控制。4:假設(shè)試劑混濁或以水為空白在630nm處吸光度值大于0.2A時,則不能使用。5:由醫(yī)生根據(jù)臨床病癥和其他實驗結(jié)果做出臨床診斷。11:臨床意義肝臟是合成血清蛋白質(zhì)最重要的器官.血清中的白蛋白,球蛋白,以及其它參與凝血的物質(zhì),均由肝細胞合成.當肝臟病變時,合成各種蛋白質(zhì)的能力降低,體內(nèi)的蛋白質(zhì)發(fā)生了數(shù)量上的改變.其主要的表現(xiàn),表達在白蛋白的下降,和球蛋白的增多.臨床上通過檢測血清蛋白質(zhì),借以了解肝臟或腎臟的情況.

總蛋白的數(shù)量隨著白蛋白或球蛋白的增減而變化.

白蛋白減低:見于慢性肝炎,肝硬化,營養(yǎng)不良,腎病綜合征,結(jié)核病,甲亢,大失血,惡性腫瘤.

白蛋白的增高沒有特殊的臨床意義.

球蛋白如果增高,并與白蛋白的比值出現(xiàn)倒置的話,屬于病理現(xiàn)象.膽固醇〔2點終點法〕單位:山東德棉職工醫(yī)院科室:檢驗科生化室文件:版本:批準施日期:有校期:一年復(fù)審方案:每年復(fù)審,測定系統(tǒng)變化時需進展修訂發(fā)放部門:檢驗科生化室編寫者:鞏建剛審批者:保管者:修訂者:膽固醇〔2點終點法〕1概述本試劑適用于體外定量檢測人血清中膽固醇的濃度。血清膽固醇測定可作為肝臟功能,膽汁功能,腸吸收,冠狀動脈疾病,甲狀腺功能和腎上腺疾病的診斷指證。膽固醇含量對高脂蛋白血癥的診斷和分類非常重要。正常的膽固醇水平應(yīng)受年齡,性別,激素平衡和妊娠的影響。2樣本要求新鮮,,不容血血清為最正確膽固醇測定樣本。血清樣本在2—8°C可穩(wěn)定3—4天,—20°C可穩(wěn)定數(shù)月。3檢驗原理膽固醇脂+H2O_______膽固醇+游離脂肪酸膽固醇+O2__________膽菑—4-3酮+H2O2H2O2+4氨基安替比林+對-羥基苯甲酸———醌亞胺色素+H2O24劑來源,配置及儲存試劑來源:迪瑞試劑配置:試劑一和試劑二均為液體試劑,可直接使用。啟用后在2-8度可穩(wěn)定30天。假設(shè)試劑混濁,或以蒸餾水為空白在500nm處的光吸收值低于1.0A,應(yīng)予丟棄。試劑儲存:試劑避光儲存2-8攝氏度可穩(wěn)定至標簽所示失效期。5分析儀器CS-600B全自動生化分析儀分析參數(shù):樣品量3u/l試劑量:第一試劑240u/l〔R1〕;第二試劑60u/l測光點16---41測定模式:速率法正反響分析波長:505nm/660nm(主波長/副波長)6計算方法樣本濃度〔mmol/L〕=樣本管吸光度的變化×校準液濃度〔mmol/L〕校正管吸光度的變化7線性范圍:本實驗的線性范圍:0---2

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