2023屆四川省眉山高三最后一模生物試題含解析

2021-2023學(xué)年高考生物模擬試卷注意事項：1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書寫，字體工整、筆跡清楚。3．請按照題號順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試題卷上答題無效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．可以用多種方法驗證細(xì)胞的活性，下列敘述錯誤的是（）A．不能被紅墨水染色的細(xì)胞具有活性 B．能被蘇丹Ⅲ染色的細(xì)胞是死細(xì)胞C．能發(fā)生質(zhì)壁分離的植物細(xì)胞具有活性 D．能發(fā)生胞質(zhì)環(huán)流的細(xì)胞具有活性2．人體的一切生命活動都是在一定環(huán)境條件下進(jìn)行的。人體內(nèi)的絕大多數(shù)細(xì)胞并不與外環(huán)境直接接觸，而是浸浴和生存在內(nèi)環(huán)境之中。下列關(guān)于人體內(nèi)環(huán)境及其穩(wěn)態(tài)的敘述中，正確的是（）A．體液中含有許多離子和化合物，約2／3的體液屬于內(nèi)環(huán)境B．組織液、血漿、淋巴均可相互轉(zhuǎn)化，以維持化學(xué)成分的相對穩(wěn)定C．組織液滲透壓增大或血漿滲透壓減小都可能造成組織水腫D．代謝的主要場所是內(nèi)環(huán)境，受內(nèi)環(huán)境的pH、溫度等影響3．某基因型為AaBb的二倍體哺乳動物體內(nèi)細(xì)胞進(jìn)行減數(shù)分裂的模式圖如下。下列敘述錯誤的是（）A．該初級精母細(xì)胞中存在兩個四分體B．B、b基因的遺傳與性別相關(guān)聯(lián)C．該細(xì)胞將產(chǎn)生四種基因型的精細(xì)胞D．該細(xì)胞A與a基因的分離發(fā)生在后期Ⅰ4．免耕法是指農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中不松土或少松土，收獲時只收割麥穗或稻穗等部位，而將經(jīng)過處理后的農(nóng)作物秸稈和殘茬保留在農(nóng)田地表，任其腐爛。提倡免耕法取代傳統(tǒng)松土措施的原因不包括（）A．增加土壤的透氣性，促進(jìn)根系的有氧呼吸B．有利于水土保持，能減少沙塵暴的發(fā)生C．減少土壤微生物對CO2的排放量，有效緩解溫室效應(yīng)D．減少了農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)輸出，使土壤肥力得以提高5．下列有關(guān)植物激素的敘述正確的是（）A．頂端優(yōu)勢的原因是頂芽生長素濃度過高抑制了自身生長B．用一定濃度的秋水仙素或低溫處理植物都可以抑制植物有絲分裂后期細(xì)胞板形成，從而引起染色體數(shù)目加倍C．達(dá)爾文通過實驗驗證：吲哚乙酸在植物向光側(cè)和背光側(cè)分布不均勻是導(dǎo)致向光性的原因D．赤霉素和乙烯可分別促進(jìn)種子萌發(fā)和果實的成熟6．科研人員提取出真核細(xì)胞中的RNA后，將其作為探針與基因組DNA進(jìn)行分子雜交，得到如下的實驗結(jié)果。以下關(guān)于實驗的敘述中，正確的是（）A．圖中突起的環(huán)狀結(jié)構(gòu)是DNA或RNA分子B．不完全雜交的原因是DNA中存在非基因片段C．科研人員提取的RNA經(jīng)過了剪接加工過程D．RNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄后再做分子雜交，不會出現(xiàn)突起7．DNA的堿基或染色體片段都可能存在著互換現(xiàn)象，下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A．基因的兩條鏈上相同位置的堿基互換可引起基因突變B．姐妹染色單體相同位置的片段互換可引起基因重組C．非同源染色體之間發(fā)生基因的互換可引起染色體結(jié)構(gòu)變異D．減數(shù)第一次分裂時染色體互換會引起配子種類的改變8．（10分）下列可以稱為種群密度的是（）A．浙江省嘉興市的人口數(shù)量 B．池塘中一立方米內(nèi)魚的數(shù)量C．一個蜂巢中所有工蜂數(shù)量 D．穩(wěn)定型生物種群的個體數(shù)量二、非選擇題9．（10分）草莓比較耐陰，若將其栽種在光照強度較弱的溫室大棚里可能更加適宜生長。某生物興趣小組研究了遮光處理對草莓葉片光合作用的影響。材料用具：二葉期草莓幼苗若干、遮陽網(wǎng)(網(wǎng)內(nèi)光強為自然光強1/3左右)、光合分析測定儀等。實驗步驟與分析：選取生長狀況相似的草莓幼苗若干，均分為對照組和實驗組，實驗組用遮陽網(wǎng)進(jìn)行處理。將兩組草莓幼苗在相同且適宜條件下培養(yǎng)至植株長出6片葉左右，測得其凈光合速率如圖甲所示。（1）據(jù)圖甲分析，實驗組有機物累積總量顯著低于對照組，與預(yù)期不符，判斷依據(jù)為__________。（2）有同學(xué)推測遮陰可能影響光合作用的__________反應(yīng)，并據(jù)此繼續(xù)進(jìn)行實驗得到圖乙的結(jié)果。由圖乙可知，實驗組利用CO2的效率降低，可能的原因是遮陰使葉片溫度降低，導(dǎo)致__________。（3）某同學(xué)推測，適當(dāng)遮光可能導(dǎo)致葉綠素含量增加，以適應(yīng)弱光環(huán)境。請設(shè)計一個簡單的實驗驗證該同學(xué)的推測是否正確，簡單的寫出實驗思路：__________。（4）綜上所述，欲提高草莓的光合速率，可改變__________(填“CO2濃度”或“遮光比例”)再作進(jìn)一步研究。10．（14分）器官移植技術(shù)能成功地替換身體中失去功能的器官，從而拯救和改善人的生命和生存質(zhì)量，器官移植是現(xiàn)代醫(yī)療技術(shù)的重大進(jìn)步?；卮鹣铝袉栴}：（1）解決免疫排斥反應(yīng)是人類器官移植的關(guān)鍵問題，臨床最常見的急性排斥反應(yīng)主要__________（填“細(xì)胞”或“體液”）免疫引起，導(dǎo)致移植器官細(xì)胞裂解死亡的直接原因是____________________。（2）目前器官移植面臨的世界性難題是___________，為此，人們開始嘗試異種移植?？茖W(xué)家試圖利用基因工程方法抑制或去除___________基因，利用克隆技術(shù)，培育出沒有免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆器官。（3）對于需要進(jìn)行器官移植的病人，將病人正常體細(xì)胞的細(xì)胞核移入培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂中期的___________細(xì)胞中，構(gòu)建重組胚胎，從囊胚期的胚胎中分離___________細(xì)胞得到核移植胚胎十細(xì)胞，通過誘導(dǎo)發(fā)育成器官，病人移植此器官后不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，根本原因是___________。11．（14分）稻瘟病是水稻最重要的病害之一，為達(dá)到防治目的，科研人員通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗稻瘟病水稻品種?；卮鹣铝袉栴}：（1）通過RT-PCR技術(shù)以抗稻瘟病基因的RNA為模板擴增出cDNA。在PCR過程中，兩個引物是_____酶的結(jié)合位點；用cDNA單鏈與該抗性水稻植株的單鏈DNA進(jìn)行分子雜交，可能出現(xiàn)游離的單鏈區(qū)，其原因是_____。（2）利用RT-PCR技術(shù)擴增基因時，設(shè)計兩種引物的堿基序列的主要依據(jù)是_____，為了便于擴增后的X基因與質(zhì)粒連接，常在兩條引物上設(shè)計加入不同的限制酶酶切位點，主要目的是_____。（3）基因工程中，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入植物細(xì)胞采用最多的方法是_____，導(dǎo)入動物受精卵采用的方法是_____。（4）若要檢測抗稻瘟病基因是否翻譯出相應(yīng)蛋白質(zhì)，可采用的分子水平的檢測方法是_____。12．Ⅰ、最近哈爾濱因疫情變化管控升級，對境外入哈、國內(nèi)疫情重點地區(qū)入哈人員，一律實行“14天集中隔離醫(yī)學(xué)觀察+14天居家隔離醫(yī)學(xué)觀察+2次核酸檢測+1次血清抗體檢測”的管控措施，做到凡進(jìn)必檢、不漏一人、萬無一失。Ⅱ、同時，中國率先開啟新冠疫苗二期臨床研究！據(jù)研究新冠病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在康復(fù)病人的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。下圖為某機構(gòu)研制疫苗的部分過程。請回答下列相關(guān)問題：（1）對疫情重點地區(qū)輸入人員進(jìn)行核酸檢測需要用到_____________________做探針，進(jìn)行血清抗體檢測的方法是______________。（2）選擇性擴增S基因需要的前提條件及原因是___________________________。（3）研究疫苗的步驟①用到的酶有______________，獲得的表達(dá)載體除了S基因外，還有____________________________等組成部分。（4）S基因在培養(yǎng)的動物細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是______________。（5）為了檢驗步驟③所表達(dá)的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性，可用動物細(xì)胞中表達(dá)的S蛋白與_____________進(jìn)行抗原—抗體雜交實驗，從而得出結(jié)論。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】

細(xì)胞膜的功能特點是具有選擇透過性；蘇丹Ⅲ能將脂肪染成橘黃色；當(dāng)細(xì)胞外液濃度高于細(xì)胞液時，細(xì)胞失水而發(fā)生質(zhì)壁分離；細(xì)胞質(zhì)具有一定的流動性?！驹斀狻緼、紅墨水不能進(jìn)入活細(xì)胞，不能被紅墨水染色的細(xì)胞是活細(xì)胞，A正確；B、蘇丹III染液可將花生子葉細(xì)胞中的脂肪顆粒染成橙黃色，而該實驗中的花生子葉細(xì)胞是活細(xì)胞，B錯誤；C、若植物細(xì)胞死亡，失去選擇透過性，則不能發(fā)生質(zhì)壁分離與復(fù)原現(xiàn)象，C正確；D、能發(fā)生胞質(zhì)環(huán)流的細(xì)胞是活細(xì)胞，D正確。故選B?！军c睛】生物學(xué)實驗中，有些實驗需要保持細(xì)胞活性，如觀察細(xì)胞質(zhì)環(huán)流、觀察細(xì)胞中的線粒體和葉綠體、觀察植物細(xì)胞質(zhì)壁分離及復(fù)原等實驗，而觀察洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞的有絲分裂時，經(jīng)解離后細(xì)胞已經(jīng)死亡；觀察細(xì)胞中DNA和RNA的分布時，經(jīng)過鹽酸處理后，細(xì)胞已經(jīng)死亡。2、C【解析】

內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)是在神經(jīng)、體液和免疫調(diào)節(jié)的共同作用下，通過機體的各器官，系統(tǒng)的分工合作，協(xié)調(diào)統(tǒng)一而實現(xiàn)的；內(nèi)環(huán)境中血糖含量、溫度、pH等保持在適宜的范圍內(nèi)，是機體進(jìn)行正常生命活動的必要條件?！驹斀狻緼、體液中含有許多離子和化合物，約1/3的體液屬于內(nèi)環(huán)境，A錯誤；B、只有組織液和血漿可相互轉(zhuǎn)化，淋巴中的物質(zhì)只能進(jìn)入血漿，B錯誤；C、組織液滲透壓增大或血漿滲透壓減小都可能引起組織液增多，造成組織水腫，C正確；D、代謝的主要場所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，受內(nèi)環(huán)境的pH、溫度等影響，D錯誤。故選C。3、D【解析】

據(jù)圖分析，該細(xì)胞有一對同源染色體形態(tài)大小不同，為性染色體，為雄性動物，兩對同源染色體分別兩兩配對，形成兩個四分體，正處于減數(shù)第一次分裂的前期，其中有一對同源染色體上非姐妹染色單體發(fā)生了交叉互換，據(jù)此答題?！驹斀狻緼、據(jù)分析可知，該細(xì)胞為初級精母細(xì)胞，含有兩個四分體，A正確；B、B、b位于性染色體上，其遺傳與性別相關(guān)聯(lián)，B正確；C、該細(xì)胞會產(chǎn)生AB、aB、Ab、ab四種配子，C正確；D、該細(xì)胞A與a基因的分離發(fā)生在后期Ⅰ或后期II，D錯誤。故選D。4、A【解析】

由題意可知，收獲時只收割麥穗或稻穗等部位，而將經(jīng)過處理后的農(nóng)作物秸稈和殘茬保留在農(nóng)田地表，任其腐爛，因此可以提高土壤肥力，也可減少土壤CO2的排放量，地表破壞少，減少沙塵?！驹斀狻緼、免耕法不松土或少松土，不能增加土壤的透氣性，A錯誤；B、地表破壞少，有利于水土保持，能減少沙塵暴的發(fā)生，B正確；C、由題意可知，將經(jīng)過處理后的農(nóng)作物秸稈和殘茬保留在農(nóng)田地表，因此減少土壤微生物對CO2的排放量，有效緩解溫室效應(yīng)，C正確；D、減少了農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)輸出，使土壤肥力得以提高，D正確。故選A。5、D【解析】

生長素對植物的生長效應(yīng)表現(xiàn)出兩重性，即低濃度促進(jìn)生長，高濃度抑制生長。各種植物激素并不是孤立地起作用，而是多種激素相互作用共同調(diào)節(jié)；植物激素的概念：由植物體內(nèi)產(chǎn)生，能從產(chǎn)生部位運輸?shù)阶饔貌课?，對植物的生長發(fā)育有顯著影響的微量有機物?！驹斀狻緼、頂端優(yōu)勢是因頂芽產(chǎn)生的生長素積累在側(cè)芽而導(dǎo)致側(cè)芽生長受抑制，A錯誤；B、用一定濃度的秋水仙素或低溫處理植物都可以抑制植物有絲分裂前期紡錘體的形成，B錯誤；C、達(dá)爾文通過實驗驗證單側(cè)光照射使胚芽鞘的尖端產(chǎn)生某種刺激，當(dāng)這種刺激傳遞到下部的伸長區(qū)時，會造成背光面比向光面生長快，因而出現(xiàn)向光性彎曲，C錯誤；D、赤霉素和乙烯分別能促進(jìn)果實的發(fā)育和果實的成熟，D正確。故選D。6、C【解析】

真核細(xì)胞還是原核細(xì)胞的基因都是由能夠編碼蛋白質(zhì)的編碼區(qū)和具有調(diào)控作用的非編碼區(qū)組成；真核細(xì)胞基因的編碼區(qū)是間隔的，不連續(xù)的，分為外顯子：能夠編碼蛋白質(zhì)的序列和內(nèi)含子：不能編碼蛋白質(zhì)的序列。【詳解】A、真核生物RNA與基因組DNA雜交后，突起的是基因中的內(nèi)含子片段，是DNA而非RNA，A錯誤；B、RNA是基因轉(zhuǎn)錄出來的，沒有配對的部分也是基因DNA中的內(nèi)含子片段，而不是非基因片段，B錯誤；C、轉(zhuǎn)錄出來的RNA經(jīng)過剪接加工，切除了內(nèi)含子對應(yīng)的RNA片段，C正確；D、RNA逆轉(zhuǎn)錄形成的cDNA也沒有內(nèi)含子，與基因組DNA雜交仍然會出現(xiàn)突起，D錯誤。故選C。7、B【解析】

1、基因突變是指DNA分子上發(fā)生了堿基對的增添、缺失或替換導(dǎo)致其結(jié)構(gòu)發(fā)生改變；2、基因重組包括兩種類型：（1）自由組合型：減數(shù)第一次分裂后期，隨著非同源染色體自由組合，非同源染色體上的非等位基因也自由組合。（2）交叉互換型：減數(shù)第一次分裂前期（四分體），基因隨著同源染色體的非等位基因的交叉互換而發(fā)生重組。3、染色體結(jié)構(gòu)變異包括增添、缺失、倒位和易位?！驹斀狻緼、基因的兩條鏈上相同位置的堿基互換會導(dǎo)致基因中堿基排列順序的改變，從而引起基因突變，A正確；B、姐妹染色單體相同位置的基因是相同的，所以其互換不會引起基因重組，B錯誤；C、非同源染色體之間發(fā)生基因的互換屬于易位，可引起染色體結(jié)構(gòu)變異，C正確；D、減數(shù)第一次分裂前期時同源染色體的非姐妹染色單體的互換會引起基因重組，從而可能增加配子種類，D正確；故選B。【點睛】本題需要考生掌握基因突變、基因重組和染色體變異的具體內(nèi)容，結(jié)合細(xì)胞分裂進(jìn)行解答。8、A【解析】

種群密度是指單位面積或體積內(nèi)某一種群個體的數(shù)量，是種群結(jié)構(gòu)最基本的參數(shù)。單位面積或體積內(nèi)種群個體數(shù)量越多，種群密度越高?！驹斀狻緼、一定區(qū)域面積如浙江省嘉興市的人口數(shù)量可表示種群密度，A正確；B、魚的種類有很多，一立方米內(nèi)的魚包含多種魚，不是一個種群，B錯誤；C、種群密度應(yīng)是單位面積或體積中同種生物所有個體的數(shù)量，而一個蜂巢中所有工蜂只是蜂群中的部分個體，C錯誤；D、種群密度是種群的最基本的數(shù)量特征，與年齡組成無關(guān)，D錯誤。故選A。二、非選擇題9、在實驗時間內(nèi)，實驗組吸收的CO2總量少于對照組暗光合作用相關(guān)酶的活性降低提取并用紙層析法分離遮光和未遮光情況下的草莓等量葉片中的色素，觀察并比較葉綠素色素帶的寬度遮光比例【解析】

由題意呈現(xiàn)的實驗?zāi)康模ㄑ芯空诠馓幚韺Σ葺~片光合作用的影響）與反映實驗結(jié)果的曲線圖和柱形圖為切入點，明辨實驗的自變量和因變量，進(jìn)而對比分析圖甲中兩曲線的變化趨勢、圖乙中實驗組和對照組的固定CO2的效率和CO2的補償點的差異，并圍繞“影響光合作用的環(huán)境因素、綠葉中色素的提取和分離”的相關(guān)知識，對各問題情境進(jìn)行分析解答?！驹斀狻浚?）對比分析對照組和遮蔭組的曲線變化趨勢可推知，實驗組（遮蔭組）有機物累積總量顯著低于對照組的原因可能是：在實驗時間內(nèi)，遮陰組吸收的CO2總量少于對照組。（2）圖乙顯示，實驗組（遮蔭組）固定CO2的效率明顯低于對照組，而CO2的補償點卻高于對照組，說明遮陰使實驗組的CO2的利用率降低，可能影響光合作用的暗反應(yīng)，究其原因是：遮陰使葉片溫度降低，導(dǎo)致與光合作用相關(guān)的酶的活性降低，進(jìn)而引起實驗組利用CO2的效率降低。（3）欲設(shè)計一個簡單的實驗驗證適當(dāng)遮光可能導(dǎo)致葉綠素含量增加、以適應(yīng)弱光環(huán)境的推測是否正確，其實驗思路為：提取并用紙層析法分離遮光和未遮光情況下的草莓等量葉片的色素，觀察并比較葉綠素色素帶的寬度。（4）綜上分析，左右自然光強，降低了草莓葉片利用CO2的效率，因此欲提高草莓的光合速率，可改變遮光比例再作進(jìn)一步研究?！军c睛】本題以反映“遮光處理對草莓葉片光合作用的影響”的實驗結(jié)果的曲線圖與柱形圖為載體，考查學(xué)生對影響光合作用的環(huán)境因素等相關(guān)知識的識記和理解能力，以及具備驗證簡單生物學(xué)事實的能力，并能對實驗現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析和處理的能力。10、效應(yīng)T細(xì)胞效應(yīng)T細(xì)胞與靶細(xì)胞密切接觸器官短缺抗原決定（答出與抗原有關(guān)即可得分）去核卵母內(nèi)細(xì)胞團(tuán)核基因（或細(xì)胞核/核內(nèi)遺傳物質(zhì)/染色體）來自病人自身【解析】

1、細(xì)胞免疫過程為：（1）感應(yīng)階段：吞噬細(xì)胞攝取和處理抗原，并暴露出其抗原決定簇，然后將抗原呈遞給T細(xì)胞；（2）反應(yīng)階段：T細(xì)胞接受抗原刺激后增殖、分化形成記憶細(xì)胞和效應(yīng)T細(xì)胞，同時T細(xì)胞能合成并分泌淋巴因子，增強免疫功能；（3）效應(yīng)階段：效應(yīng)T細(xì)胞發(fā)揮效應(yīng)。2、人體器官移植面臨的主要問題有免疫排斥和供體器官不足等，器官移植發(fā)生的免疫反應(yīng)屬于細(xì)胞免疫，可以通過使用免疫抑制劑抑制T細(xì)胞的增殖來提高器官移植的成活率?！驹斀狻浚?）臨床最常見的急性排斥反應(yīng)主要由細(xì)胞免疫起作用，效應(yīng)T細(xì)胞與靶細(xì)胞密切接觸，是靶細(xì)胞裂解死亡的直接原因。（2）目前器官移植面臨的世界性難題是器官短缺。為此，人們開始嘗試異種移植。用基因工程方法對動物器官進(jìn)行改造時，需要向器官供體基因組中導(dǎo)入某種調(diào)節(jié)因子，以抑制抗原決定基因的表達(dá)，或設(shè)法除去該基因，再結(jié)合克隆技術(shù)，培育出沒有免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆豬器官。（3）對于需要進(jìn)行器官移植的病人，將病人正常體細(xì)胞的細(xì)胞核移入培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂中期的去核卵母細(xì)胞中，構(gòu)建重組胚胎。從囊胚期的胚胎中分離內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞得到核移植的胚胎干細(xì)胞，通過誘導(dǎo)發(fā)育成器官。病人移植此器官后核基因（或細(xì)胞核/核內(nèi)遺傳物質(zhì)/染色體）來自病人自身，由于不存在抗原，所以不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng)?！军c睛】本題考查基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)；識記胚胎干細(xì)胞的特點及相關(guān)應(yīng)用；識記核移植技術(shù)及應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。11、熱穩(wěn)定DNA聚合DNA分子含有內(nèi)含子非編碼區(qū)等序列，mRNA分子中沒有相應(yīng)互補的堿基序列X基因兩端的部分脫氧核苷酸序列使X基因能定向插入表達(dá)載體，減少自連農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法顯微注射法抗原-抗體雜交【解析】

1、有關(guān)PCR技術(shù)的相關(guān)知識：（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。（2）原理：DNA復(fù)制。（3）前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。（4）過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開。2、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）在PCR過程中，兩個引物是熱穩(wěn)定DNA聚合酶的結(jié)合位點；用cDNA單鏈與該抗性水稻植株的單鏈DNA進(jìn)行分子雜交，由于DNA分子含有內(nèi)含子、非編碼區(qū)等序列，mRNA分子中沒有相應(yīng)互補的堿基序列，因此逆轉(zhuǎn)錄形成的cDNA中缺少該序列，所以出現(xiàn)游離的單鏈區(qū)。（2）用PCR技術(shù)擴增X基因時，設(shè)計兩種引物的堿基序列的主要依據(jù)是X基因兩端的部分脫氧核苷酸序列，為了便于擴增后的X基因與質(zhì)粒連接，常在兩條引物上設(shè)計加入不同的限制酶酶切位點，主要目的是使X基因能定向插入表達(dá)載體，減少酶切產(chǎn)物自身環(huán)化。（3）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，農(nóng)桿菌能在自然條件下感染雙子葉植物和裸子植物，將質(zhì)粒上的T-DNA轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞。將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞常用顯微注射法，這也是將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法。（