血液檢測(cè)室內(nèi)質(zhì)控方法（血站技術(shù)操作規(guī)程）

血液檢測(cè)室內(nèi)質(zhì)控方法1總則血站血液檢測(cè)主要包括用于血清學(xué)抗體或抗原檢測(cè)的ELISA或CLIA試驗(yàn)，用于HBV/HCV/HIVDNA或RNA檢測(cè)的NAT試驗(yàn)，以及ALT酶學(xué)試驗(yàn)。ELISA或CLIA試驗(yàn)的室內(nèi)質(zhì)控通常采用試劑盒陰陽(yáng)性對(duì)照、弱陽(yáng)性質(zhì)控品實(shí)時(shí)監(jiān)控試驗(yàn)的有效性，同時(shí)采用弱陽(yáng)性質(zhì)控品和Levey-Jennings質(zhì)控圖監(jiān)控試驗(yàn)的穩(wěn)定性。ALT作為定量試驗(yàn)通常采用Levey-Jennings質(zhì)控圖監(jiān)控ALT試驗(yàn)的精密性和有效性。NAT試驗(yàn)以及其它定性試驗(yàn)可選擇適當(dāng)濃度的質(zhì)控物，采用定性檢測(cè)結(jié)果合格即判為在控的方法。2血清學(xué)試驗(yàn)過(guò)程穩(wěn)定性控制推薦采用Levey-Jennings質(zhì)控圖監(jiān)控ELISA或CLIA試驗(yàn)過(guò)程的穩(wěn)定性，發(fā)現(xiàn)隨機(jī)誤差和系統(tǒng)誤差。實(shí)驗(yàn)室如需采用更多種類的控制圖進(jìn)行質(zhì)控，可查閱相關(guān)文獻(xiàn)。2.1質(zhì)控規(guī)則2.1.1質(zhì)控規(guī)則的表示方法用方式表示質(zhì)控規(guī)則，“A”代表質(zhì)控測(cè)定值個(gè)數(shù)，“L”是從正態(tài)統(tǒng)計(jì)量得到的質(zhì)控界限。例如，質(zhì)控規(guī)則指一個(gè)質(zhì)控結(jié)果超出了均值加減3倍標(biāo)準(zhǔn)差界限。2.1.2質(zhì)控規(guī)則的選用實(shí)驗(yàn)室可選擇Levey-Jennings質(zhì)控圖常規(guī)使用的13s規(guī)則作為在控與失控的判斷規(guī)則，如發(fā)現(xiàn)違背13s規(guī)則的情況，說(shuō)明試驗(yàn)過(guò)程沒(méi)有處于受控狀態(tài)，應(yīng)查找原因予以解決。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況，同時(shí)選擇一個(gè)監(jiān)控試驗(yàn)系統(tǒng)誤差的規(guī)則，如7x規(guī)則，以發(fā)現(xiàn)由于儀器、試劑、環(huán)境條件等因素引起的系統(tǒng)誤差。上述常用質(zhì)控規(guī)則的釋義如下：13s：一個(gè)質(zhì)控值超過(guò)。用于提示可能存在隨機(jī)誤差。7x：7個(gè)連續(xù)的質(zhì)控值落在均值一側(cè)，用于提示可能存在系統(tǒng)誤差。2.2質(zhì)控圖的建立2.2.1設(shè)定質(zhì)控圖均值和標(biāo)準(zhǔn)差在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢測(cè)條件下，連續(xù)測(cè)定同一批號(hào)的弱陽(yáng)性質(zhì)控品10～20天，收集至少20個(gè)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行離群值檢驗(yàn)，剔除超過(guò)±3s以外的數(shù)據(jù)，計(jì)算均值及標(biāo)準(zhǔn)差，以此控制后續(xù)試驗(yàn)過(guò)程，直至試劑或質(zhì)控品批號(hào)更換。實(shí)驗(yàn)室如采用積累質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)計(jì)算均值和標(biāo)準(zhǔn)差，具體方法可參見(jiàn)本章節(jié)ALT質(zhì)控均值的計(jì)算。但需注意，由于核酸和血清學(xué)試劑可能存在較大的批間差異，積累質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)計(jì)算的方式可能增大室內(nèi)質(zhì)控的標(biāo)準(zhǔn)差和變異度，因此如兩批試劑的質(zhì)控均值和標(biāo)準(zhǔn)差有顯著差異，建議針對(duì)新批號(hào)試劑重新計(jì)算質(zhì)控均值和標(biāo)準(zhǔn)差。實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建質(zhì)控圖的過(guò)程中，如果發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)變異度過(guò)大，應(yīng)采取措施，穩(wěn)定各個(gè)環(huán)節(jié)試驗(yàn)條件，將變異度控制在可接受范圍內(nèi)。通常情況下，ELISA試驗(yàn)的變異系數(shù)宜控制在20%以內(nèi)。2.2.2設(shè)定質(zhì)控圖控制限控制限通常是以標(biāo)準(zhǔn)差的倍數(shù)來(lái)表示。Levey-Jennings質(zhì)控圖將設(shè)置為控制限，即控制上限值為，控制下限值為。如果質(zhì)控圖的控制下限值小于1，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)室采用的控制低限（LCL）已經(jīng)低于試驗(yàn)性能低限（LSL），試驗(yàn)過(guò)程變異較大，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)查找原因，改進(jìn)過(guò)程，降低試驗(yàn)變異度（CV）。2.2.3繪制質(zhì)控圖以Y軸為質(zhì)控品的測(cè)定值（S/CO值），X軸為質(zhì)控個(gè)數(shù)或單位時(shí)間。Y軸刻度上各水平線分別為均值、、、上下限，描點(diǎn)繪圖。當(dāng)采用13s規(guī)則可采用單點(diǎn)質(zhì)控圖，將質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)逐一點(diǎn)于質(zhì)控圖上進(jìn)行觀察，以發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)隨機(jī)誤差。當(dāng)采用7x規(guī)則，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室情況，采用單點(diǎn)質(zhì)控圖或?qū)⒁粋€(gè)單位時(shí)間內(nèi)（通常為一天）所有質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)的均值點(diǎn)于質(zhì)控圖上進(jìn)行觀察，以發(fā)現(xiàn)檢測(cè)系統(tǒng)的變化和趨勢(shì)。2.2.4質(zhì)控圖框架的重建如果更換新批號(hào)試劑，鑒于ELISA或CLIA試驗(yàn)的特性和試劑批間的不穩(wěn)定性，可能兩批試劑質(zhì)控均值和標(biāo)準(zhǔn)差存在顯著差異，如需要應(yīng)重新建立質(zhì)控圖框架。如果更換新批號(hào)質(zhì)控品，在試劑批號(hào)不變的情況下，可采用將新批號(hào)質(zhì)控品和舊批號(hào)質(zhì)控品同時(shí)檢測(cè)的方式，以確保在舊批號(hào)質(zhì)控品使用結(jié)束前，獲得計(jì)算新批號(hào)質(zhì)控品均值和標(biāo)準(zhǔn)差的數(shù)據(jù)，建立質(zhì)控圖框架。如果質(zhì)控圖使用過(guò)程中，出現(xiàn)均值的偏移和標(biāo)準(zhǔn)差變化，需分析并消除產(chǎn)生偏差的原因，必要時(shí)應(yīng)重新調(diào)整質(zhì)控圖框架。2.3失控情況的分析處理如出現(xiàn)違背試驗(yàn)有效性判定規(guī)則，應(yīng)視為試驗(yàn)無(wú)效。查找原因，采取糾正措施后重新試驗(yàn)。如違背實(shí)驗(yàn)室選擇的質(zhì)控規(guī)則，出現(xiàn)隨機(jī)誤差或系統(tǒng)誤差，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)分析產(chǎn)生誤差原因。引起誤差的因素通常包括操作上的失誤，試劑、校準(zhǔn)物、質(zhì)控品的失效；試劑、質(zhì)控品更換批號(hào)或保存末期發(fā)生變化；儀器使用維護(hù)不當(dāng)；質(zhì)控圖建立過(guò)程中采用的數(shù)據(jù)不足造成均值和標(biāo)準(zhǔn)差不適宜等。應(yīng)采取糾正措施，消除產(chǎn)生誤差的因素。如果所選擇弱陽(yáng)性質(zhì)控品超過(guò)規(guī)定的S/CO值上限，應(yīng)關(guān)注違背－3s規(guī)則時(shí)的試驗(yàn)狀況，必要時(shí)對(duì)陰性結(jié)果重新檢測(cè)。應(yīng)保存失控情況分析處理記錄。3ALT實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控3.1質(zhì)控規(guī)則的選用3.2質(zhì)控圖的建立3.2.1設(shè)定質(zhì)控圖均值：在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢測(cè)條件下，測(cè)定同一批號(hào)的質(zhì)控品10～20天，收集至少20個(gè)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行離群值檢驗(yàn)，剔除超過(guò)±3s以外的數(shù)據(jù)，計(jì)算臨時(shí)均值及標(biāo)準(zhǔn)差，以此控制此后一個(gè)月的室內(nèi)質(zhì)控情況。一個(gè)月結(jié)束后，匯集當(dāng)月所有質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)，計(jì)算所有在控?cái)?shù)據(jù)積累的質(zhì)控均值和標(biāo)準(zhǔn)差，以此控制下一個(gè)月的室內(nèi)質(zhì)控情況。重復(fù)以上操作三到五個(gè)月，最終匯集前20個(gè)數(shù)據(jù)和三到五個(gè)月的質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)，計(jì)算積累的質(zhì)控均值和標(biāo)準(zhǔn)差，以此作為常規(guī)均值和標(biāo)準(zhǔn)差，控制以后的試驗(yàn)過(guò)程，直至質(zhì)控品批號(hào)更換。3.2.2設(shè)定質(zhì)控圖控制限：控制限通常以標(biāo)準(zhǔn)差的倍數(shù)表示。Levey-Jennings3.2.3繪制質(zhì)控圖3.2.4質(zhì)控圖的重建：鑒于ALT試驗(yàn)的特性，質(zhì)控圖可包含多個(gè)試劑批號(hào)的變化。如果更換新批號(hào)質(zhì)控品，可采用將新批號(hào)質(zhì)控品和舊批號(hào)質(zhì)控品同時(shí)檢測(cè)的方式，以確保在舊批號(hào)質(zhì)控品使用結(jié)束前，獲得計(jì)算新批號(hào)質(zhì)控品均值和標(biāo)準(zhǔn)差的數(shù)據(jù)，建立質(zhì)控圖。3.2.5如果質(zhì)控圖使用過(guò)程中，出現(xiàn)均值的偏移和標(biāo)準(zhǔn)差變化，需分析并消除產(chǎn)生偏差的原因，必要時(shí)應(yīng)重新構(gòu)建質(zhì)控圖。3.3失控情況的分析處理：如出現(xiàn)違背質(zhì)控規(guī)則的情況，需分析產(chǎn)生誤差的類型及原因，并視為試驗(yàn)失控和無(wú)效。應(yīng)查找原因，采取糾正措施后重新試驗(yàn)。引起誤差的因素通常包括操作上的失誤、試劑、校準(zhǔn)物、質(zhì)控品的失效；試劑、質(zhì)控品更換批號(hào)或保存末期發(fā)生變化；儀器使用維護(hù)不當(dāng)；由于質(zhì)控圖建立過(guò)程中采用的數(shù)據(jù)不足造成均值和標(biāo)準(zhǔn)差不適宜等。應(yīng)保存失控情況分析處理記錄。4特殊情況下的室內(nèi)質(zhì)控對(duì)于不能每天進(jìn)行血液檢測(cè)、質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)量少的實(shí)驗(yàn)室，必須保證每次試驗(yàn)滿足試劑盒質(zhì)控要求，弱陽(yáng)性質(zhì)控品S/CO≥1。在次基礎(chǔ)上，可適時(shí)采用Grubbs氏法進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控。該方法只需連續(xù)測(cè)定3次，即可對(duì)第3次檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行檢驗(yàn)和控制。具體計(jì)算方法如下。1）計(jì)算出測(cè)XX果（至少3次）的平均值（）和標(biāo)準(zhǔn)差（s）。2）計(jì)算SI上限值和SI下限值：SI上限=（X最大值-）/sSI下限=（-X最小值）/s3）查表1，將SI上限和SI下限與SI值表中的數(shù)值進(jìn)行比較。表1SI值表nn3sn2snn3sn2s31.151.15122.552.2941.491.46132.612.3351.751.67142.662.3761.941.82152.702.4172.101.94162.752.4482.222.03172.792.4792.322.11182.822.50102.412.18192.852.53112.482.23202.882.56