分析馬錢子對(duì)骨關(guān)節(jié)炎中軟骨細(xì)胞凋亡與增殖的影響

分析馬錢子對(duì)骨關(guān)節(jié)炎中軟骨細(xì)胞凋亡與增殖的影響〔〕:

摘要：目的分析馬錢子對(duì)骨關(guān)節(jié)炎中軟骨細(xì)胞凋亡與增殖的影響情況。方法通過使用硝普鈉〔snP〕方式制作出兔膝骨關(guān)節(jié)炎模型，數(shù)量為80例。將其分為對(duì)照組、低劑量組、中劑量組和高劑量組。對(duì)照組不做任何處理，低、中、高劑量組分別使用不同劑量的馬錢子處理，觀察對(duì)軟骨細(xì)胞凋亡和增殖的相關(guān)影響。結(jié)果對(duì)照組凋亡率最高，隨著馬錢子劑量的提升，凋亡率顯著降低。同時(shí)細(xì)胞增殖od值也隨著馬錢子劑量提升而提升，差異均顯著〔P

0引言

當(dāng)前在對(duì)關(guān)節(jié)炎患者施行臨床治療時(shí)，馬錢子是比擬常見的藥物類型。并且在實(shí)際的治療中，通過使用馬錢子也往往可以獲得較好效果，對(duì)于患者而言有著相當(dāng)重要的意義【1】。但需要注意的是，馬錢子對(duì)骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞凋亡以增殖的影響，實(shí)際上并不明確。因此當(dāng)前在對(duì)骨關(guān)節(jié)炎的治療中，馬錢子的使用也并不廣泛。在這樣的前提下，通過分析馬錢子對(duì)骨關(guān)節(jié)炎中軟骨細(xì)胞凋亡與增殖的影響，并找出其詳細(xì)影響的方式和機(jī)制非常重要，對(duì)臨床治療也有著較大意義[2-3]。本研究即通過制作兔膝骨關(guān)節(jié)炎模型的方式，分析了馬錢子對(duì)于骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞凋亡和增殖的詳細(xì)影響，報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

1.1.1材料和儀器

本研究使用硝普鈉〔國藥準(zhǔn)字H20223166，河南省宛西制藥股份〕，規(guī)格50mg/支。2日齡新西蘭兔，我院動(dòng)物房提供。德國產(chǎn)甲苯胺藍(lán)。中國藥品生物制品鑒定所消費(fèi)的馬錢子堿，規(guī)格20mg/支。儀器為美國BB5060二氧化碳培養(yǎng)箱，規(guī)格50mL/L。EPICSXLMCL流式細(xì)胞儀。日本JEM-1230透射電鏡。

1.1.2骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞模型

軟骨細(xì)胞系為自行制作的兔膝骨關(guān)節(jié)炎模型，數(shù)量為80例。需無菌操作獲得家兔軟骨，參加少量的100g/L的FCSDEME培養(yǎng)液，將其剪碎為1x1mm2，在500r/min條件下離心5min處理，將上清液去除后放入到燒瓶中，參加消化液處理3h，消化后將細(xì)胞懸液進(jìn)展離心處理，速度1600r/min，時(shí)間為5min。將上清液丟棄后接入到培養(yǎng)瓶中，放置在50mL/L的培養(yǎng)箱中進(jìn)展培養(yǎng)，每隔2~3d需換液，本研究為三四代傳代細(xì)胞，并且已經(jīng)使用甲苯胺藍(lán)染色鑒定確定其存在。同時(shí)需使用SNP誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞凋亡模型。將其隨機(jī)分為4組，即對(duì)照組、低劑量組、中劑量組和高劑量組，每組均20例。

1.2方法

需要對(duì)本研究的所有骨關(guān)節(jié)炎中軟骨細(xì)胞模型進(jìn)展馬錢子的處理，在本研究中需要使用馬錢子堿。軟骨細(xì)胞需要按照每個(gè)孔中1x105個(gè)細(xì)胞，種植在24孔板中，在培養(yǎng)體系中分別參加2mol/L的SNP，并且分別對(duì)其進(jìn)展孵育12h、24h以及48h，細(xì)胞對(duì)其施行流式細(xì)胞儀的監(jiān)測(cè)。同時(shí)需要在低劑量組中參加125mg/L的馬錢子堿，在中劑量組中參加250mg/L的馬錢子堿，在高劑量組中參加500mg/L的馬錢子堿。最后可對(duì)細(xì)胞的凋亡以及增殖情況進(jìn)展檢測(cè)。在本研究中，使用透射電鏡的方法進(jìn)展形態(tài)觀察，即需要將細(xì)胞進(jìn)展搜集，并且離心成為細(xì)胞團(tuán)塊，使用25g/L的戊二醛對(duì)其進(jìn)展固定處理，時(shí)間為2h，并使用10g/L的四氧化鋨進(jìn)展再固定，時(shí)間為1.5h，使用梯度丙酮進(jìn)展脫水處理，并應(yīng)用環(huán)氧樹脂浸透包埋，使用超薄切片機(jī)進(jìn)展切片，并在染色后使用電子透射電鏡進(jìn)展觀察，使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，分析細(xì)胞的凋亡率以及增殖OD值。

1.3觀察指標(biāo)

觀察本研究中4組骨關(guān)節(jié)炎中軟骨細(xì)胞的凋亡率以及增殖OD值。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

本研究使用SPSS20.0軟件進(jìn)展統(tǒng)計(jì)學(xué)的分析，計(jì)量資料用均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差〔s〕表示，采用t檢驗(yàn)，以P

3討論

當(dāng)前在臨床對(duì)關(guān)節(jié)炎患者施行臨床治療時(shí)，馬錢子是非常常見的藥物，并且也可以獲得較好的治療效果。馬錢子為馬錢的枯燥種子，一般在冬季可采收其成熟果實(shí)，并且取出種子曬干入藥[4-5]。在臨床治療時(shí)，使用馬錢子可以獲得較好的臨床療效，并且在當(dāng)前臨床治療時(shí)也開始得到了越來越廣泛的使用。

馬錢子中的有效成分為馬錢子堿。馬錢子堿可以起到通絡(luò)止痛以及消腫散結(jié)的效果，在實(shí)際的治療中，可以通過馬錢子堿的方式改善其疼痛病癥，從而讓患者可以較好地面對(duì)治療以及之后的護(hù)理[6-7]。

但需要注意的是，當(dāng)前在臨床上對(duì)于馬錢子治療骨關(guān)節(jié)炎的研究仍然比擬少。雖然已經(jīng)將馬錢子中的有效成分馬錢子堿進(jìn)展提取，并且將其制作成為馬錢子散和腰痛舒等藥物治療，但馬錢子堿可以獲得的詳細(xì)效果并不明確，因此對(duì)馬錢子的治療效果進(jìn)展分析非常重要。

本研究對(duì)馬錢子對(duì)骨關(guān)節(jié)炎中軟骨細(xì)胞凋亡與增殖的影響進(jìn)展了分析。通過本研究顯示，在對(duì)骨關(guān)節(jié)炎中軟骨細(xì)胞凋亡模型進(jìn)展馬錢子堿的處理后，發(fā)現(xiàn)模型的凋亡率有明顯降低，同時(shí)增殖OD值有顯著提升，而這種趨勢(shì)隨著馬錢子堿的計(jì)量提升而加劇，由此可見，使用大劑量的馬錢子可以對(duì)骨關(guān)節(jié)炎起到較好保護(hù)效果。

綜上所述，在對(duì)骨關(guān)節(jié)炎患者施行臨床治療時(shí)，使用馬錢子進(jìn)展治療可以獲得平安有效的治療效果，可有效抑制細(xì)胞凋亡，并促進(jìn)細(xì)胞增殖，有較高使用價(jià)值。

參考文獻(xiàn)：

【1】唐迎雪,梁曉東,李茜,等.馬錢子配伍蘇木對(duì)佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠炎癥反響及血液流變學(xué)的影響[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2022,35(3):522-525.

【2】梁曉東,陳濤,曹永倉,等.馬錢子配伍白術(shù)前后對(duì)大鼠佐劑關(guān)節(jié)炎的影響[J].中華中醫(yī)藥雜志,2022,31(1):235-238.

【3】張董喆,孫曙光,李偉,等.制馬錢子對(duì)佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中醫(yī)學(xué)報(bào),2022,30(4):539-541.

【4】孫響波,于妮娜,楊子?xùn)|,等.馬錢子配伍蘇木對(duì)佐劑關(guān)節(jié)炎模型大鼠滑膜組織Cor、CIC的影響[J].山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2022,37(5):428-430.

【5】宋曉亮,劉強(qiáng),李曉東,等.馬錢子堿對(duì)體外培養(yǎng)的人軟骨細(xì)胞增殖的影響[J].中國醫(yī)藥指南,2022,11(19):10-11.

【6】徐軍,劉強(qiáng),宋曉亮,等.馬錢子堿液關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射對(duì)兔膝關(guān)節(jié)損傷軟骨的影響[J].中國