甾體激素類藥物的分析3

基本結(jié)構(gòu)：環(huán)戊烷并多氫菲ABCD12345678910111213141516171819一、基本結(jié)構(gòu)及分類第一頁，共四十頁。分類：甾體激素腎上腺皮質(zhì)激素性激素雄性激素及蛋白同化激素孕激素雌激素第二頁，共四十頁。二、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1.腎上腺皮質(zhì)激素主要活性基團(tuán)性質(zhì)△4–3–酮UV、與羰基試劑反應(yīng)C17

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α–醇酮基還原性第三頁，共四十頁。2.雄性激素及蛋白同化激素主要活性基團(tuán)性質(zhì)△4–3–酮UV、與羰基試劑反應(yīng)

C17–

β–羥基可成酯第四頁，共四十頁。3.孕激素主要活性基團(tuán)性質(zhì)△4–3–酮UV、與羰基試劑反應(yīng)C17–甲酮基與亞硝基鐵氰化納反應(yīng)C17–乙酰氧基C17–乙炔基水解鑒定乙酸與硝酸銀沉淀第五頁，共四十頁。4.雌激素主要活性基團(tuán)性質(zhì)A環(huán)為3–OH苯環(huán)UV、與重氮苯磺酸鹽反應(yīng)C17–乙炔基與AgNO3反應(yīng)C17–羥基可成酯第六頁，共四十頁。二、鑒別試驗(yàn)（一）與強(qiáng)酸的呈色反應(yīng)甾體激素類藥物呈色H2SO4H3PO4HClO4HCl（母核）第七頁，共四十頁。與硫酸顯色反應(yīng)

顯色熒光加水稀潑尼松龍深紅

絮狀↓灰潑尼松橙黃→藍(lán)綠炔雌醚橙紅黃綠↓紅色

炔雌醇橙紅黃綠絮狀↓玫紅醋酸可的松黃或微褪色并澄帶橙清第八頁，共四十頁。(二)官能團(tuán)的反應(yīng)腎上腺皮質(zhì)激素藥物呈色四氮唑鹽費(fèi)林試液多倫試液OHˉ1C17

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α–醇酮基還原性A.呈色反應(yīng)第九頁，共四十頁。腎上腺皮質(zhì)激素藥物Cu2O↓橙紅色堿性酒石酸銅B.沉淀反應(yīng)Ag↓黑色氨制硝酸銀第十頁，共四十頁。甾體類激素藥物黃色的腙羰基試劑2.C3–酮基和C20–酮基＃常用的羰基試劑：2,4-二硝基苯肼、異煙肼、硫酸苯肼第十一頁，共四十頁。黃體酮藍(lán)紫色亞硝基鐵氰化納其他甾體淡橙色不顯色3.甲酮基呈色反應(yīng)第十二頁，共四十頁。雌激素類藥物紅色偶氮染料重氮苯磺酸4.酚羥基第十三頁，共四十頁。含炔基的甾體激素白色銀鹽沉淀硝酸銀5.乙炔基↓第十四頁，共四十頁。有機(jī)氟Fˉ有機(jī)破壞有機(jī)氯Clˉ6.有機(jī)鹵素茜素氟藍(lán)硝酸亞鈰硝酸—硝酸銀AgCl↓藍(lán)色配合物

第十五頁，共四十頁?！鳎?3-酮240nm苯環(huán)280nm（三）UV法第十六頁，共四十頁。（四）IR法第十七頁，共四十頁。（五）TLC法

主要用于甾體激素類藥物制劑的鑒別第十八頁，共四十頁。（六）HPLC法

主要用于甾體激素類藥物制劑的鑒別（如：醋酸曲安奈德軟膏、醋酸氟輕松軟膏）第十九頁，共四十頁。三、雜質(zhì)檢查（一）有關(guān)物質(zhì)檢查定義與標(biāo)示藥物結(jié)構(gòu)不同的甾體化合物都稱為“有關(guān)物質(zhì)”第二十頁，共四十頁。（1）TLC法（高低濃度對比法）判定方法：規(guī)定雜質(zhì)斑點(diǎn)數(shù)目規(guī)定雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色第二十一頁，共四十頁。（2）HPLC法（高低濃度對比法）判定方法：規(guī)定雜質(zhì)峰數(shù)目規(guī)定雜質(zhì)峰面積第二十二頁，共四十頁。（二）游離磷酸的檢查地塞米松磷酸鈉氫化可的松磷酸鈉倍他米松磷酸鈉氫化潑尼松磷酸鈉對照品法第二十三頁，共四十頁。（三）有機(jī)溶劑殘留量的檢查甲醇和丙酮甲醇≤0.3%丙酮≤0.5%

GC法第二十四頁，共四十頁。（一）HPLC法USP、BP、JP均采用RP－HPLC（大多內(nèi)標(biāo)法）特點(diǎn)用樣量少，靈敏度高，分離效果好，測定速度快例：黃體酮的含量測定：ODS柱；甲醇-水（65：35）；254nm內(nèi)標(biāo)：己烯雌酚（甾體激素類藥物常含有結(jié)構(gòu)相似的其他甾體雜質(zhì)，對利用結(jié)構(gòu)特征設(shè)計(jì)的比色法有干擾）四、含量測定第二十五頁，共四十頁。（二）UV法△４-3-酮240nm（±）腎上腺皮質(zhì)激素雄性激素和蛋白同化激素孕激素苯環(huán)280nm（±）雌激素第二十六頁，共四十頁。（三）比色法弱、非分光光度活性藥物強(qiáng)分光光度活性藥物化學(xué)反應(yīng)第二十七頁，共四十頁。

腎上腺皮質(zhì)激素類C17-α－醇酮基強(qiáng)還原性1.原理OH-[還原]四氮唑比色法第二十八頁，共四十頁。

制備對照液制備供試液加入四氮唑鹽有色產(chǎn)物484nmAX×

CXAR標(biāo)示量（%）=AXAR×V×標(biāo)示量×100%2、方法：以醋酸地塞米松為例第二十九頁，共四十頁。3.討論（1）基團(tuán)對反應(yīng)速度的影響C11=O＞C11－OHC21－OH＞C21-酯第三十頁，共四十頁。（2）溶劑、水分的影響含水量＞5%→ν↓含水10%→A↓10%含水30%→幾無反應(yīng)—無醛無水乙醇醛→A↑—無水乙醇第三十一頁，共四十頁。（3）O2與光線的影響反應(yīng)過程反應(yīng)產(chǎn)物怕光→避光、快速O2影響顏色強(qiáng)度和穩(wěn)定性→隔絕空氣、快速、充N2第三十二頁，共四十頁。（4）堿的種類及加入順序反應(yīng)應(yīng)在強(qiáng)堿性（pH13.75）條件下進(jìn)行以氫氧化四甲基銨的結(jié)果最佳加入順序：第三十三頁，共四十頁。（5）溫度與時(shí)間t℃↑→ν↑→甲瓚分解↑ChP25℃40～45′第三十四頁，共四十頁。腎上腺皮質(zhì)激素、雄性激素和蛋白同化激素、孕激素C3－酮基1.原理HCl（縮合）異煙肼比色法第三十五頁，共四十頁。2.測定方法第三十六頁，共四十頁。3.討論反應(yīng)速度（1）C3=O＞C17=O、C20=OC11=O不反應(yīng)反應(yīng)專屬性C3－酮基第三十七頁，共四十頁。（2）溶劑的選擇異煙肼鹽酸鹽→甲醇、乙醇無水甲醇無水乙醇第三十八頁，共四十頁。