藥品檢驗基礎知識

歡迎閱讀本文檔，希望本文檔能對您有所幫助！歡迎閱讀本文檔，希望本文檔能對您有所幫助！感謝閱讀本文檔，希望本文檔能對您有所幫助！感謝閱讀本文檔，希望本文檔能對您有所幫助！歡迎閱讀本文檔，希望本文檔能對您有所幫助！感謝閱讀本文檔，希望本文檔能對您有所幫助！藥品化學檢驗基礎知識藥品標準概述，中國藥典介紹…實驗誤差的來源和評估…滴定分析方法………、概述，分類，滴定方式標準溶液（滴定液），濃度表示標準溶液（滴定液），配制與標定，滴定分析的計、滴定分析應用與示例五、紫外－可見分光光度法（定義、原理、應用）六、藥品的一般雜質檢查（1、概述2、藥品雜質來源3、雜質限量4、藥品雜質分類5、重金屬檢查法）一、藥品標準概述1.1、藥品：是用于預防、治療、診斷人的疾病，有目的地調節(jié)人的生理機能并規(guī)定有適應癥或者功能主治、用法和用量的物質，包括中藥材、中藥飲片、中成藥?；瘜W原料藥及其制劑、抗生素、生化藥品、放射性藥品、血清、疫苗、血液制品和診斷藥品等。1.2、藥品標準：系根據(jù)藥物來源、制藥工藝等生產及貯存過程中的各個環(huán)節(jié)所制定的、用以檢測藥品質量是否達到用藥要求并衡量其質量是否穩(wěn)定均一的技術規(guī)定。1.3、國家藥品標準：是由國家政府制定并頒布的藥品質量標準，系國家站在公眾立場為保證藥品質量而規(guī)定的藥品所必須達到的最基本的技術要求。國家標準是強制性標準，不能達到國家藥品標準要求的藥品，即被視為不符合法定要求的藥品，因而不得作為藥品銷售或使用。法定的國家藥品標準有：1.3.1中國藥典現(xiàn)版藥典為2005年版，分一部、二部和三部。其中一部收載藥材及飲片、植物油脂和提取物、成方制劑和單味制劑等；二部收載化學藥品、抗生素、生化藥品、放射性藥品以及藥用輔料等；三部收載生物制品。1.3.2局（部）頒標準國家食品藥品監(jiān)督管理局藥品標準，簡稱局頒標準，包括編纂成冊出版發(fā)行以及單一品種的標準，由國家食品藥品監(jiān)督管理局頒布執(zhí)行。二、中國藥典介紹2.1、藥典包括凡例、標準正文、附錄等內容。凡例中的有關規(guī)定同樣具有法定的約束力；正文部分為所收載的藥品或制劑的質量標準；附錄包括制劑通則、通用檢驗方法和指導原則。2.2、2005年版藥典凡例共28條。下面介紹與檢驗相關的重點條款：2.2.1第五條：性狀項下記載藥品的外觀、臭、味，溶解度以及物理常數(shù)等。溶解度是藥品的一種物理性質。物理常數(shù)包括相對密度、餾程、熔點、比旋度等，測定結果不僅對藥品具有鑒別意義，也反映藥品的純度，是評價藥品質量的主要指標之一。2.2.2第六條：鑒別項下規(guī)定的試驗方法，僅反映該藥品某些物理、化學或生物學等性質的特征，不完全代表對該藥品化學結構的確證。2.2.3第七條：檢查項下包括反映藥品的安全性與有效性的試驗方法和限度均一性與純度等制備工藝要求等內容；對于規(guī)定中的各種雜質檢查項目，系指該藥品在按既定工藝進行生產和正常貯藏過程中可能含有或產生并需要控制的雜質；改變生產工藝時需要另考慮增修訂有關項目。2.2.4第八條：含量測定項下規(guī)定的試驗方法，用于測定原料及制劑中有效成分的含量，一般可采用化學、儀器或生物測定方法。2.2.5第十條：制劑的規(guī)格，系指每一支、片或其他每一個單位制劑中含有主藥的重量（或效價）或含量的（％）或裝量；注射液項下如為“1ml:10mg”，系指1ml中含有主藥10mg。2.2.6貯藏項下的規(guī)定，系對藥品貯存與保管的基本要求。有名詞術語表示，例如：密閉系指將容器密閉，以防止塵土及異物進入；陰涼處系指不超過20℃；涼暗處系指避光并不超過20℃；常溫系指10～30℃。2.2.7第十五條原料藥的含量（％），除另有注明者外，均按重量計。如規(guī)定上限為100％以上時，系指用本藥典規(guī)定的分析方法測定時可能達到的數(shù)值，它為藥典規(guī)定的限度或允許偏差，并非真實含有量，如未規(guī)定上限時，系指不超過101.0％。2.2.8第十六條標準品、對照品標準品系指用于生物檢定、抗生素或生化藥品中含量或效價測定的標準物質。對照品除另有規(guī)定外，均按干燥品（或無水物）進行計算后使用。2.2.9計量單位（1）、滴定液和試液的濃度，以mol/L(摩爾／升)表示者，其濃度要求精密標定的滴定液用“XXX滴定液（YYYmol/L）表示；作其他用途不需要精密標定其濃度時，用“YYYmol/LXXX溶液”表示。（2）、溫度以攝氏度（℃）表示：水浴溫度除另有規(guī)定外，均指98～100℃熱水系指70～80℃室溫系指10～30℃放冷系指放冷至室溫（3）、百分比％（g/g）表示溶液100g中含有溶質若干克；％（ml/ml）表示溶液100ml中含有溶質若干毫升；％（ml/g）表示溶液100g中含有溶質若干毫升；％(g/ml)表示溶液100ml中含有溶質若干克。（4）、液體的滴，系指在20℃時，以1.0ml水為滴進行換算。（5）、溶液后標示的（1→10）等符號，系指固體溶質1.0g或液體溶質1.0ml加溶劑使成10ml的溶液；未指明用何種溶劑時，均系指水溶液。（6）、乙醇未指明濃度時，均系指95％（ml/ml）的乙醇。2.2.10取樣量和試驗精度（1）試驗中供試品與試藥等“稱重”或“量取”的量，均以阿拉伯數(shù)碼表示，其精確度可根據(jù)數(shù)值的有效數(shù)位來確定：如稱取0.1g，系指稱取重量可為0.06～0.14g；稱取2g，系指稱取重量可為1.5～2.5g；稱取2.0g，系指稱取重量可為1.95～2.05g；稱取2.00g，系指稱取重量可為1.995～2.005g。（2）精密稱定系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一；稱定系指稱取重量應準確至所取重量的百分之一；精密量取系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求；量取系指可用量筒或按照量取體積的有效數(shù)位選用量具。取用量為“約”若干時，系指取樣量不得超過規(guī)定量的±10％。（3）恒重除另有規(guī)定外，系指供試品連續(xù)兩次干燥或熾灼后的重量差異在0.3mg以下的重量；干燥至恒重的第二次及以后各次稱重均應在規(guī)定條件下繼續(xù)干燥1小時后進行；熾灼至恒重的第二次稱重應在繼續(xù)熾灼30分鐘后進行。（4）試驗中規(guī)定“按干燥品（或無水物、或無溶劑）計算”時，除另有規(guī)定外，應取未經干燥（或未去水、或未去溶劑）的供試品進行試驗，并將計算中的取用量按檢查項下測得的干燥失重（或水分、或溶劑）扣除。（5）試驗中的“空白試驗”，系指在不加供試品或以等量的溶劑替代供試液的情況下，按同法操作所得的結果；（6）含量測定中的“并將滴定的結果用空白試驗校正”，系指按供試品所耗滴定液量（ml）與空白試驗中所耗滴定液量(ml)之差進行計算。（7）試驗時的溫度，未注明者，系指在室溫下進行；溫度高低對試驗結果有明顯影響者，除另有規(guī)定為應以25±2℃為準。（8）試驗用水，除另有規(guī)定外，均系指純化水。酸堿度檢查所用的水，均系指新沸并放冷至室溫的水。（9）酸堿性試驗時，如未指明用何種指示劑，均系指石蕊試紙。三、實驗誤差的來源和評估3.1、實驗誤差的來源在藥品檢驗工作中，尤其在含量測定中，經常提到誤差，什么是誤差，誤差的分類以及誤差產生的原因，如何消除和減少誤差，使檢驗結果更加準確可靠，這些問題是分析工作者首先考慮的問題。3.1.1、什么是誤差任何分析測量所得的結果，總是和已知的真實含量或多或少有些差別，這些差別在分析上叫誤差。3.1.2、誤差的分類及其產生的原因根據(jù)誤差的性質，可將誤差分為三類：系統(tǒng)誤差、偶然誤差、過失誤差。3.1.2.1系統(tǒng)誤差系統(tǒng)誤差又稱可測誤差。它是由某種固定的原因所造成的，一般有固定的方向（正或負）和大小，重復進行測定時重復出現(xiàn)。產生原因：（1）儀器和試劑引起的誤差，如容量瓶刻度不準，試劑不純等；（2）方法誤差，所選方法不恰當引起；（3）操作誤差，操作不當引起的誤差。消除系統(tǒng)誤差方法（1）校準儀器（2）對照試驗（3）空白試驗3.1.2.2偶然誤差偶然誤差又稱不可定誤差。它是由一些不確定的偶然因素所引起的。如測定環(huán)境溫度、濕度變化等。特點：有時大有時小，有時正有時負；規(guī)律：絕對值相同的正、負誤差出現(xiàn)的概率大體相等；消除偶然誤差方法：通過增加平行測定次數(shù)，減免測量結果中的偶然誤差。3.1.2.3過失誤差過失誤差是指工作中的差錯，是由于工作粗枝大葉，不按操作規(guī)程辦事等原因造成的。這類誤差在工作中應該屬于責任事故，是不允許存在的?？傊?，杜絕過失誤差、校正系統(tǒng)誤差、控制偶然誤差，測定的數(shù)據(jù)才是可靠的。3.2、實驗誤差的評估3.2.1準確度是指測量值與真值接近的程度。測量值與真值越接近，測量的誤差就越小，準確度就越高。通常用絕對誤差和相對誤差來表示。絕對誤差＝測量值－真值測量值－真值相對誤差＝────────×100％真值3.2.2精密度表示平行測量的各測量值之間互相接近的程度。通常用絕對偏差、相對偏差和相對平均偏差、相對標準偏差，多數(shù)用相對標準偏差（RSD）來表示。絕對偏差（d）＝測量值－平均值d＝xi－x平均相對偏差＝絕對偏差／平均值×100％d／x平均×100％＝（xi－x平均）／x平均×100％相對平均偏差：d平均／x平均×100％＝（∑︱xi-x平均︳）／n·x平均×100％標準偏差（s）S=√(X1－X平均)2＋(X2－X平均)2＋…＋(Xn－X平均)2/(n－1)相對標準偏差（RSD）RSD＝S/X平均×100％例如：一分析人員標定某滴定液的濃度，平行操作4次，結果為0.1010；0.1012；0.1014；0.1013mol/L，計算測定的平均值、相對平均偏差、相對標準偏差。平均值x平均＝（0.1010＋0.1012＋0.1014＋0.1013）/4＝0.1012mol/L平均偏差d平均＝（0.0002＋0.0000＋0.0002＋0.0001）/4＝0.0001mol/L相對平均偏差d平均／x平均＝0.0001／0.1012×100％＝0.1％標準偏差s=√(0.0002)2+(0.0000)2+(0.0002)2+(0.0001)2/(4-1)=0.0002mol/L相對標準偏差RSD＝0.0002／0.1012×100％＝0.2％3.2.3準確度與精密度的關系準確度高，要求精密度一定高；但精密度好，準確度不一定高。準確度反映了測量結果的正確性；精密度反映了測量結果的重現(xiàn)性。四、滴定分析法4.1概述P152滴定分析（又稱容量分析）法，是將一種已知準確濃度的標準溶液（滴定液）滴加到待測物質的溶液中，直到化學反應按計量關系完全作用為止，然后根據(jù)所用標準溶液的濃度和體積計算出待測物質的含量。滴定，就是將標準溶液（滴定液）通過滴定管滴加到待測溶液中的操作過程。在實際操作時，常在待測物質的溶液中加入可發(fā)生顏色變化的指示劑。在滴定過程中，指示劑正好發(fā)生顏色變化的轉變點稱為滴定終點。4.2分類P152滴定分析可分為五類：（1）酸堿滴定法：以中和反應為基礎。常用標準溶液有鹽酸滴定液、硫酸滴定液、氫氧化鈉滴定液、高氯酸滴定液等。（2）沉淀滴定法：以沉淀反應為基礎。常用標準溶液有硝酸銀滴定液、硫氰酸銨滴定液等。（3）絡合滴定法：以絡合反應為基礎。常用標準溶液有乙二胺四乙酸二鈉滴定液、鋅滴定液等。（4）氧化還原滴定法：以氧化還原反應為基礎。常用標準溶液有碘滴定液、硫代硫酸鈉滴定液、高錳酸鉀滴定液等。（5）重氮化滴定法：以重氮化反應為基礎。常用標準溶液有亞硝酸鈉滴定液。4.3滴定方式（1）直接滴定法：用標準溶液直接滴定待測物質。（2）返滴定法（剩余滴定法或回滴法）：先加入一定量的過量的滴定液，待反應完成后，用另一種標準溶液滴定剩余的滴定液。（3）置換滴定法：先用適當試劑與待測物質反應，使之置換出另一生成物，再用標準溶液滴定此生成物。4.4標準溶液（滴定液）濃度表示方法（1）物質的量濃度（摩爾濃度）mol/L；（2）滴定度（T）滴定度是指每毫升滴定液相當于待測物質的質量（g/ml或mg/ml）；（3）濃度因數(shù)（F）實際工作中配制滴定液時，不可能恰好配成理論濃度。滴定液的實際濃度濃度因數(shù)（F）＝─────────滴定液的理論濃度4.5標準溶液（滴定液）配制與標定P2014.5.1配制方法滴定液的配制方法有間接配制法和直接配制法兩種。采用間接配制法時，溶質與溶劑的取用量均應根據(jù)規(guī)定量進行稱取或量取，并使制成后的滴定液濃度值應為其名義值的0.95～1.05。采用直接配制法時，其溶質應采用基準試劑，并按規(guī)定條件干燥至恒重后稱取，取用量應為精密稱定。4.5.2標定標定系指根據(jù)規(guī)定的方法，用基準物質或已標定的滴定液準確測定滴定液濃度（mol/L）的操作過程。4.5.3標定實例例精密稱定在105℃干燥至恒重的基準鄰苯二甲酸氫鉀約0.8g，加新沸過的冷水50ml，振搖使其盡量溶解；加酚酞指示劑2-3滴，用未知濃度的氫氧化鈉滴定液滴定；在近終點時，應使鄰苯二甲酸氫鉀完全溶解，滴定至溶液顯粉紅色，30秒不退色。每1ml氫氧化鈉滴定液（1mol/L）相當于204.2mg的鄰苯二甲酸氫鉀。本滴定液的濃度C（mol/L）計算mC（mol/L）＝───────V×204.2其中m為基準鄰苯二甲酸氫鉀的稱取量（mg／g）；V為本滴定液的消耗量（ml）；204.2為與每1ml氫氧化鈉液（1mol/L）相當?shù)囊詍g/g表示的鄰苯二甲酸氫鉀的質量.假設稱取鄰苯二甲酸氫鉀的質量為0.7996g，消耗氫氧化鈉滴定液體積為19.57ml。0.7996本滴定液的濃度C＝───────＝0.2001（mol/L）19.57×0.2042注意：使用高氯酸滴定液時，應進行溫度校正，使用時的溫度與標定溫度相差不大于10℃時，濃度校正按下式計算：C0Ct＝─────────1+0.0011(t1－t0)其中t0為標定時的溫度；t1為測定時的溫度；C0標定時的濃度；Ct測定時的濃度。4.6滴定分析的計算4.6.1原料藥含量測定結果計算原料藥含量一般用百分含量（g/g）來表示。例如：對氨基水楊酸鈉含量測定取樣品約0.4g，精密稱定，用水18ml和鹽酸溶液（1→2）15ml溶解，用亞硝酸鈉標準液（0.1mol/L）滴定，每1ml的亞硝酸鈉標準液（0.1mol/L）相當于17.51mg的無水對氨基水楊酸鈉。假設取樣量0.4326g，亞硝酸鈉標準液濃度為0.1034mol/L，終點時消耗19.80ml，計算其含量（干燥失重17.0％）。實驗測得的量含量＝───────×100％供試品量已知，實驗測得的量＝V標準FT供試品的量＝W/N其中V標準為終點時消耗標準液的體積（ml）W為稱樣量F為濃度因數(shù)T為滴定度N為稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)的意義為：第一次取樣量為最后測定用供試品量的倍數(shù)。原料藥中一般為1。原料藥含量計算公式V標準×F×T×NV標準×C實際×T×N含量＝────────×100%=──────────×100％WW×C理論一般原料藥含量是以干品計算，則原料藥含量計算公式為：V標準×C實際×T×N含量＝─────────────────×100％W×C理論×（1－干燥失重百分數(shù)）19.80×0.1032×0.01751×1則對氨基水楊酸鈉含量＝─────────────×100％＝99.6％。0.4326×0.1×（1－17.0％）4.6.2液體制劑的含量測定結果計算液體制劑含量一般以相當于標示量的百分數(shù)表示。標示量對固體制劑，即每一個單元制劑中所含藥品的規(guī)定量；對液體制劑，最常用的表示方法為：每1ml中含有藥物的規(guī)定量，或者本制劑的規(guī)定濃度。例如：氯化鉀注射液，規(guī)格為10ml：1g，它的標示量為0.1g或10%。其含量測定方法；精密量取本品10ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，精密量取10ml，加水40ml，加糊精溶液（1→50）5ml，與指示劑5～8滴，用硝酸銀標準液（0.1mol/L）滴定即得。每1ml的硝酸銀標準液（0.1mol/L）相當于7.455mg的氯化鉀。假設硝酸銀標準液的濃度為0.09830mol/L，終點時消耗13.30ml，計算含量。實驗測得的量含量＝───────────────×100％供試品按標示量計算的理論量已知：實驗測得的量＝V標準FT供試品按標示量計算的理論量＝V樣品W標示量／NV標準×F×T×N則含量＝─────────────×100％V樣品×W標示量V標準×C實際×T×N含量＝─────────────×100％V樣品×C理論×W標示量其中W標示量為供試品的標示量，其余同原料藥計算公式。則氯化鉀注射液含量為：13.30×0.09830×0.007455×100／10含量＝──────────────────×100％＝97.5％。10×0.1×0.14.6.3片劑、膠囊劑等含量測定結果計算（相當于標示量的百分數(shù)）例如安乃近片含量測定：取本品10片，精密稱定，研細，精密稱出適量，加規(guī)定的試劑溶解后用碘標準液（0.05mol/L）滴定即得。每1ml的碘標準液（0.05mol/L）相當于17.57mg的安乃近。假設10片重5.3042g，精密稱出細粉0.2842g，本品規(guī)格為0.5g，所用碘標準液濃度為0.05018mol/L，終點時消耗15.10ml，計算含量（以相當于標示量的百分數(shù)表示）。實驗測得的量含量＝───────────────×100％供試品按標示量計算的理論量已知：實驗測得的量＝V標準FTW樣品W標示量供試品按標示量計算的理論量＝──×──W平均NV標準×F×T×W平均×N則含量＝──────────×100％W樣品×W標示量V標準×C實際×T×W平均×N含量＝─────────────×100％W樣品×C理論×W標示量其中W樣品：精密稱出的樣品量（g）W平均：被測樣品每一單元制劑的平均重量（g）。則安乃近片含量為：15.10×0.05018×0.01757×5.3042／10×1含量＝───────────────────×100％＝99.39％。0.2842×0.05×0.54.7滴定分析應用與示例4.7.1酸堿滴定法例1直接滴定P166阿司匹林原料含量測定：精密稱定本品0.4008g，加中性乙醇（對酚酞指示液顯中性）20ml溶解后，加酚酞指示液3滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）相當于18.02mg的阿司匹林。含阿司匹林不得少于99.5％。假設氫氧化鈉滴定液濃度為0.1040mol/L，樣品消耗氫氧化鈉滴定液的體積為21.35ml。測得量V標準×C實際×T×N含量＝───────×100％＝───────────×100％供試量C理論×W21.35×0.1040×0.01802×1＝───────────────×100％＝99.8％0.1×0.4008剩余滴定（用空白實驗校正）P167阿司匹林片規(guī)格0.5g，含阿司匹林應為標示量的95.0％～105.0％。含量測定：取本品10片，精密稱定，重量為5.4163g，研細，精密稱取細粉0.3266g，（相當于阿司匹林0.3g），置錐形瓶中，加中性乙醇（對酚酞指示液顯中性）20ml，振搖使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）至溶液顯粉紅色，再精密加氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）40ml，置水浴上加熱15分鐘并時時振搖，迅速放冷至室溫，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，并將滴定的結果用空白試驗校正。每1ml氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）相當于18.02mg的阿司匹林。假設氫氧化鈉滴定液濃度為0.1040mol/L，硫酸滴定液濃度為0.05018mol/L，空白消耗硫酸滴定液的體積為40.08ml，樣品消耗硫酸滴定液的體積為23.52ml。單位制劑測得量含量＝─────────×100％單位制劑理論量（V空白－V樣品）×C硫酸實際×2×T氫氧化鈉×W平均×N＝────────────────────×100％C氫氧化鈉理論×W樣品×W標示量（40.08－23.52）×0.05018×2×0.01802×5.4163／10×1＝───────────────────────×100％0.1×0.3266×0.5＝99.3％。有些藥物具有酸性或堿性，但難溶于水，可先加入定量且過量的酸或堿標準溶液，待反應完全后，再用堿或酸標準溶液回滴。氫氧化鋁凝膠的制酸力檢查精密稱定樣品1.5036g，置250ml具塞錐形瓶中，精密加鹽酸滴定液（0.1mol/L）50ml，密塞，在37℃不斷振搖1小時，加溴酚藍指示液6～8滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液顯藍色。每1g樣品消耗鹽酸滴定液（0.1mol/L）應為12.5～25.0ml。假設鹽酸滴定液濃度為0.1008mol/L，氫氧化鈉滴定液濃度為0.1034mol/L，樣品消耗氫氧化鈉滴定液體積為20.25ml，計算制酸力為：0.1008×50－0.1034×20.25────────────＝19.6（ml）0.1×1.5036例4非水滴定P174中國藥典2005年版中原料藥“鹽酸麻黃堿”的含量測定。測定方法：精密稱定本品（1）0.1516g,（2）0.1506g，加冰醋酸10ml，加熱溶解后，加醋酸汞試液4ml與結晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液顯翠綠色，并將滴定的結果用空白實驗校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當于20.17mg的鹽酸麻黃堿。規(guī)定：按干燥品計算，含鹽酸麻黃堿不得少于99.0％。測定溫度為24℃，高氯酸滴定液的濃度為0.1022mol/L(標定溫度為20℃)，空白消耗高氯酸滴定液的體積為0.02ml，樣品消耗高氯酸滴定液的體積為(1)7.32ml,(2)7.30ml，干燥失重0.2％。高氯酸滴定液的校正濃度為：0.1022Ct=──────────＝0.1018（mol/L）1+0.0011×(24－20)（V樣品－V空白）×Ct×T含量＝────────────────×100%C理論×W×(1－干燥失重)（7.32－0.02）×0.1018×0.02017第一份樣品含量＝──────────────×100%＝99.07％0.1×0.1516×（1－0.2％）（7.30－0.02）×0.1018×0.02017第二份樣品含量＝───────────────×100%＝99.45％0.1×0.1506×（1－0.2％）平均含量：99.3％，RD：0.2％。4.7.2沉淀滴定法例1直接滴定P181氯化銨片規(guī)格為0.3g，含氯化銨應為標示量的95.0％～105.0％。取本品10片，精密稱定，重量為3.8562g,研細，精密稱定細粉0.1557g（約相當于氯化銨0.12g），加水50ml使氯化銨溶解，再加糊精溶液（1→50）5ml，熒光黃指示液8滴與碳酸鈣0.10g，搖勻，用硝酸銀滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml硝酸銀滴定液（0.1mol/L）相當于5.349mg的氯化銨。單位制劑測得量V標準×C實際×T×W平均×N含量＝────────×100％＝───────────×100％單位制劑理論量W樣品×C理論×W標示量22.32×0.1018×0.005349×3.8562／10×1＝────────────────────＝100.3％0.1557×0.1×0.3例2：剩余滴定法（不用空白實驗校正）P182藍皮書P77膽茶堿片規(guī)格為0.1g，含膽茶堿應為標示量的94.0～106.0％。含量測定：取本品20片，精密稱定，重量為3.0422g，研細，精密稱取細粉0.7614g(約相當于膽茶堿0.5g)，置100ml量瓶中，加水70ml，時時振搖30分鐘使膽茶堿溶解后，用水稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液50ml，加氨試液8ml,置水浴上緩緩加熱后，精密滴加硝酸銀滴定液（0.1mol/L）20ml,搖勻后，繼續(xù)置水浴上加熱15分鐘，放冷至5～10℃，20分鐘后，用垂熔玻璃漏斗濾過，濾渣用水洗滌3次，每次10ml，合并濾液與洗液，加硝酸使呈酸性后，再加硝酸3ml，放冷，加硫酸鐵銨指示液2ml，用硫氰酸銨滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml硝酸銀滴定液（0.1mol/L）相當于28.33mg的膽茶堿。假設硝酸銀滴定液濃度為0.1018mol/L，硫氰酸銨滴定液濃度為0.1009mol/L，樣品消耗硫氰酸銨滴定液體積為11.48ml。單位制劑測得量含量＝────────×100％單位制劑理論量（C硝實際/C硝理論×20－C硫實際/C硫理論×V樣）×T硝×W平均×N＝─────────────────────────×100％W樣×W標示量（0.1018×20－0.1009×11.48）×0.02833×3.0422／20×100／50＝────────────────────────────×100％0.1×0.7614×0.1＝99.3％。4.7.3絡合滴定法例1直接滴定P187葡萄糖酸鈣口服液規(guī)定含葡萄糖酸鈣應為9.00～10.50％（g/ml），即每100ml葡萄糖酸鈣溶液中含葡萄糖酸鈣應為9.00g~10.50g。含量測定：精密量取本品5ml，置錐形瓶中，加水稀釋使成100ml，加氫氧化鈉試液15ml,與鈣紫紅素指示劑0.1g，用乙二胺四乙酸二鈉滴定液（0.05mol/L）滴定至溶液自紫色轉變?yōu)榧兯{色。每1ml乙二胺四乙酸二鈉滴定液（0.05mol/L）相當于22.42mg的葡萄糖酸鈣。假設乙二胺四乙酸二鈉滴定液濃度為0.05036mol/L，樣品消耗乙二胺四乙酸二鈉滴定液22.26ml。測得量V×C實際×T×N含量＝────×100％＝─────────×100％供試體積C理論×V樣品22.26×0.05036×0.02242×1＝────────────────×100％＝10.05％（g/ml）0.05×5例2剩余滴定P188氫氧化鋁原料規(guī)定：含氫氧化鋁按Al2O3計算不得少于48.0％。含量測定：精密稱定本品0.6015g，加鹽酸與水各10ml，加熱溶解后放冷，濾過，取濾液置250ml量瓶中，濾器用水洗滌，洗液并入量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，精密量取25ml，加氨試液中和至恰析出沉淀，再滴加稀鹽酸至沉淀恰溶解為止，加醋酸－醋酸銨緩沖液（pH6.0）10ml,再精密加乙二胺四乙酸二鈉滴定液（0.05mol/L）25ml，煮沸3～5分鐘，放冷，加二甲酚橙指示液1ml，用鋅滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液自黃色轉變?yōu)榧t色，并將滴定結果用空白試驗校正。每1ml乙二胺四乙酸二鈉滴定液（0.05mol/L）相當于2.549mg的Al2O3。假設乙二胺四乙酸二鈉滴定液濃度為0.05036mol/L，鋅滴定液濃度為0.05011mol/L，空白消耗鋅滴定液體積為24.96ml,樣品消耗鋅滴定液的體積為13.38ml。測得量（V空白－V樣品）×C鋅實際×TEDTA×N含量＝────×100％＝──────────────────×100％供試量CEDTA理論×W樣品(24.96-13.38)×0.05011×0.002549×250/25＝─────────────────────×100％=49.2%。0.05×0.60154.7.4氧化還原滴定法例1直接滴定P193維生素C注射液規(guī)格2ml：0.1g，含維生素C應為標示量的90.0～110.0％。含量測定：精密量取本品4ml(約相當于維生素C0.2g)，加水15ml與丙酮2ml，搖勻，放置5分鐘，加稀醋酸4ml與淀粉指示液1ml，用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液顯藍色并持續(xù)30秒鐘不褪。每1ml碘滴定液（0.05mol/L）相當于8.806mg的維生素C。假設碘滴定液的濃度為0.05012mol/L，樣品消耗碘滴定液22.62ml。單位制劑測得量V滴定液×C實際×T×N含量＝───────×100％＝──────────×100％單位制劑理論量C理論×V樣品×W標示量22.62×0.05012×0.008806×1＝───────────────×100％＝99.8％。0.05×4×0.1／2例2剩余滴定P194氨咖黃敏片規(guī)格每片含咖啡因15mg規(guī)定含咖啡因應為標示量的90.0～110.0％。含量測定：取本品30片，精密稱定，重量為11.5268g，研細，精密稱定細粉3.8446g（約相當于咖啡因150mg），置分液漏斗中，加稀硫酸20ml,振搖使咖啡因溶解，用氯仿提取4次（每次分別為40ml、30ml、20ml、10ml），合并氯仿液，置水浴上蒸干，殘渣加稀硫酸30ml，加熱回流1小時，放冷后移入100ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液40ml置100ml量瓶中，精密加碘滴定液（0.05mol/L）50ml，用水稀釋至刻度，搖勻，在25℃避光放置15分鐘，濾過，精密量取續(xù)濾液50ml，用硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，至近終點時，加淀粉指示液2ml,繼續(xù)滴定至藍色消失，并將滴定的結果用空白試驗校正。每1ml碘滴定液（0.05mol/L）相當于5.305mg的咖啡因。假設碘滴定液濃度為0.05012mol/L，硫代硫酸鈉滴定液濃度為0.1015mol/L，空白消耗硫代硫酸鈉滴定液24.56ml，樣品消耗硫代硫酸鈉滴定液為19.02ml。單位制劑測得量含量＝────────×100％單位制劑理論量（V空白－V樣品）×C硫實際×T碘×W平均×N＝──────────────────×100％C碘理論×W樣品×W標示量×2（24.56－19.02）×0.1015×0.005305×11.5268/30×100/40×100/50＝──────────────────────────────×100％0.05×3.8446×0.015×2＝99.4％。置換滴定P195葡萄糖酸銻鈉注射液規(guī)格6ml：按銻（Sb）計0.6g，約相當于葡萄糖酸銻鈉1.9g。規(guī)定每1ml中含葡萄糖酸銻鈉按銻（Sb）計算，應為0.095～0.105g。含量測定精密量取本品1ml，置具塞錐形瓶中，加水100ml，鹽酸15ml與碘化鉀試液10ml，密塞，振搖后，在暗處靜置10分鐘，用硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，至近終點時，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍色消失，并將滴定結果用空白試驗校正。每1ml硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當于6.088mg的銻（Sb）。假設硫代硫酸鈉滴定液濃度為0.1002mol/L，樣品消耗硫代硫酸鈉滴定液16.40ml，空白消耗硫代硫酸鈉滴定液0.20ml。測得量（V標準－V空白）×C實際×T×N含量＝────×100％＝─────────────×100％供試體積C理論×V樣品（16.40－0.20）×0.1002×0.006008×1＝─────────────────×100％＝0.098g。0.1×14.7.5重氮化滴定法P200氨咖黃敏片中對乙酰氨基酚的含量測定，含對乙酰氨基酚應為標示量的93.0～107.0％。規(guī)格：每片含對乙酰氨基酚0.25g。測定方法：取本品30片，精密稱定，重量為11.5268g，研細，精密稱取細粉0.4624g(約相當于對乙酰氨基酚0.30g)，加稀鹽酸50ml，加熱回流1小時，冷卻至室溫，加水50ml與溴化鉀3g，將滴定管的尖端插入液面下約2／3處，用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）迅速滴定，隨滴隨攪拌，至近終點時，將滴定管的尖端提出液面，用少量水將尖端洗滌，洗液并入溶液中，繼續(xù)緩緩滴定至用玻璃棒蘸取溶液少許，劃過涂有含鋅碘化鉀淀粉指示液的白瓷板上，即顯藍色的條痕時，即為終點。每1ml的亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當于15.12mg的對乙酰氨基酚。假設亞硝酸鈉滴定液濃度為0.1025mol/L，樣品消耗亞硝酸鈉滴定液19.22ml。單位制劑測得量對乙酰氨基酚含量＝────────×100％單位制劑理論量V標準×C實際×T×W平均×N＝─────────────×100％C理論×W樣品×W標示量19.22×0.1025×0.01512×11.5268/30×1＝──────────────────×100%＝99.0％。0.1×0.4624×0.25五、紫外－可見分光光度法5.1定義紫外－可見分光光度法是通過測定被測物質在紫外－可見光區(qū)的特定波長處或一定波長范圍內的吸收度，對該物質進行定性和定量分析的方法。紫外－可見分光光度法一般是在200～750nm波長范圍內選擇。5.2原理符合朗伯－比爾（LamLert-Beer）定律A=ECL或C=A/EL其中：A為吸光度；C為溶液濃度；E為常數(shù)，稱為吸收系數(shù)；L為光通過溶液的長度，單位為cm；當溶液的濃度為1％（C=1），光通過溶液的長度為1cm時，E=A,稱為百分吸收系數(shù)（E1%1cm）,表示為E1%1cm＝A/CL。5.3應用5.3.1定性物質的定性就是對物質作鑒定，用紫外－可見吸收光譜對物質進行鑒定時，主要根據(jù)光譜上的一些特征吸收，包括最大吸收波長、最小吸收波長、肩峰、吸收系數(shù)、吸收度比值等。5.3.2雜質檢查利用不同化合物的紫外光吸收不同進行雜質檢查。5.3.3定量藥典中多用于制劑的含量測定。對照品比較法根據(jù)A樣=E樣C樣L樣A對=E對C對L對其中E樣＝E對L樣＝L對A樣C樣得出───＝───C樣＝C對×A樣／A對A對C對W對×N樣×A樣樣品的百分含量原料藥為：─────────×100％W樣×N對×A對W對×N樣×A樣×W平均片劑、膠囊劑或顆粒劑等為：──────────×100％W樣×N對×A對×W標示量W對×N樣×A樣注射液為：─────────────×100％V樣×N對×A對×W標示量吸收系數(shù)法根據(jù)A樣=E樣C樣L樣L樣＝1A樣×N樣樣品的百分含量原料藥為：──────────×100％E1%1cm×1×100×W樣A樣×N樣×W平均片劑、膠囊劑或顆粒劑等為：──────────────×100％E1%1cm×1×100×W樣×W標示量A樣×N樣注射液為：──────────────×100％E1%1cm×1×100×V樣×W標示量例1：維生素B12注射液含量測定精密量取本品適量，加水制成每ml約含維生素B1225μg的溶液，照紫外－可見分光光度法在361nm波長處測定吸收度，按維生素B12吸收系數(shù)（E1%1cm）為207計算即得。（規(guī)格為1ml：1mg）具體操作：精密量取本品5ml，置250ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，以水為空白，在361nm波長處測定吸收度為0.409。A樣×N樣百分含量＝──────────────×100％E1%1cm×1×100×V樣×W標示量0.409×250／1＝────────────×100％＝98.8％。207×1×100×5×0.001例2：氯氮卓片含量測定取本品20片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于氯氮卓30mg），置100ml量瓶中，加鹽酸溶液（9→1000）70ml，充分振搖使氯氮卓溶解，用鹽酸溶液（9→1000）稀釋至刻度，搖勻，用干燥濾紙濾過，精密量取續(xù)濾液5ml，置另一100ml量瓶中，用鹽酸溶液（9→1000）稀釋至刻度，搖勻，照紫外－可見分光光度法，在308nm的波長處測定吸收度，按氯氮卓吸收系數(shù)（E1%1cm）為319計算，即得。（規(guī)格為10mg）具體操作：取本品20片，稱定：1.7320g，研細，精密稱取0.2546g，按上述方法操作，測定吸收度為0.460。A樣×N樣×W平均百分含量＝──────────────×100％E1%1cm×1×100×W樣×W標示量0.460×100／1×100／5×1.7320／20＝──────────────────×100％＝98.1％。319×1×100×0.2546×0.01計算分光光度法比色法六、藥品的一般雜質檢查6.1概述藥品的雜質系指存在于藥物之中的微量無治療作用，或影響藥物穩(wěn)定性和療效甚至對人體健康有害的物質。6.2藥品雜質來源6.2.1生產過程中所用原料不純。6.2.2制備過程中所用試劑、溶劑、催化劑不純或某些殘留溶劑。6.2.3生產工藝中帶來的中間體及副產物。6.2.4由生產中所用器皿、裝置及管道等混入的雜質。6.2.5藥物因外界條件而引起的變化所致。6.3雜質限量藥典中所規(guī)定雜質檢查均為限度檢查（即限量檢查，也就是一種藥物雜質的最大允許量）。通常用百分之幾或百萬分之幾來表示。雜質量雜質限量＝─────×100％供試品量供試品（W）中所含雜質量是通過與一定量的標準溶液進行比較，所以雜質量在數(shù)值上應是標準溶液的體積（V）與其濃度(C)的乘積，因此，雜質限量計算可寫成標準溶液的體積（V）×標準溶液濃度(C)雜質限量＝────────────────────×100％供試品量（W）6.4藥品雜質分類可分為一般雜質與特殊雜質。一般雜質是指在自然界分布較廣，或在多種藥物生產、貯存過程中容易引入的雜質。如：水分、氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、砷鹽、重金屬、熾灼殘渣等。特殊雜質是指某一些藥物中獨特存在的雜質。系在制備或貯存中根據(jù)其方法或性質可能產生的某一些雜質，而其它藥物均不能產生。如：葡萄糖注射液中的5－羥甲基糠醛。6.5重金屬檢查法重金屬是指在規(guī)定實驗條件下能與顯色劑作用的金屬鹽類雜質。中國藥典2005年板采用硫代乙酰胺試液或硫化鈉試液作顯色劑，以鉛的限量表示。6.5.1根據(jù)實驗條件不同，分為四種檢查方法：第一法適用于供試品不經有機破壞，在酸性溶液中顯色的重金屬限量檢查；第二法適用于供試品需灼燒破壞，取熾灼殘渣項下遺留的殘渣，經處理后在酸性溶液中顯色的重金屬限量檢查；第三法用來檢查能溶于堿而不溶于稀酸（或在稀酸中即生成沉淀）的藥品中的重金屬；第四法用微孔濾膜過濾，使用重金屬硫化物沉淀富集成色斑，用于有色溶液或重金屬限量低的品種。6.5.2重金屬硫化物生成的最佳