《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》學(xué)習(xí)指南

《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》學(xué)習(xí)指南緒論學(xué)生學(xué)習(xí)本章需要掌握的內(nèi)容：微生物和醫(yī)學(xué)微生物的定義；三大類微生物及其特點(diǎn)。微生物（microorganism，microbe）是一類體積微小、結(jié)構(gòu)簡單、肉眼直接看不見，必須用光學(xué)顯微鏡或者電子顯微鏡放大后才能看得見的微小生物的總稱。根據(jù)微生物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、遺傳特性及分化組成可分為三大類：原核細(xì)胞型微生物（prokaryoticmicrobe）；真核細(xì)胞型微生物（eukaryoticmicrobe）；非細(xì)胞型微生物（acellularmicrobe）。第1章細(xì)菌形態(tài)與結(jié)構(gòu)學(xué)生學(xué)習(xí)本章需要掌握的內(nèi)容：基本結(jié)構(gòu)：基本結(jié)構(gòu)的構(gòu)成，肽聚糖的結(jié)構(gòu)，革蘭氏陽性菌和陰性菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)和醫(yī)學(xué)意義，細(xì)胞壁缺陷菌及醫(yī)學(xué)意義；細(xì)菌胞質(zhì)內(nèi)與醫(yī)學(xué)有關(guān)的重要結(jié)構(gòu)與意義。特殊結(jié)構(gòu)：種類、化學(xué)組成及醫(yī)學(xué)意義，菌毛的定義及分類。革蘭染色法的步驟、結(jié)果判定及醫(yī)學(xué)意義。細(xì)菌按其外形分為三大類，即球菌（coccus）、桿菌（bacillus）和螺形菌（spiralbacterium）。觀察細(xì)菌最常用的儀器是光學(xué)顯微鏡，其大小一般以微米（μm）為單位。細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)包括細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和核質(zhì)；特殊結(jié)構(gòu)包括莢膜、鞭毛、菌毛、芽胞。肽聚糖（peptidoglycan）是細(xì)菌細(xì)胞壁中的主要組分，為原核細(xì)胞所特有，又稱粘肽（mucopeptide）或胞壁質(zhì)（murein）。革蘭陽性菌的肽聚糖由聚糖骨架、四肽側(cè)鏈和五肽交聯(lián)橋三部分組成，革蘭陰性菌的肽聚糖僅由聚糖骨架和四肽側(cè)鏈兩部分組成。革蘭陽性菌細(xì)胞壁特殊組分：革蘭陽性菌的細(xì)胞壁較厚（20nm～80nm），除含有15～50層肽聚糖結(jié)構(gòu)外，尚含有大量的磷壁酸（teichoicacid）或磷壁醛酸（teichuronicacid）。革蘭陰性菌細(xì)胞壁特殊組分：革蘭陰性菌細(xì)胞壁較薄（10nm～15nm），但結(jié)構(gòu)較復(fù)雜。在1～2層肽聚糖結(jié)構(gòu)外側(cè)，尚有其特殊組分外膜（outermembrane）。外膜由脂蛋白、脂質(zhì)雙層和脂多糖三部分組成。脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）由脂質(zhì)A、核心多糖和特異多糖三部分組成，即革蘭陰性菌的內(nèi)毒素（endotoxin）。表1-1革蘭陽性菌與陰性菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)比較細(xì)胞壁革蘭陽性菌革蘭陰性菌厚度20nm～80nm10nm～15nm強(qiáng)度較堅(jiān)韌較疏松肽聚糖組成聚糖骨架聚糖骨架四肽側(cè)鏈四肽側(cè)鏈五肽交聯(lián)橋無結(jié)構(gòu)類型三維立體結(jié)構(gòu)二維平面結(jié)構(gòu)層數(shù)可多達(dá)50層1～2層含量占細(xì)胞壁干重50％～80％占細(xì)胞壁干重5％～20％糖類含量約45％15％～20％脂類含量1％～4％11％～22％磷壁酸或磷壁醛酸有無外膜脂蛋白無有脂質(zhì)雙層無有脂多糖無有細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型（細(xì)菌L型）：細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)受到理化或生物因素的直接破壞或合成被抑制，這種細(xì)胞壁受損的細(xì)菌在高滲環(huán)境下仍可存活者稱為細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型或細(xì)菌L型（bacterialLform）。革蘭陽性菌細(xì)胞壁缺失后，原生質(zhì)僅被一層細(xì)胞膜包住，稱為原生質(zhì)體（protoplast）；革蘭陰性菌肽聚糖層受損后尚有外膜保護(hù)，稱為原生質(zhì)球（spheroplast）。臨床上遇有癥狀明顯而標(biāo)本常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)陰性者，應(yīng)考慮細(xì)菌L型感染的可能性。細(xì)胞質(zhì)中有核糖體、質(zhì)粒、胞質(zhì)顆粒、中介體。質(zhì)粒（plasmid）是染色體外的遺傳物質(zhì)，存在于細(xì)胞質(zhì)中。為閉合環(huán)狀的雙鏈DNA，帶有遺傳信息，控制細(xì)菌某些特定的遺傳性狀。質(zhì)粒能獨(dú)立自行復(fù)制，隨細(xì)菌分裂轉(zhuǎn)移到子代細(xì)胞中。中介體（mesosome）中介體是部分細(xì)胞膜內(nèi)陷、折疊、卷曲形成的囊狀物，多見于革蘭陽性細(xì)菌。細(xì)菌是原核細(xì)胞，不具有成形的核。細(xì)菌的遺傳物質(zhì)稱為核質(zhì)（nuclearmaterial）或擬核（nucleoid），集中于細(xì)胞質(zhì)的某一區(qū)域，多在菌體中央，無核膜、核仁和有絲分裂器；因其功能與真核細(xì)胞的染色體相似，故習(xí)慣上亦稱之為細(xì)菌的染色體（chromosome）。細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)包括莢膜、鞭毛、菌毛、芽胞。莢膜（capsule）是某些細(xì)菌在其細(xì)胞壁外包繞一層粘液性物質(zhì)，為多糖或多肽的多聚體。莢膜的功能：（1）抗吞噬作用；（2）粘附作用；（3）抗有害物質(zhì)的損傷作用。鞭毛（flagellum）是在菌體上附有細(xì)長并呈波狀彎曲的絲狀物，少僅1～2根，多者達(dá)數(shù)百。這些絲狀物稱為鞭毛，是細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官。鞭毛的功能：細(xì)菌在液體環(huán)境中能自由游動(dòng)；有些細(xì)菌的鞭毛與致病性有關(guān)；抗原性。菌毛（pilus或fimbriae）是許多革蘭陰性菌和少數(shù)革蘭陽性菌菌體表面存在著一種比鞭毛更細(xì)、更短而直硬的絲狀物，與細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)無關(guān)，稱為菌毛。菌毛可分為普通菌毛（粘附功能）和性菌毛（通過接合傳遞遺傳物質(zhì)）兩類。芽胞（spore）是某些細(xì)菌在一定的環(huán)境條件下，能在菌體內(nèi)部形成一個(gè)圓形或卵圓形小體，是細(xì)菌的休眠形式，稱為內(nèi)芽胞（endospore），簡稱芽胞。產(chǎn)生芽胞的細(xì)菌都是革蘭陽性菌。細(xì)菌的芽胞發(fā)芽（germination）成繁殖體的過程，可分為活化、啟動(dòng)和長出三個(gè)連續(xù)階段。芽胞的功能：細(xì)菌的芽胞對(duì)熱力、干燥、輻射、化學(xué)消毒劑等理化因素均有強(qiáng)大的抵抗力。革蘭染色法（Gramstain）步驟：標(biāo)本固定后，先用堿性染料結(jié)晶紫初染，再加碘液媒染，使之生成結(jié)晶紫—碘復(fù)合物；此時(shí)不同細(xì)菌均被染成深紫色。然后用95%乙醇處理，有些細(xì)菌被脫色，有些不能。最后用稀釋復(fù)紅或沙黃復(fù)染。革蘭染色后將細(xì)菌分為兩大類：不被乙醇脫色仍保留紫色者為革蘭陽性菌，被乙醇脫色后復(fù)染成紅色者為革蘭陰性菌。革蘭染色法在鑒別細(xì)菌、選擇抗菌藥物、研究細(xì)菌致病性等方面都具有極其重要的意義。第2章細(xì)菌的生理學(xué)生學(xué)習(xí)本章需要掌握的內(nèi)容：細(xì)菌生長繁殖的環(huán)境因素；細(xì)菌的生長方式及其生長曲線；細(xì)菌按對(duì)氧需要的分類；細(xì)菌的分解代謝產(chǎn)物及生化反應(yīng)；與醫(yī)學(xué)有關(guān)的合成代謝產(chǎn)物。細(xì)菌的人工培養(yǎng)：培養(yǎng)基的概念；細(xì)菌在（固體、液體、半固體）培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象。細(xì)菌生長繁殖的環(huán)境因素：營養(yǎng)物質(zhì)、氫離子濃度（pH）、溫度、氣體、滲透壓等是細(xì)菌生長繁殖的必備條件。根據(jù)細(xì)菌代謝時(shí)對(duì)分子氧的需要與否，可以分四類：①專性需氧菌（obligateaerobe），具有完善的呼吸酶系統(tǒng)，僅能在有氧環(huán)境下生長，如結(jié)核分枝桿菌、霍亂弧菌；②微需氧菌（microaerophilicbacterium），在低氧壓（～5%）下生長最好，氧濃度＞10%對(duì)其有抑制作用，如空腸彎曲菌、幽門螺桿菌；③兼性厭氧菌（facultativeanaerobe），兼有需氧呼吸和無氧發(fā)酵兩種功能，不論在有氧或無氧環(huán)境中都能生長，但以有氧時(shí)生長較好，大多數(shù)病原菌屬于此；④專性厭氧菌（obligateanaerobe），缺乏完善的呼吸酶系統(tǒng)，只能在無氧環(huán)境中進(jìn)行發(fā)酵。細(xì)菌一般以簡單的二分裂方式（binaryfission）進(jìn)行無性繁殖。在適宜條件下，多數(shù)細(xì)菌繁殖速度很快。細(xì)菌分裂數(shù)量倍增所需要的時(shí)間稱為代時(shí)（generationtime），多數(shù)細(xì)菌為20～30分鐘。個(gè)別細(xì)菌繁殖速度較慢，如結(jié)核分枝桿菌的代時(shí)達(dá)18～20小時(shí)。將一定數(shù)量的細(xì)菌接種于適宜的液體培養(yǎng)基中，連續(xù)定時(shí)取樣檢查活菌數(shù)，可發(fā)現(xiàn)其生長過程的規(guī)律性。以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo)，培養(yǎng)物中活菌數(shù)的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)，可繪制出一條生長曲線（growthcurve）。生長曲線可分為四期：①遲緩期，該期菌體增大，代謝活躍，分裂遲緩，繁殖極少；②對(duì)數(shù)期，又稱指數(shù)期（exponentialphase），細(xì)菌在該期處于穩(wěn)定狀況，生長迅速，活菌數(shù)以恒定的幾何級(jí)數(shù)增長，生長曲線圖上細(xì)菌數(shù)的對(duì)數(shù)呈直線上升，達(dá)到頂峰狀態(tài)。此期細(xì)菌的形態(tài)、染色性、生理活性等都較典型，對(duì)外界環(huán)境因素的作用敏感。因此，研究細(xì)菌的生物學(xué)性狀（形態(tài)染色、生化反應(yīng)、藥物敏感試驗(yàn)等）應(yīng)選用該期的細(xì)菌。一般細(xì)菌對(duì)數(shù)期在培養(yǎng)后的8～18小時(shí)；③穩(wěn)定期，該期細(xì)菌繁殖速度漸減，死亡數(shù)緩慢增加，生長分裂和死亡的細(xì)菌數(shù)量處于平衡狀態(tài)。④衰亡期，穩(wěn)定期后細(xì)菌繁殖越來越慢，死亡數(shù)越來越多，并超過活菌數(shù)。該期細(xì)菌形態(tài)顯著改變，出現(xiàn)衰退型或菌體自溶，難以辨認(rèn)，生理代謝活動(dòng)也趨于停滯。各種細(xì)菌所具有的酶不完全相同，對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的分解能力亦不一致，因而其代謝產(chǎn)物有別。根據(jù)此特點(diǎn)，利用生物化學(xué)方法來鑒別不同細(xì)菌稱為細(xì)菌的生化反應(yīng)試驗(yàn)（biochemicalreaction），這對(duì)于一些形態(tài)和培養(yǎng)特性上不能區(qū)別而代謝上不同的菌種鑒別尤為重要。常見的有：①糖發(fā)酵試驗(yàn)；②VP（Voges-Proskauer）試驗(yàn)；③甲基紅（methylred）試驗(yàn)；④枸櫞酸鹽利用（citrateutilization）試驗(yàn)；⑤吲哚（indol）試驗(yàn)；⑥硫化氫試驗(yàn)；⑦尿素酶試驗(yàn)。吲哚（I）、甲基紅（M）、VP（V）、枸櫞酸鹽利用（C）四種試驗(yàn)常用于鑒定腸道桿菌，合稱為IMViC試驗(yàn)。例如大腸埃希菌對(duì)這四種試驗(yàn)的結(jié)果是“++--”，產(chǎn)氣腸桿菌則為“--++”。細(xì)菌還合成一些在醫(yī)學(xué)上具有重要意義的代謝產(chǎn)物：①熱原質(zhì)（pyrogen），或稱致熱原，是細(xì)菌合成的一種注入人體或動(dòng)物體內(nèi)能引起發(fā)熱反應(yīng)的物質(zhì)，產(chǎn)生熱原質(zhì)的細(xì)菌大多是革蘭陰性菌，熱原質(zhì)即其細(xì)胞壁的脂多糖。熱原質(zhì)耐高溫，高壓蒸氣滅菌（121℃20分鐘）亦不被破壞，250℃高溫干烤才能破壞熱原質(zhì)。②毒素與侵襲性酶，細(xì)菌產(chǎn)生外毒素和內(nèi)毒素兩類毒素，在細(xì)菌致病作用中甚為重要。外毒素（exotoxin）是多數(shù)革蘭陽性菌和少數(shù)革蘭陰性菌在生長繁殖過程中釋放到菌體外的蛋白質(zhì)；內(nèi)毒素（endotoxin）是革蘭陰性菌細(xì)胞壁的脂多糖，當(dāng)菌體死亡崩解后游離出來，外毒素毒性強(qiáng)于內(nèi)毒素。某些細(xì)菌可產(chǎn)生具有侵襲性的酶，能損傷機(jī)體組織，促使細(xì)菌的侵襲和擴(kuò)散，是細(xì)菌重要的致病物質(zhì)。③色素（pigment），細(xì)菌的色素有兩類，一類為水溶性，能彌散到培養(yǎng)基或周圍組織，如銅綠假單胞菌產(chǎn)生的色素使培養(yǎng)基或感染的膿汁呈綠色。另一類為脂溶性，不溶于水，只存在于菌體，使菌落顯色而培養(yǎng)基顏色不變，如金黃色葡萄球菌的色素。④抗生素（antibiotic），大多由放線菌和真菌產(chǎn)生。⑤細(xì)菌素（bacteriocin）是某些菌株產(chǎn)生的一類具有抗菌作用的蛋白質(zhì)。⑥維生素（vitamin）培養(yǎng)基（culturemedium）是由人工方法配制而成的，專供微生物生長繁殖使用的混合營養(yǎng)物制品。大多數(shù)細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中生長繁殖后呈現(xiàn)均勻混濁狀態(tài)；少數(shù)鏈狀的細(xì)菌則呈沉淀生長；枯草芽胞桿菌、結(jié)核分枝桿菌等專性需氧菌呈表面生長，常形成菌膜。將標(biāo)本或培養(yǎng)物劃線接種在固體培養(yǎng)基的表面，因劃線的分散作用，使許多原混雜的細(xì)菌在固體培養(yǎng)基表面上散開，稱為分離培養(yǎng)。一般經(jīng)過18～24小時(shí)培養(yǎng)后，單個(gè)細(xì)菌分裂繁殖成一堆肉眼可見的細(xì)菌集團(tuán)，稱為菌落（colony）。半固體培養(yǎng)基粘度低，有鞭毛的細(xì)菌在其中仍可自由游動(dòng)，沿穿刺線呈羽毛狀或云霧狀混濁生長。無鞭毛細(xì)菌只能沿穿刺線呈明顯的線狀生長。第3章細(xì)菌遺傳與變異學(xué)生學(xué)習(xí)本章需要掌握的內(nèi)容：細(xì)菌的遺傳物質(zhì)：細(xì)菌染色體；質(zhì)粒（主要特性及重要質(zhì)粒）；噬菌體的概念及其感染細(xì)菌的過程與結(jié)果；基因轉(zhuǎn)移與重組方式的種類及定義。與細(xì)菌遺傳相關(guān)的物質(zhì)包括染色體和染色體外的其他遺傳物質(zhì)：質(zhì)粒、噬菌體、轉(zhuǎn)座子。噬菌體（bacteriophage或phage）是侵襲細(xì)菌的病毒，也是賦予宿主菌生物學(xué)性狀的遺傳物質(zhì)。噬菌體的體積微小，需用電子顯微鏡觀察。噬菌體由核酸和蛋白質(zhì)組成，必須在活菌內(nèi)寄生，有嚴(yán)格的宿主特異性。噬菌體形態(tài)有蝌蚪形、微球形和細(xì)桿形。大多數(shù)噬菌體呈蝌蚪形，有頭部和尾部之分。頭部是由蛋白質(zhì)外殼包繞核酸組成，呈六邊形立體對(duì)稱。尾部由蛋白質(zhì)組成，有尾領(lǐng)、尾鞘和尾髓之分，尾部末端有尾板、尾刺和尾絲，與吸附宿主有關(guān)。噬菌體感染細(xì)菌有兩種結(jié)果，一是噬菌體增殖，細(xì)菌被裂解，建立溶菌性周期，這類噬菌體稱為毒性噬菌體（virulentphage）；二是噬菌體核酸與細(xì)菌染色體整合，成為前噬菌體（prophage），細(xì)菌變成溶原性細(xì)菌（lysogenicbacteria），建立溶原性周期，這類噬菌體稱為溫和噬菌體（temperatephage）。①溶菌性周期指毒性噬菌體在宿主菌內(nèi)的增殖過程，包括3個(gè)階段，即吸附穿入、生物合成、成熟釋放。噬菌體感染細(xì)菌時(shí)，其尾絲為吸附器官，能識(shí)別宿主菌表面的特殊受體，然后分泌酶類溶解細(xì)胞壁，使細(xì)胞壁出現(xiàn)小孔，尾髓再收縮，將頭部的核酸注入宿主菌內(nèi)，蛋白質(zhì)外殼留在菌細(xì)胞外。繼而，進(jìn)入細(xì)菌內(nèi)的噬菌體核酸首先經(jīng)早期轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生早期蛋白質(zhì)（核酸復(fù)制所必需的酶類），并復(fù)制子代核酸，再進(jìn)行晚期轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生噬菌體的結(jié)構(gòu)蛋白（頭部外殼和尾部）。蛋白質(zhì)與核酸分別合成后，按一定程序裝配，成熟為完整的子代噬菌體。子代噬菌體達(dá)到一定數(shù)量時(shí)，由于噬菌體合成酶類的溶解作用，菌細(xì)胞突然裂解，釋放出的噬菌體再感染其他敏感細(xì)菌。②溶原性周期：溫和噬菌體感染細(xì)菌后不增殖，其核酸整合到細(xì)菌染色體上，即前噬菌體，隨細(xì)菌染色體的復(fù)制而復(fù)制，并隨細(xì)菌分裂而分配至子代細(xì)菌的染色體中。帶有前噬菌體基因組的細(xì)菌稱為溶原性細(xì)菌。溫和噬菌體又稱為溶原性噬菌體（lysogenicphage），它可偶爾自發(fā)地或在某些理化或生物因素的誘導(dǎo)下，整合的前噬菌體脫離宿主菌染色體，進(jìn)入溶菌性周期導(dǎo)致細(xì)菌裂解，并產(chǎn)生新的成熟噬菌體?？梢姕睾褪删w可有溶原性周期和溶菌性周期，而毒性噬菌體只有一個(gè)溶菌性周期。供體菌（donor）DNA轉(zhuǎn)移給受體菌（recipient）的過程稱為基因轉(zhuǎn)移或基因交換。遺傳重組（geneticrecombination）是指進(jìn)入受體菌的外源DNA能夠復(fù)制，導(dǎo)致其基因型發(fā)生改變成為重組體或重組菌（recombinantbacteria）。細(xì)菌基因轉(zhuǎn)移和重組的方式有轉(zhuǎn)化、接合、轉(zhuǎn)導(dǎo)、溶原性轉(zhuǎn)換和原生質(zhì)體融合。①轉(zhuǎn)化：受體菌直接攝取供體菌DNA，從而獲得新的遺傳性狀的過程稱為轉(zhuǎn)化（transformation）。②接合：細(xì)菌通過性菌毛相互連接溝通，將質(zhì)?；蛉旧w的DNA從供體菌轉(zhuǎn)移給受體菌的過程稱為接合（conjugation）。③轉(zhuǎn)導(dǎo)：轉(zhuǎn)導(dǎo)（transduction）是以噬菌體為媒介，將供體菌DNA片段轉(zhuǎn)移到受體菌內(nèi)，使受體菌獲得新的遺傳性狀。④溶原性轉(zhuǎn)換：溶原性細(xì)菌因染色體上整合有前噬菌體而獲得新的遺傳性狀稱為溶原性轉(zhuǎn)換（lysogenicconversion）。溶原性轉(zhuǎn)換可使某些細(xì)菌發(fā)生毒力變異或抗原性變異。⑤原生質(zhì)體融合：是分別將兩種細(xì)菌經(jīng)處理失去細(xì)胞壁懸于高滲培養(yǎng)基中保持原生質(zhì)體狀態(tài)，然后將兩種細(xì)菌的原生質(zhì)體混合，滴加聚乙二醇促使原生質(zhì)體融合（protoplastfusion）。融合后的雙倍體細(xì)胞可以短期生存，在此期間染色體之間可以發(fā)生基因的交換和重組，獲得多種不同表型的重組融合體。第4章病毒的基本性狀學(xué)生學(xué)習(xí)本章需要掌握的內(nèi)容：病毒的概念及主要特征；病毒體的概念和測(cè)量單位；病毒的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和對(duì)稱性、化學(xué)組成及功能；病毒復(fù)制周期及異常增殖現(xiàn)象（頓挫感染、缺陷病毒）。物理因素、化學(xué)因素對(duì)病毒的影響。病毒（virus）是一類非細(xì)胞型微生物。其主要特征是：=1\*GB3①體積非常微小，能通過除菌濾器；=2\*GB3②結(jié)構(gòu)簡單，無完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，只含有一種核酸（DNA或RNA）；=3\*GB3③具有嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生性；=4\*GB3④對(duì)常用抗生素不敏感，但對(duì)干擾素敏感。病毒與其他微生物不同，特征比較參見表4-1。表4-1病毒與其他微生物的比較特性病毒細(xì)菌支原體立克次體衣原體真菌通過細(xì)菌濾器（0.45μm）+---+-結(jié)構(gòu)非細(xì)胞原核細(xì)胞原核細(xì)胞原核細(xì)胞原核細(xì)胞真核細(xì)胞有無細(xì)胞壁-+-+++核酸類型DNA或RNADNA＋RNADNA＋RNADNA＋RNADNA＋RNADNA＋RNA人工培養(yǎng)基生長-++--+增殖方式復(fù)制二分裂二分裂二分裂二分裂有性或無性抗生素敏感性-+++++干擾素敏感性+-----病毒的大小病毒的大小是指病毒體的大小。測(cè)量單位是納米（nanometer，nm），即毫微米（1/1000μm）。各種病毒的大小相差很大，一般病毒介于20nm～250nm之間，其中絕大多數(shù)病毒都在100nm左右。病毒的形態(tài)病毒的形態(tài)多種多樣。絕大多數(shù)動(dòng)物病毒呈球形或近似球形；植物病毒多呈桿狀或絲狀（某些動(dòng)物病毒也呈絲狀）。病毒的結(jié)構(gòu)及化學(xué)組成病毒的結(jié)構(gòu)可分為基本結(jié)構(gòu)和輔助結(jié)構(gòu)。基本結(jié)構(gòu)包括：病毒的核心（viralcore）和衣殼（capsid），二者構(gòu)成核衣殼（nucleocapsid）。無包膜病毒的核衣殼就是病毒體。病毒核心（viralcore）是病毒體的中心結(jié)構(gòu)，其成分主要由一種類型核酸組成，即DNA或RNA。除核酸外，還有少量病毒基因編碼的非結(jié)構(gòu)蛋白，也是病毒增殖中所需要的功能蛋白。病毒核酸的存在形式具有多樣性。形狀上有線型和環(huán)型之分。核酸構(gòu)成可以是單鏈或雙鏈，但也有分節(jié)段的。病毒核酸攜帶有病毒的全部遺傳信息，其主要功能有：=1\*GB3①病毒復(fù)制；=2\*GB3②決定病毒的特性；=3\*GB3③具有感染性。病毒衣殼（viralcapsid）的成分是蛋白質(zhì)，是包圍在病毒核心外面的結(jié)構(gòu)蛋白。它是由一定數(shù)量殼粒（capsomere）組成的。根據(jù)殼粒的排列方式，病毒結(jié)構(gòu)有以下幾種對(duì)稱型：①螺旋對(duì)稱型（helicalsymmetry）；=2\*GB3②．20面體立體對(duì)稱型（icosahedralsymmetry）；=3\*GB3③復(fù)合對(duì)稱型（complexsymmetry）。衣殼的主要功能有：①保護(hù)病毒核酸②參與病毒的感染過程③具有抗原性病毒的輔助結(jié)構(gòu)主要指的是包膜（viralenvelope）。包繞在病毒核衣殼外面的雙層膜。包膜的主要功能是：①維護(hù)病毒體結(jié)構(gòu)的完整性；②與病毒入侵細(xì)胞及感染性有關(guān)；③具有病毒抗原的特異性。病毒的增殖病毒不具有能獨(dú)立進(jìn)行代謝的酶系統(tǒng)，因此只有進(jìn)入活的易感宿主細(xì)胞內(nèi)，由宿主細(xì)胞提供合成病毒核酸與蛋白質(zhì)的原料才能增殖。病毒增殖的方式是自我復(fù)制。復(fù)制是以病毒核酸為模板，在DNA多聚酶或RNA多聚酶及其他必要因素作用下，合成子代病毒的核酸和蛋白質(zhì)，裝配成完整病毒顆粒并釋放至細(xì)胞外。病毒復(fù)制一般可分為吸附、穿入、脫殼、生物合成及裝配與釋放5個(gè)階段，稱為復(fù)制周期（replicationcycle）。吸附（adsorption/attachment）吸附于宿主細(xì)胞表面是病毒感染的第一步。吸附主要是通過病毒體表面的吸附蛋白與易感細(xì)胞表面特異性受體相結(jié)合。穿入（penetration）病毒與細(xì)胞表面結(jié)合后穿過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞的過程稱為穿入。病毒體可通過胞飲、融合、直接穿入等3種方式進(jìn)入細(xì)胞。脫殼（uncoating）病毒脫去蛋白衣殼后，核酸才能發(fā)揮作用。生物合成（biosynthesis）病毒脫殼后，核酸釋放入細(xì)胞內(nèi)，則進(jìn)入病毒的生物合成階段。病毒生物合成包括病毒核酸復(fù)制和基因表達(dá)過程，即病毒利用宿主細(xì)胞提供的環(huán)境和物質(zhì)合成大量病毒核酸和結(jié)構(gòu)蛋白。生物合成一般分早期和晚期兩個(gè)階段。早期是合成早期蛋白階段，即病毒早期基因組在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄、翻譯而產(chǎn)生病毒生物合成中所需要的酶類，以及某些抑制或阻斷細(xì)胞核酸和蛋白質(zhì)合成的非結(jié)構(gòu)蛋白。晚期階段是根據(jù)病毒基因組指令，開始病毒核酸的復(fù)制，并經(jīng)過病毒晚期基因的轉(zhuǎn)錄、翻譯而產(chǎn)生病毒的結(jié)構(gòu)蛋白。根據(jù)病毒核酸類型不同將病毒的生物合成過程分為6個(gè)類型：雙鏈DNA病毒、單鏈DNA病毒、單正鏈RNA病毒、單負(fù)鏈RNA病毒、雙鏈RNA病毒及逆轉(zhuǎn)錄病毒。1．雙鏈DNA病毒dsDNA病毒復(fù)制過程在細(xì)胞核內(nèi)進(jìn)行，可分為早期和晚期兩個(gè)階段。早期階段是病毒利用宿主細(xì)胞核內(nèi)的依賴DNA的RNA多聚酶，轉(zhuǎn)錄早期mRNA，再于胞漿內(nèi)的核糖體翻譯出早期蛋白。早期蛋白主要是非結(jié)構(gòu)蛋白，包括DNA多聚酶、脫氧胸腺嘧啶激酶及調(diào)控基因和抑制細(xì)胞代謝的多種酶類，用于子代DNA的復(fù)制。晚期階段包括子代DNA復(fù)制和晚期蛋白的合成。2．單鏈DNA病毒ssDNA病毒種類很少。該類病毒基因組可是正鏈，也可是負(fù)鏈。在生物合成時(shí)，首先以親代DNA作模板，合成其互補(bǔ)鏈，并與親代DNA鏈形成dsDNA，作為復(fù)制中間體。然后解鏈，再以新合成的互補(bǔ)鏈為模板復(fù)制出子代DNA，同時(shí)轉(zhuǎn)錄mRNA并翻譯合成病毒蛋白質(zhì)。3．單正鏈RNA病毒+ssRNA本身具有mRNA功能，其RNA可直接附著于宿主細(xì)胞的核糖體上翻譯早期蛋白，首先全基因組翻譯出大分子多聚蛋白前體，在細(xì)胞或病毒編碼的蛋白酶作用下多聚蛋白被切割成為功能蛋白（如RNA聚合酶）及結(jié)構(gòu)蛋白。+ssRNA在RNA聚合酶作用下，轉(zhuǎn)錄出與親代互補(bǔ)的負(fù)鏈RNA，形成雙股RNA（±RNA），即復(fù)制中間體（RI），并以正鏈RNA為mRNA翻譯病毒晚期蛋白，即衣殼蛋白及其他結(jié)構(gòu)蛋白；以負(fù)鏈RNA為模板復(fù)制子代病毒RNA，進(jìn)而再裝配與釋放4．單負(fù)鏈RNA病毒多數(shù)有包膜病毒屬于-ssRNA病毒。雖然，-ssRNA不具有mRNA的功能，但因?yàn)檫@些病毒含有依賴RNA的RNA多聚酶，故能以病毒RNA為模板進(jìn)行復(fù)制，故在生物合成過程中，-ssRNA首先轉(zhuǎn)錄出互補(bǔ)正鏈RNA，形成復(fù)制中間體（±RNA），產(chǎn)生的正鏈RNA中，部分為模板復(fù)制出子代負(fù)鏈RNA，部分起mRNA作用，翻譯出病毒的結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白。5．雙鏈RNA病毒在生物合成時(shí)，病毒的正鏈RNA在病毒自身RNA多聚酶作用下轉(zhuǎn)錄出mRNA，然后再翻譯出早期蛋白或晚期蛋白。在核酸復(fù)制時(shí)，必須先以其原負(fù)鏈為模板復(fù)制出新正鏈RNA，再由新正鏈RNA復(fù)制出新的負(fù)鏈，構(gòu)成子代RNA。6．逆轉(zhuǎn)錄病毒其生物合成過程與其他單正鏈RNA不同，首先以病毒RNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成cDNA，構(gòu)成RNA：DNA中間體。中間體中的RNA鏈由RNA酶H水解，DNA鏈進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，在DNA多聚酶作用下復(fù)制成dsDNA。dsDNA則整合至宿主細(xì)胞的染色體DNA上，成為前病毒，并可隨宿主細(xì)胞的分裂存在于子代細(xì)胞內(nèi)。前病毒在細(xì)胞核內(nèi)逆轉(zhuǎn)錄出子代病毒RNA和mRNA。mRNA在胞漿核糖體上翻譯出子代病毒的結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白。裝配與釋放（assemblyandrelease）病毒裝配是指病毒核酸與蛋白質(zhì)合成之后，在細(xì)胞漿內(nèi)或細(xì)胞核內(nèi)組裝為成熟病毒顆粒的過程。不同種類的病毒在細(xì)胞內(nèi)裝配的部位也不同。與病毒增殖有關(guān)的異常現(xiàn)象頓挫感染（abortiveinfection）病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞后，如果細(xì)胞不能為病毒增殖提供所需要的酶、能量及必要的成分，則病毒在其中不能合成本身的成分；或者雖能合成部分或全部病毒成分，但不能裝配和釋放，此感染過程被稱為頓挫感染。不能為病毒增殖提供條件的細(xì)胞，被稱為非容納細(xì)胞。能為病毒提供條件，可產(chǎn)生完整病毒的細(xì)胞被稱為容納細(xì)胞。缺陷病毒（defectivevirus）因病毒基因組不完整或基因發(fā)生改變而不能進(jìn)行正常增殖所產(chǎn)生的子代病毒稱為缺陷病毒。如果缺陷病毒與其他病毒共同感染細(xì)胞時(shí)，而且其他病毒能為缺陷病毒提供所需要的條件，缺陷病毒則又能完成正常增殖而產(chǎn)生完整的子代病毒，將這種有輔助作用的病毒稱為輔助病毒。理化因素對(duì)病毒的影響病毒在體外受到物理、化學(xué)因素作用后能失去感染性稱為滅活（inactivation）。滅活的病毒仍能保留其他特性。理化因素滅活病毒的機(jī)制主要是：=1\*GB3①通過破壞病毒的包膜；=2\*GB3②使病毒蛋白質(zhì)變性；=3\*GB3③損傷病毒的核酸等途徑。物理因素的影響：大多數(shù)病毒耐冷不耐熱；多數(shù)病毒在pH5～pH9穩(wěn)定，但也因病毒種類而異；X線、γ射線或紫外線均能以不同機(jī)制使病毒滅活。化學(xué)因素的影響：乙醚、氯仿、去氧膽酸鹽、陰離子去污劑等脂溶劑均能使有包膜病毒的包膜脂質(zhì)溶解而失去吸附能力被滅活。但對(duì)無包膜病毒幾乎無作用。除強(qiáng)酸、強(qiáng)堿外，次亞氯酸鹽、過氧乙酸、戊二醛、甲醛、氧化劑、鹵素及其化合物等化學(xué)消毒劑均對(duì)病毒有滅活作用。第5章細(xì)菌與病毒的感染與致病機(jī)制學(xué)生學(xué)習(xí)本章需要掌握的內(nèi)容：正常菌群的概念及生理作用，機(jī)會(huì)性致病菌、菌群失調(diào)的概念；條件（機(jī)會(huì)）致病菌的致病條件。細(xì)菌的毒力（包括侵襲性酶和毒素）；外毒素的定義、種類及特點(diǎn)；內(nèi)毒素結(jié)構(gòu)組成及生物學(xué)活性；內(nèi)、外毒素的主要區(qū)別。細(xì)菌感染的來源；菌血癥、毒血癥、敗血癥、膿毒血癥的概念。病毒侵入機(jī)體的方式與傳播途徑：水平傳播與垂直傳播；病毒感染類型：慢性感染、潛伏感染和慢發(fā)病毒感染；致病機(jī)制：病毒對(duì)宿主細(xì)胞的直接作用；病毒感染的免疫病理作用。細(xì)菌的感染與致病機(jī)制通常把這些在人體各部位正常寄居而對(duì)人無害的細(xì)菌稱為正常菌群（normalflora）。正常菌群對(duì)構(gòu)成人體內(nèi)局部微生態(tài)平衡起著重要作用，其生理作用有：（1）生物拮抗作用；（2）營養(yǎng)作用；（3）免疫作用；（4）抑癌作用；（5）抗衰老作用。正常菌群與宿主之間，以及正常菌群之間，通過營養(yǎng)競(jìng)爭，代謝產(chǎn)物的相互制約等因素，維持著良好的生存平衡。在一定條件下這種平衡關(guān)系被打破，原來不致病的正常菌群中的細(xì)菌可成為致病菌，稱這類細(xì)菌為條件致病菌（conditionalbacterium）。菌群失調(diào)（dysbacteriosis）是指機(jī)體某部位正常菌群中各菌種間的比例發(fā)生較大幅度變化而超出正常范圍的狀態(tài)。由此產(chǎn)生的病癥，稱為菌群失調(diào)癥或菌群交替癥（microbialselectionandsubstitution）。細(xì)菌的毒力主要表現(xiàn)為兩方面：一是病原菌有突破宿主皮膚、粘膜生理屏障等免疫防御機(jī)制，進(jìn)入機(jī)體定居，繁殖和擴(kuò)散的能力，稱為侵襲力（invasiveness）；二是毒素，即病原菌含有損害宿主組織、器官并引起生理功能紊亂的大分子成份。侵襲力是細(xì)菌突破機(jī)體的能力的物質(zhì)基礎(chǔ)，它包括莢膜、粘附素和侵襲性物質(zhì)等，主要涉及菌體的表面結(jié)構(gòu)和釋放的胞外蛋白和酶類。細(xì)菌毒素是細(xì)菌在粘附、定居及生長繁殖過程中合成并釋放的多種對(duì)宿主細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能有損害作用的毒性物質(zhì)。依據(jù)毒素產(chǎn)生的來源、性質(zhì)和作用的不同，可分為外毒素（exotoxin）和內(nèi)毒素（endotoxin）兩種。外毒素主要由革蘭陽性菌和部分革蘭陰性菌產(chǎn)生并釋放到菌體外的毒性蛋白質(zhì)。具有以下共同特征：①本質(zhì)是蛋白質(zhì)；②毒性作用強(qiáng)；③選擇性強(qiáng)；④理化穩(wěn)定性差；⑤抗原性強(qiáng)；⑥種類多。按外毒素對(duì)宿主細(xì)胞的親和性及作用方式可分成三大類：神經(jīng)毒素（neurotoxin）主要作用于神經(jīng)組織引起神經(jīng)傳導(dǎo)功能紊亂；細(xì)胞毒素（cytotoxin）可直接破壞宿主細(xì)胞膜或抑制細(xì)胞蛋白質(zhì)的合成；腸毒素（enterotoxin）能作用于腸上皮細(xì)胞引起腸功能紊亂。內(nèi)毒素是革蘭陰性菌細(xì)胞壁中的脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）組分，只有當(dāng)菌體裂解（細(xì)菌死亡或人工破壞）后才釋放出來。內(nèi)毒素的生物學(xué)作用：①發(fā)熱反應(yīng)；②白細(xì)胞反應(yīng)；③內(nèi)毒素血癥與內(nèi)毒性休克；④Shwartzman現(xiàn)象與彌漫性血管內(nèi)凝血（disseminatedintravascularcoagulation，DIC）。表5-1外毒素與內(nèi)毒素的主要區(qū)別區(qū)別要點(diǎn)外毒素內(nèi)毒素來源革蘭陽性菌與部分革蘭陰性菌革蘭陰性菌存在部位由活菌分泌到菌外，少數(shù)是細(xì)菌崩解后釋出細(xì)胞壁組分，菌裂解后釋出化學(xué)成分蛋白質(zhì)脂多糖穩(wěn)定性60℃160℃，2-作用方式與細(xì)胞的特異受體結(jié)合刺激宿主細(xì)胞分泌細(xì)胞因子、血管活性物質(zhì)毒性作用強(qiáng)，對(duì)組織器官有選擇性毒害效應(yīng)，引起特殊臨床表現(xiàn)較弱，各菌的毒性效應(yīng)大致相同，引起發(fā)熱、白細(xì)胞增多、微循環(huán)障礙、休克、DIC等抗原性強(qiáng)，刺激機(jī)體產(chǎn)生抗毒素；甲醛液處理脫毒形成類毒素弱，刺激機(jī)體產(chǎn)生的中和抗體作用弱；甲醛液處理不形成類毒素引起機(jī)體感染的致病菌來源有兩大類：外源性感染（exogenousinfection）和內(nèi)源性感染（endogenousinfection）。外源性感染，病原菌來自宿主機(jī)體以外的環(huán)境，傳染源主要是：①病人；②帶菌者（carrier）；③患病及帶菌動(dòng)物。內(nèi)源性感染，主要指來自體內(nèi)的細(xì)菌引起的感染，又稱自身感染。這類感染主要來源于正常菌群，當(dāng)某些條件改變時(shí)，一些條件致病菌引起感染并致病。感染發(fā)生后，病原菌或其毒性代謝產(chǎn)物向全身擴(kuò)散，引起全身性癥狀。全身感染在臨床上常見下列幾種情況：（1）毒血癥（toxemia）：產(chǎn)生外毒素的病原菌只在局部生長繁殖，病菌不進(jìn)入血流，但其產(chǎn)生的外毒素進(jìn)入血循環(huán)，達(dá)到易感靶器官、引起組織損害，產(chǎn)生特殊的毒性癥狀。例如白喉、破傷風(fēng)等。（2）菌血癥（bacteremia）：病原菌侵入血流，但未在其中繁殖，只是短暫的一過性經(jīng)血液循環(huán)到達(dá)體內(nèi)適宜部位再繁殖致病。如傷寒早期的菌血癥，臨床癥狀輕微。（3）敗血癥（septicemia）：病原菌侵入血流后，在其中大量繁殖并產(chǎn)生毒性產(chǎn)物，引起嚴(yán)重全身中毒癥狀，例如高熱、皮膚和粘膜瘀斑、肝脾腫大等。革蘭陽性菌和革蘭陰性菌均可引起敗血癥，如鼠疫耶氏菌、炭疽芽胞桿菌等。（4）膿毒血癥（pyemia）：化膿性細(xì)菌侵入血流后，在其中大量繁殖，通過血流擴(kuò)散到機(jī)體其他組織或器官，產(chǎn)生新的化膿性病灶。如金黃色葡萄球菌的膿毒血癥，常導(dǎo)致多發(fā)性肝膿腫、皮下膿腫、肺膿腫和腎膿腫。（5）內(nèi)毒素血癥（endotoxemia）：由于革蘭陰性菌感染使宿主血液中出現(xiàn)內(nèi)毒素引起的癥狀。可由病灶內(nèi)大量革蘭陰性菌死亡，釋放內(nèi)毒素入血所致，也可由侵入血中的革蘭陰性菌大量繁殖、死亡崩解后釋放。癥狀因血中內(nèi)毒素量的不同而異。輕則只有發(fā)熱，重則可有DIC、休克甚至死亡。例如小兒急性中毒性細(xì)菌性痢疾。病毒感染與致病機(jī)制病毒侵入機(jī)體的方式和途徑常決定感染的發(fā)生和發(fā)展。機(jī)體與外界相通的皮膚、口腔、鼻腔及泌尿生殖道等都是病毒入侵機(jī)體的門戶，所以病毒主要通過皮膚和粘膜（呼吸道、消化道或泌尿生殖道）傳播。但在特定條件下，病毒可直接進(jìn)入血循環(huán)感染機(jī)體如輸血、注射、器官移植和昆蟲叮咬等。表5-2人類病毒的感染途徑感染途徑傳播方式與媒介病毒種類呼吸道空氣、飛沫、痰、唾液或皮屑正粘病毒（流感病毒）、副粘病毒、鼻病毒、水痘病毒和腺病毒等消化道污染的水或食物脊髓灰質(zhì)炎病毒、其他腸道病毒、輪狀病毒、HAV及HEV.眼及泌尿生殖道接觸（直接或間接）、游泳池、性交HIV、HSV-1、HSV-2、CMV、HPV、腺病毒及腸道病毒70型等破損皮膚吸血昆蟲、狂犬腦炎病毒、狂犬病病毒等血液輸血、注射、器官移植HIV、HBV、HCV、CMV經(jīng)胎盤或產(chǎn)道宮內(nèi)、分娩產(chǎn)道、哺乳風(fēng)疹病毒、HIV、HBV、CMV等流行病學(xué)上把病毒在人群中的傳播方式分為水平傳播（horizontaltransmission）和垂直傳播（verticaltransmission）兩類。水平傳播指病毒在人群中不同個(gè)體之間的傳播（也包括由媒介、動(dòng)物參與的傳播），主要通過呼吸道、消化道或皮膚粘膜等途徑進(jìn)入人體，產(chǎn)生水平感染（horizontalinfection）。垂直傳播指存在母體的病毒經(jīng)胎盤或產(chǎn)道由親代傳播給子代的方式，主要是孕婦發(fā)生病毒血癥，或病毒與血細(xì)胞緊密結(jié)合造成子代的感染。這種方式產(chǎn)生的感染稱垂直感染（verticalinfection），這在其他微生物少見，已知有十多種病毒可引起垂直感染，其中以HBV、HCV、CMV、HIV和風(fēng)疹病毒為多見。垂直感染可致死胎、流產(chǎn)、早產(chǎn)或先天畸形，子代也可沒有任何癥狀或成為病毒攜帶者。機(jī)體感染病毒后，可表現(xiàn)出不同的臨床類型。根據(jù)有無癥狀，可分為隱性感染和顯性感染；依病毒在機(jī)體內(nèi)感染過程、滯留的時(shí)間及出現(xiàn)臨床癥狀的長短，病毒感染又分為急性感染和持續(xù)性感染。在持續(xù)性病毒感染（persistentviralinfection）中，病毒在機(jī)體內(nèi)可持續(xù)存在數(shù)月、數(shù)年甚至數(shù)十年?？沙霈F(xiàn)癥狀也可不出現(xiàn)癥狀，但體內(nèi)病毒存在時(shí)間長，成為長期帶毒者，不但是重要傳染源，也可引起慢性進(jìn)行性疾病。大致分為：慢性感染、潛伏感染和慢發(fā)病毒感染三種情況。（1）慢性病毒感染（chronicviralinfection）：經(jīng)顯性或隱性感染后，病毒未被完全清除，持續(xù)存在于機(jī)體血液或組織中，病毒不斷排出體外。慢性病毒感染病程長達(dá)數(shù)月或數(shù)十年，患者臨床癥狀輕微或?yàn)闊o癥狀病毒攜帶者。（2）潛伏性病毒感染（latentviralinfection）：經(jīng)急性或隱性感染后，病毒與機(jī)體處于平衡狀態(tài)，病毒基因組潛伏在特定組織或細(xì)胞內(nèi)，但并不能產(chǎn)生有感染性的病毒體，此時(shí)用常規(guī)方法不能分離出病毒，在某些條件下若平衡被破壞，則病毒可被激活，增殖而出現(xiàn)臨床癥狀，并可檢測(cè)出病毒的存在。（3）慢發(fā)病毒感染（slowvirusinfection）：經(jīng)顯性或隱性感染后，病毒有很長潛伏期，此時(shí)機(jī)體無癥狀也分離不出病毒。但以后出現(xiàn)慢性、進(jìn)行性疾病、常導(dǎo)致死亡，此類感染又稱遲發(fā)病毒感染。病毒感染對(duì)宿主細(xì)胞的致病作用，包括：（1）溶細(xì)胞感染，體外組織培養(yǎng)時(shí)，病毒感染的細(xì)胞可見到細(xì)胞變圓、聚集、融合、裂解或脫落等現(xiàn)象，稱病毒的致細(xì)胞病變作用（cytopathiceffect，CPE）；（2）穩(wěn)定狀態(tài)感染：有些病毒（多為有包膜病毒）在宿主細(xì)胞內(nèi)增殖過程中，對(duì)細(xì)胞代謝、溶酶體膜影響不大，由于以出芽方式釋放病毒，其過程緩慢、病變較輕、短時(shí)間也不會(huì)引起細(xì)胞溶解和死亡，這些不具有殺細(xì)胞效應(yīng)的病毒引起的感染稱為病毒的穩(wěn)定狀態(tài)感染（steadystateinfection）；（3）細(xì)胞凋亡：是由細(xì)胞基因自身指令發(fā)生的一種生物學(xué)過程。在一定條件下，細(xì)胞受到誘導(dǎo)因子作用，激發(fā)的信號(hào)傳到細(xì)胞核內(nèi)，激活細(xì)胞凋亡基因，從而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)胞膜鼓泡、細(xì)胞核濃縮并可出現(xiàn)凋亡小體；（4）細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)化：有少數(shù)病毒感染細(xì)胞后不但不抑制宿主細(xì)胞DNA的合成，反而促進(jìn)細(xì)胞DNA的合成，并使細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化，失去細(xì)胞間接觸性抑制，而成堆生長。這些細(xì)胞生物學(xué)行為的改變，稱為細(xì)胞轉(zhuǎn)化（celltransformation）。；（5）病毒基因的整合：分子遺傳學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，病毒的遺傳物質(zhì)核酸可以結(jié)合到宿主細(xì)胞染色體DNA中，稱為整合（integration）；（6）包涵體的形成：細(xì)胞被病毒感染后，在細(xì)胞漿或細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)光鏡下可見的斑塊狀結(jié)構(gòu)，稱為包涵體（inclusionbody）。病毒感染對(duì)機(jī)體的致病作用，包括：（1）病毒對(duì)組織器官的親嗜性與組織器官的損傷。（2）免疫病理損傷：①體液免疫病理作用；②細(xì)胞免疫病理作用。（3）病毒對(duì)免疫系統(tǒng)的致病作用：①病毒感染引起免疫抑制；②病毒對(duì)免疫活性細(xì)胞的殺傷；③病毒感染引起自身免疫病。第6章抗細(xì)菌與抗病毒免疫學(xué)生學(xué)習(xí)本章需要掌握的內(nèi)容：固有免疫（非特異性免疫）的組成、吞噬細(xì)胞吞噬作用的后果、胞外菌感染、胞內(nèi)菌感染及外毒素致病的免疫特點(diǎn)。干擾素的概念、抗病毒機(jī)制及應(yīng)用；抗病毒感染的特異性免疫：中和抗體的概念及作用機(jī)制?？辜?xì)菌免疫固有免疫又稱天然免疫,是在種系發(fā)育和進(jìn)化過程中建立起的防御病原微生物的功能。屏障結(jié)構(gòu)。皮膚和粘膜屏障是人體的皮膚及與外界相通腔道的粘膜層可通過多種方式發(fā)揮抗感染作用。（1）機(jī)械阻擋；（2）分泌殺菌物質(zhì)；（3）正常菌群的拮抗。血腦屏障，由軟腦膜、脈絡(luò)叢的腦毛細(xì)血管壁及包裹在壁外的星狀膠質(zhì)細(xì)胞形成的膠質(zhì)膜組成。血胎屏障，由母體子宮內(nèi)膜的基蛻膜和胎兒的絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞組成。吞噬作用的后果：病原菌被吞噬細(xì)胞吞噬后的結(jié)果，因細(xì)菌種類、毒力和機(jī)體免疫力不同，有完全吞噬和不完全吞噬兩種。（1）完全吞噬：病原菌被吞噬后被殺死、破壞，稱為完全吞噬。通?；撔郧蚓煌淌珊螅话阌?～10分鐘死亡，30～60分鐘被破壞。（2）不完全吞噬：病原菌雖被吞噬，但不能被殺死，稱為不完全吞噬。如結(jié)核分枝桿菌、布魯菌、傷寒沙門菌等胞內(nèi)寄生菌，在免疫力低下的機(jī)體中則出現(xiàn)不完全吞噬。不完全吞噬可使病原菌在吞噬細(xì)胞中受到保護(hù)，免受體液中的非特異性抗菌物質(zhì)、抗體及抗菌藥物的作用。有的甚至能在吞噬細(xì)胞內(nèi)生長繁殖，導(dǎo)致吞噬細(xì)胞死亡，或可通過游走的吞噬細(xì)胞經(jīng)淋巴液或血液擴(kuò)散到機(jī)體其它部位，引起病變?？拱饩腥久庖撸焊腥緳C(jī)體后，主要寄居于宿主細(xì)胞外的血液、淋巴液和組織液中的病原菌，稱為胞外菌。其致病機(jī)制主要是產(chǎn)生內(nèi)、外毒素等毒性物質(zhì)和引起炎癥反應(yīng)。（1）粘膜免疫系統(tǒng)的作用。（2）抗體的作用，①阻止細(xì)菌粘附；調(diào)理吞噬作用；②中和細(xì)菌外毒素。抗胞內(nèi)菌感染免疫：感染機(jī)體后，主要寄居于細(xì)胞內(nèi)的細(xì)菌稱為胞內(nèi)菌。（1）CD4+T細(xì)胞的作用；（2）CD8+T細(xì)胞的作用?？共《久庖邔W(xué)生學(xué)習(xí)本章需要掌握的內(nèi)容：干擾素（interferon，IFN）是由病毒或其他IFN誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)人或動(dòng)物細(xì)胞產(chǎn)生的一類糖蛋白，它具有抗病毒、抑制腫瘤及免疫調(diào)節(jié)等多種生物活性。病毒及其他細(xì)胞內(nèi)繁殖的微生物、細(xì)菌內(nèi)毒素、原蟲及人工合成的雙鏈RNA等均可誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生干擾素，其中以病毒和人工合成的雙鏈RNA誘生能力最強(qiáng)。受干擾素誘生劑作用的巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及體細(xì)胞均可產(chǎn)生干擾素。干擾素具有廣譜抗病毒活性，其作用特點(diǎn)是：①只能抑制病毒，而不能殺滅病毒；②作用具有相對(duì)的種屬特異性，一般在同種細(xì)胞中的活性大于異種細(xì)胞；③對(duì)不同病毒的作用效果不同。由人類細(xì)胞誘生的干擾素根據(jù)其抗原性不同分為IFN-α、IFN-β、IFN-γ三種。IFN-α主要由人白細(xì)胞產(chǎn)生，IFN-β主要由人成纖維細(xì)胞產(chǎn)生，二者屬?型干擾素，它們的抗病毒作用強(qiáng)于免疫調(diào)節(jié)和抑制腫瘤作用。IFN-γ由T細(xì)胞產(chǎn)生，屬Ⅱ型干擾素，又稱免疫干擾素，其免疫調(diào)節(jié)和抑制腫瘤作用強(qiáng)于抗病毒作用。干擾素的誘生是宿主細(xì)胞在病毒或誘生劑刺激下，編碼IFN基因被激活而表達(dá)產(chǎn)生。產(chǎn)生的干擾素并不是直接發(fā)揮抗病毒作用，而是通過與鄰近細(xì)胞上的干擾素受體結(jié)合，經(jīng)受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，激活抗病毒蛋白基因，使細(xì)胞合成多種抗病毒蛋白（antiviralproteins,AVP），由抗病毒蛋白阻止病毒的合成而發(fā)揮抗病毒作用）。抗病毒蛋白主要有2'-5'腺嘌呤核苷合成酶（2'-5'A合成酶）和蛋白激酶（PKR）等，這些酶通過降解mRNA、抑制多肽鏈的延伸等阻斷病毒蛋白的合成。①2'-5'A合成酶途徑：2'-5'A合成酶是一種依賴雙鏈RNA（dsRNA）的酶，被激活后使ATP多聚化，形成2'-5'A，2'-5'A再激活RNA酶L或F，活化的RNA酶則可切斷病毒mRNA。②PKR途徑：PKR也是依賴dsRNA的酶，它可磷酸化蛋白合成起始因子的α亞基（elF-2a），從而抑制病毒蛋白質(zhì)的合成。病毒抗原一般具有較強(qiáng)的免疫原性，可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生有效的體液免疫和細(xì)胞免疫。細(xì)胞外的病毒經(jīng)單核吞噬細(xì)胞吞噬處理后，通過MHCⅡ類途徑提呈病毒抗原，被CD4+T細(xì)胞識(shí)別，啟動(dòng)Th細(xì)胞應(yīng)答，產(chǎn)生IFN-γ、TNF-α和IL-2等細(xì)胞因子，并輔助B細(xì)胞產(chǎn)生抗體。病毒在感染細(xì)胞內(nèi)合成的病毒蛋白通過MHCⅠ類途徑提呈病毒抗原，被CD8+T細(xì)胞識(shí)別，啟動(dòng)CTL應(yīng)答。包膜病毒可通過包膜蛋白、無包膜病毒可通過衣殼蛋白與易感細(xì)胞上相應(yīng)的受體結(jié)合而吸附于細(xì)胞?？贵w與這些病毒結(jié)構(gòu)蛋白抗原結(jié)合后，可阻斷病毒感染的發(fā)生。這種能與病毒結(jié)合，消除病毒感染能力的抗體稱為中和抗體（neutralizingantibody），如流感病毒、乙腦病毒等的血凝抑制抗體。中和抗體的作用機(jī)制包括：①改變病毒表面構(gòu)型，或與吸附于易感細(xì)胞受體的病毒表位結(jié)合，從而阻止病毒吸附和侵入易感細(xì)胞；②與病毒形成免疫復(fù)合物易于被巨噬細(xì)胞吞噬和清除；③與無胞膜病毒結(jié)合并將其覆蓋，可阻斷病毒在進(jìn)入細(xì)胞時(shí)脫殼，抑制病毒的復(fù)制環(huán)節(jié)；④與胞膜病毒表面抗原結(jié)合后，通過激活補(bǔ)體使病毒裂解。中和抗體是針對(duì)病毒表面的、與病毒入侵有關(guān)的抗原產(chǎn)生的抗體，具有保護(hù)作用，是機(jī)體滅活游離病毒的主要抗體。而有些抗體是針對(duì)病毒內(nèi)部抗原如核蛋白、復(fù)制酶等的抗體，或針對(duì)與病毒入侵易感細(xì)胞無關(guān)的表面抗原如具有細(xì)胞融合功能的酶的抗體，這些抗體稱為非中和抗體，沒有保護(hù)作用，但有些具有診斷價(jià)值，如補(bǔ)體結(jié)合抗體抗體對(duì)病毒感染細(xì)胞的作用主要有以下方式：①胞膜病毒感染細(xì)胞后，細(xì)胞膜上可出現(xiàn)病毒編碼的蛋白，抗體與其結(jié)合后，在補(bǔ)體的參與下，可使細(xì)胞裂解或起調(diào)理作用，促進(jìn)巨噬細(xì)胞吞噬病毒感染細(xì)胞；②抗體與病毒感染細(xì)胞結(jié)合，通過NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及中性粒細(xì)胞發(fā)生ADCC作用第7章細(xì)菌與病毒感染的微生物學(xué)檢查方法學(xué)生學(xué)習(xí)本章需要掌握的內(nèi)容：細(xì)菌學(xué)診斷：標(biāo)本的采集和送檢原則。病原菌檢驗(yàn)程序。細(xì)菌感染的血清學(xué)診斷血清學(xué)診斷原則及常用方法。病毒感染檢驗(yàn)程序，標(biāo)本的采集和送檢要求，病毒分離培養(yǎng)方法；病毒感染的血清學(xué)診斷原則及常用方法；病毒感染的快速診斷方法種類。微生物感染的病原學(xué)實(shí)驗(yàn)室診斷方法大致包括：①借助顯微鏡對(duì)標(biāo)本或組織中的病原體的形態(tài)學(xué)檢查；②病原體的分離培養(yǎng)和鑒定；③用免疫學(xué)方法檢測(cè)病原體的抗原；④用分子生物學(xué)方法對(duì)病原體特異性基因序列的檢測(cè)；⑤用免疫學(xué)技術(shù)檢測(cè)患者血清中特異性抗體。標(biāo)本的采集與送檢是微生物學(xué)檢查的第一步，方法的正確與否直接影響病原體的檢出率，因此應(yīng)注意下述原則：（1）采集標(biāo)本時(shí)應(yīng)無菌操作，盡量避免污染；盛放標(biāo)本的容器和培養(yǎng)基應(yīng)預(yù)先進(jìn)行無菌處理并貼好標(biāo)簽。（2）應(yīng)選擇感染部位或病變明顯的部位采集標(biāo)本，避免周圍組織、器官或分泌物中的雜菌污染。（3）根據(jù)病原體在感染性疾病的不同時(shí)期的體內(nèi)分布和排出部位選擇性采集適宜標(biāo)本。（4）對(duì)于懷疑細(xì)菌感染的標(biāo)本，盡量在抗生素使用前采集，特別是對(duì)抗生素敏感的病原體。而且用于病毒分離培養(yǎng)的標(biāo)本應(yīng)加入抗生素，以避免在病毒培養(yǎng)過程中的細(xì)菌污染。（5）檢查病原體的特異性IgG抗體時(shí)，應(yīng)采集急性期和恢復(fù)期雙份血清，只有當(dāng)恢復(fù)期血清抗體效價(jià)比急性期的效價(jià)明顯升高達(dá)4倍或以上時(shí)，方有診斷價(jià)值。檢測(cè)血清特異性抗體的標(biāo)本應(yīng)保存在-20℃細(xì)菌感染的微生物學(xué)檢查方法根據(jù)臨床上診斷和治療的需要選擇不同的標(biāo)本和檢查方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷，從而鑒定出感染的病原菌。實(shí)驗(yàn)室診斷包括細(xì)菌學(xué)診斷，即檢測(cè)及鑒定病原菌；檢測(cè)病原菌成分（抗原和核酸）以及檢測(cè)患者血清中特異性抗體。形態(tài)學(xué)檢查：細(xì)菌個(gè)體微小，必須借助顯微鏡對(duì)其形態(tài)和排列、結(jié)構(gòu)、染色性及運(yùn)動(dòng)性進(jìn)行觀察，為細(xì)菌感染的初步診斷和進(jìn)一步對(duì)細(xì)菌分類與鑒定提供參考。（1）普通光學(xué)顯微鏡檢查法：①革蘭染色法；②抗酸染色法；③負(fù)染色法。（2）暗視野顯微鏡檢查法。（3）熒光顯微鏡檢查法。病原菌的分離培養(yǎng)：原則上應(yīng)對(duì)所有送檢標(biāo)本做分離培養(yǎng)，以便獲得單個(gè)菌落后進(jìn)行純培養(yǎng)，從而對(duì)細(xì)菌做進(jìn)一步的生物學(xué)、免疫學(xué)、致病性或細(xì)菌的藥物敏感性等方面的檢查，最終做出確切的報(bào)告。生化試驗(yàn)：在得到細(xì)菌純培養(yǎng)物后，用糖發(fā)酵試驗(yàn)、吲哚試驗(yàn)、硝酸鹽還原試驗(yàn)等對(duì)細(xì)菌的酶系統(tǒng)和其代謝產(chǎn)物的檢查，是鑒別細(xì)菌的重要方法之一。血清學(xué)鑒定：利用含已知的特異性抗體的免疫血清，如志賀菌屬、沙門菌屬的單價(jià)和多價(jià)診斷血清，檢測(cè)未知細(xì)菌的抗原，不僅能對(duì)分離培養(yǎng)的細(xì)菌進(jìn)行種的鑒定，還可以進(jìn)一步對(duì)細(xì)菌進(jìn)行群和型的鑒別。常用方法是玻片凝集試驗(yàn)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：一般不作為臨床標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)常規(guī)檢查技術(shù)，但對(duì)測(cè)定細(xì)菌的毒力或致病性有重要意義，故可選敏感動(dòng)物用于疑難的病原菌分離或微生物學(xué)的研究。毒力檢測(cè)：細(xì)菌毒力依其侵襲力和產(chǎn)生毒素不同而強(qiáng)弱不一，可經(jīng)灌胃、腹腔、靜脈或皮下注射等途徑在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)測(cè)定，一般以半數(shù)致死量（LD50）或半數(shù)感染量（ID50）來表示。藥物敏感試驗(yàn)：不同病原菌對(duì)抗生素的敏感性不同，即使同一種細(xì)菌的不同菌株對(duì)抗生素的敏感性也存在差別。藥物敏感試驗(yàn)（簡稱藥敏試驗(yàn)）是測(cè)定抗生素或其他抗微生物制劑在體外抑制細(xì)菌生長的能力。這種能力可以通過擴(kuò)散法或稀釋法來測(cè)定。檢測(cè)病原菌成分?？乖臋z測(cè)：多種免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)可用于細(xì)菌抗原的檢測(cè)。其原理是用已知的特異性抗體檢測(cè)未知的細(xì)菌抗原成分。核酸的檢測(cè)：能有助于感染性疾病的確診，還能確定病原菌的基因型，使微生物學(xué)的檢測(cè)技術(shù)從細(xì)菌生物學(xué)檢查進(jìn)展到細(xì)菌分子生物學(xué)的鑒定。抗體的檢測(cè)。病原菌侵入機(jī)體后，其抗原性物質(zhì)能刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體。存在于血液或其他體液中的特異性抗體，常隨病程的進(jìn)展發(fā)生變化。用已知細(xì)菌或其抗原檢測(cè)病人體內(nèi)是否產(chǎn)生了相應(yīng)的特異性抗體及其量的多少，可作為某些病原菌感染的輔助診斷。因需采集病人的外周血分離血清進(jìn)行此類試驗(yàn)，故稱之為血清學(xué)診斷（serologicaldiagnosis）。常用的血清學(xué)試驗(yàn)包括：玻片或試管凝集試驗(yàn)、沉淀試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）等，可根據(jù)病原菌的種類加以選擇。血清學(xué)診斷一般適用于病程較長和抗原性較強(qiáng)的病原菌引起的感染。病毒感染的微生物學(xué)檢查方法經(jīng)典的病毒學(xué)檢查方法包括病毒分離鑒定和血清學(xué)診斷（病毒特異性抗體的檢測(cè)）。由于分子病毒學(xué)和現(xiàn)代化實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展，近年來又建立了許多診斷方法，包括電鏡直接觀察形態(tài)、檢查病毒抗原、核酸等，使得病毒感染的快速診斷成為可能。形態(tài)學(xué)檢查。（1）電子顯微鏡，能觀察病毒顆粒的形態(tài)和大??；（2）光學(xué)顯微鏡，能觀察病毒感染細(xì)胞內(nèi)的病理變化，如包涵體或多核巨細(xì)胞等。病毒分離培養(yǎng)的方法。（1）動(dòng)物接種是最原始的分離病毒的方法，現(xiàn)已逐漸被細(xì)胞培養(yǎng)所代替。（2）雞胚培養(yǎng)：不同日齡（9～14日）的雞胚經(jīng)不同的接種途徑可用于不同病毒的培養(yǎng)。雞胚接種已經(jīng)少用，但仍然是培養(yǎng)流感病毒最敏感、特異的方法。（3）組織培養(yǎng)，包括三種類型：器官培養(yǎng)、組織培養(yǎng)和細(xì)胞培養(yǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)又稱單層細(xì)胞培養(yǎng)，它不但是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中的重要實(shí)驗(yàn)手段，也是病毒分離、鑒定以及疫苗制備過程中的常用技術(shù)，在病毒學(xué)發(fā)展過程中發(fā)揮了相當(dāng)重要的作用。用于病毒分離培養(yǎng)的細(xì)胞主要有原代細(xì)胞、二倍體細(xì)胞和傳代細(xì)胞系。病毒在培養(yǎng)細(xì)胞中增殖的鑒定指標(biāo)：（1）細(xì)胞病變（cytopathy）；（2）紅細(xì)胞吸附（hemadsorption）；（3）紅細(xì)胞凝集（hemagglutination）；（4）病毒干擾作用（viralinterference）；（5）中和試驗(yàn)（neutralizationtest，NT）；（6）空斑形成試驗(yàn)（plaqueformation）。病毒成分的檢測(cè)：（1）病毒抗原的檢測(cè)；（2）病毒核酸的檢測(cè)。病毒抗體的檢測(cè)：（1）中和試驗(yàn)（NT）；（2）血凝抑制試驗(yàn)（HI）；（3）補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CF）；（4）ELISA法（ELISA）；（5）蛋白印跡技術(shù)（Westernblot）。第8章細(xì)菌與病毒感染的特異性防治學(xué)生學(xué)習(xí)本章需要掌握的內(nèi)容：適應(yīng)性免疫（特異性免疫）的獲得方式；人工免疫的概念。細(xì)菌、病毒感染防治用人工自動(dòng)免疫及人工被動(dòng)免疫制劑種類及用途。對(duì)病原微生物（細(xì)菌、病毒等）感染的預(yù)防原則主要是使機(jī)體獲得特異性免疫力。特異性免疫力的產(chǎn)生是預(yù)防、控制感染或傳染病的主要方法，特異性免疫可分為自然免疫和人工免疫，兩者又可根據(jù)產(chǎn)生的方式不同，進(jìn)一步分為主動(dòng)免疫（activeimmunization）和被動(dòng)免疫（passiveimmunization）。表8-1獲得性免疫的產(chǎn)生方式主動(dòng)免疫自然主動(dòng)免疫：患病、隱性感染人工主動(dòng)免疫：接種疫苗、類毒素等被動(dòng)免疫自然被動(dòng)免疫：通過胎盤、初乳人工被動(dòng)免疫：注射抗毒素、免疫球蛋白、免疫細(xì)胞、轉(zhuǎn)移因子人工主動(dòng)免疫常用的生物制品：（1）疫苗（vaccine）是用各種微生物制備的用于預(yù)防相應(yīng)傳染病的抗原性生物制品。①減毒活疫苗（attenuatedlivevaccine）；②滅活疫苗（inactivatedvaccine）；③亞單位疫苗（subunitvaccine）；④基因工程疫苗（geneengineeredvaccine）；⑤核酸疫苗（nucleicacidvaccine）。（2）類毒素（toxoid），細(xì)菌外毒素經(jīng)0.4％甲醛液處理后，其毒性消失而仍保留抗原性的生物制品，即為類毒素。人工被動(dòng)免疫常用的生物制品，（1）抗毒素（antitoxin）；（2）抗菌血清（antiserum）；（3）免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）；（4）細(xì)胞免疫制劑。病毒感染的特異性預(yù)防。人工主動(dòng)免疫預(yù)防，（1）減毒活疫苗；（2）滅活疫苗；（3）亞單位疫苗；（4）基因工程疫苗；①基因工程亞單位疫苗（geneengineeredsubunitvaccine）；②基因工程載體疫苗（geneengineeredvectoredvaccine）；③基因缺失活疫苗（genedeletedlivevaccine）；④合成肽疫苗（syntheticpeptidevaccine）。人工被動(dòng)免疫預(yù)防，（1）丙種球蛋白(gammaglobulin)；（2）特異性免疫球蛋白（specificimmunoglobulin）。第9章真菌概述學(xué)生學(xué)習(xí)本章需要掌握的內(nèi)容：真菌概念及其分類、形態(tài)與結(jié)構(gòu)、培養(yǎng)特性及致病性。真菌（fungus）為真核細(xì)胞型微生物，其主要特征是具有典型的細(xì)胞核及完善的細(xì)胞器，不含葉綠素，無根、莖、葉的分化，以寄生或腐生方式生存，能進(jìn)行無性或有性繁殖，大多數(shù)為多細(xì)胞，少數(shù)為單細(xì)胞。按形態(tài)結(jié)構(gòu)真菌可分為單細(xì)胞和多細(xì)胞真菌兩類。單細(xì)胞真菌單細(xì)胞真菌稱為酵母菌（yeast），呈圓形或卵圓形，以出芽方式繁殖，芽生孢子成熟后脫落成獨(dú)立的個(gè)體。能引起人類疾病的有新生隱球菌和白假絲酵母菌等。多細(xì)胞真菌多細(xì)胞真菌稱為霉菌或絲狀菌，由菌絲（hypha）和孢子（spore）組成，菌絲與孢子交織在一起。各種霉菌的菌絲和孢子形態(tài)不同，是鑒別真菌的重要標(biāo)志。菌絲呈管狀，其長度隨不同生長條件而異。菌絲是孢子以出芽方式繁殖時(shí)形成的。在適宜的環(huán)境條件下由孢子長出芽管，逐漸延長成菌絲，菌絲又可長出許多分枝，并交織成團(tuán)，成為菌絲體。真菌的結(jié)構(gòu)真菌除具有一般真核細(xì)胞的結(jié)構(gòu)外，尚有些特殊的結(jié)構(gòu)，如具有由特殊成分和結(jié)構(gòu)組成的細(xì)胞壁及有特殊的隔膜等。1.細(xì)胞壁外的成分:部分酵母菌細(xì)胞壁外有一層低電子密度的粘液，其與真菌的毒力和致病性密切相關(guān)。2.細(xì)胞壁位于細(xì)胞膜外層，具有保持營養(yǎng)物質(zhì)、氣體和酶自由通透及避免細(xì)胞受外界高滲透壓的作用。細(xì)胞壁內(nèi)的某些化學(xué)成分還與真菌的形態(tài)特征有關(guān)。真菌細(xì)胞壁的主要成分為多糖，可占細(xì)胞干重的80%～90%，此外還有蛋白質(zhì)、脂質(zhì)及無機(jī)鹽類。多糖以不溶性多糖晶體和高分子多糖復(fù)合物兩種形式存在，前者以微細(xì)纖維形式構(gòu)成細(xì)胞壁的骨架，后者填入骨架縫隙中，構(gòu)成細(xì)胞壁基質(zhì)的組成成分。（1）骨架：由微細(xì)纖維組成的骨架以幾丁質(zhì)和葡聚糖為主，這是真菌與其它高等植物不同的特征之一。絲狀菌骨架組成以幾丁質(zhì)（N-乙酰葡聚糖胺的均聚體）的含量最高，其作用與菌絲生長和芽管形成有關(guān)。酵母菌的骨架組成則以葡聚糖的含量最高，是維持真菌細(xì)胞外形堅(jiān)固性的分子基礎(chǔ)。（2）基質(zhì)：由多糖、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)及無機(jī)鹽組成。真菌細(xì)胞壁基質(zhì)中的多糖種類很多，如葡聚糖、葡糖胺、葡萄糖、幾丁質(zhì)和半乳糖等。多糖含量在同一真菌細(xì)胞壁的不同發(fā)育階段明顯不同，其含量直接影響真菌的形態(tài)變化。蛋白質(zhì)可單獨(dú)或與多糖組成糖蛋白存在。細(xì)胞壁中的糖蛋白具有酶活性，其中以水解酶居多，可分解基質(zhì)，使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)易于進(jìn)入胞內(nèi)，糖蛋白也是細(xì)胞壁抗原的分子基礎(chǔ)?；|(zhì)中的糖蛋白以甘露聚糖蛋白復(fù)合物的含量為最高。脂質(zhì)中以磷質(zhì)為主，脂質(zhì)的存在可保持水分不被蒸發(fā)。無機(jī)鹽以磷為主，另含少量鈣和鎂元素。真菌菌絲的細(xì)胞壁由四層結(jié)構(gòu)組成，由外向內(nèi)依次為無定形葡聚糖層、糖蛋白形成的粗糙網(wǎng)、蛋白質(zhì)層和幾丁質(zhì)微細(xì)纖維層。3.隔膜位于菌絲或細(xì)胞間，不同屬真菌的隔膜各異，因此可作為真菌分類的依據(jù)之一。低等真菌的隔膜完整，隨真菌的進(jìn)化，隔膜出現(xiàn)大小不等的小孔，如皮膚絲狀菌、組織胞漿菌和球孢子菌的菌絲隔膜具有中心小孔并附有球形的間隔小體，小孔與間隔小體可調(diào)節(jié)兩側(cè)細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)速度，并在菌絲受損后可堵住隔膜小孔，防止細(xì)胞液的流失，因此隔膜也是防御菌絲受損的一種保護(hù)性結(jié)構(gòu)。4.其他結(jié)構(gòu):真菌的細(xì)胞膜不同于其他生物細(xì)胞膜的主要特征是排列成雙層結(jié)構(gòu)的磷脂為不恒定的微團(tuán)結(jié)構(gòu)，其間有大量的麥角固醇類化合物，易與多烯族抗生素結(jié)合，故為抗真菌藥物作用的靶分子。真菌細(xì)胞核與一般真核細(xì)胞不同的特點(diǎn)是核小而圓，數(shù)目不等，一個(gè)細(xì)胞或每個(gè)菌絲節(jié)段中可有1～2個(gè)，多者達(dá)20～30個(gè)。且細(xì)胞分裂期時(shí)，真菌的核仁與核膜仍保留，此點(diǎn)也與一般真核生物明顯不同。在真菌細(xì)胞內(nèi)還具有線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等多種細(xì)胞器。培養(yǎng)條件真菌的營養(yǎng)要求不高，實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)真菌常用沙保培養(yǎng)基（Sabouraudmedium），其成分簡單，主要含葡萄糖、蛋白胨和瓊脂。雖然真菌在一般的細(xì)菌培養(yǎng)基上都能生長，但不同培養(yǎng)基上形成的菌落形態(tài)差異很大，不易鑒定。感染性疾病的控制學(xué)生學(xué)習(xí)本章需要掌握的內(nèi)容：消毒、滅菌、防腐、抑菌和無菌的概念；熱力滅菌法的種類和應(yīng)用；射線滅菌法的原理和應(yīng)用。醫(yī)院感染的來源及控制。常用化學(xué)消毒劑的種類、濃度和應(yīng)用。細(xì)菌的耐藥性。常用以下術(shù)語表示物理或化學(xué)方法對(duì)微生物的殺滅程度。滅菌（sterilization）指殺滅或去除物體上所有微生物的方法，包括抵抗力極強(qiáng)的細(xì)菌芽胞。消毒（disinfection）指殺死物體上病原微生物的方法，芽胞或非病原微生物可能仍存活。用以消毒的藥品稱為消毒劑（disinfectant）。防腐（antisepsis）防止或抑制體外細(xì)菌生長繁殖的方法。細(xì)菌一般不死亡。某些消毒劑在高濃度時(shí)有消毒作用，低濃度時(shí)則是防腐劑。抑菌（bacteriostasis）抑制細(xì)菌和真菌的生長繁殖的方法。常用的抑菌劑（bacteriostat）是一些抗生素，能可逆性抑制細(xì)菌的繁殖，但不直接殺死細(xì)菌。無菌（asepsis）指沒有活菌的意思。防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù)，稱為無菌操作。外科手術(shù)必須無菌操作以防感染發(fā)生。熱力滅菌法是利用熱能去變性蛋白質(zhì)或核酸、破壞細(xì)胞膜或胞膜來實(shí)現(xiàn)殺死微生物。分干熱滅菌和濕熱滅菌兩大類。細(xì)菌的繁殖體在干燥狀態(tài)下，80℃～100℃1小時(shí)可被殺死；芽胞需要加熱至160℃～170℃2小時(shí)才殺滅。干熱滅菌的方法有①焚燒②燒灼③干烤④紅外線（infrared）⑤微波（microwave）。濕熱滅菌法可在較低的溫度下達(dá)到與干熱法相同的滅菌效果，因?yàn)椋孩贊駸嶂械鞍孜账?，更易凝固變性；②水分子的穿透力比空氣大，更易均勻傳遞熱能；③蒸汽有潛熱存在，每1克水由氣態(tài)變成液態(tài)可釋放出529卡熱能，可迅速提高物體的溫度。常用的濕熱滅菌法有：（1）巴氏消毒法（pasteurization）方法是加熱61.1℃～62.8℃30分鐘，或者72℃15秒，可殺死乳制品的鏈球菌、沙門菌、布魯菌等病原菌，但仍保持其中不耐熱成分不被破壞，用于乳制品消毒。（2）煮沸法：在1個(gè)大氣壓下水的沸點(diǎn)為100℃，細(xì)菌繁殖體5分鐘能被殺死，芽胞需1～2小時(shí)才被殺滅。如果水中加入2%碳酸氫鈉，沸點(diǎn)為105℃，可促進(jìn)芽胞殺滅，也防止金屬器皿生銹，適合高原地區(qū)。常用于食具、刀剪、注射器的消毒。（3）流通蒸汽消毒法：在一個(gè)大氣壓下利用100℃的水蒸汽進(jìn)行消毒。器械是Arnold消毒器或普通蒸籠。15～30分鐘可殺滅細(xì)菌繁殖體，但不保證殺滅芽胞。（4）間歇滅菌法（fractionalsterilization）：利用反復(fù)多次的流通蒸汽加熱，殺滅所有微生物，包括芽胞。方法同流通蒸汽滅菌法，但要重復(fù)3次以上，每次間歇是將要滅菌的物體放到37℃孵箱過夜，目的是使芽胞發(fā)育成繁殖體。若被滅菌物不耐100℃高溫，可將溫度降至75℃～80℃，加熱延長為30～60分鐘，并增加次數(shù)。適用于不耐高熱的含糖或牛奶的培養(yǎng)基。（5）高壓蒸汽滅菌法（autoclaving射線滅菌法常用的射線是紫外線和電離輻射。①紫外線（ultraviolet，UV）：②電離輻射：包括γ射線、X射線和加速電子等，對(duì)各種微生物均有致死作用，細(xì)菌繁殖體對(duì)射線比芽胞要敏感。過濾除菌法（filtration）是用物理阻留的方法將液體或空氣的細(xì)菌除去，以達(dá)到無菌目的。所用的器具是含有微小孔徑的濾菌器（filter）。主要用于血清、毒素、抗生素等不耐熱生物制品及空氣的除菌。表10-1常用消毒劑的種類、作用機(jī)制和用途種類作用機(jī)制名稱用途重金屬鹽類氧化作用、蛋白質(zhì)變性與沉淀、滅活酶類0.05%～0.1%升汞非金屬器皿消毒。不能與碘酒同時(shí)使用2%紅汞皮膚粘膜小創(chuàng)傷消毒。不能與碘酒同時(shí)使用0.01%～0.1%硫柳汞生物制品防腐；皮膚、手術(shù)部位消毒1%硝酸銀新生兒滴眼，預(yù)防淋球菌感染。有腐蝕性氧化劑氧化作用、蛋白質(zhì)沉淀0.1%高錳酸鉀皮膚尿道消毒，疏菜水果消毒。需新鮮配制3%過氧化氫口腔粘膜消毒，沖洗傷口，防止厭氧菌感染0.1%～0.5%過氧乙酸塑料、玻璃、人造纖維、皮毛、食具消毒。原液有腐蝕性0.2ppm～0.5ppm氯飲水及游泳池消毒。對(duì)金屬有腐蝕性10%～20%漂白粉地面、廁所及排泄物消毒，飲水消毒0.2%～0.5%氯胺空氣及物品表面消毒（噴霧），浸泡衣服。需新鮮配制2.5%碘液皮膚消毒。不能與紅汞同用，刺激性大，涂后用酒精脫碘1%碘伏主要用于皮膚粘膜消毒烷化劑菌體蛋白質(zhì)及核酸烷基化10%甲醛浸泡物體表面消毒，空氣消毒。揮發(fā)慢，刺激性強(qiáng)50mg/L環(huán)氧乙烷消毒手術(shù)器械、敷料2%戊二醛精密儀器、內(nèi)窺鏡消毒醇類蛋白質(zhì)變性、干擾代謝70%～75%乙醇皮膚、體溫計(jì)消毒。易揮發(fā)，有刺激性，不宜用于粘膜及創(chuàng)傷酚類變性蛋白質(zhì)、損傷細(xì)胞膜、滅活酶類3%～5%石炭酸、2%來蘇地面、家具、器皿的表面消毒及排泄物消毒。來蘇也用于手和皮膚消毒。石炭酸腐蝕性強(qiáng)，殺菌力弱，現(xiàn)少用0.02%～0.05%洗必泰術(shù)前洗手，腹腔、膀胱、陰道沖洗。不能與升汞同用表面活性劑損傷細(xì)胞膜、滅活氧化酶、蛋白質(zhì)變性0.05%～0.1%新潔爾滅手術(shù)前洗手、皮膚粘膜消毒，器械浸泡消毒。遇肥皂或其他合成洗滌劑時(shí)作用減弱0.05%～0.1%杜滅芬皮膚傷口沖洗，金屬器械、棉織品、塑料、橡皮制品消毒。遇肥皂或其他合成洗滌劑時(shí)作用減弱染料抑制細(xì)菌繁殖、干擾氧化過程2%～4%龍膽紫淺表創(chuàng)傷消毒，對(duì)葡萄球菌作用強(qiáng)酸堿類破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞壁、凝固蛋白質(zhì)醋酸，5ml/m2～10ml/m2加等量水蒸發(fā)消毒房間空氣，控制呼吸道感染生石灰，1:4至1:8加水配成糊狀消毒排泄物及地面。新鮮配制，有強(qiáng)腐蝕性細(xì)菌的耐藥性（drugresistance）從遺傳學(xué)的角度，有些耐藥性是由細(xì)菌遺傳物質(zhì)編碼，屬遺傳性耐藥性。有些耐藥現(xiàn)象僅僅是與細(xì)菌暫時(shí)的生理狀態(tài)和環(huán)境有關(guān)，為非遺傳性耐藥。1.非遺傳性耐藥靜止?fàn)顟B(tài)的細(xì)菌對(duì)藥物通常不敏感，如結(jié)核分枝桿菌在結(jié)核病灶中可以存活數(shù)年但不繁殖，此時(shí)抗結(jié)核治療效果不好，所以抗結(jié)核治療需要長時(shí)間用藥。傷寒沙門菌、嗜肺軍團(tuán)菌等胞內(nèi)寄生菌可寄生于巨噬細(xì)胞內(nèi)，氨基甙類藥物不能進(jìn)入巨噬細(xì)胞，故對(duì)此類細(xì)菌無效。2.遺傳性耐藥，大多數(shù)耐藥是細(xì)菌遺傳物質(zhì)改變和藥物連續(xù)篩選的結(jié)果。表10-2細(xì)菌耐藥機(jī)制耐藥機(jī)制典型舉例受影響的藥物滅活藥物－內(nèi)酰胺酶破壞－內(nèi)酰胺環(huán)－內(nèi)酰胺類抗生素（青霉素、頭孢霉素）修飾細(xì)菌的藥物靶點(diǎn)1．青霉素結(jié)合蛋白基因突變2．核糖體30S亞基突變3．肽聚糖的乳酸被丙氨酸取代4．DNA促旋酶（gyrase）突變5．RNA聚合酶突變6．過氧化物酶突變青霉素氨基甙類，例如鏈霉素萬古霉素奎諾酮類利福平異煙肼降低藥物的透透性孔蛋白突變青霉素、氨基甙類等增強(qiáng)藥物外排多藥耐藥泵四環(huán)素、磺胺類細(xì)菌的耐藥機(jī)制：（1）產(chǎn)生鈍化酶；（2）細(xì)胞通透性的改變；（3）靶位結(jié)構(gòu)的改變；（4）建立代謝旁路；（5）代謝酶分子的改變。細(xì)菌耐藥的遺傳物質(zhì)：染色體、質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座子。（1）染色體：染色體突變的頻率很低（10-12～10-7），因此臨床上因染色體突變而產(chǎn)生的耐藥發(fā)生機(jī)率極低。（2）質(zhì)粒：攜帶耐藥基因的質(zhì)粒稱為耐藥質(zhì)粒（resistanceplasmid，R質(zhì)粒）。質(zhì)粒編碼的耐藥性對(duì)臨床藥物治療尤其重要，因?yàn)椋孩倌退庂|(zhì)粒普遍存在于各種細(xì)菌，尤其是革蘭陰性桿菌；②質(zhì)粒編碼的耐藥性通常是多重耐藥（multipledrugresistance，MDR）；③質(zhì)粒可通過接合在菌株間高頻傳遞。（3）轉(zhuǎn)座子（transposon，Tn）：Tn是可在染色體內(nèi)和質(zhì)粒內(nèi)或者染色體與質(zhì)粒間轉(zhuǎn)移的小DNA片段。典型的耐藥轉(zhuǎn)座子含3個(gè)基因：①轉(zhuǎn)座酶基因：編碼的轉(zhuǎn)座酶負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)座子DNA與染色體或質(zhì)粒DNA分子的切割和連接；②轉(zhuǎn)座酶抑制基因：編碼產(chǎn)物抑制轉(zhuǎn)座酶基因的表達(dá)，保證轉(zhuǎn)座子位置的相對(duì)穩(wěn)定；③耐藥基因：編碼破壞藥物分子的酶類。細(xì)菌耐藥的控制是臨床抗菌藥物治療的關(guān)鍵問題。通過以下途徑可最大限度防止耐藥發(fā)生：①維持高水平藥物濃度，在最短時(shí)間內(nèi)清除原始感染細(xì)菌；②聯(lián)合使用兩種沒有交叉耐藥的藥物，避免耐藥株被篩選出來；③避免濫用藥物，防止細(xì)菌過多接觸該藥。醫(yī)院感染（hospitalinfection）也稱醫(yī)院內(nèi)感染，或醫(yī)院獲得性感染是指由醫(yī)院的病原生物或其毒素導(dǎo)致的局部或全身感染性疾病，感染對(duì)象是一切在醫(yī)院活動(dòng)的人群，包括患者、患者陪護(hù)人員、醫(yī)院職工等。感染類型醫(yī)院感染以內(nèi)源性感染為主。導(dǎo)致醫(yī)院感染的大多數(shù)微生物在人群中普遍存在，以寄生于機(jī)體的微生物群引起的條件感染居多。預(yù)防和控制醫(yī)院感染涉及到醫(yī)院設(shè)施、醫(yī)療、管理等各方面。措施應(yīng)當(dāng)包括以下幾方面：1、消毒滅菌和無菌操作；2、隔離；3、監(jiān)測(cè)；4、合理使用抗生素；4、建立醫(yī)院感染控制機(jī)構(gòu)和規(guī)章：①監(jiān)測(cè)和控制醫(yī)院感染的發(fā)生；②監(jiān)測(cè)醫(yī)院衛(wèi)生狀況；③提供疫情報(bào)告和建議；④提供醫(yī)院感染教育。第11章葡萄球菌屬學(xué)生學(xué)習(xí)本章需要掌握的內(nèi)容：葡萄球菌屬形態(tài)、染色和分類，致病物質(zhì)及所致疾病；致病性葡萄球菌的鑒定要點(diǎn)。葡萄球菌屬（staphylococcus）細(xì)菌，是一群革蘭染色陽性球菌，通常排列成葡萄串狀。葡萄球菌屬至少有30個(gè)種。臨床上較重要的葡萄球菌根據(jù)其色素、生化反應(yīng)等不同可分為金黃色葡萄球菌（Staph.aureus）、表皮葡萄球菌（Staph.epidermidis）和腐生葡萄球菌（Staph.saprophyticus）三種。金黃色葡萄球菌為凝固酶陽性菌；表皮、腐生葡萄球菌為凝固酶陰性菌。金黃色葡萄球菌是人類重要的致病菌。金黃色葡萄球菌營養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基中，37℃生長良好。無鞭毛，無芽胞，一般不形成莢膜。需氧或兼性厭氧。在普通瓊脂平板上孵育24～48小時(shí)后，形成圓形、隆起、表面光滑、濕潤、邊緣整齊、不透明的菌落。直徑1～2mm。菌落初為白色，隨時(shí)間延長，產(chǎn)生的色素使菌落呈現(xiàn)為金黃色。色素為脂溶性，僅菌落呈色。在血瓊脂平板上菌落周圍形成完全透明的溶血環(huán)（β致病性金葡菌可分解甘露醇，非致病性葡萄球菌菌株無此作用?？乖瓨?gòu)造復(fù)雜，其中葡萄球菌A蛋白（staphylococcalproteinA，SPA）是該菌較重要的一類表面抗原。SPA是絕大多數(shù)金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁的一種表面蛋白,可與IgG分子的Fc段發(fā)生非特異性結(jié)合。二者結(jié)合后，IgG的Fab段仍然可以與特異性抗原結(jié)合，在此基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)的協(xié)同凝集試驗(yàn)已廣泛應(yīng)用于多種微生物抗原的檢測(cè)。SPA與IgG結(jié)合后的復(fù)合物具有抗吞噬等多種生物學(xué)活性。金黃色葡萄球菌對(duì)熱和干燥的抵抗力較一般無芽胞細(xì)菌強(qiáng)。本菌易產(chǎn)生耐藥性。金葡菌侵襲力強(qiáng)，產(chǎn)生多種毒素及胞外酶，主要包括凝固酶、葡萄球菌溶血素、殺白細(xì)胞素、腸毒素、表皮溶解毒素或稱表皮剝脫毒素、毒性休克綜合征毒素I。金黃色葡萄球菌可引起皮膚、器官及全身的化膿性炎癥，食物中毒、燙傷樣皮膚綜合征和毒性休克綜合征等毒素性疾病，及葡萄球菌性腸炎，后者是菌群失調(diào)癥的一種。正常人群對(duì)金黃色葡萄球菌有一定的天然免疫力。但難以防止再次感染。微生物學(xué)檢查程序，根據(jù)疾病類型不同采取不同的標(biāo)本后，直接涂片鏡檢，根據(jù)細(xì)菌形態(tài)、排列方式及染色性，可初步診斷。同時(shí)進(jìn)行分離培養(yǎng)與鑒定，將標(biāo)本接種到血瓊脂平板上，進(jìn)一步進(jìn)行生化反應(yīng)鑒定。致病性葡萄球菌的特點(diǎn)是：產(chǎn)生金黃色色素，有溶血性，凝固酶陽性，可發(fā)酵甘露醇。金黃色葡萄球菌易產(chǎn)生耐藥性變異，故藥敏試驗(yàn)應(yīng)作為一項(xiàng)常規(guī)檢測(cè)，以便選出細(xì)菌敏感藥物治療。金黃色葡萄球菌感染的防治原則，注意個(gè)人衛(wèi)生，做好消毒隔離，防止醫(yī)源性感染。金黃色葡萄球菌引起的膿腫或慢性骨髓炎在抗生素治療同時(shí)采取引流術(shù)或病灶清創(chuàng)術(shù)。金黃色葡萄球菌引起的敗血癥及各種嚴(yán)重的內(nèi)臟器官感染，治療時(shí)應(yīng)根據(jù)藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果，選用敏感抗菌藥物。凝固酶陰性葡萄球菌（coagulasenegativestaphylococcus，CNS）常為正常菌群，主要包括表皮葡萄球菌和腐生性葡萄球菌，前者是可引起尿路感染、修復(fù)術(shù)或?qū)Ч芤鸬母腥尽?chuàng)傷感染、菌血癥或敗血癥最常見的病原體。腐生葡萄球菌是引起育齡女性尿路感染的常見的致病菌。第12章鏈球菌屬學(xué)生學(xué)習(xí)本章需要掌握的內(nèi)容：鏈球菌屬：形態(tài)、染色和分類；致病物質(zhì)及所致疾?。绘溓蚓苎睾团R床檢測(cè)的關(guān)系。肺炎鏈球菌形態(tài)、染色；致病物質(zhì)及引起疾病。鏈球菌屬細(xì)菌為革蘭染色陽性球菌，生長過程中成對(duì)或成鏈狀排列。普通瓊脂平板及肉湯培養(yǎng)基中生長不好，需在培養(yǎng)基中加入血液或組織液方能生長。鏈球菌常用的分類方法有三種：1．根據(jù)溶血現(xiàn)象分類鏈球菌在血液瓊脂平板上生長時(shí)，按產(chǎn)生溶血與否及其溶血性質(zhì)將鏈球菌分為三類：（1）甲型溶血性鏈球菌：菌落周