實(shí)驗(yàn)：酵母細(xì)胞的固定化課件_第1頁(yè)
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實(shí)驗(yàn)四酵母細(xì)胞的固定化高大響一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵罅私夤潭ɑ?xì)胞的原理。掌握用海藻酸鈉制備固定化酵母細(xì)胞的方法。二、實(shí)驗(yàn)原理工業(yè)上常用包埋法固定微生物細(xì)胞。根據(jù)包埋劑的特性，海藻酸鈉在水相中加熱溶解呈溶液狀。將細(xì)胞加入混勻，滴入氯化鈣溶液中，由于離子的轉(zhuǎn)移作用而凝固，形成凝膠顆粒，凝膠顆粒中的微小空格將細(xì)胞固定。海藻酸鈣凝固的顆粒能反復(fù)使用，細(xì)胞在空格中可新陳代謝（固定活細(xì)胞），也可以利用細(xì)胞中的酶進(jìn)行酶促反應(yīng)（固定死細(xì)胞）。本實(shí)驗(yàn)利用海藻酸鈣凝膠包埋酵母生長(zhǎng)細(xì)胞。酵母細(xì)胞的活化取市售干酵母按1g投入到20ml

36～38℃的溫水中活化15～20分鐘，酵母細(xì)胞活化時(shí)體積會(huì)變大，活化前應(yīng)該選擇體積足夠大的容器，以避免酵母細(xì)胞的活化液溢出容器外。四、實(shí)驗(yàn)方法和步驟酵母細(xì)胞的固定化在冷卻至45～50℃左右海藻酸鈉溶液中，加入5mL預(yù)熱至35℃的酵母培養(yǎng)液，混合均勻。將混合液裝入注射器中，裝上大好針頭，以緩慢而穩(wěn)定的速度將其滴入1.5％CaCl2溶液中，邊滴邊搖動(dòng)三角瓶，即可制得直徑為3mm左右的凝膠珠。在CaCl2溶液中鈣化30min，即可使用。四、實(shí)驗(yàn)方法和步驟

加熱使海藻酸鈉溶化是操作中最重要的一環(huán)一定要溶解徹底，在溶解過程中不斷攪拌，在降溫過程中不能低于45℃，否則會(huì)凝固。

五、注意事項(xiàng)

海藻酸鈉的濃度涉及到固定化細(xì)胞的質(zhì)量如果海藻酸鈉濃度過高，將很難形成凝膠珠；如果濃度過低，形成的凝膠珠所包埋的酵母細(xì)胞的數(shù)目少，影響實(shí)驗(yàn)效果。

五、注意事項(xiàng)

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