不同培養(yǎng)基對茉莉花組培的影響

不同培養(yǎng)基對茉莉花組培的影響邱思曉摘要茉莉花具有多種藥用價值、食療價值、觀賞價值以及經(jīng)濟(jì)價值等。在經(jīng)濟(jì)生產(chǎn)應(yīng)用中，常被制作成茉莉花茶而流入市場。但由于近幾年茉莉花的成本升高，公司的利潤降低，導(dǎo)致茉莉花茶不能很好的生產(chǎn)銷售。因此，我們可以試圖通過組培快繁技術(shù)來降低成本。，關(guān)鍵詞茉莉花；組織培養(yǎng)；快速繁殖目錄TOC\o"1-5"\h\z前言 31.1研究對象 3\o"CurrentDocument"1.2研究目的意義 3\o"CurrentDocument"1.3茉莉花組培概況 31.4主要存在問題 41.4.1褐變問題 41.4.2污染問題 41.4.3成功率較低 4設(shè)計內(nèi)容 42.1試驗研究內(nèi)容 42.1.1試驗材料 4\o"CurrentDocument"2.1.2外植體來源和消毒處理 42.1.3培養(yǎng)基設(shè)計 5\o"CurrentDocument"2.2實驗流程及試驗研究具體實施方案 52.2.1實驗流程 52.2.2試驗研究具體實施方案 6實驗結(jié)果分析討論 73.1實驗記錄表格 73.2實驗分析 8\o"CurrentDocument"參考文獻(xiàn) 81.刖言1.1研究對象茉莉，為木樨科素馨屬常綠灌木或藤本植物的統(tǒng)稱，原產(chǎn)于印度、巴基斯坦，中國早已引種，并廣泛地種植。茉莉喜溫暖濕潤和陽光充足環(huán)境，其葉色翠綠，花朵顏色潔白，香氣濃郁，是最常見的芳香性盆栽花木。在素馨屬中，最著名的一種是雙瓣茉莉，也就是人們平常俗稱的茉莉花。茉莉有著良好的保健和美容功效，可以用來飲食，可用于茉莉花茶的制作。茉莉花根味苦、性溫、有毒，民間用于治療跌打損傷、齲齒、頭頂痛、失眠等癥⑴1.2研究目的意義茉莉花常用打插、分株、壓條三種方法繁殖。打插繁殖是茉莉花最常用的繁殖方法【2】。但無論是打插、分株還是壓條，他們都有一定的局限性，不利于大規(guī)模的生產(chǎn)，而隨著科技的發(fā)展，組織培養(yǎng)技術(shù)的成熟，人們可以通過組織培養(yǎng)技術(shù)來快速繁殖茉莉花的幼株，從而達(dá)到大規(guī)模和縮短培養(yǎng)的周期。但是目前對于茉莉花的組織培養(yǎng)方面的研究比較少，因此，本實驗試圖通過對比不同不同培養(yǎng)基中茉莉花的組織培養(yǎng)的生長狀況，初步探索出比較適合茉莉花組培的培養(yǎng)方案。1.3茉莉花組培概況橫縣是中國最大的茉莉花種植和花茶加工基地，為全國花茶產(chǎn)業(yè)的穩(wěn)定和發(fā)展做出了很大貢獻(xiàn)，但隨著國內(nèi)、國際茶葉市場行情的不斷變化，茉莉花茶市場也一度出現(xiàn)低迷和波動⑶。從2007年到現(xiàn)在，花茶原料和茉莉花的價格都有較大幅度的提高，導(dǎo)致花茶加工成本逐步上升?！?】在生產(chǎn)成本不斷上升的情況下，部分企業(yè)為了減少虧損，提高利潤，他們開始開發(fā)利用組織培養(yǎng)技術(shù)來快速繁殖以降低生產(chǎn)成本。但是目前，利用組培技術(shù)進(jìn)行茉莉花快速繁殖技術(shù)的研究還比較少，缺乏一些比較完善，有效且簡易的組培方案。而在組培過程中所出現(xiàn)的褐變問題、污染問題和成功率較低也稱為了阻擋組培技術(shù)大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)的主要障礙。1.4主要存在問題1.4.1褐變問題褐變是植物組培育苗中常見的現(xiàn)象，以木本植物較為嚴(yán)重。褐變是指外植體在誘導(dǎo)脫分化或再分化過程中，自身組織從表面養(yǎng)基釋放褐色物質(zhì)，以全培養(yǎng)基逐漸變成褐色，外植體也隨之變褐而死亡的現(xiàn)象。故在培養(yǎng)中應(yīng)選擇合適茉莉花的外植體，配置合適的培養(yǎng)基并加入適量抗氧化劑和創(chuàng)設(shè)合理培養(yǎng)條件。1.4.2污染問題污染是指在組織培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基和培養(yǎng)材料滋生雜菌，導(dǎo)致培養(yǎng)失敗的現(xiàn)象。污染已成為制約茉莉花組織培養(yǎng)的主要難題之一，故分析污染原因，規(guī)范實驗操作，減少污染，提高組培的成功率是解決污染問題的主要途徑。1.4.3成功率較低除了褐變問題和污染問題會影響組培的成功率外，培養(yǎng)基中的激素比例對組培的成功率影響也極大。因此，探究比較適合茉莉花組培的激素比例是解決該問題的關(guān)鍵。2.設(shè)計內(nèi)容2.1試驗研究內(nèi)容2.1.1試驗材料生長良好的茉莉花莖段。2.1.2外植體來源和消毒處理組培中，作為原始繁殖材料的外植體的消毒，直接影響整個培養(yǎng)過程的進(jìn)行【5】。自來水沖洗5~15分鐘，接著在無菌條件下，用75%酒精浸泡30s后，用無菌水沖洗3?4次，然后置于0.1%升汞溶液中處理7?10min，最后用無菌水沖洗4?6次，放到無菌濾紙上吸十水分，切成每段長1.0?1.5cm，接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上。2.1.3培養(yǎng)基設(shè)計分別配置以下幾種不同比例的激素培養(yǎng)基MSMS+NAA0.5mg/L十6-BA0.1mg/LMS+NAA0.5mg/L+6-BA0.2mg/LMS+NAA0.5mg/L+6-BAO.Smg/LMS+NAA1.Omg/L+6-BA0.1mg/LMS+NAA1.Omg/L+6-BA0.2mg/LMS+NAA1.Omg/L+6-BA0.5mg/LMS+NAA2.Omg/L+6-BAO.1mg/LMS+NAA2.Omg/L+6-BA0.2mg/LMS+NAA2.Omg/L+6-BA0.5mg/LMS+NAA1.5mg/L+6-BA0.1mg/LMS+IBAO.5mg/L1/2MS1/2MS++IBAO.5mg/L分別對以上培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌備用。2.2實驗流程及試驗研究具體實施方案2.2.1實驗流程

圖1試驗流程圖化化數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析化-立圖1試驗流程圖化化數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析化-立.口2.2.2試驗研究具體實施方案誘導(dǎo)培養(yǎng)基的篩選以MS為基本培養(yǎng)基，附加不同濃度的NAA、6一BA。NAA設(shè)0.5、1.0、2.0mg/L3個濃度梯度，6一BA設(shè)0.1、0.2、0.5mg/L3個濃度梯度。對NAA、6一BA濃度進(jìn)行2因素3水平的正交試驗，每個處理90個外植體，3次重復(fù)，25d后統(tǒng)計莖段芽分化情況。芽誘導(dǎo)率（%）=（誘導(dǎo)出芽的外植體數(shù)/接種的外植體數(shù)）X100%分化培養(yǎng)基的篩選從誘導(dǎo)的莖段叢上切取2~3個芽的部分轉(zhuǎn)接至不同的分化培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基以MS+6一BA1.0mg/L為基礎(chǔ)，NAA設(shè)0.5、1.0、1.5、2.0mg/L4個濃度梯度，培養(yǎng)30d后觀察芽分化情況。生根培養(yǎng)基的篩選選擇葉片高度約3cm的叢芽，切成單芽，接種全生根培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基如下：(1)MS；(2)MS+IBA0.5mg/L；(3)1/2MS；(4)1/2MS+IBA0.5mg/L。每種培養(yǎng)基接種30個芽，3次重復(fù)，25d后統(tǒng)計生根情況。3.實驗結(jié)果分析討論3.1實驗記錄表格不同培養(yǎng)基對芽誘導(dǎo)的影響培養(yǎng)基配方接種數(shù)(個)芽誘導(dǎo)率(％)1)MS+NAA0.5mg/L十6-BA0.1mg/L302)MS+NAA0.5mg/L+6-BA0.2mg/L303)MS+NAA0.5mg/L+6-BAO.Smg/L304)MS+NAA1.Omg/L+6-BA0.1mg/L305)MS+NAA1.Omg/L+6-BA0.2mg/L306)MS+NAA1.Omg/L+6-BA0.5mg/L307)MS+NAA2.Omg/L+6-BAO.1mg/L308)MS+NAA2.Omg/L+6-BA0.2mg/L309)MS+NAA2.Omg/L+6-BA0.5mg/L30不同培養(yǎng)基對芽分化的影響培養(yǎng)基配方接種芽數(shù)(個)總芽數(shù)(個)MS+6-BA1.Omg/L+NAAO.Smg/L30MS+6-BA1.Omg/L+NAA1.Omg/L30MS+6-BA1.0mg/L+NAA1.Smg/L30MS+6-BA1.Omg/L+NAA2.OmglL30不同培養(yǎng)基對芽生根的影響培養(yǎng)基mg/kg接種芽數(shù)（個）生根狀況MS30MS+IBAO.5mg/L301/2MS301/2MS++IBAO.5mg/L303.2實驗分析通過以上試驗，分析并初步總結(jié)出茉莉花組培中最適合茉莉花組織培養(yǎng)的各種培養(yǎng)基搭配的方案。參考文獻(xiàn)【1】黃泰康.現(xiàn)代本草綱目[