2017屆高三生物二輪復習 課時作業(yè)17 基因工程(含PCR技術)與細胞工程

課時作業(yè)17基因工程(含PCR技術)與細胞工程1．(2016·廣州市考前訓練)如圖為人類對克隆羊技術的拓展及應用的設想。請據圖回答問題：圖中所涉及的現代生物技術 寫三個)。

等(至少若利用圖中過程最終獲得嬰兒說具有全能性，兩個嬰兒性狀基相同。使用培養(yǎng)基進行重組細胞培養(yǎng)時，通常要加等天然成分，為防止培養(yǎng)過程雜菌污染通常要在細胞培養(yǎng)液中添加一定量培養(yǎng)過程中通常采用培養(yǎng)皿或蓋培養(yǎng)瓶，將其置于的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。圖中從“內細胞團到胚胎干細胞”的培養(yǎng)過程中，必須處理內細胞團，使分散成單個細胞。胚胎干細胞在形態(tài)上具有的特點答案(1)核移植、胚胎移植、動物細胞培養(yǎng)動物細胞核原型男人血清(或血漿)抗生素95(4(5)體積小，細胞核大，核仁明顯解析(1(2)克隆嬰兒相同。(3于含95%空氣加5%CO295%空氣是細胞代謝必需的，5%的CO2維持培養(yǎng)液的pH值。(4)圖中從“內細胞團到胚胎干細胞”的培養(yǎng)過程中，必須用(5有的特點是體積小，細胞核大，核仁明顯。2．(2016·ftⅣ，用于血友病的治療。請回答下列問題：根據凝血因子Ⅳ基因上游和下游的堿基序列，可技術獲取并擴增基因。構該基因表達載體時所用到的工具酶該基因表達載體中凝血因子Ⅳ基因的游 和 下 游 分 別 是。將目的基因表達載體導入奶ft羊受精卵的常用方法。受體細胞選用受精卵優(yōu)點是細胞大易操作、營養(yǎng)物質含量高。在體外胚胎培養(yǎng)時，應選用囊胚進行DNA分析，用于選擇雌性胚胎。此期胚胎也適于胚胎分割移植，此技術的優(yōu)點是。人凝血因子Ⅳ是一種胞外酶，該蛋白的加工是等細胞器上進行的。人凝血子 Ⅳ 只 在 乳 腺 細 胞 合 成 的 原 因 是。答案(1)PCR限制性核酸內切酶和DNA連接酶 啟動子和終止子顯微注射法細胞全能性高滋養(yǎng)層細胞充分發(fā)揮雌性動物的生殖潛(快速大量繁(4)內質網、高爾基體 基因的選擇性表達解析(1PCR含有目的基因的DNADNADNA連接酶。凝血因子Ⅳ基因為目的基因，在基因表達載體中，(2)顯微注射技術是將目的基因(3)在體外胚胎培養(yǎng)時，可取囊胚的滋養(yǎng)層細胞做DNA分析性別鑒定。胚胎分割有利于(4)分泌蛋白是在內)2015年，屠呦呦因發(fā)現青蒿素治療瘧疾的新療法獲獎。工業(yè)上青通過基因測序發(fā)現該高產植株控制青蒿素合成相關的一種關鍵酶的基因發(fā)生了突變。提取了高產植株的全部DNA后，要想快速大量獲得該突變基因可以采用PCR技術，該術的原理。如果用青蒿某個時期mRNA反轉錄產生的雙鏈cDNA片段，用該雙鏈cDNA進行PCR擴增進行了30個循環(huán)后，理論上可以產生約個DNA分子，該雙鏈與載體連接后儲存在一個受體菌群中，這個受體菌群就叫做青蒿，獲得的cDNA與青蒿細胞中該基因堿基序填“相同”或“不同”)。12中箭頭表示相關限制酶的酶切位點。請回答：DNASma 識別結合位點。檢測目的基因是否表達出相應蛋白質應采技術目的基因導入組織細胞后通過 技術培育出青蒿幼苗。答案(1)DNA雙鏈復制230 cDNADNA中的目的基因RNA(4)抗原抗體雜交植物組織培養(yǎng)解析(1)PCR技術的原理是DNADNA(2)如果用青蒿某個時期mRNA反轉錄產生的雙鏈cDNAcDNA進行PCR30230個DNA(cDNAcDNA(3DNASmaⅠ會破壞質粒的抗性基因及外源DNARNA聚合酶識別結合位點。(4)檢測目的基因是否表達出相應蛋4．(2016·唐ft市二模)[生物——選修3：現代生物科技專題]科研人員為了判定人體中某兩個基因是否在同一條染色體上，做了人·鼠細胞融合實驗。人4660這些性狀都是小鼠細胞所沒有的)，從而判斷待測基因所屬的染色體。請回答：人·鼠細胞融合常用的生物融合誘導劑，融合過程體現了細膜的 性。如果僅考慮兩兩融合的細胞融合體系中除含有人·鼠融合細胞外可能還、 。細胞融合后的增殖方式，一個人·鼠融合細胞，在不分裂時染體數目最多條。有五個人·鼠融合細胞株A、、C、、E，分別測得甲、乙、丙、丁四種表現型，結果如下：保留的人染色體測定的性狀1 23甲乙丙丁A＋ －－－＋－＋細B－ ＋－＋－＋＋胞C－ －＋－－－－株D－ －－－－－＋E＋ ＋＋＋＋＋－注：＋表示保留的染色體或具有某一性狀，－表示沒有。實驗表明：控兩個性狀的基因都在人的2號染色體上。若想制備單克隆抗體，需要用已免疫細胞和骨髓瘤細胞融合答案(1)滅活(仙病毒流動人·人融合細胞鼠·鼠融合細胞有絲分裂(4)甲、丙(5)B解析(1)動物細胞融合的原理是細胞膜具有一定的流動性。植物原生質體融合的誘導方法A(2)如果僅考慮兩兩融合的細胞，融合體系中除含有人·鼠融合細胞外，可能還有人·人融合細胞、鼠·(3)細胞融合后的增殖方式是有絲分裂，一個人·鼠融合細胞，在不分裂時染色體數目最多是人的染色體數目＋鼠的染色體數目。(4B1122)若想制備單克隆抗體，需要用已免疫的B細胞和骨髓瘤細胞融合。5．(2016·洛陽市考前練習四)如圖所示為細胞融合技術的一些過程，請據圖回答：如果AB細胞為植物細胞植物細胞在細胞融合前可先除，余下的部分稱為 。這一步驟中若用酶解法，所使用的酶( )多肽酶C．

D若AB是動物細胞一般取自幼齡動物細胞或胚胎然后使其分散開來B到C的過程中常用的但不能用于植物細胞培養(yǎng)的手段是 ，所形成的D稱為 。若該過程是制備單克隆抗體為小鼠漿細胞，那么，在獲得此細胞之前，小鼠已被射了 。獲得雜交瘤細胞后，常用的擴大培養(yǎng)方法是培養(yǎng)基中體外培養(yǎng)和注入 培養(yǎng)。答案(1)細胞壁原生質體C胰蛋白酶滅活的病毒誘導雜交細胞相應的抗原小鼠腹腔解析(1)植物細胞在細胞融合前，可先除去細胞壁，余下部分稱為原生質體，因為植物細AB、BCD(3為小鼠漿細胞，6．(2016·懷化市二模)如圖是植物細胞雜交過程示意圖，請據圖分析完成下列問題：步驟①，最常用的方法。步驟②一般常用的化學試劑，目的。在利用雜種細胞培育成為雜種植株的過程中，運用的技術手段，其中步驟相當，步驟⑤相當。植物體細胞雜交的目的是獲得新的雜種植株，這項研究對于培養(yǎng)作物新品種方面的重意義在。答案(1(2(PEG)誘導細胞融合植物組織培養(yǎng)技術脫分化再分化克服遠緣雜交不親和的障礙，擴大親本范圍解析(1(PEG(3(4)植物體細胞雜交技術能克服遠緣雜交不親和的障礙，擴大親本范圍。7．Rag基因缺失小鼠不能產生成熟的淋巴細胞?？蒲腥藛T利用胚胎干細胞(ES細胞)對Rag2 2基因缺失小鼠進行基因治療。其技術流程如圖：步驟①中，在核移植前應去除卵母細胞。步驟②中，重組胚胎培養(yǎng)期時，可從其內細胞團分離出ES細胞。步驟③中，需要構建含有基因Rag2

的表達載體?？梢愿鶕ag2

基因設計引物，利用PCR技術擴增Rag2

基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分別在片段兩側進行酶切獲得Rag基因2片段為將該片段直接連接到表達載體所選擇的表達載體上應具酶的酶切位點。該基因表達載體上除含Rag基因外，還應含至少寫出兩)。方法2將基因表達載體導入ES細胞。為檢測Rag基因的表達情況，利原理，可提取小鼠骨髓細胞，用2抗Rag蛋白的抗體進行雜交實驗。2答案(1)細胞核(2)囊胚Ⅰ啟動子、終止子、標記基因、復制原點顯微注射解析(1)核移植是將體細胞核移植到去核的卵母細胞中，所以實驗前要去除卵母細胞的細胞核。(2)內細胞團位于囊胚中，所以重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期。(3)Rag基因是利用限制酶2Ⅲ和Ⅲ和(Rag基因)。將目的基因導2入動物細胞最有效的方法是顯微注射法。(4)基因表達的產物是蛋白質，所以提取小鼠骨髓細胞的蛋白質進行抗原－抗體雜交。8．(2016·菏澤市二模)[生物——選修3：現代生物科技專題]分析上圖可知，構建重組質粒(如圖所示)最好選用 限制酶，理由是 。工業(yè)生產過程中，最初多采用重組大腸桿菌或芽孢桿菌生產凝乳酶，將目的基因導入腸桿菌或芽孢桿菌前所做的處理方法現在生產凝乳酶多采用重組毛霉或重組酵母菌，毛霉或酵母菌作為受體細胞的優(yōu)勢。(3)研究發(fā)現，如果將該凝乳酶20位和24位氨基酸改變?yōu)榘腚装彼?，其催化能力將提?倍科學家可以生產上述高效凝乳酶的現代生物工程技術該生物工程技術的實質。(4)轉基因技術和細胞工程在動植物中都有廣泛應用，但是胚胎工程只是指對動物的 所進行的多種亞顯微操作和處理技術。答案Ⅰ提高重組DNA用鈣離子處理細胞，使之轉化為感受態(tài)細胞含有的內質網和高爾基體可對蛋白質進行加工和修飾(4)配子或早期胚胎解析(1)限制酶不能破壞目的基因，也不能破壞質粒上的標記基因，且應該用不同的限制和(2)基因工程中，將目的基因導入大腸桿菌等微生物細酵母菌含有的內質網和高爾基體可對蛋白質進行加工和修飾(3)根據題意分析，通過改造凝乳酶的氨基酸，提高了其催化功能，(4)胚胎工程只是指對動物的配子或早期胚胎所進行的多種亞顯微操作和處理技術。9．近十年來，PCR技術(聚合酶鏈式反應)成為分子生物學實驗室的一種常規(guī)手段，其原理是利用DNADNA加熱使DNA雙鏈打開這一步是打鍵稱為 在細胞中是 酶的作用下進行的。